專利名稱：一種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒及其使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種膠體金檢測(cè)技術(shù)，尤其涉及一種間接標(biāo)記的用于檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒及其使用方法，屬于食品安全快速檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
目前，對(duì)于食物中藥物殘留的檢測(cè)，例如，水產(chǎn)品中的呋喃唑酮的檢測(cè)的方法，常見的有化學(xué)比色法、液相色譜法、酶聯(lián)免疫法、膠體金法等。其中，前面三種方法存在一些缺陷，不能滿足現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的要求，主要表現(xiàn)在化學(xué)比色法的干擾比較多導(dǎo)致特異性變差，檢測(cè)的靈敏度也不高，達(dá)不到市場(chǎng)的要求；液相色譜法的特異性好，靈敏度也比較高，但是需要特殊的儀器設(shè)備，專業(yè)的操作人員，檢測(cè)費(fèi)用很高，檢測(cè)所需時(shí)間也比較長(zhǎng)，一般需 要隔天才能出檢測(cè)結(jié)果，單個(gè)樣本的檢測(cè)費(fèi)用基本都在2000左右，不適合廣泛的推廣；酶聯(lián)免疫法需要使用酶標(biāo)儀，需要專業(yè)的操作人員，操作時(shí)間比膠體金法要長(zhǎng)2小時(shí)左右，不適合現(xiàn)場(chǎng)操作，費(fèi)用也比膠體金法稍高，若檢測(cè)樣本較少，費(fèi)用也將成倍高于膠體金法。膠體金法利用抗原與抗體的高度專一性特異反應(yīng)來(lái)進(jìn)行檢測(cè)，具有高靈敏度和高特異性，操作過(guò)程簡(jiǎn)單，不需要使用特殊的儀器設(shè)備，所需時(shí)間較短，5 8分鐘即可判讀，事前需要進(jìn)行樣本處理的也能在2個(gè)小時(shí)內(nèi)出結(jié)果，而且結(jié)果可用肉眼判讀，適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，可以較好的實(shí)現(xiàn)我國(guó)食品安全領(lǐng)域快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)要求。因?yàn)闄z測(cè)樣本的原因，如水產(chǎn)品容易死亡，特別是在流通的環(huán)節(jié)，必須使用快速方法進(jìn)行檢測(cè)，以上數(shù)種方法中也只有免疫膠體金法能夠滿足要求。然而現(xiàn)有技術(shù)中，人們?cè)谑褂媚z體金法檢測(cè)時(shí)，都是在單克隆抗體上用膠體金直接標(biāo)記，不僅抗體用量大，且會(huì)導(dǎo)致被標(biāo)記抗體的活性出現(xiàn)明顯的下降，從而導(dǎo)致產(chǎn)品靈敏度降低。例如，申請(qǐng)?zhí)枮?00810224933. 3的中國(guó)發(fā)明專利，公開了一種檢測(cè)禽流感的試紙條及其制備方法，該試紙條包括以下部分墊板、硝酸纖維素膜、兩個(gè)結(jié)合墊和兩片吸水濾紙，所述的硝酸纖維素膜含有金標(biāo)記的AIV單克隆抗體、AIV血清和羊抗鼠IgG，所述的結(jié)合墊是含有脫脂酪蛋白、金標(biāo)記的AIV單克隆抗體、AIV血清和羊抗鼠IgG的玻璃纖維膜。在使用該種方法時(shí)，就容易出現(xiàn)膠體金用量大，抗體活性降低的技術(shù)問(wèn)題，從而導(dǎo)致靈敏度降低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供一種間接標(biāo)記的檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒。它具有檢測(cè)靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明的上述目的可以通過(guò)以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的。一種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒，包括檢測(cè)板和金標(biāo)微孔，檢測(cè)板包括載體膜和膠體金結(jié)合墊，膠體金結(jié)合墊附著于載體膜上的一端，所述金標(biāo)微孔上包被有單克隆抗體與膠體金的結(jié)合物；所述載體膜上設(shè)有檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)，檢測(cè)區(qū)上固定有特異性結(jié)合抗原，質(zhì)控區(qū)上固定有二抗；
