專利名稱：一種多維色譜聯(lián)用分離裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及分離分析領(lǐng)域的分離檢測裝置，尤其涉及一種多維色譜聯(lián)用分離裝置。
背景技術(shù)：
加壓毛細(xì)管電色譜(pCEC)是近年發(fā)展起來的一種新型微分離分析技術(shù)，它整合了毛細(xì)管電泳與液相色譜的優(yōu)點(diǎn)，通過在填充有HPLC填料的毛細(xì)管電色譜柱兩端施加高壓直流電場，樣品在毛細(xì)管色譜柱中的保留行為同時(shí)受到電滲流及其在流動相與固定相之間分配系數(shù)的影響，大大提高了樣品分離能力，在雙重分離機(jī)制的作用下，pCEC對于被分離樣品細(xì)微之處的分辨能力得到了極大的提高。 如公告號為CN 2373793Y的中國發(fā)明專利說明書公開了一種"多用加壓電色譜裝置"，該裝置由高壓電源、毛細(xì)管色譜柱及檢測設(shè)備構(gòu)成，并且還包括有高壓泵，通過對毛細(xì)管色譜柱加壓抑制氣泡的產(chǎn)生，并能保持高選擇性和高柱效。 又如公開號CN 101025408A的中國發(fā)明專利申請公布說明書公開了 "一種多用加壓電色譜裝置"，該裝置是在上述"多用加壓電色譜裝置"基礎(chǔ)上的改進(jìn)，其由順序連接的高壓泵、混合閥、進(jìn)樣閥、毛細(xì)管色譜柱、檢測器及與毛細(xì)管柱并聯(lián)并對其提供高壓的高壓電源組成，它還包含分流器及電隔離裝置，使得該裝置得以分析樣品的體積、增加了系統(tǒng)的靈活性，對分析方法的建立有促進(jìn)和優(yōu)化效果。 但是傳統(tǒng)的一維色譜及加壓毛細(xì)管電色譜所能提供的分離能力、分辨率和峰容量都不足以對復(fù)雜樣品體系(如蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物中的多肽分離)進(jìn)行完全分離；隨著生命科學(xué)研究的不斷深入，高度復(fù)雜的生物樣品將使傳統(tǒng)的一維分離手段更顯力不從心，即使將一維分離技術(shù)與質(zhì)譜聯(lián)用，仍不能將其組分完全分辨。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是一種分離效率高、峰容量大、樣品用量小，原料成本低以及污染小的多維色譜聯(lián)用分離裝置，以克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足。
為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案 —種多維色譜聯(lián)用分離裝置，包括加壓毛細(xì)管電色譜單元，該加壓毛細(xì)管電色譜單元包括順序連接的流動相驅(qū)動裝置、進(jìn)樣閥、毛細(xì)管色譜柱、緩沖液瓶，與毛細(xì)管色譜柱并聯(lián)的高壓電源以及連接在毛細(xì)管色譜柱上的檢測器，其特征在于還包括毛細(xì)管離子交換色譜單元，該毛細(xì)管離子交換色譜單元包括順序連接的流動相驅(qū)動裝置、進(jìn)樣閥以及毛細(xì)管離子交換色譜柱，所述毛細(xì)管離子交換色譜柱與加壓毛細(xì)管電色譜單元的進(jìn)樣閥的進(jìn)樣口相連接。 所述毛細(xì)管離子交換色譜柱和毛細(xì)管色譜柱為毛細(xì)管填充色譜柱或毛細(xì)管整體柱。 所述檢測器為柱上型檢測器。
為了能夠?yàn)槊?xì)管分離體系提供穩(wěn)定和壓力和低流速、流量穩(wěn)定的流動相，所述 加壓毛細(xì)管電色譜單元的進(jìn)樣閥之后與毛細(xì)管色譜柱平行具有一條由分流閥和廢液瓶連 接形成的分流支路。 所述流動相驅(qū)動裝置由一個(gè)泵或兩個(gè)泵并聯(lián)在一個(gè)混合閥上構(gòu)成。混合閥保證了
兩個(gè)泵提供的兩流動相混合充分。所述泵為恒流泵或恒壓泵。 為了將多余樣品排出，所述兩個(gè)進(jìn)樣閥均連接一個(gè)廢液瓶。 為了保證進(jìn)入毛細(xì)管離子交換色譜柱中各次樣品量一致，所述毛細(xì)管離子交換色 譜單元的進(jìn)樣閥具有定量環(huán)結(jié)構(gòu)。 為了能夠濃縮毛細(xì)管離子交換色譜柱分離的分離產(chǎn)物，所述加壓毛細(xì)管電色譜單
