本發(fā)明涉及食品檢測領(lǐng)域。具體地，本發(fā)明涉及檢測液態(tài)乳制品中殘留農(nóng)藥含量的方法。
背景技術(shù)：
：檢測乳制品中各類殘留農(nóng)藥的含量是乳制品質(zhì)量檢測中重要的部分。我國2009年實(shí)施的國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.19-2008《食品中有機(jī)氯農(nóng)藥多組分殘留的測定》以及國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.162-2008《動(dòng)物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥和擬除蟲菊酯農(nóng)藥多組分殘留量的測定》中對于多組分殘留農(nóng)藥的檢測方法以及檢出限均作出了明確規(guī)定。其中，氣相色譜作為色譜法中重要的分析手段，被廣泛的應(yīng)用于各類殘留農(nóng)藥含量的檢測中。然而，目前檢測乳制品中殘留農(nóng)藥含量的方法仍有待改進(jìn)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明旨在至少在一定程度上解決相關(guān)技術(shù)中的技術(shù)問題之一。本發(fā)明是基于發(fā)明人的以下發(fā)現(xiàn)而完成的：對于多種有機(jī)殘留農(nóng)藥含量的測定，國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.19-2008以及國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.162-2008中規(guī)定的基于氣相色譜的檢測方法均存在前處理操作復(fù)雜，消耗有機(jī)溶劑多，檢測時(shí)間長，上機(jī)雜質(zhì)干擾多，且回收率偏低等問題。并且，由于上機(jī)雜質(zhì)干擾較多，上述國家標(biāo)準(zhǔn)色譜條件不能實(shí)現(xiàn)同時(shí)將多種農(nóng)藥殘留的氣相色譜峰分開，進(jìn)而嚴(yán)重影響檢測效果。有鑒于此，在本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提出了一種檢測液態(tài)乳制品中殘留農(nóng)藥含量的方法。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，該方法包括：一種檢測液態(tài)乳制品中殘留農(nóng)藥含量的方法，其特征在于，包括：第一步，將所述待測液體乳制品樣品混勻，準(zhǔn)確稱量9～11g，加入20mL乙腈，然后加入3.5～4.5g硫酸鎂和1.0～1.5g氯化鈉，渦旋1分鐘，并在4000～5000rpm條件下進(jìn)行4～6分鐘的第一離心處理，靜置分層后獲得第一有機(jī)相和第一水相。隨后，向所述第一水相中再加入10mL乙腈，通過第二離心混合充分，靜置分層后獲得第二有機(jī)相，將所述第二有機(jī)相以及所述第一有機(jī)相合并，得到乙腈有機(jī)相。第二步，將所述乙腈有機(jī)相在48～52攝氏度的水浴條件下旋轉(zhuǎn)蒸干，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中加入約9mL的正己烷，沖洗旋轉(zhuǎn)瓶，再加入約9mL水，進(jìn)行1分鐘的第一震搖，待溶液分層清晰后，獲得第三有機(jī) 相以及第二水相。向所述第二水相中再加入6mL的正己烷，進(jìn)行1分鐘的第二震搖，靜置分層，獲得第四有機(jī)相。第三步，將所述第四有機(jī)相與所述第三有機(jī)相合并，并用氮?dú)庠?8～52攝氏度的水浴條件下中吹至1mL，獲得待測粗品，待用。第四步，利用弗羅里硅土SPE柱對待測粗品進(jìn)行純化，其中，弗羅里硅土SPE柱首先進(jìn)行活化，所述活化為在所述弗羅里硅土SPE柱中加入3mL正己烷，然后再加入3mL第一洗脫劑；將所述待測粗品渦旋30秒后，注入經(jīng)過所述活化的所述弗羅里硅土SPE柱中，當(dāng)所述待測粗品溶液快要流干時(shí)，在盛放樣品的玻璃試管中加入6mL所述第一洗脫劑進(jìn)行沖洗，再將所述第一洗脫劑倒入所述弗羅里硅土SPE柱，然后在所述盛放樣品的玻璃試管中加入3mL所述第二洗脫劑進(jìn)行沖洗，再將所述第二洗脫劑倒入弗羅里硅土SPE柱，待所有洗脫劑流干后，棄去所述弗羅里硅土SPE柱，收集全部洗脫液，其中，所述第一洗脫劑為正己烷與三氯甲烷的混合溶劑，并且正己烷與三氯甲烷的體積比為9：1，以及所述第二洗脫劑為正己烷與三氯甲烷的混合溶劑，并且正己烷與三氯甲烷的體積比為4：1。第五步，在所述洗脫液中加入10微升的乙二醇，并用氮?dú)庠?8～52攝氏度的水浴條件下吹掃完正己烷之后，準(zhǔn)確加入1.00毫升正己烷，在渦旋混合器上充分振蕩溶解殘留物，經(jīng)0.45μm有機(jī)系濾膜過濾后，獲得待測樣品，待用。第六步，設(shè)置氣相色譜參數(shù)如下：進(jìn)樣口溫度260攝氏度～280攝氏度，檢測器溫度300攝氏度，載氣為氮?dú)?，載氣流速1.2mL/分鐘，尾吹氣為氮?dú)?，流?8mL/分鐘，并將所述待測樣品1～2微升注入到CP-Sil19CB毛細(xì)管色譜柱中，設(shè)置程序升溫如下：初始溫度80攝氏度，以40攝氏度/分鐘升至214攝氏度，保持7分鐘，以20攝氏度/分鐘升至280攝氏度，保持7分鐘，總時(shí)間為25.65分鐘。柱流速1.2mL/分鐘。第七步：結(jié)果計(jì)算。由此，可以由根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法提供前處理充分，雜質(zhì)含量較少以及成份簡單、利于氣相色譜分析的所述待測樣品，并且通過調(diào)節(jié)氣相色譜相關(guān)參數(shù)，進(jìn)而可以達(dá)到將殘留農(nóng)藥成份準(zhǔn)確定量的目的，從而提高根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例的方法的檢測效果。在本發(fā)明的第二方面，本發(fā)明提出了一種檢測液態(tài)乳制品中殘留農(nóng)藥含量的方法。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，該方法包括：(1)利用乙腈對所述液態(tài)乳制品進(jìn)行萃取，并收集乙腈有機(jī)相，其中，在所述萃取過程中，添加無機(jī)鹽；(2)將所述乙腈有機(jī)相進(jìn)行旋轉(zhuǎn)干燥后，利用正己烷和水對所述旋轉(zhuǎn)干燥后的剩余固體進(jìn)行溶解，并收集正己烷有機(jī)相；(3)將所述正己烷有機(jī)相，用氮?dú)膺M(jìn)行吹掃，以便獲得待測粗品；(4)利用固相萃取柱對所述待測粗品進(jìn)行純化，以便獲得洗脫液；(5)將所述洗脫液與乙二醇混合，并用氮?dú)膺M(jìn)行吹掃，以便獲得待測樣品；以及(6)通過色譜法，對所述待測樣品進(jìn)行檢測，以便確定所述液態(tài)乳制品中殘留農(nóng)藥的含量。由此，通過根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法中的萃取過程，能夠有效的將待檢測的液態(tài)乳制品中的殘留農(nóng)藥成份提取出來，并且通過加入正己烷以及水對萃取所得的殘留農(nóng)藥成份進(jìn)行進(jìn)一步提取以及除雜，進(jìn)而可以降低待測粗品中的雜質(zhì)含量，進(jìn) 而提高后續(xù)分析效果；此外，通過利用固相萃取柱對所述待測粗品進(jìn)行進(jìn)一步純化，有利于所述待測粗品中雜質(zhì)的進(jìn)一步除去，以便獲得具有雜質(zhì)含量低、成份簡單的洗脫液；在洗脫液中加入乙二醇，能夠避免洗脫液在氮?dú)獯祾哌^程中完全吹干引起的殘留農(nóng)藥成份損失，從而提高檢測的回收率。因此，利用根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例的方法對殘留農(nóng)藥的含量進(jìn)行檢測，能夠達(dá)到節(jié)省前處理步驟、提高檢測的準(zhǔn)確性。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，步驟(1)進(jìn)一步包括：(1-1)將所述液態(tài)乳制品與乙腈、無機(jī)鹽混合后進(jìn)行第一離心，并分別獲得第一有機(jī)相和第一水相；(1-2)將所述第一水相與乙腈混合后進(jìn)行第二離心，并收集第二有機(jī)相；以及(1-3)將所述第二有機(jī)相與所述第一有機(jī)相合并得到所述乙腈有機(jī)相。由此，通過采用乙腈對所述液態(tài)乳制品進(jìn)行萃取，可以達(dá)到提取所述乳制品中殘留農(nóng)藥成份的目的。