專利名稱：用于在液體樣品中檢查和/或檢測生物分子和/或活性物質(zhì)的方法和測試系統(tǒng)的制作方法
描述本發(fā)明涉及一種檢查和/或檢測至少一種待檢查的樣品物質(zhì)的類型和/或數(shù)量的方法，其中(a)已提供了加載了探針分子或檢測分子的預(yù)先配量的數(shù)量的載體顆粒，(b)這些負(fù)載的載體顆粒以干燥的形式存在，(c)(i)將載體顆粒與含有待檢查或待檢測的樣品物質(zhì)的液體接觸，其中樣品物質(zhì)用一種和/或多種指定的標(biāo)記參數(shù)進(jìn)行標(biāo)記，或者(ii)將載體顆粒與存在于同一或不同液體中的樣品物質(zhì)和標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)同時或依次接觸，和(d)在一個或多個其間用于接觸的樣品物質(zhì)與探針分子或檢測分子和標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)能夠結(jié)合的反應(yīng)時間之后，分析至少一種(但優(yōu)選兩種或更多種)標(biāo)記參數(shù)，從中可以推斷出待檢查或待檢測的樣品物質(zhì)的數(shù)量。
在DE 33 22 373 C2和EP 0 126 450中描述了一種方法，其能夠同時測定來自一個樣品的多種抗原和/或抗體。將用不同的抗體和/或抗原涂覆的顆粒的混合物與含有待檢查或待檢測的抗原或抗體的液體混合。在一個其間待檢測的抗原或抗體與載體上涂覆的抗體或抗原結(jié)合的指定反應(yīng)時間之后，通過添加具有熒光標(biāo)記的抗體和/或抗原的液體來鑒定結(jié)合的抗原或抗體，該熒光標(biāo)記的抗體和/或抗原與待檢測或待檢查的抗原或抗體能夠進(jìn)行種類特異性反應(yīng)。單個載體的標(biāo)記的分析借助于特別為顆粒測量而調(diào)整的流式細(xì)胞測量儀來進(jìn)行。從該分析中可以推斷出待檢查的抗原或抗體的性質(zhì)或存在。通過適當(dāng)?shù)剡x擇加載在所使用的載體上的抗體或抗原，可以檢查待檢查的液體或其內(nèi)含物的預(yù)先確定的、所希望的特性。根據(jù)將要在待檢查的液體中檢測或分析哪些抗原或抗體，可以使用加載有相應(yīng)的抗體或抗原的測試顆粒。
在本文中，將待檢查或待檢測的生物分子或活性物質(zhì)稱為“樣品物質(zhì)”。在此，術(shù)語“生物分子”表示所有這樣的分子和分子片段，即其能夠自然地以有活力和無活力的性質(zhì)存在，并且能夠通過分離方法或同樣的復(fù)制而提供，特別是位于或來自植物和動物細(xì)胞、器官和生物體中的分子，位于/來自原核生物、位于/來自真菌、位于/來自病毒和噬菌體的分子，還有諸如病毒體、朊病毒及其類似物或者其部分(例如抗原、抗體、DNA、DNA片段等)的分子。
術(shù)語“活性物質(zhì)”在此表示所有由人設(shè)計和合成的分子(例如合成的藥物)。
用“探針分子和檢測分子”來描述用于加載或涂覆載體顆粒的這樣的生物分子和/或活性物質(zhì)，即它們存在于這些載體分子上。
用“標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)”來描述具有已知的、指定的標(biāo)記參數(shù)的這樣的生物分子和/或活性物質(zhì)，利用它們來進(jìn)行分析，即用于計算。特別是可以考慮這樣的生物分子或活性物質(zhì)作為這種標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)，即這些生物分子或活性物質(zhì)本身具有熒光活性、磷光活性、生物發(fā)光活性、化學(xué)發(fā)光活性、生色團(tuán)活性、放射活性或酶活性，或者它們與具有一種或多種所述活性的分子偶聯(lián)。
