專利名稱：預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種生物技術(shù)研究用試劑盒，尤其是涉及一種蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒。
背景技術(shù)：
目前的生物技術(shù)研究中尤其是蛋白質(zhì)電泳中，需要廣泛應(yīng)用蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒。常規(guī)的蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑為非預(yù)染的蛋白混合物，在凝膠電泳的過程中無法識(shí)別，必須在電泳后經(jīng)過一系列的染色處理后才能夠看到清晰的條帶。近年來，一些國外廠商開發(fā)出一些預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒，但是現(xiàn)有的這幾種商業(yè)化的預(yù)染色蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒，它們所使用的染料顏色單一，在蛋白條帶不清晰的時(shí)候難以分辨，同時(shí)存在蛋白降解的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本實(shí)用新型的目的在于提供一種預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒，將該試劑盒應(yīng)用于生物技術(shù)研究中，可以實(shí)時(shí)觀察電泳過程中樣品的分離狀況，具有條帶穩(wěn)定、使用方便的優(yōu)點(diǎn)。
本實(shí)用新型所述的一種預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒，包括至少一個(gè)冷凍管，其管體為圓柱形，底部為平底或錐形，管口設(shè)有螺旋蓋和密封圈，管壁上設(shè)有刻度，其容量規(guī)格為0.5或1毫升，冷凍管內(nèi)裝有預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑。
所述的冷凍管的管體印有預(yù)染多色寬譜蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)或預(yù)染多色窄譜蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)識(shí)。
所述的冷凍管內(nèi)裝有的預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑包括紅色、藍(lán)色、橘色和翠藍(lán)色的若干種組分，為不同分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)與雷馬素系列染料反應(yīng)形成的化合物的混合液。
本實(shí)用新型的有益效果是整體結(jié)構(gòu)簡單，便于保存、運(yùn)送和使用，以及試劑的分裝；選用一些純化好的蛋白質(zhì)的混合物，以及多種雷馬素染料，這些蛋白混合物與雷馬素染料共價(jià)偶聯(lián)形成的乙烯基化合物非常穩(wěn)定，解決了蛋白降解的問題；可在凝膠電泳時(shí)出現(xiàn)強(qiáng)度均勻的條帶，實(shí)時(shí)觀察SDS-凝膠電泳中蛋白樣品的分離狀況，遷移情況直觀可見；可以在凝膠電泳的過程中方便地了解樣品中目標(biāo)蛋白的位置，隨時(shí)決定停止電泳的時(shí)間；又可用于免疫印跡檢測和觀察免疫印跡的轉(zhuǎn)移效率。


圖1是本實(shí)用新型所述的預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖2為本實(shí)用新型所述的預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒的第一種電泳圖譜。
圖3為本實(shí)用新型所述的預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒的第二種電泳圖譜。
圖4為本實(shí)用新型所述的預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒的第三種電泳圖譜。
具體實(shí)施方式
本實(shí)用新型所述的預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒，如圖1所示，包括至少一個(gè)冷凍管1，其管體11為圓柱形，底部12為平底(左圖)或錐形(右圖)，管口設(shè)有螺旋蓋13和密封圈(未示出)，管壁14上設(shè)有刻度，其容量規(guī)格為0.5毫升或1毫升，冷凍管1內(nèi)裝有預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑。圖1為結(jié)構(gòu)示意圖，不代表實(shí)際尺寸。
所述的冷凍管的管體11印有預(yù)染多色寬譜蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)或預(yù)染多色窄譜蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)識(shí)15。
所述的冷凍管內(nèi)裝有的預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑包括紅色、藍(lán)色、橘色和翠藍(lán)色的若干種組分，為不同分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)與雷馬素系列染料反應(yīng)形成的化合物的混合液。
蛋白混合液的組分是濃度為0.1-0.2毫克/毫升的每一種蛋白，包括胰蛋白酶抑制劑、溶菌酶、牛血清蛋白、雞血清蛋白、肌球蛋白、磷酸酶、碳酸酐酶、抑菌肽等；染料為雷馬素系列。
所述的蛋白混合液溶解在特定緩沖液中，其成分為100mM Tris-HCl(pH 6.8)、10％(w/v)SDS、40mM DTT、0.01％(w/v)溴酚蘭和10％甘油。
具體實(shí)施過程中，將單獨(dú)配制的每種標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液按比例混合，制備出預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑，0.5毫升或1毫升裝載于冷凍管中，保存在零下20攝氏度。