并且，通過在上述過程中加入無機(jī)鹽，能夠提高乙腈萃取有機(jī)農(nóng)藥殘留成份的效果。此外，通過對(1-1)中形成的第一水相進(jìn)行再次萃取，能夠進(jìn)一步提高對所述待測乳制品中農(nóng)藥殘留成份的提取效果，進(jìn)而提高根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法的檢測效果。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，步驟(2)進(jìn)一步包括：(2-1)將所述乙腈有機(jī)相置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸干；(2-2)向經(jīng)過所述旋轉(zhuǎn)蒸干的所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中加入正己烷對所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶進(jìn)行沖洗，隨后向所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中加入水進(jìn)行第一震搖后靜置分層，并分別獲得第三有機(jī)相和第二水相；(2-3)將所述第二水相與正己烷混合后進(jìn)行第二震搖，靜置分層并收集第四有機(jī)相；以及(2-4)將所述第三有機(jī)相與所述第四有機(jī)相合并，以便獲得所述正己烷有機(jī)相。由此，可以通過正己烷的加入，較好的溶解經(jīng)過旋轉(zhuǎn)蒸干的殘留農(nóng)藥提取物。并且，通過加入水對所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶進(jìn)行沖洗，能夠在溶解殘留農(nóng)藥提取物的過程中對可溶于水的部分待測乳制品中的雜質(zhì)進(jìn)行溶解分離，并可以將步驟(1)中加入的無機(jī)鹽從殘留農(nóng)藥提取物中分離出來，進(jìn)而達(dá)到除雜的目的，從而進(jìn)一步提高根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法的后續(xù)檢測效果。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，步驟(4)中采用弗羅里硅土SPE柱。由此，可以有所述弗羅里硅土SPE柱為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例的所述待測粗品進(jìn)行固相萃取凈化，從而達(dá)到進(jìn)一步分離乙腈等有機(jī)溶劑以及殘留農(nóng)藥成份的目的，進(jìn)而進(jìn)一步提高根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法的檢測效果。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在步驟(4)中使用第一洗脫劑和第二洗脫劑，所述第一洗脫劑和所述第二洗脫劑均包括正己烷和三氯甲烷，其中，在所述第一洗脫劑中所述正己烷與三氯甲烷的體積比為9：1，在所述第二洗脫劑中，所述正己烷與三氯甲烷的體積比為4：1。由此，可以由上述洗脫劑對注入到所述弗羅里硅土SPE柱中的待測粗品進(jìn)行洗脫，從而達(dá)到分離提純的目的。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，基于9～11克所述液態(tài)乳制品，在步驟(1-1)中，所述乙腈的用量為20ml，所述無機(jī)鹽包括3.5～4.5克硫酸鎂和1.0～1.5克氯化鈉，所述混合是通過渦旋1分鐘進(jìn)行的，所述第一離心是按照4000～5000rpm的轉(zhuǎn)速進(jìn)行4～6分鐘；在步驟(1-2)中，所述乙腈的用量為10ml；在步驟(2-1)中，所述旋轉(zhuǎn)蒸干是在48～52攝氏度的溫度下進(jìn)行的；在步驟(2-2)中，所述正己烷的用量為9毫升，所述水的用量為9毫升，所述第一震搖進(jìn)行1分鐘；在步驟(2-3)中，所述正己烷的用量為6毫升，所述第二震搖進(jìn)行1分鐘；在步驟(3)中，在48～52攝氏度的溫度下，用氮?dú)膺M(jìn)行吹干；在步驟(4)中，所述弗羅里硅土SPE柱被預(yù)先活化，所述活化是通過向所述弗羅里硅土SPE柱中依次添加3ml正己烷和3ml所述第一洗脫劑而進(jìn)行的；在步驟(4)中，依次采用6ml所述第一洗脫劑和3ml所述第二洗脫劑進(jìn)行洗脫；以及在步驟(5)中，所述乙二醇的用量為10微升，采用氮?dú)庠?8～52攝氏度的溫度下進(jìn)行吹掃，并且用1ml正己烷對殘留物進(jìn)行震蕩溶解，利用0.45微米的濾膜進(jìn)行過濾，選擇所得到的濾液作為所述待測樣品，所述殘留農(nóng)藥包括選自下列的至少之一：α-666，β-666，γ-666，δ-666，p,p’-DDE，p,p’-DDD，o,p’-DDT，p,p’-DDT，七氯，環(huán)氧七氯，順式氯丹，反式氯丹，氧化氯丹，α-硫丹，β-硫丹，硫丹硫酸鹽以及狄試劑，以及所述液態(tài)乳制品包括牛奶。由此，可以通過調(diào)節(jié)上述測試調(diào)節(jié)，例如加入有機(jī)溶劑的量、無機(jī)鹽的質(zhì)量、離心參數(shù)以及弗羅里硅土SPE柱活化等參數(shù)步驟，進(jìn)一步提高根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法的分離提純效果，從而提高根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法的檢測效果。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在步驟(6)中，所述色譜法為氣相色譜法。由此，可以由氣相色譜法為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例的方法提供檢測手段。此外，由于氣相色譜法采用氣體作為流動(dòng)相，因此待檢測組分可以很快在流動(dòng)相以及固定相之間達(dá)到分配平衡；并且由于氣相色譜法的固定相選擇多種多樣，因而可以達(dá)到快速分析并且具有較高的分離效率，進(jìn)而可以進(jìn)一步提高根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法的檢測效果。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述氣相色譜法采用CP-Sil19CB毛細(xì)管色譜柱、VF-1701ms毛細(xì)管色譜柱或DB-1701毛細(xì)管色譜柱。由此，可以由通過毛細(xì)管柱作為所述氣相色譜的固定相，為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例的方法提供檢測手段。此外，由于根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法具有良好的樣品前處理效果，氣相色譜上機(jī)前樣品中雜質(zhì)含量少，成份不復(fù)雜，因而根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例的方法可以選用上述3種毛細(xì)管色譜柱中的任意一種，進(jìn)而達(dá)到方便、快捷的實(shí)現(xiàn)對所述殘留農(nóng)藥的含量進(jìn)行檢測的目的。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述氣相色譜法采用下列條件：進(jìn)樣口溫度260攝氏度～280攝氏度，檢測器溫度300攝氏度，載氣為氮?dú)?，尾吹氣為氮?dú)?，針對CP-Sil19CB毛細(xì)管色譜柱，設(shè)置設(shè)置初始溫度為80攝氏度，保持2分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至214攝氏度，保持7分鐘，以20攝氏度/分鐘升溫至280攝氏度，保持7分鐘，總時(shí)間為25.65分鐘，其 中載體流速為1.2ml/分鐘，尾吹氣流速為28ml/分鐘。針對VF-1701ms毛細(xì)管色譜柱或DB-1701毛細(xì)管色譜柱，設(shè)置初始溫度為90攝氏度，保持1分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至170攝氏度，保持5分鐘，以6攝氏度/分鐘升溫至242攝氏度，保持7分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至270攝氏度，保持7分鐘，總時(shí)間為39～42分鐘，其中，柱流速為1.0ml/分鐘，尾吹氣流速為29.0ml/分鐘。