專利名稱：一種同時(shí)檢測(cè)格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測(cè)卡的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種檢測(cè)降糖中藥中非法添加西藥成分的器具，特別是涉及一種同時(shí)檢測(cè)格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測(cè)卡，屬于中藥非法添加西藥成分檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
格列苯脲和格列齊特都屬于磺酰脲類降糖藥物，主要通過促進(jìn)胰島素分泌而發(fā)揮作用，此外，還可加強(qiáng)胰島素與受體結(jié)合，解除受體被胰島素抵抗的作用，使胰島素作用加強(qiáng)。療效確切而且價(jià)格低廉，臨床應(yīng)用廣泛，但也具有一定的毒副作用。格列苯脲可造成低血糖癥以及其它一系列如腎上腺皮質(zhì)功能減退、致畸等嚴(yán)重不良反應(yīng)。然而一些不法廠家為了增強(qiáng)降糖效果，將其摻入降糖保健食品中，使患者在不知情的情況下大量服用，造成嚴(yán)重后果。因此建立一種準(zhǔn)確可靠的分析方法，對(duì)非法添加這些化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)是非常必要的。目前，現(xiàn)有技術(shù)對(duì)于格列苯脲和格列齊特的檢測(cè)主要依賴色譜和質(zhì)譜技術(shù)，這些方法對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備要求高，操作繁瑣，對(duì)操作人員的專業(yè)知識(shí)要求高，費(fèi)時(shí)費(fèi)力。因此建立一種準(zhǔn)確可靠又快速方便的檢測(cè)中藥中西藥成分的分析方法是非常必要的。
發(fā)明內(nèi)容本實(shí)用新型的目的在于提供一種能同時(shí)檢測(cè)格列苯脲和格列齊特的器具，克服現(xiàn)有技術(shù)操作繁瑣、專業(yè)要求高的缺陷，用于查處偽劣產(chǎn)品，保證用藥安全。本實(shí)用新型的技術(shù)方案一種同時(shí)檢測(cè)格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測(cè)卡，在長(zhǎng)條扁平薄殼狀的檢測(cè)卡外殼1中設(shè)置測(cè)試條2，檢測(cè)卡外殼表面有檢測(cè)窗孔3和加樣孔 4，測(cè)試條是由支承背板5上粘貼五種元件組成支承背板中部粘貼硝酸纖維素膜6，支承背板一端部上疊置粘貼吸水膜10，另一端部上疊置粘貼樣品墊9，吸水膜內(nèi)端與樣品墊內(nèi)端各自分別與硝酸纖維素膜一端搭接，在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部，兩者之間夾置粘貼兩段膠體金膜7、8，膠體金膜7、8依次是含抗格列苯脲單克隆抗體膠體金標(biāo)記物和抗格列齊特單克隆抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜；硝酸纖維素膜上橫向有三條間隔開的顯示印跡帶一條是含格列苯脲蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)帶11，另一條是含格列齊特蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)帶12，第三條是含抗兔抗體或抗鼠抗體的質(zhì)控帶13 ；測(cè)試條置入檢測(cè)卡外殼內(nèi)，樣品墊正對(duì)加樣孔，硝酸纖維素膜正對(duì)檢測(cè)窗孔。應(yīng)用免疫學(xué)的方法直接檢測(cè)樣品中格列苯脲和格列齊特的含量，檢測(cè)樣品為膠囊、片劑、藥丸等降糖中藥樣品，處理方法如下(1)隨機(jī)采集一定量的待測(cè)樣本，粉碎均勻。(2)稱取5g粉碎后的樣品，加入IOmL樣品抽提液，充分?jǐn)嚢杌旌?min以上，震蕩反應(yīng)30min。抽提液配置如下在70mL甲醇中加入30mL蒸餾水。