現(xiàn)有技術(shù)中已知的方法包括下列步驟-在反應(yīng)容器中配制顆粒混合物，所述顆粒涂覆有作為探針分子或檢測分子的第二種抗體/抗原，-添加含有待檢查或待檢測的第一種抗原/抗體作為樣品物質(zhì)的液體，-溫育，-在反應(yīng)時間結(jié)束之后洗滌載體顆粒以去除未結(jié)合的物質(zhì)和分子，-添加具有經(jīng)熒光標(biāo)記的第三種抗體和/或抗原作為標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)的液體，所述的抗體和/或抗原可與待檢測或待檢查的第一種抗原/抗體(即樣品物質(zhì))種類特異性地反應(yīng)。
-溫育，-洗滌以去除未結(jié)合的物質(zhì)和分子，和-借助于特別為載體顆粒測量而調(diào)整的流式細(xì)胞測量儀來分析單個載體顆粒的標(biāo)記。
在分析方法開始之前，在反應(yīng)容器中配制用所希望的作為探針分子或檢測分子的生物分子/活性物質(zhì)涂覆的載體顆?；蜉d體顆?；旌衔?。這一移液步驟完全決定性地影響著檢查結(jié)果的質(zhì)量，因為由此確定了存在于顆粒上的探針分子或檢測分子在測試溶液中的濃度。存在于顆粒上的生物分子/活性物質(zhì)在測試溶液中的濃度影響著測試校準(zhǔn)和測試水平，由此影響著所檢查的樣品材料的評價。偏離測試校準(zhǔn)的顆粒數(shù)目也會例如在于流式細(xì)胞測量儀中進(jìn)行分析時影響計數(shù)速率。
如果提供例如處于含水緩沖溶液(例如PBS)中的待配制的載體顆粒，則由于較高的載體顆粒濃度(例如對于由聚苯乙烯制成的載體顆粒為1.05g/ml)而會導(dǎo)致沉降過程。因此在再次使用之前，必須進(jìn)行懸浮液的均質(zhì)化，其中必須小心翼翼地避免懸浮液起泡沫和氣泡的形成。在接著的工藝步驟中，必須注意避免載體顆粒的再次沉淀。
本發(fā)明的任務(wù)為如此進(jìn)一步開發(fā)已知的方法，即避免所述的缺點和可能在保持高靈敏度和特異性的同時施行簡化的操作方法。
用具有文端所述的性質(zhì)的方法解決了這一任務(wù)，其特征在于，加載了探針分子或檢測分子的載體顆粒在大小和/或顏色方面是不同的，和在步驟(d)中還分析載體顆粒的大小和/或顏色。
“在顏色方面不同”在本文中表示，將或可以將載體顆粒不僅用不同的顏色種類或染料(例如紅色、綠色、藍(lán)色)，而且用同一顏色種類/同一染料的不同顏色強度(例如從亮紅色至暗紅色的10個強度等級)著色(編號)。因此，在進(jìn)行顏色分析時要分析顏色種類和/或顏色強度。
在本發(fā)明的方法中，預(yù)先配量地以干燥形式提供加載或涂覆有探針分子或檢測分子的載體顆粒。如此，實驗室合作者能夠追溯至經(jīng)涂覆的載體顆粒的預(yù)配量的數(shù)量，而無須首先在費事的移液步驟中準(zhǔn)確地確定載體顆粒的數(shù)量。所以，在檢查或檢測樣品物質(zhì)時不再需要這一特別關(guān)鍵且誤差密集的步驟，和該方法因此還可在簡化的條件下無需大量專門技術(shù)地實施。準(zhǔn)確確定載體顆粒的數(shù)量的步驟事先在制備相應(yīng)的測試系統(tǒng)時施行。
因為預(yù)配量的數(shù)量的載體顆粒以經(jīng)干燥的，優(yōu)選經(jīng)凍干的形式提供，所以此外還延長了涂覆載體顆粒的探針分子或檢測分子的耐久性。
提供凍干形式的載體顆粒是可以特別簡單地實現(xiàn)的，并且是精確的。
本發(fā)明的方法不僅可用于檢查某一存在的樣品物質(zhì)(即生物分子或活性物質(zhì)的類型)的數(shù)量，而且可用于檢測究竟是否含有某一樣品物質(zhì)(即相應(yīng)的生物分子或活性物質(zhì))。
在一個優(yōu)選的實施變化形式中，為此使用這樣的載體顆粒，即其不只是在顏色和/或大小不同，而是此外還用不同的探針分子或檢測分子加載。