由此，可以通過對上述色譜條件以及程序升溫的溫度、時(shí)間的調(diào)控，達(dá)到使不同組分的殘留農(nóng)藥成份在氣相色譜的毛細(xì)管柱中通過分配分開，進(jìn)而達(dá)到將不同成份的農(nóng)藥殘留分離并定量檢測的目的，從而提高根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法的檢測效果。附圖說明圖1顯示了根據(jù)本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例的檢測液態(tài)乳制品中殘留農(nóng)藥含量的方法的流程示意圖；圖2顯示了根據(jù)本發(fā)明另一個(gè)實(shí)施例的檢測液態(tài)乳制品中殘留農(nóng)藥含量的方法的流程示意圖；圖3顯示了根據(jù)本發(fā)明又一個(gè)實(shí)施例的檢測液態(tài)乳制品中殘留農(nóng)藥含量的方法的流程示意圖；圖4顯示了根據(jù)本發(fā)明又一個(gè)實(shí)施例的檢測液態(tài)乳制品中殘留農(nóng)藥含量的方法的流程示意圖；圖5顯示了根據(jù)本發(fā)明又一個(gè)實(shí)施例的檢測液態(tài)乳制品中殘留農(nóng)藥含量的方法的流程示意圖；圖6顯示了根據(jù)本發(fā)明又一個(gè)實(shí)施例的檢測液態(tài)乳制品中殘留農(nóng)藥含量的方法的流程示意圖；圖7和圖8顯示了實(shí)施例1的氣相色譜圖；圖9和10顯示了實(shí)施例2的氣相色譜圖；圖11和12顯示了對比例1的氣相色譜圖；圖13、圖14和圖15顯示了對比例2的氣相色譜圖；以及圖16、圖17和圖18顯示了對比例3的氣相色譜圖。具體實(shí)施方式下面詳細(xì)描述本發(fā)明的實(shí)施例，所述實(shí)施例的示例在附圖中示出，其中自始至終相同或類似的標(biāo)號表示相同或類似的元件或具有相同或類似功能的元件。下面通過參考附圖描述的實(shí)施例是示例性的，僅用于解釋本發(fā)明，而不能理解為對本發(fā)明的限制。需要說明的是，術(shù)語“第一”、“第二”僅用于描述目的，而不能理解為指示或暗示相對重要性或者隱含指明所指示的技術(shù)特征的數(shù)量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隱含地包括一個(gè)或者更多個(gè)該特征。進(jìn)一步地，在本發(fā)明的描述中，除非另有說明，“多個(gè)”的含義是兩個(gè)或兩個(gè)以上。本發(fā)明是基于發(fā)明人的以下發(fā)現(xiàn)而完成的：對于多種有機(jī)殘留農(nóng)藥含量的測定，國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.19-2008以及國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.162-2008中規(guī)定的基于氣相色譜的檢測方法均存在前處理操作復(fù)雜，消耗有機(jī)溶劑多，檢測時(shí)間長，上機(jī)雜質(zhì)干擾多，且回收率偏低等問題。并且，由于上機(jī)雜質(zhì)干擾較多，上述國家標(biāo)準(zhǔn)不能實(shí)現(xiàn)同時(shí)將多種農(nóng)藥殘留的氣相色譜峰分開，進(jìn)而嚴(yán)重影響檢測效果。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，在前期對樣品處理階段，有機(jī)試劑萃取提取的殘留農(nóng)藥濃縮液中含有大量雜質(zhì)以及萃取過程中加入的無機(jī)鹽成份，造成濃縮液渾濁、成份復(fù)雜，不利于后續(xù)分析檢測。發(fā)明人經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在此過程中通過添加正己烷和水對上述濃縮成份進(jìn)行萃取，能夠?qū)⒋蟛糠挚扇苡谒碾s質(zhì)以及無機(jī)鹽成份溶解在水相中進(jìn)而除去，由此提高前處理效果。此外，由于檢測過程中由于殘留農(nóng)藥成份多為有機(jī)物，易揮發(fā)，常常造成待測殘留農(nóng)藥的損失，嚴(yán)重影響分析效果。發(fā)明人通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在進(jìn)行氮?dú)獯祾邼饪s之前，通過在待測樣品中加入少量的保護(hù)劑，即乙二醇，可以大大緩解由于揮發(fā)造成的待測殘留農(nóng)藥損失，從而提高分析效果?；谏鲜霭l(fā)現(xiàn)，在本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提出了一種檢測液態(tài)乳制品中殘留農(nóng)藥含量的方法。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，參考圖1，該方法包括：S100萃取根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在S100中，通過在待測液態(tài)乳制品中加入乙腈，對上述乳制品進(jìn)行萃取，并在萃取過程中加入無機(jī)鹽，提取靜置分層后形成的乙腈有機(jī)相。由此，可以通過乙腈以及待測液態(tài)乳制品混合，借助相似相容原理將有機(jī)農(nóng)藥殘留成份提取出來。此外，在萃取過程中添加的無機(jī)鹽能夠造成同離子相應(yīng)，提高分配比，進(jìn)而進(jìn)一步提高乙腈萃取殘留農(nóng)藥成份的效果。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解，在S100萃取中使用的有機(jī)萃取劑不受特別限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)實(shí)際待檢測的乳制品的具體成份選擇適當(dāng)?shù)妮腿┻M(jìn)行對殘留農(nóng)藥的萃取。例如，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，當(dāng)該液態(tài)乳制品為牛奶時(shí)，可以選擇乙腈作為萃取劑，從而達(dá)到將殘留農(nóng)藥從液態(tài)乳制品中分離出來的效果。此外，根據(jù)本法明的實(shí)施例，參考圖2，S100可以進(jìn)一步包含以下步驟：S110第一離心根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，基于9～11g的液態(tài)乳制品，采用20ml乙腈進(jìn)行萃取。并且，在 液態(tài)乳制品和乙腈混合溶液中加入3.5～4.5克硫酸鎂和1.0～1.5克氯化鈉。將上述液態(tài)乳制品、乙腈以及無機(jī)鹽混合物通過渦旋1分鐘進(jìn)行充分混合后，按照4000～5000rpm的轉(zhuǎn)速進(jìn)行第一離心，離心時(shí)間可以為4～6分鐘。然后將經(jīng)過第一離心的液態(tài)乳制品、乙腈和無機(jī)鹽的混合物靜置，使該混合物分層，形成第一有機(jī)相以及第一水相。由此，可以通過上述乙腈以及無機(jī)鹽實(shí)現(xiàn)對液態(tài)乳制品中殘留農(nóng)藥的高效提取，并通過適當(dāng)?shù)臏u旋時(shí)間以及第一離心進(jìn)行充分混合，進(jìn)而可以提高乙腈對液態(tài)乳制品中殘留農(nóng)藥的萃取效果，從而提高根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法的檢測效果。S120第二離心根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在S110形成的第一水相中加入10ml乙腈進(jìn)行再次萃取，靜置形成第二有機(jī)相。由此，可以通過對第一水相的再次萃取，將經(jīng)過S110后留在第一水相中的殘留農(nóng)藥成份提取出來，從而完成對殘留農(nóng)藥的濃縮，進(jìn)而提高根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的檢測方法的后續(xù)檢測效果以及檢測的準(zhǔn)確性。S130乙腈有機(jī)相根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在該步驟中，通過將S110中的第一有機(jī)相以及S120中的第二有機(jī)相進(jìn)行混合，形成乙腈有機(jī)相。由此，通過將兩次萃取所得到的有機(jī)相進(jìn)行混合，達(dá)到將待測液態(tài)乳制品中的殘留農(nóng)藥最大程度的提取出來的目的。