所述單克隆抗體與膠體金的結(jié)合物具體為，膠體金標(biāo)記在抗抗體上而所述抗抗體與單克隆抗體特異性結(jié)合，的一種結(jié)合物。本發(fā)明的上述目的還通過(guò)以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的。一種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒，包括檢測(cè)板，檢測(cè)板包括載體膜和膠體金結(jié)合墊，膠體金結(jié)合墊附著于載體膜上的一端，所述膠體金結(jié)合墊上包被有單克隆抗體與膠體金的結(jié)合物；所述載體膜上設(shè)有檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)，檢測(cè)區(qū)上固定有特異性結(jié)合抗原，質(zhì)控區(qū)上固定有二抗；
所述單克隆抗體與膠體金的結(jié)合物具體為，膠體金標(biāo)記在抗抗體上而所述抗抗體與單克隆抗體特異性結(jié)合，的一種結(jié)合物。
本發(fā)明采用的方法是膠體金免疫層析法，膠體金是一種負(fù)電荷的疏水膠，靠靜電粒子相互排斥作用來(lái)維持穩(wěn)定的膠體體系，直徑從幾納米到幾十納米不等。由于不同直徑的膠體金的光散射各異，所以其溶膠顏色的深淺相應(yīng)發(fā)生顯著的變化，這就是膠體金用于被動(dòng)凝集試驗(yàn)的基礎(chǔ)。同時(shí)由于膠體金金顆粒對(duì)蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的吸附功能，可與SPA，Igg，毒素、糖蛋白、酶、抗生素和激素等多種物質(zhì)非共價(jià)結(jié)合，從而使其成為免疫反應(yīng)的優(yōu)良標(biāo)記物。本發(fā)明所述單克隆抗體與膠體金的結(jié)合物，為膠體金標(biāo)記在抗抗體上而所述抗抗體與單克隆抗體特異性結(jié)合，的一種結(jié)合物。而這種結(jié)構(gòu)的結(jié)合物是采用間接標(biāo)記的方法制備的。方法為不對(duì)目標(biāo)抗體進(jìn)行直接的標(biāo)記，而采用標(biāo)記抗抗體，然后把目標(biāo)抗體加入標(biāo)記抗抗體的膠體金溶液中。如要標(biāo)記鼠抗AOZ-BSA抗體，不對(duì)該抗體直接進(jìn)行標(biāo)記，而采用標(biāo)記羊抗鼠抗體，標(biāo)記好以后，將鼠抗AOZ-BSA抗體加入標(biāo)記好的羊抗鼠膠體金溶液，利用標(biāo)記好的羊抗鼠溶液會(huì)和鼠源性抗體結(jié)合的特點(diǎn)，以達(dá)到對(duì)鼠抗AOZ-BSA抗體進(jìn)行膠體金標(biāo)記的目的。這樣做的優(yōu)點(diǎn)在于，標(biāo)記過(guò)程中，抗體的效價(jià)會(huì)降低，因未對(duì)單抗進(jìn)行標(biāo)記，效價(jià)降低的只是羊抗鼠抗體，如果效價(jià)降低出現(xiàn)在單克隆抗體上，那么會(huì)降低靈敏度；而且因?yàn)樾r(jià)降低，單抗的使用量必須增加，以保證檢測(cè)時(shí)足夠的顯色指示，這也會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品靈敏度的降低。本發(fā)明采用間接標(biāo)記法，標(biāo)記在二抗上，如羊抗鼠IgG，此時(shí)效價(jià)降低的是羊抗鼠IgG，而單克隆抗體才是檢測(cè)的關(guān)鍵，因此羊抗鼠效價(jià)的降低，并不會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響，從而有效地提高了檢測(cè)的靈敏度，同時(shí)還節(jié)省了單克隆抗體的用量。作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，所述檢測(cè)板還包括樣品墊、吸水墊、載體板和背襯，所述載體膜附著在背襯上，背襯附著在載體板上；樣品墊設(shè)在膠體金結(jié)合墊上，所述載體膜上相對(duì)于所述膠體金結(jié)合墊的另一端設(shè)有吸水墊。