對于這一目的，預(yù)配量的數(shù)量的并在其上存在有探針分子或檢測分子的載體顆粒特別可以由多個組別的載體顆粒組成，其中各個的組別首先通過所屬載體顆粒的大小和/或著色(顏色種類和/或顏色強度)，其次通過存在于載體顆粒上的探針分子或檢測分子的類型而相互區(qū)分。換句話說就是每種單個組別的載體分子具有同樣的大小和顏色種類/顏色強度，并用同樣的探針分子或檢測分子進(jìn)行加載，而兩個組別的載體分子區(qū)別于其大小和/或其顏色種類和/或顏色強度，并且用不同的探針分子或檢測分子進(jìn)行加載。
采用本發(fā)明方法的這一實施變化形式，能夠以最簡單的方式和方法在一次單一檢查過程中于同一個測試液體中檢測或檢查不同的樣品物質(zhì)。
在此可以使用與樣品物質(zhì)和/或與標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)互補的探針分子或檢測分子。在此，將這樣的探針分子或檢測分子(即生物分子或活性物質(zhì))稱為是互補的，即它們通過親和或雜交反應(yīng)和/或共價反應(yīng)而結(jié)合其他樣品物質(zhì)(生物分子和/或活性物質(zhì))。
為了檢驗在液體樣品中究竟是否含有某一類型的樣品分子(即生物分子或活性物質(zhì))，優(yōu)選使用(可能會)與任選待檢測的樣品物質(zhì)反應(yīng)的探針分子或檢測分子的載體顆粒。
本發(fā)明的方法還可以通過利用競爭性反應(yīng)來實施。在此，樣品物質(zhì)和探針分子或檢測分子是非常類似的甚至是相同的，和標(biāo)記物質(zhì)和報道物質(zhì)與樣品物質(zhì)和/或探針分子或檢測分子是互補的。在競爭性反應(yīng)中，樣品物質(zhì)和探針分子或檢測分子競爭著與經(jīng)標(biāo)記的、互補的標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)結(jié)合。如果在溶液中不合有樣品物質(zhì)微粒，則所有的標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)微粒與探針分子/檢測分子結(jié)合，由此也就結(jié)合在載體顆粒上，并可探測到。另一方面，如果存在許多樣品物質(zhì)微粒，則所有的標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)微粒與樣品物質(zhì)微粒結(jié)合，而不與探針分子/檢測分子結(jié)合，因此也就不會結(jié)合在載體顆粒上，由此就無法探測到。
在有利的本發(fā)明方法的設(shè)計中，以壓制品的形式提供預(yù)配量的并經(jīng)干燥或凍干的載體顆粒。換句話說就是使用含有經(jīng)干燥或凍干的載體顆粒的以預(yù)配量的形式的壓制品。該壓制品容易操作，并能夠在任何反應(yīng)容器中使用。
該方法變化形式的進(jìn)一步形成預(yù)先規(guī)定，使用不同組別的壓制品，這些壓制品的不同點是在其中含有的載體顆粒用不同的探針分子或檢測分子加載，其中每個單獨的壓制品的載體顆粒加載有同樣的探針分子或檢測分子。
例如，對于在妊娠期間的感染血清學(xué)測試(所謂的“妊娠期調(diào)查(Schwangerschaftspanel)”)可以提供一種單一壓制品，其含有不同大小和/或不同顏色的載體顆粒，這些載體顆粒加載有對于風(fēng)疹、弓形體病、CMV、HSV、VZV、細(xì)小病毒組等的抗原和/或抗體而使用的探針分子或檢測分子，其中每種載體顆粒種類加載有一種確定的探針分子或檢測分子種類。
同樣也是很好的是，例如對于用于疫苗接種控制的感染血清學(xué)測試可以提供一組多種壓制品，其中每種壓制品只含有一種單一的確定類別的載體顆粒，這些載體顆粒用一種確定的類型的探針分子或檢測分子加載，例如對于破傷風(fēng)、白喉、百日咳等的抗原和/或抗體而使用的探針分子或檢測分子。然后將這些單獨的壓制品分別根據(jù)所提出的問題混合在一起。
