專利名稱：一種檢測(cè)對(duì)位紅的間接競(jìng)爭(zhēng)法酶聯(lián)免疫試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于酶聯(lián)免疫和食品安全領(lǐng)域中違禁添加劑檢測(cè)分析技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及一種用于檢測(cè)對(duì)位紅的間接競(jìng)爭(zhēng)法酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒。
背景技術(shù)：
對(duì)位紅屬于偶氮系列化工合成染色劑，主要應(yīng)用于油彩顏料及橡膠制品的著色， 常溫下呈固態(tài)。由于其結(jié)構(gòu)(見(jiàn)下圖)與致癌物蘇丹紅相似，在代謝過(guò)程中偶氮苯可被降解，產(chǎn)生苯胺，苯胺可直接作用于肝細(xì)胞，引起中毒性肝病，長(zhǎng)期攝入苯胺可造成人體的神經(jīng)系統(tǒng)損害，并具有潛在的致癌性，因此被禁止用于食品生產(chǎn)。
權(quán)利要求
1.一種檢測(cè)對(duì)位紅的酶聯(lián)免疫試劑盒，其中包括對(duì)位紅特異性抗體、對(duì)位紅-載體蛋白偶聯(lián)物和酶標(biāo)二抗。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述試劑盒還包括包被了對(duì)位紅抗原的酶標(biāo)板、對(duì)位紅標(biāo)準(zhǔn)溶液、底物顯色劑、洗滌液、終止液和濃縮樣品稀釋液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述對(duì)位紅特異性抗體為單克隆抗體或多克隆抗體。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述的載體蛋白為牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)或鑰孔銅蘭蛋白(KLH)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述的酶標(biāo)二抗的酶為辣根過(guò)氧化物酶。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述的酶標(biāo)二抗為羊抗兔IgG抗體或羊抗鼠IgG抗體。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述的洗滌液為含有 0. 05% -0. 5%吐溫-20磷酸鹽緩沖液。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述的底物顯色劑由顯色劑A 和顯色劑B組成，顯色劑A為過(guò)氧化氫或過(guò)氧化脲，顯色劑B為鄰苯二胺或四甲基聯(lián)苯胺。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述的濃縮樣品稀釋液為含 0. 吐溫-20的磷酸鹽緩沖液。
10.一種檢測(cè)樣品中對(duì)位紅含量的方法，包括步驟(1)樣品前處理；(2)用權(quán)利要求1-9任一所述的試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，向包被有對(duì)位紅抗原的酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液，再加入抗對(duì)位紅多克隆抗體或單克隆抗體工作液，孵育后洗滌拍干，加入酶標(biāo)記二抗(羊抗兔或羊抗鼠)，孵育后洗滌拍干，顯色、終上，用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度值；(3)分析檢測(cè)結(jié)果。
全文摘要
本發(fā)明屬于生物檢測(cè)領(lǐng)域。本發(fā)明公開(kāi)了一種檢測(cè)對(duì)位紅的酶聯(lián)免疫試劑盒，本發(fā)明所提供的對(duì)位紅的酶聯(lián)免疫試劑盒包括對(duì)位紅特異性單克隆抗體或多克隆抗體、對(duì)位紅與載體蛋白的偶聯(lián)物、酶標(biāo)二抗。本發(fā)明的檢測(cè)對(duì)位紅的酶聯(lián)免疫試劑盒靈敏、快速、準(zhǔn)確，主要用于大批樣品的篩查；盒中的主要試劑均以工作液的形式提供，使用方便，具有高特異性、高靈敏性、高精確性、高準(zhǔn)確性等特點(diǎn)，可快速檢測(cè)食品中殘留的對(duì)位紅。
文檔編號(hào)G01N33/577GK102346182SQ20101024005
公開(kāi)日2012年2月8日 申請(qǐng)日期2010年7月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月29日
發(fā)明者于洪俠, 張妍, 張薇薇, 楊曙明, 程瑪麗, 邱靜, 陳剛, 陳愛(ài)亮 申請(qǐng)人:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所