本發(fā)明涉及材料、分析化學技術領域，具體的說涉及一種識別葉綠素的磁性分子印跡材料及其制備方法和應用，。

背景技術：

農(nóng)藥在作物和環(huán)境中的蓄積和殘留一直是威脅人類食品安全和健康的重要來源之一。為了增加世界糧食的生產(chǎn)量，現(xiàn)代農(nóng)業(yè)廣泛使用化肥和農(nóng)藥。其中農(nóng)藥的使用種類繁多，包括有機磷(OOPs)，有機氯(OCPs)和擬除蟲菊酯類殺蟲劑等。大量使用這些農(nóng)藥的后果便是這些化學物及其代謝產(chǎn)物在水和土壤等環(huán)境中殘留和富集，并通過食物鏈最終進入人體。許多研究已經(jīng)證明，部分農(nóng)藥具有致癌性，細胞毒性，遺傳毒性，致突變性，致畸性和免疫損傷等，而高毒和劇毒的農(nóng)藥即使含量極低也會對非靶標生物和人類的健康存在危害。因此作物和環(huán)境中的農(nóng)藥殘留監(jiān)測也就成為了保障人類健康的必要手段。有鑒于此，農(nóng)藥殘留檢測已經(jīng)成為食品安全例行監(jiān)測中重要的一環(huán)。

準確測定農(nóng)藥殘留量，監(jiān)控其在規(guī)定的殘留限量范圍內，是當前保障食品安全和避免貿易糾紛的有效手段。2014年8月1日，食品中農(nóng)藥最大殘留限量新國標GB2763-2014實施，較此前標準分別增加了65種農(nóng)藥、43種食品及1357項限量指標，約91％的限量等同或嚴于國際食品法典標準。因此建立農(nóng)產(chǎn)品中痕量農(nóng)藥殘留的準確、靈敏的檢測技術，進而對農(nóng)產(chǎn)品質量安全風險評估提供大數(shù)據(jù)支持，以及保障國民健康均具有重要意義。

農(nóng)藥殘留分析的常用方法有很多種：如氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)、色譜-質譜聯(lián)用(GC-MS/MS，UPLC-MS/MS)、免疫分析法、毛細管電泳分析等。大部分的方法在檢測過程中還需要進行前處理，目前報道的前處理技術有液液萃取、基質固相分散、單液滴微萃取、固相萃取和分散固相萃取等。尤其值得一提的是2003年美國農(nóng)業(yè)部開發(fā)的一種突破性的樣品制備方法，簡化了農(nóng)藥分析中樣品制備步驟，即QuEChERS方法。目前，此方法在歐盟和美國被廣泛使用。不過研究者發(fā)現(xiàn)其局限性是：QuEChERS方法中使用的石墨化炭黑(GCB)不僅對平面結構的分子如葉綠素有很強的吸附作用，可以去除基質中的色素雜質，而且對同樣具有平面結構的農(nóng)藥分子也有很強的吸附能力，從而降低其回收率。而平面結構的農(nóng)藥并不少，常見的有多菌靈，百菌清，部分三嗪類除草劑和氨基甲酸酯類殺蟲劑等。二者之間存在矛盾，若增加GCB的用量則除盡葉綠素的同時會顯著降低平面結構農(nóng)藥的回收率，若減少GCB的用量兼顧平面結構農(nóng)藥的回收率則葉綠素去除不完全而出現(xiàn)高色素農(nóng)產(chǎn)品樣品中最常見的嚴重的基質干擾問題，兩種情況都會影響農(nóng)藥殘留量的準確定量。因此，需要開發(fā)一種可選擇性吸附葉綠素，而對平面結構農(nóng)藥無吸附的新吸附材料，以彌補石墨化炭黑的不足。

近些年，分子印跡材料(MIPs,molecularly imprinted polymers)在固相萃取和傳感器制備等方面發(fā)揮了重大作用，引起了人們的廣泛重視。一般而言，分子印跡技術是指以某一特定的目標分子為模板，制備對該分子有特異選擇性識別的聚合物的技術。該技術已經(jīng)廣泛運用在眾多領域，然而目前報道的適用于農(nóng)藥檢測的分子印跡材料通常均為專一性檢測某種農(nóng)藥分子(即模板分子)或結構相近的化合物，運用在農(nóng)產(chǎn)品安全檢測中時無法實現(xiàn)多種類的農(nóng)藥多殘留檢測。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明首先提供了一種識別葉綠素的磁性分子印跡材料的制備方法，該方法包括如下步驟：