預(yù)配量的、經(jīng)干燥或凍干的載體顆粒可以同樣良好地在反應(yīng)容器如微量滴定板或小管中以非壓縮的形式提供，這些反應(yīng)容器然后可以直接用于分析待檢查的液體而無需其他附加的措施。試驗員只是必須在該反應(yīng)容器中注滿待檢查的液體，以便將這些液體與預(yù)配量的、因此已知的數(shù)量的凍干載體顆粒接觸，而不再需要轉(zhuǎn)注過程或數(shù)量測定。
作為對于液體中的樣品物質(zhì)的指定標(biāo)記參數(shù)，建議使用熒光染料，因而在本發(fā)明方法的步驟d)中利用熒光進(jìn)行分析。
特別有利的是，通過如下方法能夠簡化本發(fā)明的方法，即將預(yù)配量的、用探針分子或檢測分子加載的載體顆粒與預(yù)配量的數(shù)量的標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)一起以經(jīng)干燥的或經(jīng)凍干的形式提供。在此，標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)具有與待檢查的或待檢測的樣品物質(zhì)種類特異性地反應(yīng)這樣的特性。它們可以由一種或多種成分組成，和它們可以具有一種或多種與探針分子或檢測分子和/或樣品物質(zhì)互補的結(jié)構(gòu)。
在其中已經(jīng)用預(yù)配量的載體顆粒提供了經(jīng)標(biāo)記的標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)這樣的方法中，通過精簡另一個配制步驟來保證誤差率的減少。另外，通過減少方法步驟的數(shù)目來簡化程序，因為與上述的現(xiàn)有技術(shù)的方法步驟相反，在本發(fā)明方法的這一變化形式中只是需要添加任選含有待檢查或待檢測的樣品物質(zhì)的液體，和例如借助于特別為顆粒測量而調(diào)整的流式細(xì)胞測量儀來分析單個載體顆粒的標(biāo)記。
本發(fā)明的目標(biāo)還為在本發(fā)明的檢查和/或檢測方法中使用的測試系統(tǒng)(試劑盒)，其特征在于，該測試系統(tǒng)包含在大小和/或顏色(顏色種類和/或顏色強度)方面屬于不同的類別的、加載有探針分子/檢測分子的載體顆粒，這些載體顆粒以經(jīng)干燥的形式存在。
在顏色方面的載體顆粒的編號優(yōu)選地以已知方式通過下列方法來完成，即通過將一種或多種熒光團(tuán)可能以不同的濃度引入載體顆粒中，或者通過將一種或多種相同類型或不同類型的熒光性納米顆粒附著在載體顆粒表面上。
試驗員可以直接使用這一本發(fā)明的測試系統(tǒng)(試劑盒)而無需移液或配制步驟，從而以所述方式減少了主要的誤差來源。這種測試系統(tǒng)(試劑盒)可以事先大量制備，并如此例如進(jìn)行銷售。
載體顆粒在該測試系統(tǒng)(試劑盒)中優(yōu)選地以經(jīng)凍干的形式存在。
該測試系統(tǒng)可以包含在大小和/或顏色方面屬于不同的組別的載體顆粒，其中同組的載體顆粒用相同類型的探針分子或檢測分子加載，和不同組別的載體顆粒載有不同的探針分子或檢測分子。
經(jīng)干燥或經(jīng)凍干的載體顆?；蛘哳A(yù)先配量地以一種或多種壓制品的形式存在于測試系統(tǒng)中，或者預(yù)先配量地以未壓縮的形式存在于反應(yīng)容器中。
