專利名稱:用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁納米粒子合成方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁納米粒子合 成方法。
背景技術(shù):
相對于單一金屬納米粒子,雙金屬納米粒子同時具有兩種材料的優(yōu)點, 因而有更廣泛的應用領(lǐng)域。其中生物分子修飾的金殼鐵核磁納米粒子以其 獨特的生物相容性、光學和磁學性質(zhì)可以對細胞進行實時、動態(tài)的觀測,
因此已有一些研究將DNA,蛋白、抗體通過多聚物分子與金殼鐵核磁納 米粒子連接利用納米粒子的光學與磁學性質(zhì)來實現(xiàn)特定細胞識別與分離 (科學,Sc,ewce, 2006, 372, 1027-1030;生物聚合體化學,(3ew. 2004, ",482-490)。然而,在這些研究中,主要利用聚賴氨酸或牛血清蛋 白復合物等來穩(wěn)定納米粒子,再進一步通過共價鍵反應結(jié)合DNA,蛋白、 抗體等功能分子,合成過程復雜,需要較長的反應時間(生物聚合體化學, 說oc朋yi/gafe C/zem. 2004, ", 482-490),并且難以克服非特異性吸附使檢測 的選擇性降低。應用多肽修飾的金納米粒子,可以使納米粒子在水溶液中 保持高穩(wěn)定性(美國化學會志,/ ^肌C&附.&c., 2004, 726, 10076-10084), 并容易通過修飾生物素應用生物素-親和素反應結(jié)合DNA,蛋白、抗體等 功能分子,實現(xiàn)特異性識別(美國國家科學院院刊,7VW/. & .a S. A 2006,川3, 1215-1220)。表皮生長因子受體抗體能通過特異性識別與腫 瘤細胞膜中過表達的表皮生長因子受體作用而區(qū)分正常細胞與病變細胞。因此,將表皮生長因子受體抗體與胱氨酰丙氨酰亮氨酰天門冬氨酰天門冬氨酰甘氨酰賴氨酰-生物素-甘氨酸修飾的金殼鐵核磁納米粒子相結(jié)合獲得抗體-金殼鐵核磁納米粒子對實現(xiàn)細胞識別與分離有一定意義。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種具有細胞識別與分離功能的抗體-金殼鐵核 磁納米粒子合成方法。生物素修飾的胱氨酰丙氨酰亮氨酰天門冬氨酰天門冬氨酰甘氮酰賴氨 酰-生物素-甘氨酸與金原子有很強的親和性,能夠在金殼鐵核磁納米粒子 形成致密的保護層,使磁納米粒子溶于水溶液并保持長期的穩(wěn)定性且能與 親和素反應。表皮生長因子受體抗體能與特定腫瘤細胞膜中過表達的抗原 表皮生長因子受體相互作用,實現(xiàn)細胞識別。本發(fā)明結(jié)合這兩種生物分子 的優(yōu)勢,優(yōu)化合成條件,成功實現(xiàn)了對細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁 納米粒子。并且納米粒子表面表皮生長因子受體抗體的含量可以通過反應液中表皮生長因子受體抗體和蛋白A的配比調(diào)控。 實現(xiàn)本發(fā)明的方法的具體的技術(shù)方案如下按照Lyon方法,先利用10毫升濃度為3.0摩爾/升的氫氧化鈉與10毫 升濃度均為10毫摩爾/升氯化亞鐵和氯化鐵混合液相互作用獲得四氧化三 鐵,進一步用10毫升0.02摩爾/升的硝酸在IO(TC下反應1小時獲得三氧 化二鐵,冷卻。在室溫下將10毫升溶液含有質(zhì)量濃度為1%氯金酸,5毫 摩爾/升的檸檬酸鈉和0.2摩爾/升的鹽酸羥氨的混合液分10次,每次間隔 10分鐘加入所制備的三氧化二鐵溶液,獲得金殼鐵核磁性納米粒子。其粒 徑為60納米。將多肽胱氨酰丙氨酰亮氨酰天門冬氨酰天門冬氨酰甘氨酰賴氨酰-生物素-甘氨酸與金殼鐵核磁性納米粒子按摩爾比1"05至5><106的配比范圍 配制成水溶液,在室溫下靜置反應1小時后,10000 rpm離心后拋棄上清液, 獲得多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子。