使用方法使用前將試劑置于95-100℃3-5分鐘，溶解后震蕩混勻，離心后將試劑直接上樣于凝膠電泳。如果在凝膠電泳中肉眼觀察，每次加10微升預(yù)染多色蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑；如果是免疫印跡實(shí)驗(yàn)，每次加5微升試劑。
圖2為本實(shí)用新型所述的預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒的第一種電泳圖譜。如圖2所示，215kDa條帶是肌球蛋白與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色；100kDa條帶是磷酸酶與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色；80kDa條帶是牛血清蛋白與雷馬素翠藍(lán)偶聯(lián)，翠藍(lán)色；52kDa條帶是雞血清蛋白(Grade VI)與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色；46kDa條帶是雞血清蛋白(Grade V)與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色；35kDa條帶是碳酸酐酶與雷馬素亮橘3R偶聯(lián)，橘色；28kDa條帶是胰蛋白酶抑制劑與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色；18kDa條帶是溶菌酶與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色。
圖3為本實(shí)用新型所述的預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒的第二種電泳圖譜。如圖3所示，95kDa條帶是胰蛋白酶抑制劑交聯(lián)物與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色；85kDa條帶是牛血清蛋白與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色；52kDa條帶是雞血清蛋白(Grade VI)與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色；46kDa條帶是雞血清蛋白(Grade V)與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色；35kDa條帶是碳酸酐酶與雷馬素亮橘3R偶聯(lián)，橘色；28kDa條帶是胰蛋白酶抑制劑與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色；18kDa條帶是溶菌酶與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色；5kDa條帶是抑菌肽與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，淡藍(lán)色。
圖4為本實(shí)用新型所述的預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒的第三種電泳圖譜。如圖4所示，90kDa條帶是牛血清蛋白與雷馬素亮紅F3B偶聯(lián)，紅色；52kDa條帶是雞血清蛋白(Grade VI)與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色；46kDa條帶是雞血清蛋白(Grade V)與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色；35kDa條帶是碳酸酐酶與雷馬素亮橘3R偶聯(lián)，橘色；28kDa條帶是胰蛋白酶抑制劑與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色；18kDa條帶是溶菌酶與雷馬素亮藍(lán)R偶聯(lián)，藍(lán)色。
權(quán)利要求1.一種預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒，其特征在于包括至少一個(gè)冷凍管(1)，其管體(11)為圓柱形，底部(12)為平底或錐形，管口設(shè)有螺旋蓋(13)和密封圈，管壁(14)上設(shè)有刻度，其容量規(guī)格為0.5或1毫升，冷凍管(1)內(nèi)裝有預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒，其特征在于所述的冷凍管的管體(11)印有預(yù)染多色寬譜蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)或預(yù)染多色窄譜蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)識(shí)(15)。
專利摘要本實(shí)用新型涉及一種預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒。所述的預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑盒包括至少一個(gè)冷凍管，其管體為圓柱形，底部為平底或錐形，管口設(shè)有螺旋蓋和密封圈，管壁上設(shè)有刻度，其容量規(guī)格為0.5或1毫升，冷凍管內(nèi)裝有預(yù)染多色蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)試劑。本實(shí)用新型整體結(jié)構(gòu)簡單，便于保存、運(yùn)送和使用，以及試劑的分裝；解決了蛋白降解的問題；可在凝膠電泳時(shí)出現(xiàn)強(qiáng)度均勻的條帶，實(shí)時(shí)觀察SDS－凝膠電泳中蛋白樣品的分離狀況，遷移情況直觀可見；可以在凝膠電泳的過程中方便地了解樣品中目標(biāo)蛋白的位置，隨時(shí)決定停止電泳的時(shí)間；又可用于免疫印跡檢測和觀察免疫印跡的轉(zhuǎn)移效率。
文檔編號G01N33/50GK2874473SQ20052006714
公開日2007年2月28日 申請日期2005年11月11日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月11日
發(fā)明者侯志波 申請人:侯志波, 夏立新