在本發(fā)明的測試系統(tǒng)的一個實施變化形式中預(yù)先規(guī)定，另外還包含至少一種可以與待檢查的樣品物質(zhì)種類特異性地反應(yīng)的標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)。這種標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)特別地可以具有熒光活性、磷光活性、生物發(fā)光活性、化學(xué)發(fā)光活性、生色團(tuán)活性、放射活性或酶活性所述標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)優(yōu)選地一起或者包含在壓制品中，或者包含在用載體顆粒填充的反應(yīng)容器中，并可以由一種或多種成分組成。
對于測試系統(tǒng)(試劑盒)的這些特殊的實施方案，上面對于本發(fā)明的方法已經(jīng)描述的優(yōu)點也存在于類似的方法中。
所有本發(fā)明的測試系統(tǒng)(試劑盒)優(yōu)選地在靠近中心的位置進(jìn)行制備并從那里進(jìn)行銷售，從而它們在實驗室購買之后可以無需附加的配制或移液步驟而直接用于所希望的檢查。
本發(fā)明的方法和本發(fā)明的測試系統(tǒng)將在下面借助于附圖和實施例作更詳細(xì)的解釋。在此不言而喻，在實施例中所描述的施行方式在相關(guān)的檢查中遵循還適用于就其中存在的樣品物質(zhì)而進(jìn)行每種其他的液體樣品檢查的原則。


圖1示例性地(自然也可考慮其他的溫度和壓力特性曲線)顯示了在實施用于本發(fā)明測試系統(tǒng)(試劑盒)的本發(fā)明制備方法過程中于凍干時的溫度或壓力過程。
實施例1在孕婦中的感染血清學(xué)檢查-變化形式1為了獲得關(guān)于某一(某些)樣品物質(zhì)例如風(fēng)疹、弓形體病、CMV、HSV、VZV、細(xì)小病毒等的抗原和/或抗體在孕婦的血清樣品中存在和/或性質(zhì)的信息，將大小不同的載體顆粒用不同的探針分子或檢測分子，即用于這些抗原和/或抗體以及可能還有其他抗原和/或抗體的探針分子或檢測分子，進(jìn)行加載，預(yù)先配量，凍干，和或者以處于反應(yīng)容器中的未壓縮的形式提供，或者以壓縮成壓制品的形式提供。
為了分析這一血清樣品，實驗室合作者動用具有預(yù)配量的數(shù)量的載體顆粒的這種反應(yīng)容器或這種壓制品。實驗室合作者知道其使用了多少載體顆粒，因此知道使用了多少探針分子或檢測分子，以及知道這些探針分子或檢測分子對于哪些待檢查或者可能待檢測的樣品物質(zhì)是特異的。實驗室合作者將該壓制品或者該在反應(yīng)容器中的未壓縮形式的載體顆粒與含有樣品物質(zhì)的待檢查的液體，即與血清樣品在一個或上述反應(yīng)容器中接觸。同時或順次向其中添加一定數(shù)量的標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)。
如果標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)已經(jīng)與加載有探針分子或檢測分子的載體顆粒一起以經(jīng)干燥的形式、預(yù)配量的形式以及或者壓縮成壓制品或者未壓縮地裝入反應(yīng)容器中的形式存在，那么這一步驟可以省略。
在反應(yīng)時間結(jié)束之后，在載體顆粒上結(jié)合不同的樣品物質(zhì)和相同類型的標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)。
通過分析載體顆粒的大小(例如在為顆粒測量而調(diào)整的流式細(xì)胞測量儀中)可以推斷出類型，和通過分析樣品物質(zhì)和/或標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)的指定標(biāo)記參數(shù)可以推斷出待檢查液體中的樣品物質(zhì)的數(shù)量。
為了去除未結(jié)合的物質(zhì)，可以在各個反應(yīng)時間結(jié)束時施行本身已知的洗滌步驟。