配制親和素修飾表皮生長因子受體抗體和親和素修飾的蛋白A摩爾比 為l: 0.111-99.9的混合物,將多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子與親和素 修飾表皮生長因子受體抗體和親和素修飾的蛋白A的混合物,按摩爾比為 1: lxlO、5xl(^配制成pH值為7的磷酸緩沖溶液,在室溫下靜置反應l小 時后,10000 rpm離心后拋棄上清液,再加入1000微升pH值為7磷酸緩 沖溶液,獲得表皮生長因子受體抗體-磁納米粒子溶液,再10000 rpm離心 后拋棄上清液,真空凍干,獲得用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁納 米粒子。該納米粒子可以在-80。C存儲6個月不變性。通過改變親和素修飾的表皮生長因子受體抗體和親和素修飾的蛋白A 混合物中兩種物質(zhì)的配比,即親和素修飾表皮生長因子受體抗體和親和素 修飾的蛋白A的摩爾配比范圍為1: 0.111-99.9,即可調(diào)節(jié)用于細胞識別與 分離的抗體-金殼鐵核磁納米粒子表面表皮生長因子受體抗體的含量為6% 至100%。本發(fā)明提供的一種用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁納米粒子的用法將培養(yǎng)好的細胞離心富集,用0.1 MPBS緩沖溶液lOOOrpm離心, 去除上清液,將10微升1.0納摩爾/升的用于細胞識別與分離的抗體-金殼 鐵核磁納米粒子溶液與1"04個細胞混合均勻,加入40微升培養(yǎng)基在體積比為5%032, 37。C環(huán)境下共培養(yǎng)。30分鐘后,即可觀察納米粒子對相應 細胞識別作用。作用強度可用細胞顏色判斷,顏色越深作用越強。本發(fā)明的有益效果(1) 、用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁納米粒子合成方法簡 單,所需時間短。利用生物素修飾的胱氨酰丙氨酰亮氨酰天門冬氨酰天門 冬氨酰甘氨酰賴氨酰-生物素-甘氨酸穩(wěn)定金殼鐵核磁性納米粒子,利用生 物素與親和素的相互作用將表皮生長因子受體抗體修飾到納米粒子表面實 現(xiàn)納米粒子的細胞識別功能。(2) 、細胞識別具有特異性。表皮生長因子受體抗體能與特定腫瘤細 胞膜中過表達的抗原表皮生長因子受體相互作用,實現(xiàn)細胞識別。在我們 的實驗中,用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁納米粒子一旦與細胞混 合,納米粒子即與相應細胞作用。30分鐘后,幾乎所有的特定的腫瘤細胞 都被納米粒子覆蓋,呈現(xiàn)出紫紅色。(3) 、分離效率高。在磁場的作用下實現(xiàn)了正常細胞與腫瘤細胞的分 離。分離效果達到90%。(4) 、檢測簡單直觀。相比較細胞載體傳統(tǒng)檢測手段——電子顯微鏡, 熒光顯微鏡等,用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁納米粒子與細胞作 用可由普通光學顯微鏡觀察。樣品不需其他預處理,細胞種類可根據(jù)顏色 判斷能與納米粒子相互作用的細胞顯現(xiàn)紫紅色,明顯區(qū)別于無作用細胞。 納米粒子的顯色性穩(wěn)定,不會淬滅的性質(zhì)可使檢測樣品長時間保存。(5) 用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁納米粒子表面表皮生長 因子受體抗體的含量可以通過反應液中物質(zhì)的配比調(diào)控。