[0010](3)將步驟(2)所得溶液移入IOmL離心管，4000r/min離心lOmin，取離心后的上清液；若上清液澄清，則按上清液樣品稀釋液為1 3的比例稀釋，即取上清液100 μ L加入300 μ L樣品稀釋液，混合均勻后測(cè)定；若上清液渾濁，則用濾紙過濾，取過濾后的上清液按上清液100 μ L加入300 μ L樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，混合均勻后測(cè)定。樣品稀釋液為ρΗ7. 6、IOmmoL PBST溶液。檢測(cè)帶11、12和質(zhì)控帶13同時(shí)顯現(xiàn)棕紅色印跡，表示檢測(cè)結(jié)果為陰性，說明被檢測(cè)樣品中格列苯脲和格列齊特均未超標(biāo)。檢測(cè)帶11、12不顯示顏色，只有質(zhì)控帶13顯現(xiàn)棕紅色印跡，檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，表明被檢測(cè)樣品中格列苯脲和格列齊特均超標(biāo)。檢測(cè)帶11不顯示顏色，檢測(cè)帶12和質(zhì)控帶13同時(shí)顯現(xiàn)棕紅色印跡，檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，表明被檢測(cè)樣品中格列苯脲超標(biāo)，而格列齊特未超標(biāo)。檢測(cè)帶12不顯示顏色，檢測(cè)帶11和質(zhì)控帶13同時(shí)顯現(xiàn)棕紅色印跡，檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，表明被檢測(cè)樣品中格列齊特超標(biāo)，而格列苯脲未超標(biāo)。檢測(cè)帶11、12和質(zhì)控帶13均不顯色，則表明檢測(cè)試條失效。本實(shí)用新型的優(yōu)點(diǎn)是能同時(shí)檢測(cè)出降糖中藥樣品中的格列苯脲和格列齊特，易于制備且節(jié)省檢測(cè)費(fèi)用，使用方便，檢測(cè)快速，靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確。

圖1格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測(cè)卡及測(cè)試條在外殼內(nèi)的安置圖。1、外殼， 2、測(cè)試條，3、檢測(cè)窗孔，4、加樣孔。圖2格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測(cè)卡的檢測(cè)試條結(jié)構(gòu)示意圖。5、支承背板， 6、硝酸纖維素膜，7、膠體金膜(含抗格列苯脲單克隆抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜)，8、 膠體金膜(含抗格列齊特單克隆抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜)，樣品墊9，吸水膜10。圖3檢測(cè)試條的硝酸玻璃纖維膜上顯示印跡示意圖。6、硝酸纖維素膜，11、檢測(cè)帶 (含格列苯脲蛋白質(zhì)偶聯(lián)物)，12、檢測(cè)帶(含格列齊特蛋白質(zhì)偶聯(lián)物)，13、質(zhì)控帶。
具體實(shí)施方式
本實(shí)用新型結(jié)合具體實(shí)施例參見附圖進(jìn)一步說明如下實(shí)施例1一種格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測(cè)卡，它是在檢測(cè)卡外殼1中設(shè)置測(cè)試條2， 檢測(cè)卡外殼1的結(jié)構(gòu)及測(cè)試條2的設(shè)置參見附圖1和附圖2，檢測(cè)卡外殼1為長(zhǎng)條扁平薄殼狀殼體，長(zhǎng)7cm，寬2cm，厚0. 5cm，薄殼壁厚0. Icm,由工程塑料制成。檢測(cè)卡外殼1由殼蓋與殼座兩半聯(lián)接構(gòu)成，在檢測(cè)卡外殼1殼蓋上有檢測(cè)窗孔3和加樣孔4。測(cè)試條2放置在檢測(cè)卡外殼1的殼座內(nèi)。