元的進(jìn)樣閥上裝有富集柱。裝上富集柱，可實(shí)現(xiàn)在線富集，脫鹽，兩維交換功能。 所述毛細(xì)管離子交換色譜柱還可以更換成體積排阻色譜柱或親和色譜柱或分配
色譜柱。通過色譜柱的更換，可以改善該分離裝置的分離選擇性，形成新的三維分離模式。 采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明的多維色譜聯(lián)用分離裝置，在加壓毛細(xì)管電色譜中的
電泳分離和反相色譜分配機(jī)理二維分離機(jī)制的基礎(chǔ)上，增加多一維的離子交換色譜分離機(jī)
理，解決了一維色譜分辨率差和峰容量有限的問題。由于加壓毛細(xì)管電色譜的性能本身具
有色譜與電泳的雙重分離機(jī)制，使得本發(fā)明的多維色譜聯(lián)用分離裝置可實(shí)現(xiàn)最少三重分離
機(jī)制同時(shí)發(fā)揮最用，大大提高了分離效率。加壓毛細(xì)管電色譜由電滲流推動，反壓極小，可
制成較長分離柱，大大提高了峰容量。 因此，本發(fā)明的多維色譜聯(lián)用分離裝置具有分離效率高、峰容量大、樣品用量小， 原料成本低以及污染小的優(yōu)點(diǎn)，比傳統(tǒng)的一維色譜、加壓毛細(xì)管電色譜、二維液相色譜等均 具有更加優(yōu)異的峰容量及分離能力，更加適合復(fù)雜樣品的分析。


下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式
對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明
圖1為本發(fā)明的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖中 1、泵2、泵3、混合閥4、廢液瓶5、進(jìn)樣閥6、樣品7、毛細(xì)管離子交換色譜 柱8、進(jìn)樣閥9、泵 10、混合閥11、泵12、廢液瓶 13、四通 14、分流閥15、廢液瓶 16、電極17、高壓電源18、毛細(xì)管色譜柱19、檢測器20、電極21、緩沖液瓶。
具體實(shí)施例方式
如圖1所示，本發(fā)明的多維色譜聯(lián)用分離裝置，由毛細(xì)管離子交換色譜單元和加 壓毛細(xì)管電色譜單元組成。毛細(xì)管離子交換色譜單元包括泵1、泵2、混合閥3構(gòu)成的流動 相驅(qū)動裝置，進(jìn)樣閥5，毛細(xì)管離子交換色譜柱7，廢液瓶4。加壓毛細(xì)管電色譜單元包括泵 9、泵11、混合閥10構(gòu)成的流動相驅(qū)動裝置，進(jìn)樣閥8，毛細(xì)管色譜柱18，高壓電源17，檢測 器19，廢液瓶12，緩沖液瓶21。進(jìn)樣閥5和進(jìn)樣閥8均為六通閥。 在毛細(xì)管離子交換色譜單元中，泵1和泵2并聯(lián)在混合閥3，為離子交換分離體系 (即第一維分離體系)提供流動相；在加壓毛細(xì)管電色譜單元中，泵9和泵11并聯(lián)在混合 閥10上構(gòu)成，為加壓毛細(xì)管電色譜分離體系(即第二維分離體系)提供流動相；混合閥3、
410保證了兩泵1、2和9、11提供的流動相混合充分。當(dāng)然，上述流動相驅(qū)動裝置也可以由一 個(gè)泵構(gòu)成。泵可以為恒流泵，也可以為恒壓泵。 在毛細(xì)管離子交換色譜單元中，混合閥3的輸出端與進(jìn)樣閥5相連，樣品6直接引 入進(jìn)樣閥5的進(jìn)樣口 。進(jìn)樣閥5的一出口連接廢液瓶4， 一出口與毛細(xì)管離子交換色譜柱7 相連，當(dāng)進(jìn)樣閥5處于load狀態(tài)下時(shí)，樣品6注入進(jìn)樣閥，多余樣品排入廢液瓶4，進(jìn)樣閥5 內(nèi)具有定量環(huán)結(jié)構(gòu)，可以保證各次樣品量一致。當(dāng)進(jìn)樣閥5切換至inject狀態(tài)時(shí)，進(jìn)樣閥5 的一出口與毛細(xì)管離子交換色譜柱7相連，為離子色譜提供樣品輸入。毛細(xì)管離子交換色 譜柱7為填充毛細(xì)管色譜柱，使用目的是對樣品進(jìn)行初級分離。 毛細(xì)管離子交換色譜柱7出口與加壓毛細(xì)管電色譜單元的進(jìn)樣閥8的進(jìn)樣口相 連，濃縮毛細(xì)管離子交換色譜柱7所分離的分離產(chǎn)物作為加壓毛細(xì)管電色譜分離體系的樣 品。進(jìn)樣閥8上可裝有富集柱，可實(shí)現(xiàn)在線富集，脫鹽，兩維交換功能。