圖1是用本發(fā)明中所合成用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁納米 粒子水溶液圖,簡稱抗體-金殼鐵核磁納米粒子溶液圖。其具有很好的分 散性。圖2在磁場作用下抗體-金殼鐵核磁納米粒子沉積于試管壁的圖。其具 有很好的磁學性質(zhì)。圖3納米粒子表面表皮生長因子受體抗體的百分含量與溶液中表皮生 長因子受體抗體的百分含量的關(guān)系圖。圖4是與抗體-金殼鐵核磁納米粒子作用后的人腎胚胎細胞的明場顯微鏡照片。細胞為無色。圖5是與抗體-金殼鐵核磁納米粒子作用后的人腎胚胎瘤細胞的明場顯 微鏡照片。細胞呈現(xiàn)淡紫紅色。圖6是與抗體-金殼鐵核磁納米粒子作用后的人宮頸癌細胞的明場顯微 鏡照片。細胞呈現(xiàn)深紫紅色。圖7是抗體-金殼鐵核磁納米粒子與人宮頸癌細胞與人腎胚胎細胞混 合液相互作用后明場顯微鏡照片。圖8是抗體-金殼鐵核磁納'米粒子與人宮頸癌細胞與人腎胚胎細胞混 合液相互作用后,磁場下分離后的獲得的人腎胚胎細胞圖。圖9是抗體-金殼鐵核磁納米粒子與人宮頸癌細胞與人腎胚胎細胞混 合液相互作用后,磁場下分離后的獲得的人宮頸癌細胞圖。圖10是抗體-金殼鐵核磁納米粒子與細胞相互作用后,平均單細胞的 暗場散射光強度圖。l為293細胞;2為293T細胞;3為HeLa細胞。每種細胞的采集個數(shù)為200。
具體實施方式
制備實施例1:表面含100%表皮生長因子受體用于細胞識別與分離的抗體 -金殼鐵核磁納米粒子,以下簡稱為抗體-金殼鐵核磁納米粒子的合成按照Lyon方法,先利用10毫升濃度為3.0摩爾/升的氫氧化鈉與10毫 升濃度均為10毫摩爾/升氯化亞鐵和氯化鐵混合液相互作用獲得四氧化三 鐵,進一步用10毫升0.02摩爾/升的硝酸在IO(TC下反應1小時獲得三氧 化二鐵,冷卻。在室溫下將10 S升溶液含有質(zhì)量濃度為1%氯金酸,5毫 摩爾/升的檸檬酸鈉和0.2摩爾/升的鹽酸羥氨的混合液分10次,每次間隔 10分鐘加入所制備的三氧化二鐵溶液,獲得金殼鐵核磁性納米粒子。其粒 徑為60納米。將胱氨酰丙氨酰亮氨酰天門冬氨酰天門冬氨酰甘氨酰賴氨酰(生物素) 甘氨酸肽鏈溶和金殼鐵核磁性納米粒子按摩爾比5><106配制1毫升溶液, 在室溫下靜置反應l小時后,10000 rpm離心后拋棄上清液,獲得多肽修飾 的金殼鐵核磁性納米粒子。配制親和素修飾表皮生長因亍受體抗體和親和素修飾的蛋白A摩爾比 為1: 99的混合物,簡稱其為混合物。將多肽修飾的金殼鐵核磁性納米 粒子與混合物按摩爾比1:5><04配制成1000微升pH值為7的磷酸緩沖溶 液,在室溫下靜置反應1小時后,10000 rpm離心后拋棄上清液,再加入 1000微升pH值為7磷酸緩沖溶液,獲得表皮生長因子受體抗體-磁納米粒 子溶液,再10000 rpm離心后拋棄上清液,真空凍干后獲得表面含100%表 皮生長因子受體抗體的抗體-金殼鐵核磁性納米粒子。制備實施例2:表面含80%表皮生長因子受體抗體的抗體-金殼鐵核磁性 納米粒子合成
按照Lyon方法,先利用10毫升濃度為3.0摩爾/升的氫氧化鈉與10毫 升濃度均為10毫摩爾/升氯化亞鐵和氯化鐵混合液相互作用獲得四氧化三 鐵,進一步用10毫升0.02摩爾/升的硝酸在IO(TC下反應1小時獲得三氧 化二鐵,冷卻。在室溫下將10毫升溶液含有質(zhì)量濃度為1%氯金酸,5毫 摩爾/升的檸檬酸鈉和0.2摩爾/升的鹽酸羥氨的混合液分10次,每次間隔 10分鐘加入所制備的三氧化二鐵溶液,獲得金殼鐵核磁性納米粒子。其粒 徑為60納米。
將胱氨酰丙氨酰亮氨酰天門冬氨酰天門冬氨酰甘氨酰賴氨酰(生物素) 甘氨酸肽鏈溶和金殼鐵核磁性納米粒子按摩爾比lxl(f配制1毫升溶液, 在室溫下靜置反應1小時后,10000 rpm離心后拋棄上清液,獲得多肽修飾 的金殼鐵核磁性納米粒子。