作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，所述載體板采用塑料板，所述載體膜采用硝酸纖維素薄膜。本發(fā)明從一個(gè)創(chuàng)新角度出發(fā)，提供了兩種技術(shù)方案的試劑盒。一種是具有金標(biāo)微孔的，一種是沒(méi)有金標(biāo)微孔的。具有金標(biāo)微孔的試劑盒，檢測(cè)時(shí)，待檢溶液先加入金標(biāo)微孔中，反應(yīng)后轉(zhuǎn)移到檢測(cè)板的樣品墊上，樣品溶液因載體膜的毛細(xì)管作用向另一端擴(kuò)散。在移動(dòng)的過(guò)程中，會(huì)發(fā)生相應(yīng)的抗原抗體反應(yīng)，并通過(guò)免疫膠體金的顏色顯示出來(lái)。如果樣品溶液含有相應(yīng)藥物殘留，藥物將和膠體金顆粒上的抗體先行反應(yīng)，因此當(dāng)膠體金顆粒隨樣品溶液擴(kuò)散至檢測(cè)區(qū)時(shí)，膠體金顆粒上抗體的活性位點(diǎn)因被樣品溶液中的藥物占據(jù)而無(wú)法與檢測(cè)區(qū)上特異性抗原結(jié)合；所以當(dāng)樣品中的藥物含量超過(guò)試劑板檢出限時(shí)，試劑板上的檢測(cè)區(qū)將較質(zhì)控區(qū)顯色淡甚至無(wú)顯色，判定為陽(yáng)性。反之，當(dāng)樣品中藥物含量在試劑板檢出限以下或無(wú)殘留時(shí)，試劑板上的檢測(cè)區(qū)顯色與質(zhì)控區(qū)相近或偏深，判定為陰性。無(wú)金標(biāo)微孔的試劑盒，其單克隆抗體與膠體金的結(jié)合物是包被在膠體金結(jié)合墊上的，使用時(shí)直接將待檢溶液滴在樣品墊上。然檢測(cè)的判定方法以及檢測(cè)的原理都是一致的。本發(fā)明的目的之二是提供一種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒的使用方法。一種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒的使用方法，它采用了具有金標(biāo)微孔的試劑盒的技術(shù)方案中對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)時(shí)將樣品溶液滴加在金標(biāo)微孔中，等待數(shù)分鐘后，轉(zhuǎn)移到檢測(cè)板上，等待數(shù)分鐘后，肉眼觀察，若檢測(cè)區(qū)較之質(zhì)控區(qū)顯色淡或無(wú)顯色，判定為陽(yáng)性，反之，判定為陰性。一種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒的使用方法，它采用了無(wú)金標(biāo)微孔的試劑盒的技術(shù)方案對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)時(shí)將樣品溶液滴加在檢測(cè)板上，等待數(shù)分鐘后，肉眼觀 察，若檢測(cè)區(qū)較之質(zhì)控區(qū)顯色淡或無(wú)顯色，判定為陽(yáng)性，反之，判定為陰性。作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，所述樣本處理是將樣本組織中的藥物萃取出來(lái)，然后進(jìn)行稀釋或濃縮的一種技術(shù)手段。有些樣本可以通過(guò)簡(jiǎn)單的常規(guī)處理就能直接用于檢測(cè)，而有些樣本則不行，因此需要通過(guò)樣本處理，把樣本中的待檢物質(zhì)提取出來(lái)，從而達(dá)到檢測(cè)目的。通過(guò)溶液配方的配比組合，使得不同樣本間的差異最小化，同時(shí)，保證樣本的前處理工藝具有快速，簡(jiǎn)單，便于操作等特點(diǎn)，保證整個(gè)檢測(cè)過(guò)程在短時(shí)間內(nèi)完成。作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，所述樣本處理是將樣本組織中的藥物萃取出來(lái)，進(jìn)行稀釋或濃縮，進(jìn)行衍生加臂，使之充分暴露免疫位點(diǎn)的一種技術(shù)手段。作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，所述樣本處理包括以下步驟
Φ取的去脂肪組織樣本，用均質(zhì)機(jī)均質(zhì)處理；
@取均質(zhì)處理的樣本于離心管中；
@加入萃取劑于裝有肉樣的離心管中；