S200收集正己烷有機(jī)相根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，將S100中形成的乙腈有機(jī)相轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸干，然后利用正己烷和水對上述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中蒸干后的含有殘留農(nóng)藥的乙腈有機(jī)相進(jìn)行溶劑，并收集正己烷有機(jī)相。由此，可以通過旋轉(zhuǎn)蒸干除去大部分的乙腈，剩余的殘留農(nóng)藥用正己烷和水形成的溶液進(jìn)行重新溶解、萃取，將殘留農(nóng)藥溶解在正己烷中，可溶性雜質(zhì)以及無機(jī)鹽通過水相除去。由此，可以對S100中萃取出的殘留農(nóng)藥進(jìn)行進(jìn)一步凈化，進(jìn)而提高后續(xù)分析檢測的效率以及效果。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，參考圖3，S200還可以通過以下步驟實(shí)現(xiàn)：S210旋轉(zhuǎn)蒸干根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在該步驟中，將S100形成的乙腈有機(jī)相轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，并在48～52攝氏度的水浴溫度下對上述乙腈有機(jī)相進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸干。由此，可以通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙腈有機(jī)相中的乙腈溶劑部分，剩余殘留農(nóng)藥。從而減少后續(xù)檢測樣品中的成分，進(jìn)而提高后續(xù)分析檢測效果。S220第一震搖根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在S210進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中加入9ml正己烷以及9ml水進(jìn)行沖洗，對上述正己烷以及水的混合沖洗溶液進(jìn)行震搖混合。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例， 可以通過震搖1分鐘的方式實(shí)現(xiàn)正己烷以及水的充分混合和殘留農(nóng)藥成分的充分溶解。隨后通過靜置分層，分別獲得第三有機(jī)相和第二水相。取出第三有機(jī)相備用，第二水相繼續(xù)進(jìn)行后續(xù)處理步驟。在該步驟中，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，如果僅使用正己烷對旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶進(jìn)行沖洗，由于液態(tài)乳制品中含有的水溶性雜質(zhì)以及S100中加入的無機(jī)鹽無法除去，會造成旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中有白色顆粒物質(zhì)析出，并且沖洗后的正己烷溶液呈渾濁狀態(tài)，嚴(yán)重影響后續(xù)處理步驟。發(fā)明人通過實(shí)驗(yàn)驚奇的發(fā)現(xiàn)，通過分別采用正己烷以及水對旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶進(jìn)行沖洗，由于水的加入，可以溶解大部分水溶性雜質(zhì)以及幾乎全部的無機(jī)鹽成份，進(jìn)而通過后續(xù)靜置分層使雜質(zhì)以及無機(jī)鹽與殘留農(nóng)藥分開。因此，采用根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法可以大幅降低處理后第三有機(jī)相中的雜質(zhì)含量，進(jìn)而提高后續(xù)檢測效果。S230第二震搖根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在S220形成的第二水相中加入6ml正己烷，通過震搖1分鐘充分混合，并靜置分層，收集第四有機(jī)相。由此，可以通過在第二水相中再次加入正己烷，進(jìn)一步提取殘留在第二水相中的殘留農(nóng)藥成份，進(jìn)而提高經(jīng)過處理的殘留農(nóng)藥含量，從而提高根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例的檢測方法的檢測效果以及準(zhǔn)確性。S240正己烷有機(jī)相在該步驟中，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，通過將S220形成的第三有機(jī)相以及S230形成的第四有機(jī)相進(jìn)行混合，得到正己烷有機(jī)相。由此，通過將上述第三有機(jī)相以及第四有機(jī)相混合，得到含有雜質(zhì)含量較低的正己烷有機(jī)相，從而提高后續(xù)處理效果，進(jìn)而進(jìn)一步提高根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法的檢測效果。S300獲得待測粗品根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，將S200中形成的正己烷有機(jī)相通過氮?dú)獯蹈?，獲得待測粗品。其中，氮?dú)獯蹈墒峭ㄟ^氮?dú)獯蹈蓛x在48～52攝氏度的水浴溫度下進(jìn)行的。由此，可以通過氮?dú)獯蹈?，將正己烷有機(jī)相中的大部分正己烷除去，獲得待測粗品，進(jìn)而可以提高后續(xù)處理效果。S400純化根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在該步驟中，通過固相萃取柱對S300形成的待測粗品進(jìn)行純化，獲得洗脫液。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解，上述固相萃取柱的種類并不受特別限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)待測液態(tài)乳制品的種類和成份選擇適當(dāng)?shù)墓滔噍腿≈瓿蒘400的純化步驟。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，選擇弗羅里硅土SPE柱作為固相萃取柱來完成S400的純化步驟。由此，可以通過S400純化步驟降低待測粗品中除殘留農(nóng)藥成份外的雜質(zhì)成份，例如前面各個(gè)步驟中引入的有機(jī)溶劑等，進(jìn)而提高后續(xù)色譜分析的檢測效果。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，參考圖4，S400還可以通過以下步驟實(shí)現(xiàn)：S410活化根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，弗羅里硅土SPE柱使用前首先經(jīng)過活化處理。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解，上述活化處理的方法不受具體限制，本領(lǐng)域人員可以采用熟悉的試劑以及方法對弗羅里硅土SPE柱進(jìn)行活化處理。具體地，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，可以采用依次向弗羅里硅土SPE柱中注入3ml正己烷和3ml第一洗脫劑實(shí)現(xiàn)的。其中，第一洗脫劑為正己烷和三氯甲烷的混合液，并且正己烷和三氯甲烷具有9:1的體積比。由此，可以達(dá)到對弗羅里硅土SPE柱進(jìn)行活化的目的，從而提高后續(xù)凈化處理效果。S420第一洗脫劑洗脫根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在該步驟中，向經(jīng)過S410活化的弗羅里硅土SPE柱中注入S300形成的待測粗品，隨后，采用6ml第一洗脫劑對盛放待測粗品的容器進(jìn)行沖洗，將沖洗后的第一洗脫劑倒入弗羅里硅土SPE柱進(jìn)行洗脫。由此，可以通過第一洗脫劑對待測粗品中進(jìn)行洗脫，洗脫后的溶液中含有的雜質(zhì)成份較少，分離效果較好，并且第一洗脫劑可以將極性較小的組分，例如α-666以及p,p’-DDD洗脫出來。由此，可以提高第一洗脫劑的洗脫效果，進(jìn)而提高后續(xù)凈化處理效果。