配制親和素修飾表皮生長因子受體抗體和親和素修飾的蛋白A摩爾比 為3的混合物,簡稱其為混合物。將多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子 將混合物與多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子按摩爾比1: lxl(^配制成 1000微升pH值為7的磷酸緩沖溶液,在室溫下靜置反應l小時后,10000 rpm離心后拋棄上清液,再加入1000微升pH值為7磷酸緩沖溶液,獲得 表皮生長因子受體抗體-磁納米粒子溶液,再10000 rpm離心后拋棄上清液, 真空凍干后獲得表面含80%表皮生長因子受體抗體的抗體-金殼鐵核磁性 納米粒子。
制備實施例3:表面含50%表皮生長因子受體抗體的抗體-金殼鐵核磁性納米粒子合成
按照Lyon方法,先利用10毫升濃度為3.0摩爾/升的氫氧化鈉與10毫 升濃度均為10毫摩爾/升氯化亞鐵和氯化鐵混合液相互作用獲得四氧化三 鐵,進一步用10毫升0.02摩爾/升的硝酸在IO(TC下反應1小時獲得三氧 化二鐵,冷卻。在室溫下將10毫升溶液含有質(zhì)量濃度為1%氯金酸,5毫 摩爾/升的檸檬酸鈉和0.2摩爾/升的鹽酸羥氨的混合液分10次,每次間隔 10分鐘加入所制備的三氧化二鐵溶液,獲得金殼鐵核磁性納米粒子。其粒 徑為60納米。
將胱氨酰丙氨酰亮氨酰天門冬氨酰天門冬氨酰甘氨酰賴氨酰(生物素) 甘氨酸肽鏈溶和金殼鐵核磁性納米粒子按摩爾比5xl()S配制1毫升溶液, 在室溫下靜置反應1小時后,10000 rpm離心后拋棄上清液,獲得多肽修飾 的金殼鐵核磁性納米粒子。
配制親和素修飾表皮生長因子受體抗體和親和素修飾的蛋白A摩爾比 為1的混合物,簡稱混合物。將多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子將混合 物與多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子按摩爾比1: 2><104配制成1000微 升pH值為7的磷酸緩沖溶液,在室溫下靜置反應1小時后,10000 rpm離 心后拋棄上清液,再加入1000微升pH值為7磷酸緩沖溶液,獲得表皮生 長因子受體抗體-磁納米粒子溶液,再10000 rpm離心后拋棄上清液,,真 空凍干后獲得表面含50%表皮生長因子受體抗體的抗體-金殼鐵核磁性納 米粒子。
制備實施例4:表面含10%表皮生長因子受體抗體的抗體-金殼鐵核磁性納 米粒子合成按照Lyon方法,先利用10毫升濃度為3.0摩爾/升的氫氧化鈉與10毫 升濃度均為10毫摩爾/升氯化亞鐵和氯化鐵混合液相互作用獲得四氧化三 鐵,進一步用10毫升0.02摩爾/升的硝酸在IO(TC下反應1小時獲得三氧 化二鐵,冷卻。在室溫下將10毫升溶液含有質(zhì)量濃度為1%氯金酸,5毫 摩爾/升的檸檬酸鈉和0.2摩爾/升的鹽酸羥氨的混合液分10次,每次間隔 10分鐘加入所制備的三氧化二鐵溶液,獲得金殼鐵核磁性納米粒子。其粒 徑為60納米。
將胱氨酰丙氨酰亮氨酰天門冬氨酰天門冬氨酰甘氨酰賴氨酰(生物素) 甘氨酸肽鏈溶和金殼鐵核磁性納米粒子按摩爾比lxl()S配制1毫升溶液, 在室溫下靜置反應l小時后,10000 rpm離心后拋棄上清液,獲得多肽修飾 的金殼鐵核磁性納米粒子。
配制親和素修飾表皮生長因子受體抗體和親和素修飾的蛋白A摩爾比 為0.176的混合物,簡稱混合物。將多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子將混 合物與多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子按摩爾比1: 5><104配制成1000 微升pH值為7的磷酸緩沖溶液,在室溫下靜置反應l小時后,10000 rpm 離心后拋棄上清液,再加入1000微升pH值為7磷酸緩沖溶液,獲得表皮 生長因子受體抗體-磁納米粒子溶液,再10000 rpm離心后拋棄上清液,真 空凍干后獲得表面含10%表皮生長因子受體抗體的抗體-金殼鐵核磁性納 米粒子。