Φ劇烈振蕩后，室溫下離心機(jī)離心；
用配備的滴管移取上清液于另一離心管中，吹干；
分別用專用滴管向吹干的離心管中加入正己烷和緩沖液，室溫下離心，取下層溶液，待檢。作為上述技術(shù)方案的另一種優(yōu)選，所述樣本處理包括以下步驟Φ取去脂肪組織樣本，用均質(zhì)機(jī)均質(zhì)處理；
^取均質(zhì)處理的樣本于離心管中，并加入去離子水、鹽酸、樣本衍生化試劑，充分混
合；
@55 65°C水浴條件下孵育O. 8 I. 2h，超聲處理8 12min ；
Φ取出后加入磷酸氫二鉀、氫氧化鈉、乙酸乙酯，充分混合，離心或靜置使之分層；
@移取上層溶液于離心管中，吹干；
@向吹干的離心管中加入正己烷，振蕩，然后加入緩沖溶液，充分混勻，離心或靜置 使之分層；
@吸取下層溶液，待檢。 由于有些需要檢測(cè)的藥物的分子量比較小，不能直接檢測(cè)，因此需要對(duì)小分子的藥物進(jìn)行處理。對(duì)這樣的樣本進(jìn)行的處理，是將小分子藥物進(jìn)行衍生加臂，使之充分暴露免疫位點(diǎn)。樣本衍生化試劑的使用就是其中的一種常規(guī)技術(shù)。所述樣本衍生化試劑是指，一種用于對(duì)樣本進(jìn)行處理，使得它帶有羧基或者硝基，以充分暴露抗原位點(diǎn)，便于抗體的識(shí)別的試劑。樣本衍生化試劑的選取由具體的樣本決定，樣本衍生化試劑及其如何選取屬于本領(lǐng)域技術(shù)人員的公知技術(shù)，在此不作贅述。本發(fā)明具有以下技術(shù)效果
本發(fā)明提供的兩種試劑盒，都是采用間接方法對(duì)蛋白進(jìn)行膠體金標(biāo)記。采用間接方法標(biāo)記不僅避免了特異性抗體的標(biāo)記損傷，節(jié)省特異性抗體的用量，還能提高產(chǎn)品的特異性和靈敏度。


圖I是本發(fā)明實(shí)施例一試劑盒的結(jié)構(gòu)示意 圖2是本發(fā)明載體膜的結(jié)構(gòu)示意圖，箭頭表示樣本溶液在載體膜上的擴(kuò)散方向；
圖3是本發(fā)明實(shí)施例二試劑盒的結(jié)構(gòu)示意 圖中，I-樣品墊，2-膠體金結(jié)合墊，3-載體膜，4-吸水墊，5-背襯，6-載體板，7-金標(biāo)微孔，3_1是檢測(cè)區(qū)，3_2是質(zhì)控區(qū)。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的說(shuō)明。本具體實(shí)施方式
僅僅是對(duì)本發(fā)明的解釋，并不是對(duì)本發(fā)明的限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員在閱讀了本發(fā)明之后所作出的任何改進(jìn)，只要在本發(fā)明的權(quán)利要求書保護(hù)范圍內(nèi)，都將受到專利法的保護(hù)。實(shí)施例一
檢測(cè)水產(chǎn)品中呋喃唑酮代謝物的試劑盒
如圖I和2所示，一種檢測(cè)水產(chǎn)品中呋喃唑酮代謝物的試劑盒，包括樣品墊I、膠體金結(jié)合墊2、載體膜3、吸水墊4、背襯5，載體板6和金標(biāo)微孔7，所述載體膜3具體為硝酸纖維素膜，所述載體板6為PVC試劑板。硝酸纖維素膜粘附在背襯5上，背襯5粘附在PVC試劑板上，硝酸纖維素膜一端設(shè)有膠體金結(jié)合墊2，膠體金結(jié)合墊2上設(shè)有樣品墊，硝酸纖維素膜另一端設(shè)有吸水墊4。金標(biāo)微孔7上包被有單克隆抗體與膠體金的結(jié)合物，所述硝酸纖維素膜上設(shè)有檢測(cè)區(qū)3-1和質(zhì)控區(qū)3-2，檢測(cè)區(qū)3-1上固定有特異性結(jié)合抗原，質(zhì)控區(qū)3-2上固定有羊抗鼠抗體，羊抗鼠抗體是個(gè)二抗。所述單克隆抗體與膠體金的結(jié)合物采用間接標(biāo)記的方法制備，具體為，采用膠體金去標(biāo)記羊抗鼠抗體，將單克隆抗體鼠抗AOZ-BSA抗體加入標(biāo)記好的羊抗鼠抗體溶液中， 利用標(biāo)記好的羊抗鼠溶液會(huì)和鼠源性抗體結(jié)合的特點(diǎn)，以達(dá)到對(duì)鼠抗AOZ-BSA抗體間接標(biāo)記膠體金的目的。檢測(cè)水產(chǎn)品中呋喃唑酮代謝物的試劑盒的使用方法
由于呋喃唑酮代謝物是一種小分子物質(zhì)，因此需要對(duì)樣本進(jìn)行處理后才能進(jìn)行檢測(cè)。樣本處理如下
Φ取一定量的去脂肪組織樣本，用均質(zhì)機(jī)均質(zhì)處理；