(1)磁性納米粒子Fe₃O₄的合成：

將六水合物氯化鐵(FeCl₃·6H₂O)和四水合物氯化亞鐵(FeCl₂·4H₂O)分別溶于水中，然后兩者混合并通入氮氣保護；

取水和氨水倒入燒瓶中，置于30-40℃水浴鍋中，攪拌并通氮除氧，然后加入上述FeCl₃·6H₂O和FeCl₂·4H₂O的混合水溶液，攪拌1-2h，反應完成后將得到的黑色物質用磁鐵分離，用水洗滌、，干燥，得到磁性納米粒子Fe₃O₄；

(2)基丙烯酸(MAA)對磁性納米粒子Fe₃O₄表面進行修飾：

將上述磁性納米粒子Fe₃O₄分散于第一有機溶劑中，加入MAA，攪拌反應20-30h；

反應完成后，將得到的修飾好的Fe₃O₄用磁鐵分離，用水和乙醇分別洗滌、干燥，得到MAA表面修飾的磁性納米Fe₃O₄顆粒；

(3)磁性分子印跡材料Fe₃O₄@MIP的合成：

將上述MAA表面修飾的磁性納米Fe₃O₄顆粒分散于第二有機溶劑中，稱取含卟啉環(huán)類化合物模板分子和功能單體也溶于第二有機溶劑中，超聲20-50min后兩者混合，再超聲20-50min；

向混合液中加入交聯(lián)劑和引發(fā)劑，通入氮氣2-7min后，密封容器；

在40-70℃下水浴搖床，自由基聚合反應16-30h；

反應完成后，將得到的分子印跡聚合物用磁鐵分離，分別用水和第三有機溶劑洗滌，最后至PH值6-7，干燥，得到Fe₃O₄@MIP。

其中優(yōu)選的方案為：

步驟(1)中FeCl₃·6H₂O和FeCl₂·4H₂O的摩爾比是1：(1.5-2.5)；所述氨水濃度為25％-28％(質量比)，水和氨水的添加比例為(10-25)：1(體積比)；

其中步驟(2)中所述的第一有機溶劑為甲醇、乙醇或甲苯中的一種；所述Fe₃O₄磁性納米粒子在第一有機溶劑中的濃度為10-30mg/mL；所述MAA和第一有機溶劑的體積之比為(2-5)：10；

其中步驟(3)中所述的第二有機溶劑為乙腈、乙醇或甲苯中的一種；所述的含卟啉環(huán)類化合物模板分子為葉綠素、血晶素或四苯基卟啉；所述的功能單體為甲基丙烯酸、甲基丙烯酰胺、對乙烯基苯甲酸、2-(三氟甲基)丙烯酸中的一種或多種；所述的交聯(lián)劑為二甲基丙烯酸乙二醇酯或甲基丙烯酸縮水甘油酯；所述的引發(fā)劑為偶氮二異丁腈；所述MAA修飾的Fe₃O₄磁性納米粒子在第二有機溶劑中的濃度為5-7mg/mL；所述卟啉環(huán)類化合物在第二有機溶劑中的濃度為3-10μmol/mL，所述功能單體在第二有機溶劑中的濃度為12-40μmol/mL，所述交聯(lián)劑在第二有機溶劑中的濃度為60-200μmol/mL，所述引發(fā)劑在第二有機溶劑中的濃度為3-10μmol/mL；所述的第三有機溶劑為乙腈、甲醇或甲醇乙酸混合液中的一種；

另外優(yōu)選的方案中，在步驟(1)中所述FeCl₃·6H₂O和FeCl₂·4H₂O的混合水溶液在加入水和氨水的混合液中時，是邊攪拌邊逐滴加入的，其中攪拌的速率為400-800rpm/min；這樣可以得到分散性良好、粒徑均勻適中的磁性納米粒子Fe₃O₄；

步驟(2)中，為了得到均勻分散并均勻地將磁性納米粒子Fe₃O₄表面修飾MAA，攪拌第一有機溶劑、磁性納米粒子Fe₃O₄和MAA混合物時要均勻，攪拌的速率為500-1000rpm/min。

本發(fā)明還提供了一種由上述方法制備得到的識別葉綠素的磁性分子印跡材料Fe₃O₄@MIP。

本發(fā)明的識別葉綠素的磁性分子印跡材料用于農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測時的用途，其用于吸附葉綠素，去除干擾。

本發(fā)明所提供的分子印跡材料為磁性納米仿生識別材料，有特異性強的識別位點和較好的吸附性能，吸附速率快、吸附容量大、穩(wěn)定性能較好，可實現(xiàn)對高色素農(nóng)產(chǎn)品樣品中葉綠素干擾物的高效選擇性識別和吸附，而對目標平面結構農(nóng)藥無吸附，一舉解決了目前主流的葉綠素吸附劑GCB對二者無選擇性吸附的難題。