在加壓毛細(xì)管電色譜單元中，加壓毛細(xì)管電色譜分離體系中的混合閥10的出口 與進(jìn)樣閥8相連，進(jìn)樣閥8的一出口與廢液瓶12相連，另一出口與一個(gè)四通13相連，四通 13的其中另二個(gè)接口分別連有分流閥14、毛細(xì)管色譜柱18。分流閥14再連接廢液瓶15 形成一個(gè)分流支路，為加壓毛細(xì)管電色譜分離體系提供穩(wěn)定的壓力和低流速、流量穩(wěn)定的 流動相。毛細(xì)管色譜柱18尾端連接到緩沖液瓶21。高壓電源17并聯(lián)在毛細(xì)管色譜柱18 上，即高壓電源17 —端連接電極16，另一端連接電極20，電極16再連接到四通13的一個(gè) 接口上，電極20再連入緩沖液瓶21中(在兩個(gè)電極中，一個(gè)電極為正電極，另一個(gè)則為負(fù) 電極)。電極16、20與高壓電源17組成供電系統(tǒng)為分離提供持續(xù)穩(wěn)定的高壓電場。毛細(xì)管 色譜柱18用于實(shí)現(xiàn)第二維的色譜分離。毛細(xì)管色譜柱18上開有檢測窗口，窗口位置連有 檢測器19，檢測器19用于分離樣品的檢測，與工作站相連，輸出并記錄分離圖譜。檢測器 19為柱上型檢測器，可以是紫外(UV)，激光誘導(dǎo)熒光(LIF)等。 上述毛細(xì)管離子交換色譜柱7可以更換成體積排阻色譜柱或親和色譜柱或分配 色譜柱以及其它類型毛細(xì)管色譜柱。本分離裝置可以通過毛細(xì)管離子交換色譜柱的更換， 電壓強(qiáng)度和方向的改變，改變混合梯度而實(shí)現(xiàn)多模式組合分離，改善分離選擇性，形成新的 三維分離模式。 本發(fā)明的多維色譜聯(lián)用分離裝置，在加壓毛細(xì)管電色譜中的電泳分離和反相色譜 分配機(jī)理二維分離機(jī)制的基礎(chǔ)上，增加多一維的離子交換色譜分離機(jī)理，解決了一維色譜 分辨率差和峰容量有限的問題。由于加壓毛細(xì)管電色譜的性能本身具有色譜與電泳的雙重 分離機(jī)制，使得本發(fā)明的多維色譜聯(lián)用分離裝置可實(shí)現(xiàn)最少三重分離機(jī)制同時(shí)發(fā)揮最用， 大大提高了分離效率。加壓點(diǎn)色譜由電滲流推動，反壓極小，可制成較長分離柱，大大提高 了峰容量。 因此，本發(fā)明的多維色譜聯(lián)用分離裝置具有分離效率高、峰容量大、樣品用量小， 原料成本低以及污染小的優(yōu)點(diǎn)，比傳統(tǒng)的一維色譜、加壓毛細(xì)管電色譜、二維液相色譜等均 具有更加優(yōu)異的峰容量及分離能力，更加適合復(fù)雜樣品的分析。 當(dāng)然，在本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)中，在毛細(xì)管分離體系前還可以再增加一個(gè)毛細(xì)管 分離體系，比如在加壓毛細(xì)管電色譜單元之前再連接一個(gè)加壓毛細(xì)管電色譜單元，這樣就 可以形成三維分離體系。 以上就是本發(fā)明的多維色譜聯(lián)用分離裝置，但是，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該認(rèn)識到，上
5述的具體實(shí)施方式
只是示例性的，是為了更好的使本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解本專利，不能 理解為是對本專利包括范圍的限制；只要是根據(jù)本專利所揭示精神的所作的任何等同變更 或修飾，均落入本專利包括的范圍。
權(quán)利要求