制備實施例5:表面含6%表皮生長因子受體抗體的抗體-金殼鐵核磁性納 米粒子合成
按照Lyon方法,先利用10毫升濃度為3.0摩爾/升的氫氧化鈉與10毫升濃度均為10毫摩爾/升氯化亞鐵和氯化鐵混合液相互作用獲得四氧化三
鐵,進一步用10毫升0.02摩爾/升的硝酸在100。C下反應1小時獲得三氧 化二鐵,冷卻。在室溫下將10毫升溶液含有質(zhì)量濃度為1%氯金酸,5毫 摩爾/升的檸檬酸鈉和0.2摩爾/升的鹽酸羥氨的混合液分10次,每次間隔 10分鐘加入所制備的三氧化二鐵溶液,獲得金殼鐵核磁性納米粒子。其粒 徑為60納米。
將胱氨酰丙氨酰亮氨酰天門冬氨酰天門冬氨酰甘氨酰賴氨酰(生物素) 甘氨酸肽鏈溶和金殼鐵核磁性納米粒子按摩爾比1"06配制1毫升溶液, 在室溫下靜置反應l小時后,10000 rpm離心后拋棄上清液,獲得多肽修飾 的金殼鐵核磁性納米粒子。
配制親和素修飾表皮生長因子受體抗體和親和素修飾的蛋白A摩爾比 為0.111的混合物,簡稱混合物。將多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子將混 合物與多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子按摩爾比1: lxl()S配制成1000 微升pH值為7的磷酸緩沖溶液,在室溫下靜置反應1小時后,10000 rpm 離心后拋棄上清液,再加入1000'微升pH值為7磷酸緩沖溶液,獲得表皮 生長因子受體抗體-磁納米粒子溶液,再10000 rpm離心后拋棄上清液,真 空凍干后獲得表面含6%表皮生長因子受體抗體的抗體-金殼鐵核磁性納 米粒子。
用法實施例l:細胞特異性識別
將培養(yǎng)好的293, 293T和HeLa細胞分別離心富集,用0.1摩爾/升PBS 緩沖溶液1000rpm離心,去除上清液。將10微升1.0納摩爾/升的抗體-金 殼鐵核磁納米粒子溶液與lxlO"個細胞混合均勻,加入40微升培養(yǎng)基在5%C02, 37。C環(huán)境下共培養(yǎng)。在明場顯微鏡下,作用強度可用細胞顏色判斷, 顏色越深作用越強(圖3)。在暗場顯微鏡下,作用強度可用細胞散射光 判斷,散射光越強作用越強(圖4)。實驗結(jié)果表明HeLa細胞與抗體-金殼 鐵核磁性納米粒子存在強作用;293T細胞與抗體-金殼鐵核磁性納米粒子 存在弱作用;293細胞與抗體-金殼鐵核磁性納米粒子無作用。 用法實施例2:細胞分離
將培養(yǎng)好的293和HeLa細胞混合液離心富集,用O.l摩爾/升PBS緩 沖溶液1000rpm離心,去除上清液。將10微升1.0納摩爾/升的抗體-金殼 鐵核磁納米粒子溶液與1><104個細胞混合均勻,加入40微升培養(yǎng)基在5% C02, 37。C環(huán)境下共培養(yǎng)。30分鐘后,在磁場作用下實現(xiàn)細胞分離(圖5)。
權(quán)利要求
1、用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁納米粒子合成方法,其特征在于步驟和條件為按照Lyon方法,先利用10毫升濃度為3.0摩爾/升的氫氧化鈉與10毫升濃度均為10毫摩爾/升氯化亞鐵和氯化鐵混合液相互作用獲得四氧化三鐵,進一步用10毫升0.02摩爾/升的硝酸在100℃下反應1小時獲得三氧化二鐵,冷卻,在室溫下將10毫升溶液含有質(zhì)量濃度為1%氯金酸,5毫摩爾/升的檸檬酸鈉和0.2摩爾/升的鹽酸羥氨的混合液分10次,每次間隔10分鐘加入所制備的三氧化二鐵溶液,獲得金殼鐵核磁性納米粒子;將多肽胱氨酰丙氨酰亮氨酰天門冬氨酰天門冬氨酰甘氨酰賴氨酰-生物素-甘氨酸與金殼鐵核磁性納米粒子按摩爾比1×105至5×106的配比范圍配制成水溶液,在室溫下