S430第二洗脫劑洗脫根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在該步驟中，采用3ml第二洗脫劑對盛放待測粗品的容器進(jìn)行沖洗，將沖洗后的第二洗脫劑倒入弗羅里硅土SPE柱進(jìn)行洗脫。其中，第二洗脫劑為具有體積比為4:1的正己烷和三氯甲烷混合液。由此，可以通過第二洗脫劑對待測粗品中進(jìn)行洗脫，并且第二洗脫劑可以將極性較大的組分，例如狄氏劑洗脫出來。由此，可以提高第二洗脫劑的洗脫效果，進(jìn)而提高后續(xù)凈化處理效果。S440獲得洗脫液根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在該步驟中，收集S420以及S430中從弗羅里硅土SPE柱中流出的洗脫液，以備后續(xù)檢測步驟使用。由此，可以通過收集全部的洗脫液，獲得雜質(zhì)含量較少、便于后續(xù)色譜分析的洗脫液，進(jìn)而提高后續(xù)處理效果。S500獲得待測樣品根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，將洗脫液與乙二醇進(jìn)行混合后，采用氮?dú)膺M(jìn)行吹掃。用正己烷對所得到的混合物進(jìn)行震蕩溶解，從而獲得待測樣品。由此，可以通過氮?dú)獯祾哌^程除去大部分有機(jī)溶劑，并且通過乙二醇的加入，保護(hù)殘留農(nóng)藥不在后續(xù)檢測過程中由于揮發(fā)造成大量損失，進(jìn)而避免了對檢測結(jié)果的負(fù)面影響，提高了根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法的檢測效果。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，參考圖5，S500可以進(jìn)一步包含以下步驟：S510氮?dú)獯蹈筛鶕?jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在該步驟中，首先在洗脫液中加入10微升乙二醇，然后進(jìn)行氮?dú)獯祾咛幚?。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解，在S510中的氮?dú)獯蹈傻木唧w條件不受特別限制，只要能夠滿足根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例的要求，達(dá)到對洗脫液進(jìn)行吹干處理并不造成殘留農(nóng)藥的損失即可。具體地，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，氮?dú)獯祾呖梢允峭ㄟ^氮?dú)獯蹈蓛x在48～52攝氏度的水浴溫度下進(jìn)行的。由此，可以通過氮?dú)獯祾?，將前面各步驟中引入的有機(jī)相溶劑除去，進(jìn)而可以提高后續(xù)處理效果。此外，加入乙二醇作為保護(hù)劑，可以避免在氮?dú)獯祾哌^程中洗脫液被完全吹干而造成殘留農(nóng)藥成份大量損失，進(jìn)而可以提高根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的檢測方法的回收率。S520震蕩溶解根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，將經(jīng)過氮?dú)獯祾吆蟮南疵撘簹堅(jiān)M(jìn)行震蕩溶解，使洗脫液殘?jiān)械臍埩艮r(nóng)藥成份充分溶解在殘留溶液中。由此，可以進(jìn)一步提高根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法的檢測準(zhǔn)確性。S530過濾獲得待測樣品根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在該步驟中，采用0.45微米的濾膜對經(jīng)過震蕩溶解的含有殘留農(nóng)藥成分的溶液進(jìn)行過濾，由此可以除去震蕩溶解步驟中未完全溶解的殘?jiān)糠郑M(jìn)而提高根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例的方法的檢測效果。此外，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解的是，在該步驟中所使用的過濾手段不受特別限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)實(shí)際震蕩溶解情況選擇任何熟悉的過濾手段獲得待測樣品，只要能夠滿足根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的過濾效果，并不造成嚴(yán)重的待測樣品損失即可。S600色譜法檢測根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在S600中，采用配備電子捕獲檢測器的氣相色譜對待測樣品進(jìn)行殘留農(nóng)藥含量的色譜分析定量檢測。并且，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，該氣相色譜是通過毛細(xì)管柱作為固定相完成的。此外，由于前面描述的各個(gè)步驟為S600提供了雜質(zhì)含量少、組成簡單并且有利于色譜分析的待測樣品，因此在S600中可以選擇多種毛細(xì)管色譜柱作為固定相，并達(dá)到較好的定量分析效果。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在S600中可以檢測出的殘留農(nóng)藥成分包括α-666，β-666，γ-666，δ-666，p,p’-DDE，p,p’-DDD，o,p’-DDT，p,p’-DDT，七氯，環(huán)氧七氯，順式氯丹，反式氯丹，氧化氯丹，α-硫丹，β-硫丹，硫丹硫酸鹽以及狄試劑、艾氏劑。并且，通過對S600中氣相色譜的相關(guān)參數(shù)設(shè)置，可以達(dá)到同時(shí)準(zhǔn)確檢測出上述18種殘留農(nóng)藥。換句話說，在氣相色譜定量分析中，待測樣品中的上述18中殘留農(nóng)藥的特征峰可以被完全的區(qū)分開。由此，可以通過具有快速分析以及準(zhǔn)確定量檢測性能的氣相色譜為根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法提高可靠的定量檢測結(jié)果。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，參考圖6，S600可以進(jìn)一步包含以下步驟：S610設(shè)置參數(shù)根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在氣相色譜檢測步驟，首先對氣相色譜相關(guān)的各個(gè)參數(shù)進(jìn)行設(shè)置。其中，此處提到的各個(gè)參數(shù)包括氣相色譜法檢測過程中涉及到的能夠進(jìn)行設(shè)置的所有參數(shù)。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解，S610中設(shè)置的參數(shù)的具體數(shù)值不受特別限制，只要能夠滿足根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，達(dá)到準(zhǔn)確定量檢測殘留農(nóng)藥含量，并且將前面描述的18中殘留農(nóng)藥的色譜峰完全分開即可。具體地，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，可以對氣相色譜的參數(shù)進(jìn)行如下設(shè)置：進(jìn)樣口溫度260攝氏度～280攝氏度，檢測器溫度300攝氏度，載氣為氮?dú)?，尾吹氣為氮?dú)?。由此，可以通過S610為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例的氣相色譜法檢測殘留農(nóng)藥含量提供范圍適當(dāng)?shù)膮?shù)設(shè)置，由此進(jìn)一步提高氣相色譜法分析的準(zhǔn)確性以及定量效果。S620程序升溫根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在該步驟中，通過設(shè)置程序升溫的具體參數(shù)，達(dá)到使氣相色譜的色譜柱溫度按照設(shè)定的梯度進(jìn)行升溫，使待測樣品中的各個(gè)組分的沸點(diǎn)與柱溫相互對應(yīng)，進(jìn)而達(dá)到分離沸點(diǎn)不同的各個(gè)組分的目的，使色譜峰分布均勻。