實施例2在孕婦中的感染血清學(xué)檢查-變化形式2與實施例1一樣，但是不使用不同大小的載體顆粒，而是使用不同顏色的，即在顏色種類和/或顏色強度方面不同的載體顆粒，并用不同的探針分子或檢測分子加載。
通過分析不同的顏色或顏色強度，可檢測不同的載體顆粒，因此可檢測在載體顆粒上結(jié)合的探針分子或檢測分子的類型(種類)以及由此探測的樣品物質(zhì)的類型(種類)，和通過分析樣品物質(zhì)和/或標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)的指定的標(biāo)記參數(shù)可以推斷出待檢查液體中的樣品物質(zhì)的數(shù)量。
實施例3在孕婦中的感染血清學(xué)檢查-變化形式3與實施例2一樣，但是使用大小不同且顏色不同的載體顆粒，其中顏色的差異性可以位于不同的顏色種類或不同的顏色強度(在顏色種類相同時)方面。同樣大小和顏色種類或顏色強度即同樣編號的載體顆粒用相同類型(種類)的探針分子或檢測分子加載，具有其他大小和/或顏色種類和/或顏色強度即具有其他編號的載體顆粒用其他類型(種類)的探針分子或檢測分子加載。
通過分析不同的大小和/或顏色種類和/或顏色強度，可檢測不同的載體顆粒，因此可檢測在載體顆粒上結(jié)合的探針分子或檢測分子的類型以及由此探測的樣品物質(zhì)的類型，和通過分析樣品物質(zhì)和/或標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)的指定的標(biāo)記參數(shù)可以推斷出待檢查液體中的樣品物質(zhì)的數(shù)量。
實施例4不使用標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)的樣品物質(zhì)的檢測為了檢測核酸序列(例如DNA)可以已經(jīng)將樣品物質(zhì)例如某一DNA進(jìn)行熒光標(biāo)記。對于這樣的測試，首先要擴(kuò)增出待檢測的DNA。這一步驟可以用已經(jīng)熒光標(biāo)記的引物來進(jìn)行，以致于待檢測的DNA(也就是樣品物質(zhì))的擴(kuò)增物已含有熒光團(tuán)。
在于大小和顏色(顏色種類和/或顏色強度)方面經(jīng)編號的載體顆粒上偶聯(lián)探針分子或檢測分子，例如以一種第二(互補的)DNA的形態(tài)。待檢測的DNA(樣品物質(zhì))的經(jīng)熒光標(biāo)記的擴(kuò)增物直接與該位于載體顆粒之上的(第二)探針-DNA或檢測劑-DNA結(jié)合。
不需要使用標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)。因此，為了實施該方法建議使用實施例5的測試系統(tǒng)。
另一方面，也存在這樣的可能性，即使用標(biāo)記的和非標(biāo)記的第三種DNA分子作為標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)，其在樣品-DNA和探針-DNA或檢測劑-DNA之間起著橋接的作用。為了實施這一方法變化形式，合適的是實施例6的測試系統(tǒng)，即以經(jīng)干燥的、預(yù)配量的形式包含加載有探針-DNA或檢測劑-DNA的載體顆粒以及標(biāo)記或非標(biāo)記的標(biāo)記-DNA或報道-DNA的測試系統(tǒng)。