@稱取3g均質(zhì)處理的樣本于50 ml離心管中，并加入6ml去離子水，O. 75mlIM鹽酸，0.2ml樣本衍生化試劑，充分混合3min;
Φ 65°C水浴條件下孵育50分鐘，超聲10分鐘；
φ取出后加入7.5ml O. IM磷酸氫二鉀，0.6ml IM氫氧化鈉，加入乙酸乙酯8ml，充分混合 Imin , 4000 r/min,離心 5min ；
■D移取上層溶液3ml于5ml離心管中，60°C下空氣吹干；
Φ向吹干的試管中加入Iml正己烷，加蓋振蕩lmin，然后加入0.3ml緩沖液，充分混勻，4000轉(zhuǎn)/分鐘，離心Imin (或靜置至明顯分層)；
Φ吸取0.1毫升下層溶液，待檢；
檢測(cè)如下
當(dāng)待檢樣品溶液在金標(biāo)微孔中反應(yīng)3 5分鐘后，轉(zhuǎn)移到試劑盒的樣品墊I上，3 8分鐘后，樣品溶液因硝酸纖維素膜載體的毛細(xì)管作用向另一端擴(kuò)散，在移動(dòng)的過(guò)程中，會(huì)發(fā)生相應(yīng)的抗原抗體反應(yīng)，并通過(guò)免疫膠體金的顏色顯示出來(lái)，如果樣品溶液含有相應(yīng)藥物殘留，藥物將和膠體金顆粒上的抗體先行反應(yīng)，因此當(dāng)膠體金顆粒隨樣品溶液擴(kuò)散至檢測(cè)區(qū)3-1時(shí)，膠體金顆粒上抗體的活性位點(diǎn)因被樣品溶液中的藥物占據(jù)而無(wú)法與檢測(cè)區(qū)3-1上的特異性抗原結(jié)合；所以當(dāng)樣品中的藥物含量超過(guò)試劑盒檢出限時(shí)，試劑盒上的檢測(cè)區(qū)3-1將較質(zhì)控區(qū)3-2顯色淡甚至無(wú)顯色，判定為陽(yáng)性，反之，當(dāng)樣品中藥物含量在試劑盒檢出限以下或無(wú)殘留時(shí)，試劑盒上的檢測(cè)區(qū)3-1顯色與質(zhì)控區(qū)相近或偏深，判定為陰性。
權(quán)利要求
1.一種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒，包括檢測(cè)板和金標(biāo)微孔，檢測(cè)板包括載體膜和膠體金結(jié)合墊，膠體金結(jié)合墊附著于載體膜上的一端，其特征在于所述金標(biāo)微孔上包被有單克隆抗體與膠體金的結(jié)合物；所述載體膜上設(shè)有檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)，檢測(cè)區(qū)上固定有特異性結(jié)合抗原，質(zhì)控區(qū)上固定有ニ抗； 所述單克隆抗體與膠體金的結(jié)合物具體為，膠體金標(biāo)記在抗抗體上而所述抗抗體與單克隆抗體特異性結(jié)合，的一種結(jié)合物。
2.一種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒，包括檢測(cè)板，檢測(cè)板包括載體膜和膠體金結(jié)合墊，膠體金結(jié)合墊附著于載體膜上的一端，其特征在干所述膠體金結(jié)合墊上包被有單克隆抗體與膠體金的結(jié)合物；所述載體膜上設(shè)有檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)，檢測(cè)區(qū)上固定有特異性結(jié)合抗原，質(zhì)控區(qū)上固定有ニ杭； 所述單克隆抗體與膠體金的結(jié)合物具體為，膠體金標(biāo)記在抗抗體上而所述抗抗體與單克隆抗體特異性結(jié)合，的一種結(jié)合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的ー種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒，其特征在于所述檢測(cè)板還包括樣品墊、吸水墊、載體板和背襯，所述載體膜附著在背襯上，背襯附著在載體板上；樣品墊設(shè)在膠體金結(jié)合墊上，所述載體膜上相對(duì)于所述膠體金結(jié)合墊的另一端設(shè)有吸水墊。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的ー種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒，其特征在于所述載體板采用塑料板，所述載體膜采用硝酸纖維素薄膜。
5.如權(quán)利要求I所述的ー種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒的使用方法，其特征在于檢測(cè)時(shí)將樣品溶液滴加在金標(biāo)微孔中，等待數(shù)分鐘后，轉(zhuǎn)移到檢測(cè)板上，等待數(shù)分鐘后，肉眼觀察，若檢測(cè)區(qū)較之質(zhì)控區(qū)顯色淡或無(wú)顯色，判定為陽(yáng)性，反之，判定為陰性。