程序升溫是決定氣相色譜法分析效果的關(guān)鍵步驟之一，因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)實(shí)際待測樣品的具體情況對S620中程序升溫的溫度梯度以及升溫速度進(jìn)行調(diào)節(jié)。具體地，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，針對不同的毛細(xì)管色譜柱，可以設(shè)定不同的升溫程序。例如，針對CP-Sil19CB毛細(xì)管色譜柱，設(shè)置初始溫度為80攝氏度，保持2分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至214攝氏度，保持7分鐘，以20攝氏度/分鐘升溫至280攝氏度，保持7分鐘，總時(shí)間為25.65分鐘，其中載體流速為1.2ml/分鐘，尾吹氣流速為28ml/分鐘。針對VF-1701ms毛細(xì)管色譜柱或DB-1701毛細(xì)管色譜柱，設(shè)置初始溫度為90攝氏度，保持1分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至170攝氏度，保持5分鐘，以6攝氏度/分鐘升溫至242攝氏度，保持7分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至270攝氏度，保持7分鐘，其中，總時(shí)間為39～42分鐘，柱流速為1.0ml/分鐘。由此，可以通過對上述色譜條件以及程序升溫的溫度、時(shí)間的調(diào)控，達(dá)到使不同組分的殘留農(nóng)藥成份在氣相色譜的毛細(xì)管柱中通過分配分開，進(jìn)而達(dá)到將不同成份的農(nóng)藥殘留分離并定量檢測的目的，從而提高根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法的檢測效果。S630色譜分析根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，在S630色譜分析步驟，利用氮?dú)庾鳛檩d氣，選用毛細(xì)管色譜柱以及電子捕獲器作為檢測器，對待測樣品中的各個(gè)殘留農(nóng)藥組分的含量進(jìn)行定量。由此，可以通過適當(dāng)?shù)膮?shù)設(shè)定，達(dá)到完全分離前面描述的18種農(nóng)藥成分的色譜峰的目的。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，具體地，利用外標(biāo)法對上述待測樣品進(jìn)行定量分析。例如，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，首先配制具有已知濃度的含有特定農(nóng)藥成分的溶液作為標(biāo)準(zhǔn)工作液，根據(jù)獲得的待測樣品中的殘留農(nóng)藥峰面積，根據(jù)下列公式對各個(gè)殘留農(nóng)藥組分進(jìn)行定量計(jì)算：其中，Ai為待測樣品中各個(gè)殘留農(nóng)藥的峰面積；C為標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度，單位為μg/mL；V為殘留物溶液的體積，為1.00mL；As為標(biāo)準(zhǔn)工作液中農(nóng)藥殘留的峰面積；m為殘留物溶液的質(zhì)量，單位為g。由此，通過上述公式以及S630獲得的待測樣品的色譜峰，對殘留農(nóng)藥進(jìn)行定量檢測，進(jìn)而達(dá)到準(zhǔn)確定量的檢測上述18中殘留農(nóng)藥在液體乳制品中的含量的目的。下面將結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的方案進(jìn)行解釋。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解，下面的實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體技術(shù)或條件的，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。在下面的實(shí)施例中，如果沒有明確說明，則采用儀器和耗材為：氣相色譜儀：配電子捕獲檢測器。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：配真空系統(tǒng)和加熱裝置。天平：感量為1mg(稱量樣品)和0.1mg(稱量標(biāo)準(zhǔn)品)。氮吹儀：水浴溫度為48～52攝氏度。離心機(jī)：最高轉(zhuǎn)速可達(dá)到5000轉(zhuǎn)/分鐘。渦旋混合器。玻璃試管：推薦采用規(guī)格為15×150mm和18×180mm。佛羅里硅藻土SPE凈化小柱：500mg/3mL。CP-Sil19CB毛細(xì)管色譜柱：50m×0.25mm×0.20μm，或具有同等性能的毛細(xì)管色譜柱；30m×0.32mm×0.25μm，或具有同等性能的毛細(xì)管色譜柱。另外，如果30m色譜柱能夠滿足根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的要求，可不采用50m色譜柱。VF-1701ms毛細(xì)管色譜柱，安捷倫公司(Agilent)：30m×0.32mm×0.25μm，或具有同等性能的毛細(xì)管色譜柱。DB-1701毛細(xì)管色譜柱，安捷倫公司(Agilent)：30m×0.25mm×0.25μm，或具有同等性能的毛細(xì)管色譜柱。試劑和藥品：氯化鈉、硫酸鎂(MgSO4·7H2O或者無水硫酸鎂)均為分析純。除特殊規(guī)定外，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例所用的乙腈，三氯甲烷，正己烷、乙二醇有機(jī)溶劑均為色譜純，實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T6682三級水的要求。實(shí)施例1第一步，將待測液體乳制品樣品混勻，準(zhǔn)確稱量10.000g于50mL離心管中，加入20mL乙腈，然后加入4g硫酸鎂和1g氯化鈉，渦旋1分鐘，并在4000rpm條件下進(jìn)行4分鐘的第一離心處理。靜置分層后，獲得第一有機(jī)相和第一水相。隨后，第一水相中再加入10mL乙腈，通過第二離心混合充分。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，第二離心的時(shí)間以及轉(zhuǎn)速不受具體限制，只要能夠滿足充分混合第一水相以及乙腈即可。靜置分層后，將第二有機(jī)相以及第一有機(jī)相合并，得到乙腈有機(jī)相。第二步，將乙腈有機(jī)相50攝氏度的水浴條件下旋轉(zhuǎn)蒸干。然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中加入約9mL的正己烷，沖洗旋轉(zhuǎn)瓶，再加入約9mL水，進(jìn)行1分鐘的第一震搖，待溶液分層清晰后，獲得第三有機(jī)相以及第二水相。下層第二水相中再加入約6mL的正己烷，進(jìn)行1分鐘的第二震搖，靜置分層，獲得第四有機(jī)相。第三步，將第四有機(jī)相與第三有機(jī)相合并，并用氮?dú)庠?0攝氏度的水浴條件下中吹至約1mL，獲得待測粗品，待用。第四步，利用弗羅里硅土SPE柱對待測粗品進(jìn)行純化。其中，弗羅里硅土SPE柱首先進(jìn)行活化：在SPE柱中加入約3mL正己烷，然后再加入約3mL第一洗脫劑。將上述待測粗品渦旋30秒后，注入弗羅里硅土SPE柱中。當(dāng)待測粗品溶液快要流干時(shí)，在盛放樣品的玻璃試管中加入約6mL第一洗脫劑進(jìn)行沖洗，再將上述第一洗脫劑倒入弗羅里硅土SPE柱，然后在盛放樣品的玻璃試管中加入約3mL第二洗脫劑進(jìn)行沖洗，再將上述第二洗脫劑倒入弗羅里硅土SPE柱，待所有洗脫劑流干后，棄去弗羅里硅土SPE柱，收集全部洗脫液。第五步，在所述洗脫液中準(zhǔn)確加入10微升的乙二醇，并用氮?dú)庠?8～52攝氏度的水浴條件下吹掃完正己烷之后，準(zhǔn)確加入1.00毫升正己烷，在渦旋混合器上充分振蕩溶解殘留物，經(jīng)0.45μm有機(jī)系濾膜過濾后，獲得待測樣品，待用。第六步，設(shè)置氣相色譜參數(shù)如下：進(jìn)樣口溫度280攝氏度，檢測器溫度300攝氏度，載氣為氮?dú)?，尾吹氣為氮?dú)?。以正己烷配制濃度已知的含有前面描述?8種殘留農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。并將待測樣品1微升注入到VF-1701ms毛細(xì)管色譜柱中，設(shè)置初始溫度為90攝氏度，保持1分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至170攝氏度，保持5分鐘，以6攝氏度/分鐘升溫至242攝氏度，保持7分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至270攝氏度，保持7分鐘，其中，總時(shí)間為38分鐘，柱流速為1.0ml/分鐘。