針對高葉綠素含量的農(nóng)產(chǎn)品樣品，將本發(fā)明所提供的識別葉綠素的磁性分子印跡材料和QuEChERS方法相結合，可以建立一種高回收率、降低基質效應、快速、可靠的前處理方法，實現(xiàn)了農(nóng)藥多殘留檢測，極具實際應用價值。

通過紅外光譜儀對所制備的磁性分子印跡納米材料Fe₃O₄@MIP等進行表征，通過透射電鏡(TEM)觀察納米顆粒表面形貌。通過靜態(tài)和動態(tài)吸附性實驗，以紫外-可見光譜儀測定并比較優(yōu)化的磁性分子印跡納米材料Fe₃O₄@MIP和非分子印跡材料Fe₃O₄@NIP對葉綠素的吸附容量和速率。并以QuEChERS前處理方法結合色譜質譜聯(lián)用儀(GC-MS/MS和UPLC-MS/MS)分析比較使用磁性分子印跡納米材料Fe₃O₄@MIP和石墨化炭黑(GCB)在吸附高色素農(nóng)產(chǎn)品樣品如韭菜、菠菜、茶葉中的葉綠素干擾物的效果，以及同等效果條件下評價所分析的68種目標平面結構農(nóng)藥的添加回收率和重復性試驗的相對標準偏差。

本發(fā)明的識別葉綠素的磁性分子印跡材料改變了以往的一種分子印跡材料只能檢測一種農(nóng)藥分子或相近結構農(nóng)藥的局限，將目的由目標農(nóng)藥分子捕捉變?yōu)楦蓴_物去除，拓寬了分子印跡技術的運用思路。開發(fā)了一種可選擇性吸附葉綠素，吸附容量大，而對平面結構農(nóng)藥無吸附的新型分子印跡材料Fe₃O₄@MIP，彌補了石墨化炭黑(GCB)的不足。針對高葉綠素含量農(nóng)產(chǎn)品樣品，將分子印跡技術和QuEChERS方法相結合，建立一種高回收率、降低基質效應、快速、可靠的前處理方法，實現(xiàn)了農(nóng)藥多殘留檢測，極具實際應用價值。

與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果為：

(1)本發(fā)明以磁性四氧化三鐵為載體制備磁性分子印跡材料，既保證了材料良好的磁學性質、分散性和穩(wěn)定性，還便于根據(jù)實驗目的對載體進行化學修飾。

(2)本發(fā)明在磁性四氧化三鐵載體表面修飾MAA，采用表面分子印跡技術將聚合物接枝到載體表面，得到了表面覆蓋有納米級別尺寸的識別葉綠素分子的印跡薄層磁性功能化納米材料。反應條件簡便，材料形貌可控，選擇性吸附性能、分散性和穩(wěn)定性良好。

(3)本發(fā)明通過嘗試幾種含卟啉環(huán)類結構化合物模板分子，優(yōu)化篩選功能單體、交聯(lián)劑和引發(fā)劑種類，成功制備了能夠識別葉綠素的磁性分子印跡納米材料Fe₃O₄@MIP，可應用于高色素農(nóng)產(chǎn)品樣品中農(nóng)藥多殘留檢測的去除干擾物的前處理。

(4)本發(fā)明所提供的磁性分子印跡材料具有選擇性識別葉綠素的吸附性能，而對目標平面結構農(nóng)藥無吸附。將該材料和QuEChERS方法相結合，建立了一種針對高葉綠素含量的農(nóng)產(chǎn)品樣品中農(nóng)藥多殘留檢測的高回收率、基質效應低、快速、可靠的前處理方法。彌補了目前農(nóng)產(chǎn)品的農(nóng)藥殘留前處理中重要干擾物葉綠素的特異性高效吸附的技術空白。

附圖說明

圖1包含圖1(a)和圖1(b)，是實施例1制備的磁性納米粒子Fe₃O₄的透射電鏡圖(圖1(a))和磁性分子印跡材料Fe₃O₄@MIP的透射電鏡圖(圖1(b))。

圖2是實施例1制備的磁性納米粒子Fe₃O₄，甲基丙烯酸(MAA)接枝改性磁性納米粒子Fe₃O₄和磁性分子印跡材料Fe₃O₄@MIP的紅外譜圖。

圖3是實施例1制備的磁性分子印跡材料Fe₃O₄@MIP和非分子印跡材料Fe₃O₄@NIP對葉綠素的吸附等溫曲線。

圖4是實施例1制備的磁性分子印跡材料Fe₃O₄@MIP和非分子印跡材料Fe₃O₄@NIP對葉綠素的動態(tài)吸附曲線。

具體實施方式

下面將結合實施例對本發(fā)明的實施方案進行詳細描述，但是本領域技術人員將會理解，下列實施僅用于說明本發(fā)明，而不應視為限制本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