靜置反應1小時后,10000rpm離心后拋棄上清液,獲得多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子;配制親和素修飾表皮生長因子受體抗體和親和素修飾的蛋白A摩爾比為1∶0.111-99.9的混合物,將多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子與親和素修飾表皮生長因子受體抗體和親和素修飾的蛋白A的混合物,按摩爾比為1∶1×103-5×104配制成pH值為7的磷酸緩沖溶液,在室溫下靜置反應1小時后,10000rpm離心后拋棄上清液,再加入1000微升pH值為7磷酸緩沖溶液,獲得表皮生長因子受體抗體-磁納米粒子溶液,再10000rpm離心后拋棄上清液,真空凍干,獲得用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁納米粒子。
2、 如權(quán)利要求1所述的一種用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁納米粒子,其特征在于,所述的多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子與與親和素修飾的表皮生長因子受體抗體和親和素修飾的蛋白A的混合物的摩爾 比為l:5xl04。
3、 如權(quán)利要求1所述的一種用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁 納米粒子,其特征在于,所述的多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子與親和 素修飾的表皮生長因子受體抗體和親和素修飾的蛋白A的混合物的摩爾為1: lx104。
4、 如權(quán)利要求1所述的一種用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁 納米粒子,其特征在于,所說的多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子將混合 物與親和素修飾的表皮生長因子受體抗體和親和素修飾的蛋白A的混合物 的摩爾為1: 2xl04。
5、 如權(quán)利要求1所述的一種用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁 納米粒子,其特征在于,所說的多肽修飾的金殼鐵核磁性納米粒子將混合 物與親和素修飾的表皮生長因子受體抗體和親和素修飾的蛋白A的混合物 的摩爾為1: lx103。
全文摘要
本發(fā)明提供用于細胞識別與分離的抗體-金殼鐵核磁納米粒子合成方法。用肽鏈表面修飾法使肽鏈穩(wěn)定包裹磁納米粒子,結(jié)合表皮生長因子受體抗體與特定腫瘤細胞膜中過表達的表皮生長因子受體相互作用,實現(xiàn)細胞識別。幾乎所有特定的腫瘤細胞都被金納米粒子覆蓋,呈現(xiàn)出紫紅色。在磁場作用下實現(xiàn)正常細胞與腫瘤細胞分離,分離效果達到90%。與細胞載體傳統(tǒng)檢測手段的電子顯微鏡、熒光顯微鏡等相比較,抗體-磁納米粒子與細胞作用可由普通光學顯微鏡觀察。樣品不需預處理,細胞種類可根據(jù)顏色判斷;納米粒子顯色性穩(wěn)定,不會淬滅的性質(zhì)可使檢測樣品長時間保存,并且納米粒子表面表皮生長因子受體抗體的含量可以通過反應液中物質(zhì)的配比調(diào)控。
文檔編號G01N27/72GK101303342SQ200810050910
公開日2008年11月12日 申請日期2008年7月3日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月3日
發(fā)明者孫琳琳, 王振新, 王金娥 申請人:中國科學院長春應用化學研究所