測(cè)試條2是多層結(jié)構(gòu)的窄條薄片，片長(zhǎng)約6. Ocm，片寬約0. km，厚度小于2. 5mm。 測(cè)試條2是多層結(jié)構(gòu)底層是支承背板5，為聚氯乙烯塑料薄片，厚約0. 5mm,長(zhǎng)6. Ocm,寬 0. 4cm ；支承背板5中部疊置粘貼硝酸纖維素膜6，硝酸纖維素膜厚0. 5mm，長(zhǎng)2_2. 5cm,寬 0. 4cm0硝酸纖維素膜6上有三條間隔開的橫向顯示印跡帶，參見附圖3，三條顯示印跡帶中，一條是檢測(cè)帶11，含格列苯脲蛋白質(zhì)偶聯(lián)物，另一條是檢測(cè)帶12，含格列齊特蛋白質(zhì)偶聯(lián)物，第三條是質(zhì)控帶13，含抗兔抗體或抗鼠抗體。支承背板5 —端部上疊置粘貼吸水膜 10，支承背板5另一端部上疊置粘貼樣品墊9，吸水膜10內(nèi)端與樣品墊9內(nèi)端各自分別與硝酸纖維素膜6 —端搭接，在樣品墊9與硝酸纖維素膜6的搭接部，兩者之間夾置粘貼兩段膠體金膜7、8，膠體金膜7是含抗格列苯脲抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜，膠體金膜8是含抗格列齊特抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜。膠體金膜7和膠體金膜8厚0. 5-0. 8mm，長(zhǎng) 0. 5-0. 6cm,寬 0. 4cm。樣品墊 9 厚 0. 5-0. 8mm,長(zhǎng) 2cm,寬 0. 4cm。吸水膜 10 厚 0. 5-0. 8mm, 長(zhǎng)1. 6-2cm,寬0. 4cm0膠體金膜7、8、樣品墊9及吸水膜10與硝酸纖維素膜搭接長(zhǎng)度為 0. 1-0. 2cm。吸水膜10材料是吸水紙，樣品墊9材料是吸水玻璃纖維膜。測(cè)試條2置入外殼1內(nèi)，樣品墊9正對(duì)加樣孔4，硝酸纖維素膜6正對(duì)檢測(cè)窗孔3。實(shí)施例2檢測(cè)樣品為膠囊、片劑、藥丸等降糖中藥樣品，處理方法如下(1)隨機(jī)采集一定量的待測(cè)樣本，粉碎均勻；(2)稱取5g粉碎后的樣品，加入IOmL樣品抽提液，充分?jǐn)嚢杌旌?min以上，震蕩反應(yīng)30min ；抽提液配置如下在70mL甲醇中加入30mL蒸餾水；(3)將步驟(2)所得溶液移入IOmL離心管，4000r/min離心lOmin，取離心后的上清液；若上清液澄清，則按上清液樣品稀釋液為1 3的比例稀釋，即取上清液100 μ L加入300 μ L樣品稀釋液，混合均勻后測(cè)定；若上清液渾濁，則用濾紙過濾，取過濾后的上清液按上清液100 μ L加入300 μ L樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，混合均勻后測(cè)定；樣品稀釋液為ρΗ7. 6、IOmmoL PBST溶液；檢測(cè)卡的主要反應(yīng)是免疫學(xué)的抗原和抗體反應(yīng)，在硝酸纖維素膜上遷移的膠體金標(biāo)記的抗體，在測(cè)試帶上分別與含格列苯脲蛋白質(zhì)偶聯(lián)物、格列齊特蛋白質(zhì)偶聯(lián)物，以及質(zhì)控帶抗兔抗體或抗鼠抗體反應(yīng)，形成棕紅色條帶。若樣品中有相應(yīng)的待檢格列苯脲和格列齊特都高于允許值，當(dāng)樣品加入后即與相應(yīng)的抗體發(fā)生反應(yīng)，而不會(huì)與相應(yīng)的檢測(cè)帶所含的格列苯脲蛋白質(zhì)偶聯(lián)物、格列齊特蛋白質(zhì)偶聯(lián)物反應(yīng)，從而不顯色。主要反應(yīng)的結(jié)果有以下5種情況檢測(cè)帶11、12和質(zhì)控帶13同時(shí)顯現(xiàn)棕紅色印跡，表示檢測(cè)結(jié)果為陰性，說明被檢測(cè)樣品中格列苯脲和格列齊特均未超標(biāo)；檢測(cè)帶11、12不顯示顏色，只有質(zhì)控帶13顯現(xiàn)棕紅色印跡，檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，表明被檢測(cè)樣品中格列苯脲和格列齊特均超標(biāo)；檢測(cè)帶11不顯示顏色，檢測(cè)帶12和質(zhì)控帶13同時(shí)顯現(xiàn)棕紅色印跡，檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，表明被檢測(cè)樣品中格列苯脲超標(biāo)，而格列齊特未超標(biāo)；檢測(cè)帶12不顯示顏色，檢測(cè)帶11和質(zhì)控帶13同時(shí)顯現(xiàn)棕紅色印跡，檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，表明被檢測(cè)樣品中格列齊特超標(biāo)，而格列苯脲未超標(biāo)；檢測(cè)帶11、12和質(zhì)控帶13均不顯色，則表明檢測(cè)試條失效。
權(quán)利要求1. 一種同時(shí)檢測(cè)格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測(cè)卡，其特征在于在長(zhǎng)條扁平薄殼狀的檢測(cè)卡外殼(1)中設(shè)置測(cè)試條(2)，檢測(cè)卡外殼表面有檢測(cè)窗孔(3)和加樣孔(4);測(cè)試條是由支承背板(5)上粘貼五種元件組成支承背板中部粘貼硝酸纖維素膜(6)，支承背板一端部上疊置粘貼吸水膜(10)，另一端部上疊置粘貼樣品墊(9)，吸水膜內(nèi)端與樣品墊內(nèi)端各自分別與硝酸纖維素膜一端搭接，在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部，兩者之間夾置粘貼兩段膠體金膜(7)、(8)，膠體金膜(7)、(8)依次是含抗格列苯脲單克隆抗體膠體金標(biāo)記物、抗格列齊特單克隆抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜；硝酸纖維素膜上橫向有三條間隔開的顯示印跡帶一條是含格列苯脲蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)帶(11)，另一條是含格列齊特蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)帶(12)，第三條是含抗兔抗體或抗鼠抗體的質(zhì)控帶(13)；測(cè)試條置入檢測(cè)卡外殼內(nèi)，樣品墊正對(duì)加樣孔，硝酸纖維素膜正對(duì)檢測(cè)窗孔。
專利摘要一種同時(shí)檢測(cè)格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測(cè)卡，屬于中藥非法添加西藥成分檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。該檢測(cè)卡外殼表面有檢測(cè)窗孔和加樣孔,殼內(nèi)有測(cè)試條，支承背板中部粘貼硝酸纖維素膜，支承背板一端粘貼吸水膜，另一端粘貼樣品墊，硝酸纖維素膜和樣品墊之間夾置粘貼兩段膠體金膜,膠體金膜分別是含抗格列苯脲和抗格列齊特單克隆抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜；硝酸纖維素膜上橫向有三條間隔開的顯示印跡帶一條是含格列苯脲蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)帶，另一條是含格列齊特蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測(cè)帶，第三條是含抗兔抗體或抗鼠抗體的質(zhì)控帶，樣品墊正對(duì)加樣孔，硝酸纖維素膜正對(duì)檢測(cè)窗孔。本檢測(cè)卡能同時(shí)檢測(cè)一份降糖中藥樣品中非法添加的兩種西藥成分,節(jié)省檢測(cè)費(fèi)用，使用方便，檢測(cè)快速，靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確。
文檔編號(hào)G01N33/577GK202066862SQ20102067658
公開日2011年12月7日 申請(qǐng)日期2010年12月23日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月23日
發(fā)明者吳文曄, 周堅(jiān), 熊曉芳 申請(qǐng)人:無錫安迪生物工程有限公司