實施例5本發(fā)明的測試系統(tǒng)(試劑盒)的制備和組成-變化形式1以指定的數(shù)量和在準(zhǔn)確監(jiān)測的條件下，在反應(yīng)容器中配制一種或多種類型的載體顆粒(即具有同一編號或具有不同編號的載體顆粒)，其中優(yōu)選使用一種特殊的緩沖劑-穩(wěn)定劑體系(例如50mM的磷酸緩沖液、150mM的氯化鈉、0.02％的疊氮化鈉、8g/L的明膠水解產(chǎn)物，pH7.4，另外還有成骨架劑和助劑如蔗糖、苯丙氨酸)。如果需要，可借助于超聲波和/或機(jī)械攪拌使載體顆粒均質(zhì)化。隨后將此預(yù)配量的載體顆粒通過凍干或其他干燥方法進(jìn)行干燥，因此載體顆粒變得具有耐久性和可更簡單地進(jìn)行操作。在此，優(yōu)選采用從圖1中獲知的溫度和壓力特性曲線。根據(jù)該測試系統(tǒng)將用于何種分析，使用或者(a)同一編號的并只加載有一種類型(種類)的探針分子或檢測分子的載體顆粒，或者(b)同一編號的但加載有不同類型(不同種類)的探針分子或檢測分子的載體顆粒，或者(c)不同編號的并在編號前只加載有一種類型(種類)的探針分子或檢測分子的載體顆粒。
在干燥/凍干之后，可以將這種加載有探針分子或檢測分子的載體顆粒形成為壓制品，其中這些壓制品各含有預(yù)定數(shù)量的載體顆粒。
在這樣的壓制品的情況下，即其只含有一種類型的具有確定的大小和確定的顏色種類和/或顏色強度的載體顆粒，也就是只含有同一編號的載體顆粒，并且其中該載體顆粒只加載有一種類型(種類)的互補的探針分子或檢測分子，載體顆粒的混合物可以通過在反應(yīng)容器中組合相應(yīng)的壓制品而分別制備。
實施例6本發(fā)明的測試系統(tǒng)(試劑盒)的制備和組成-變化形式2與實施例5一樣，但是將加載有探針分子或檢測分子的載體顆粒與指定數(shù)量的標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)一起在使用特殊的緩沖劑-穩(wěn)定劑體系的情況下和在準(zhǔn)確監(jiān)測的條件下于反應(yīng)容器中進(jìn)行配制，通過凍干或其他干燥方法進(jìn)行干燥，和最后以壓縮成壓制品的形式或者未壓縮地裝入反應(yīng)容器中的形式提供。
權(quán)利要求
1.檢查和/或檢測至少一種樣品物質(zhì)的類型和/或數(shù)量的方法，其中(a)提供加載有探針分子或檢測分子的預(yù)配量的數(shù)量的載體顆粒，(b)這些負(fù)載的載體顆粒以干燥的形式存在，(c)(i)將載體顆粒與含有待檢查或待檢測的樣品物質(zhì)的液體接觸，其中樣品物質(zhì)用一種和/或多種指定的標(biāo)記參數(shù)進(jìn)行了標(biāo)記，或者(ii)將載體顆粒與存在于同一或不同液體中的樣品物質(zhì)和標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)同時或依次接觸，和(d)在一個或多個其間用于互相接觸的樣品物質(zhì)與探針分子或檢測分子和標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)能夠結(jié)合的反應(yīng)時間之后，分析至少一種標(biāo)記參數(shù)，從中可以推斷出樣品物質(zhì)的類型和/或數(shù)量，其特征在于，加載有探針分子或檢測分子的載體顆粒在大小和/或顏色(顏色種類和/或顏色強度)方面不同，和在步驟(d)還分析載體顆粒的大小和/或顏色。
2.權(quán)利要求1的方法，其特征在于，將載體顆粒凍干。
3.權(quán)利要求1或2的方法，其特征在于，在顏色和/或大小方面不同的載體顆粒用不同的探針分子或檢測分子進(jìn)行加載。
4.權(quán)利要求1-3中任一項的方法，在該方法中經(jīng)干燥或經(jīng)凍干的載體顆粒以壓制品的形式提供。
5.權(quán)利要求3和4的方法，在該方法中使用不同類別的壓制品，所述壓制品的不同點是在其中含有的載體顆粒用不同的探針分子或檢測分子加載，其中每種單獨的壓制品的載體顆粒加載有同樣的探針分子或檢測分子。
6.權(quán)利要求1-3中任一項的方法，其特征在于，經(jīng)干燥或經(jīng)凍干的載體顆粒在反應(yīng)容器中以預(yù)先配量的形式提供。
7.權(quán)利要求1-6中任一項的方法，其特征在于，樣品物質(zhì)的指定的標(biāo)記參數(shù)為熒光染料，和在步驟d)中利用熒光進(jìn)行分析。