第七步：結(jié)果計(jì)算。得到樣品溶液中18種殘留農(nóng)藥的峰面積，然后通過以下公式計(jì)算殘留農(nóng)藥含量：其中，Ai為待測樣品中各個(gè)殘留農(nóng)藥的峰面積；C為標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度，單位為μg/mL；V為殘留物溶液的體積，為1.00mL；As為標(biāo)準(zhǔn)工作液中農(nóng)藥殘留的峰面積；m為殘留物溶液的質(zhì)量，單位為g。如圖7、圖8所示，采用上述方法通過氣相色譜可以將18種殘留農(nóng)藥成份的色譜峰完全分開并準(zhǔn)確定量。圖7和圖8出峰順序?yàn)椋?1)α-66613.752min(2)γ-66615.282min(3)艾氏劑15.996min(4)七氯16.933min(5)β-66617.955min(6)δ-66618.728min(7)氧化氯丹19.013min(8)環(huán)氧七氯19.361min(9)α-硫丹20.229min(10)反式氯丹20.407min(11)順式氯丹20.674min(12)p,p’-DDE20.930min(13)狄試劑21.574min(14)o,p’-DDT22.786min、(15)p,p’-DDD24.405min(16)β-硫丹24.762min(17)p,p’-DDT25.316min(18)硫丹硫酸鹽29.718min。因此，采用根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法進(jìn)行液態(tài)乳中殘留農(nóng)藥的檢測，可以對多種殘留農(nóng)藥成份進(jìn)行區(qū)分并準(zhǔn)確定量，進(jìn)而提高了根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法檢測殘留農(nóng)藥的效率以及效果。此外，為了說明根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例的檢測方法的優(yōu)點(diǎn)，下面對根據(jù)GB/T5009.19-2008第一法得到的回收率與根據(jù)實(shí)施例1得到的回收率進(jìn)行比較：表118種農(nóng)藥殘留加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(μg/Kg)由表1提供的以上數(shù)據(jù)可以看出，實(shí)施例1回收率有較大的提高。實(shí)施例2第一步，將待測液體乳制品樣品混勻，準(zhǔn)確稱量10g于50mL離心管中，加入20mL乙腈，然后加入4.2g硫酸鎂和1.2g氯化鈉，渦旋1分鐘，并在4500rpm條件下進(jìn)行5分鐘的第一離心處理。靜置分層后，獲得第一有機(jī)相和第一水相。隨后，第一水相中再加入10mL乙腈，通過第二離心混合充分。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，第二離心的時(shí)間以及轉(zhuǎn)速不受具體限制，只要能夠滿足充分混合第一水相以及乙腈即可。靜置分層后，將第二有機(jī)相以及第一有機(jī)相合并，得到乙腈有機(jī)相。第二步，將乙腈有機(jī)相50攝氏度的水浴條件下旋轉(zhuǎn)蒸干。然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中加入約9mL的正己烷，沖洗旋轉(zhuǎn)瓶，再加入約9mL水，進(jìn)行1分鐘的第一震搖，待溶液分層清晰后，獲得第三有機(jī)相以及第二水相。下層第二水相中再加入約6mL的正己烷，進(jìn)行1分鐘 的第二震搖，靜置分層，獲得第四有機(jī)相。第三步，將第四有機(jī)相與第三有機(jī)相合并，并用氮?dú)庠?0攝氏度的水浴條件下中吹至約1mL，獲得待測粗品，待用。第四步，利用弗羅里硅土SPE柱對待測粗品進(jìn)行純化。其中，弗羅里硅土SPE柱首先進(jìn)行活化：在SPE柱中加入約3mL正己烷，然后再加入約3mL第一洗脫劑。將上述待測粗品渦旋30秒后，注入弗羅里硅土SPE柱中。當(dāng)待測粗品溶液快要流干時(shí)，在盛放樣品的玻璃試管中加入約6mL第一洗脫劑進(jìn)行沖洗，再將上述第一洗脫劑倒入弗羅里硅土SPE柱，然后在盛放樣品的玻璃試管中加入約3mL第二洗脫劑進(jìn)行沖洗，再將上述第二洗脫劑倒入弗羅里硅土SPE柱，待所有洗脫劑流干后，棄去弗羅里硅土SPE柱，收集全部洗脫液。第五步，在所述洗脫液中準(zhǔn)確加入10微升的乙二醇，并用氮?dú)庠?8～52攝氏度的水浴條件下吹掃完正己烷之后，準(zhǔn)確加入1.00毫升正己烷，在渦旋混合器上充分振蕩溶解殘留物，經(jīng)0.45μm有機(jī)系濾膜過濾后，獲得待測樣品，待用。第六步，設(shè)置氣相色譜參數(shù)如下：進(jìn)樣口溫度280攝氏度，檢測器溫度300攝氏度，載氣為氮?dú)?，尾吹氣為氮?dú)?。以正己烷配制濃度已知的含有前面描述?8種殘留農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。并將待測樣品1微升注入到CP-Sil19CB毛細(xì)管色譜柱，設(shè)置初始溫度為80攝氏度，保持2分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至170攝氏度，保持4分鐘，以23攝氏度/分鐘升溫至242攝氏度，保持10分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至270攝氏度，保持5分鐘總時(shí)間為27.08分鐘，其中載體流速為1ml/分鐘，尾吹氣流速為29ml/分鐘第七步：結(jié)果計(jì)算。得到樣品溶液中18種殘留農(nóng)藥的峰面積，然后通過以下公式計(jì)算殘留農(nóng)藥含量：其中，Ai為待測樣品中各個(gè)殘留農(nóng)藥的峰面積；C為標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度，單位為μg/mL；V為殘留物溶液的體積，為1.00mL；As為標(biāo)準(zhǔn)工作液中農(nóng)藥殘留的峰面積；m為殘留物溶液的質(zhì)量，單位為g。如圖9和圖10所示，采用CP-Sil19CB毛細(xì)管色譜柱，也可以將18種殘留農(nóng)藥成份的色譜峰完全分開并準(zhǔn)確定量。圖9和圖10出峰順序?yàn)椋?1)α-6667.713min(2)γ-6668.348min(3)艾氏劑8.709min(4)七氯9.276min(5)β-6669.888min(6)δ-66610.589min(7)氧化氯丹10.690min(8)環(huán)氧七氯11.186min(9)α-硫丹12.168min(10)反式氯丹12.359min(11)順式氯丹12.681min(12)p,p’-DDE13.024min(13)狄試劑13.783min(14)o,p’-DDT15.481min(15)p,p’-DDD17.416min(16)β-硫丹17.597min(17)p,p’-DDT18.193min(18)硫丹硫酸鹽20.741min。因此，采用根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法進(jìn)行液態(tài)乳中殘留 農(nóng)藥的檢測，可以對多種殘留農(nóng)藥成份進(jìn)行區(qū)分并準(zhǔn)確定量，進(jìn)而提高了根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法檢測殘留農(nóng)藥的效率以及效果。此外，為了說明根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例的檢測方法的優(yōu)點(diǎn)，下面對根據(jù)GB/T5009.162-2008第二法得到的回收率與根據(jù)實(shí)施例2得到的回收率進(jìn)行比較：表218種農(nóng)藥殘留加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(μg/Kg)由表2提供的以上數(shù)據(jù)可以看出，實(shí)施例2回收率有較大的提高。