一種多維色譜聯(lián)用分離裝置，包括加壓毛細(xì)管電色譜單元，該加壓毛細(xì)管電色譜單元包括順序連接的流動相驅(qū)動裝置、進(jìn)樣閥、毛細(xì)管色譜柱、緩沖液瓶，與毛細(xì)管色譜柱并聯(lián)的高壓電源以及連接在毛細(xì)管色譜柱上的檢測器，其特征在于還包括毛細(xì)管離子交換色譜單元，該毛細(xì)管離子交換色譜單元包括順序連接的流動相驅(qū)動裝置、進(jìn)樣閥以及毛細(xì)管離子交換色譜柱，所述毛細(xì)管離子交換色譜柱與加壓毛細(xì)管電色譜單元的進(jìn)樣閥的進(jìn)樣口相連接。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的多維色譜聯(lián)用分離裝置，其特征在于所述毛細(xì)管離子交換 色譜柱和毛細(xì)管色譜柱為毛細(xì)管填充色譜柱或毛細(xì)管整體柱。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的多維色譜聯(lián)用分離裝置，其特征在于所述檢測器為柱上型 檢測器。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的多維色譜聯(lián)用分離裝置，其特征在于所述加壓毛細(xì)管電色 譜單元的進(jìn)樣閥之后與毛細(xì)管色譜柱平行具有一條由分流閥和廢液瓶連接形成的分流支 路。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的多維色譜聯(lián)用分離裝置，其特征在于所述流動相驅(qū)動裝置 由一個(gè)泵或兩個(gè)泵并聯(lián)在一個(gè)混合閥上構(gòu)成。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的多維色譜聯(lián)用分離裝置，其特征在于所述泵為恒流泵或恒 壓泵。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的多維色譜聯(lián)用分離裝置，其特征在于所述毛細(xì)管離子交換 色譜單元的進(jìn)樣閥具有定量環(huán)結(jié)構(gòu)。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的多維色譜聯(lián)用分離裝置，其特征在于所述加壓毛細(xì)管電色 譜單元的進(jìn)樣閥上裝有富集柱。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的多維色譜聯(lián)用分離裝置，其特征在于所述毛細(xì)管離子交換 色譜柱更換成體積排阻色譜柱或親和色譜柱或分配色譜柱。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種多維色譜聯(lián)用分離裝置，包括加壓毛細(xì)管電色譜單元，該加壓毛細(xì)管電色譜單元包括順序連接的流動相驅(qū)動裝置、進(jìn)樣閥、毛細(xì)管色譜柱、緩沖液瓶，與毛細(xì)管色譜柱并聯(lián)的高壓電源以及連接在毛細(xì)管色譜柱上的檢測器。該分離裝置還包括毛細(xì)管離子交換色譜單元，該毛細(xì)管離子交換色譜單元包括順序連接的流動相驅(qū)動裝置、進(jìn)樣閥以及毛細(xì)管離子交換色譜柱，毛細(xì)管離子交換色譜柱與加壓毛細(xì)管電色譜單元的進(jìn)樣閥的進(jìn)樣口相連接。該多維色譜聯(lián)用分離裝置具有分離效率高、峰容量大、樣品用量小，原料成本低以及污染小的優(yōu)點(diǎn)，比傳統(tǒng)的一維色譜、加壓毛細(xì)管電色譜、二維液相色譜等均具有更加優(yōu)異的峰容量及分離能力，更加適合復(fù)雜樣品的分析。
文檔編號G01N30/00GK101762666SQ200810207908
公開日2010年6月30日 申請日期2008年12月26日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月26日
發(fā)明者李鵬, 林澤濤, 王玉紅, 閻超 申請人:上海通微分析技術(shù)有限公司