6.如權(quán)利要求2所述的ー種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒的使用方法，其特征在于檢測(cè)時(shí)將樣品溶液滴加在檢測(cè)板上，等待數(shù)分鐘后，肉眼觀察，若檢測(cè)區(qū)較之質(zhì)控區(qū)顯色淡或無(wú)顯色，判定為陽(yáng)性，反之，判定為陰性。
7.如權(quán)利要求5或6所述的ー種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒的使用方法，其特征在干在檢測(cè)前還要進(jìn)行樣本處理，所述樣本處理是將樣本組織中的藥物萃取出來(lái)，然后進(jìn)行稀釋或濃縮的ー種技術(shù)手段。
8.如權(quán)利要求5或6所述的ー種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒的使用方法，其特征在于在檢測(cè)前還要進(jìn)行樣本處理，所述樣本處理是將樣本組織中的藥物萃取出來(lái)，進(jìn)行稀釋或濃縮，進(jìn)行衍生加臂，使之充分暴露免疫位點(diǎn)的一種技術(shù)手段。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的ー種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒的使用方法，其特征在于所述樣本處理包括以下步驟 X 取去脂肪組織樣本，用均質(zhì)機(jī)均質(zhì)處理； I 取均質(zhì)處理的樣本于離心管中； S 加入萃取劑于裝有肉樣的離心管中； X 劇烈振蕩后，室溫下離心機(jī)離心； I 用配備的滴管移取上清液于另ー離心管中，吹干；S 分別用專用滴管向吹干的離心管中加入正己烷和緩沖液，室溫下離心，取下層溶液，待檢。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的ー種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒的使用方法，其特征在于在檢測(cè)前還要將樣本進(jìn)行處理，所述樣本前處理包括以下步驟 I取去脂肪組織樣本，用均質(zhì)機(jī)均質(zhì)處理； I取均質(zhì)處理的樣本于離心管中，并加入去離子水、鹽酸、樣本衍生化試劑，充分混合；; 55 65°C水浴條件下孵育O. 8 I. 2h，超聲處理8 12min ； .I取出后加入磷酸氫ニ鉀、氫氧化鈉、こ酸こ酷，充分混合，離心或靜置使之分層； I移取上層溶液于離心管中，吹干； .5向吹干的離心管中加入正己烷，振蕩，然后加入緩沖溶液，充分混勻，離心或靜置使之分層； Z吸取下層溶液，待檢。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種膠體金檢測(cè)技術(shù)，尤其涉及一種間接標(biāo)記的用于檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒及其使用方法，屬于食品安全快速檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。一種檢測(cè)食物中藥物殘留的試劑盒,包括檢測(cè)板和金標(biāo)微孔，檢測(cè)板包括載體膜和膠體金結(jié)合墊，膠體金結(jié)合墊附著于載體膜上的一端，所述金標(biāo)微孔上包被有單克隆抗體與膠體金的結(jié)合物；所述載體膜上設(shè)有檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)，檢測(cè)區(qū)上固定有特異性結(jié)合抗原，質(zhì)控區(qū)上固定有二抗。本發(fā)明采用間接方法標(biāo)記不僅避免了特異性抗體的標(biāo)記損傷，節(jié)省特異性抗體的用量，還能提高產(chǎn)品的特異性和靈敏度。
文檔編號(hào)G01N33/531GK102854319SQ201210368270
公開日2013年1月2日 申請(qǐng)日期2012年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月28日
發(fā)明者周崇盈, 查美蘭 申請(qǐng)人:湖州艾維德生物技術(shù)有限公司