8.權(quán)利要求1-7中任一項的方法，其特征在于，標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)具有熒光活性、磷光活性、生物發(fā)光活性、化學(xué)發(fā)光活性、生色團(tuán)活性、放射活性或酶活性。
9.權(quán)利要求1-8中任一項的方法，其特征在于，將預(yù)配量的、加載有探針分子或檢測分子的載體顆粒與預(yù)先配量的數(shù)量的標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)一起以經(jīng)干燥或經(jīng)凍干的形式提供，所述標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)適合于與待檢查或待檢測的樣品物質(zhì)進(jìn)行種類特異性的反應(yīng)。
10.在權(quán)利要求1的方法中使用的測試系統(tǒng)，其特征在于，該測試系統(tǒng)包含在大小和/或顏色方面屬于不同的類別的、加載有探針分子或檢測分子的載體顆粒，所述載體顆粒以經(jīng)干燥的形式預(yù)配量地提供。
11.權(quán)利要求10的測試系統(tǒng)，其特征在于，同一類別的載體顆粒用相同類型的探針分子或檢測分子加載，和不同類別的載體顆粒載有不同的探針分子或檢測分子。
12.權(quán)利要求10或11的測試系統(tǒng)，其特征在于，載體顆粒以凍干的形式存在。
13.權(quán)利要求10-12中任一項的測試系統(tǒng)，其特征在于，經(jīng)干燥的載體顆粒預(yù)配量地以一種或多種壓制品的形式存在。
14.權(quán)利要求10-12中任一項的測試系統(tǒng)，其特征在于，經(jīng)干燥的載體顆粒預(yù)配量地存在于反應(yīng)容器中。
15.權(quán)利要求10-14中任一項的測試系統(tǒng)，其特征在于，該測試系統(tǒng)另外還包含至少一種標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)。
16.權(quán)利要求15的測試系統(tǒng)，其特征在于，標(biāo)記物質(zhì)或報道物質(zhì)具有熒光活性、磷光活性、生物發(fā)光活性、化學(xué)發(fā)光活性、生色團(tuán)活性、放射活性或酶活性。
全文摘要
用于檢查和/或檢測至少一種樣品物質(zhì)的類型和/或數(shù)量的方法，其具有如下特征提供預(yù)配量的數(shù)量的在大小和/或顏色(顏色種類和/或顏色強度)方面不同的、加載了探針分子/檢測分子的且經(jīng)干燥的載體顆粒?；蛘?i)將這些載體顆粒與含有待檢查或待檢測的樣品物質(zhì)的液體接觸，其中樣品物質(zhì)以一種和/或多種指定的標(biāo)記參數(shù)進(jìn)行了標(biāo)記，或者(ii)將它們與存在于同一或不同液體中的樣品物質(zhì)和標(biāo)記/報道物質(zhì)同時或依次接觸。在一個或多個反應(yīng)時間之后，分析載體顆粒的大小和/或顏色，以及樣品物質(zhì)和/或標(biāo)記/報道物質(zhì)的至少一種標(biāo)記參數(shù)，從中可以推斷出樣品物質(zhì)的類型和/或數(shù)量。測試系統(tǒng)，其特征在于，該測試系統(tǒng)包含在大小和/或顏色方面屬于不同的類別的、加載了探針分子/或檢測分子的載體顆粒，這些載體顆粒預(yù)先配量地以干燥的形式存在。
文檔編號G01N33/58GK1756958SQ200480005779
公開日2006年4月5日 申請日期2004年5月21日 優(yōu)先權(quán)日2003年5月26日
發(fā)明者G·赫爾曼, I·屈爾曼－拉本斯, U·朔貝爾 申請人:維潤賽潤研發(fā)有限公司