明顯地，國標(biāo)GB/T5009.19-2008中程序升溫條件下(初始溫度為90攝氏度，保持1分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至170攝氏度，保持5分鐘，以2.3攝氏度/分鐘升溫至230攝氏度，保持17分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至280攝氏度，保持5分鐘，總時(shí)間為57.34分鐘，柱流速為1.0ml/分鐘，尾吹氣為25ml/分鐘)采用氣相色譜檢測樣品的時(shí)間約為57分鐘，國標(biāo)GB/T5009.162-2008第二法(初始溫度為60攝氏度，保持1分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至170攝氏度，保持5分鐘，以2攝氏度/分鐘升溫至235攝氏度，保持5分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至280攝氏度，保持5分鐘，總時(shí)間為52.38分鐘，柱流速為1.0ml/分鐘，尾吹氣為50ml/分鐘)中程序升溫條件下采用氣相色譜檢測樣品的時(shí)間約為53分鐘； 而本發(fā)明中實(shí)施例1的檢測時(shí)間為38分鐘，實(shí)施例2的檢測時(shí)間約為26分鐘，與上述國標(biāo)檢測時(shí)間相比，根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的檢測時(shí)間明顯縮短，進(jìn)而提高了根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法的檢測效率。對比例1為了說明根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的檢測方法中，在第二步中使用水沖洗旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶對鹽分等雜質(zhì)的去除作用，下面引入對比例進(jìn)行具體說明。對比例1中的檢測方法與實(shí)施例2相同，但在第二步中，不采用水對旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶進(jìn)行清洗。參考圖11、圖12，通過對比實(shí)施例2以及對比例1可以發(fā)現(xiàn)，當(dāng)不使用水對旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶進(jìn)行清洗時(shí)，由于無機(jī)鹽以及部分易溶于水的雜質(zhì)不能除去，因此采用對比例2的方法得到的氣相色譜圖譜中包含多個(gè)雜質(zhì)峰，進(jìn)而對依靠氣相色譜對殘留農(nóng)藥的定量分析產(chǎn)生負(fù)面影響。對比例2為了說明在根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的檢測方法中，在第五步中添加乙二醇作為保護(hù)劑的作用，下面引入對比例進(jìn)行具體說明。對比例2中的檢測方法與實(shí)施例2相同，但在第五步中，在經(jīng)過弗羅里硅土SPE柱處理待吹掃的待測樣品中沒有加入乙二醇，并繼續(xù)進(jìn)行后續(xù)處理。表3對比例2以及實(shí)施例2氣相色譜對積峰面積比較組分名稱對比例3峰面積實(shí)施例2峰面積α-六六六8940811012779γ-六六六759584917985艾氏劑16361031855900七氯9883081137488β-666311433319394δ-666293583297883氧化氯丹101245116393環(huán)氧七氯14669771550040α-硫丹12201971376529反式氯丹469454502489順式-氯丹142021150977p,p’-DDE11758661286121狄氏劑14024931635565o,p’-DDT393318471987p,p’-DDD761936905985β-硫丹9693541218417p,p’-DDT422709575830硫丹硫酸酯15225471718053參考圖13、圖14以及圖15，通過對比實(shí)施例2以及對比例2以發(fā)現(xiàn)，當(dāng)不加入乙二醇作為保護(hù)劑時(shí)，含有殘留農(nóng)藥的待測樣品因易揮發(fā)，會在檢測過程有較多損失。參考表3，不加入乙二醇作為保護(hù)劑的對比例2中的各個(gè)殘留農(nóng)藥成份的峰面積與采用實(shí)施例2的方法得到的氣相色譜峰面積相比，均明顯減小。由此，不加入乙二醇作為保護(hù)劑時(shí)，待測樣品中的殘留農(nóng)藥成份由于揮發(fā)損失，導(dǎo)致氣相色譜峰面積失真，進(jìn)而對依靠氣相色譜對殘留農(nóng)藥的定量分析產(chǎn)生負(fù)面影響。圖13、圖14和圖15出峰順序?yàn)椋?1)α-66611.184min(2)γ-66612.549min(3)艾氏劑13.379min(4)七氯14.643min(5)β-66615.797min(6)δ-66616.757min(7)氧化氯丹17.040min(8)環(huán)氧七氯17.402min(9)α-硫丹18.144min(10)反式氯丹18.237min(11)順式氯丹18.416min(12)p,p’-DDE18.536min(13)狄試劑19.015min(14)o,p’-DDT19.649min(14)p,p’-DDD20.453min(16)β-硫丹20.753min(17)p,p’-DDT20.915min(18)硫丹硫酸鹽22.959min。對比例3為了說明根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的程序升溫設(shè)定對于檢測結(jié)果的影響，下面引入對比例3進(jìn)行具體說明。對比例3的具體檢測步驟與實(shí)施例1相同，在第六步，設(shè)置氣相色譜參數(shù)時(shí)，對程序升溫做如下設(shè)置(GB/T5009.162-2008第二法)：初始溫度為60攝氏度，保持1分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至170攝氏度，保持5分鐘，以2攝氏度/分鐘升溫至235攝氏度，保持5分鐘，以40攝氏度/分鐘升溫至280攝氏度，保持5分鐘，總時(shí)間為52.38分鐘，柱流速為1.0ml/分鐘，尾吹氣為50ml/分鐘。參考圖16、圖17、圖18，與實(shí)施例1相比，采用對比例3中方法進(jìn)行氣相色譜檢測，由于在程序升溫過程中的參數(shù)設(shè)置不合理，因此無法將上述18種殘留農(nóng)藥成份分開。圖16、圖17和圖18出峰順序?yàn)椋?1)α-66620.259min(2)γ-66623.359min(3)艾氏劑24.792和24.820min(4)七氯26.883min(5)β-66629.634min(6)δ-66631.458min(7)氧化氯丹32.095min(8)環(huán)氧七氯32.767min(9)α-硫丹34.901min(10)反式氯丹35.454min(11)順式氯丹36.115min(12)p,p’-DDE36.893min(13)狄試劑38.046min(14)o,p’-DDT40.738min(14)p,p’-DDD43.859min (16)β-硫丹44.212min(17)p,p’-DDT45.504min(18)硫丹硫酸鹽48.925min。需要說明的是，在本發(fā)明的各個(gè)方面中所描述的特征和效果可以互相適用，在此不再贅述。在本說明書的描述中，參考術(shù)語“一個(gè)實(shí)施例”、“另一個(gè)實(shí)施例”等的描述意指結(jié)合該實(shí)施例描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點(diǎn)包含于本發(fā)明的至少一個(gè)實(shí)施例中。在本說明書中，對上述術(shù)語的示意性表述不必須針對的是相同的實(shí)施例或示例。而且，描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點(diǎn)可以在任一個(gè)或多個(gè)實(shí)施例或示例中以合適的方式結(jié)合。此外，在不相互矛盾的情況下，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以將本說明書中描述的不同實(shí)施例或示例以及不同實(shí)施例或示例的特征進(jìn)行結(jié)合和組合。盡管上面已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實(shí)施例，可以理解的是，上述實(shí)施例是示例性的，不能理解為對本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在本發(fā)明的范圍內(nèi)可以對上述實(shí)施例進(jìn)行變化、修改、替換和變型。當(dāng)前第1頁1 2 3