實施例1

磁性分子印跡材料Fe₃O₄@MIP的制備。

具體包括如下步驟：

S11：磁性四氧化三鐵(Fe₃O₄)納米粒子的合成

稱取6.763g六水合物氯化鐵和1.99g四水合物氯化亞鐵，然后分別溶于25mL和5mL超純水后，兩者混合并通入N2保護。取237mL超純水和15mL氨水倒入500mL三口燒瓶中，置于35℃水浴鍋中，在機械攪拌器作用下充分攪拌，并通入N₂，除去溶液中的O₂，然后將含有Fe³⁺和Fe²⁺的混合溶液逐滴加入，反應在35℃，N₂保護和充分機械攪拌下進行1h，反應完成后將得到的黑色物質用超強磁鐵分離，用超純水洗滌，再用永久磁鐵分離，重復用超純水洗滌分離5次，置于60℃真空干燥，得到磁性Fe₃O₄納米粒子。

S12：甲基丙烯酸(MAA)接枝改性磁性Fe₃O₄納米粒子的制備

稱取0.2g Fe₃O₄并加入10mL甲苯，超聲分散30min后，加入2mL甲基丙烯酸(MAA)，充分機械攪拌24h。反應完成后，將得到的修飾好的Fe₃O₄用超強磁鐵分離，用水和乙醇洗滌，再用永久磁鐵分離，重復用水和乙醇洗滌分離3次，置于60℃真空干燥，得到甲基丙烯酸表面修飾的磁性Fe₃O₄納米粒子(Fe₃O₄-MAA)。

S13:識別葉綠素的磁性分子印跡材料Fe₃O₄@MIP的制備

稱取0.2g Fe₃O₄-MAA溶于5mL乙腈中，超聲30min，再稱取0.0892g模板分子葉綠素和0.0334g MAA溶于25mL乙腈中，超聲30min后，然后兩者混合后倒入單口燒瓶中超聲30min。向混合液中加入360μL二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)和40mg偶氮二異丁腈(AIBN)，通N₂ 5min后，用實心橡膠塞密封單口燒瓶，然后將單口燒瓶放入水浴搖床中，60℃，搖24h。反應完成后，將得到印跡聚合物用超強磁鐵分離，用超純水洗滌兩次，超強磁鐵分離，然后用甲醇/乙酸(v/v,9:1)洗滌四次，超強磁鐵分離，60℃真空干燥，得到Fe₃O₄@MIP。

實施例2

磁性分子印跡材料Fe₃O₄@MIP的制備。

具體包括如下步驟：

S21：磁性四氧化三鐵(Fe₃O₄)納米粒子的合成

稱取3.38g六水合物氯化鐵和0.995g四水合物氯化亞鐵，然后分別溶于15mL和3mL超純水后，兩者混合并通入N2保護。取118mL超純水和8mL氨水倒入500mL三口燒瓶中，置于35℃水浴鍋中，在機械攪拌器作用下充分攪拌，并通入N₂，除去溶液中的O₂，然后將含有Fe³⁺和Fe²⁺的混合溶液逐滴加入，反應在35℃，N₂保護和充分機械攪拌下進行1h，反應完成后將得到的黑色物質用超強磁鐵分離，用超純水洗滌，再用永久磁鐵分離，重復用超純水洗滌分離5次，置于60℃真空干燥，得到磁性Fe₃O₄納米粒子。

S22：甲基丙烯酸(MAA)接枝改性磁性Fe₃O₄納米粒子的制備

稱取0.4g Fe₃O₄并加入20mL甲苯，超聲分散30min后，加入4mL甲基丙烯酸(MAA)，充分機械攪拌24h。反應完成后，將得到的修飾好的Fe₃O₄用超強磁鐵分離，用水和乙醇洗滌，再用永久磁鐵分離，重復用水和乙醇洗滌分離3次，置于60℃真空干燥，得到甲基丙烯酸表面修飾的磁性Fe₃O₄納米粒子(Fe₃O₄-MAA)。

S23:識別葉綠素的磁性分子印跡材料Fe₃O₄@MIP的制備

稱取0.4g Fe₃O₄-MAA溶于10mL乙腈中，超聲30min，再稱取0.1372g模板分子血晶素和0.0668g MAA溶于50mL乙腈中，超聲30min后，然后兩者混合后倒入單口燒瓶中超聲30min。向混合液中加入760μL二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)和80mg偶氮二異丁腈(AIBN)，通N₂ 5min后，用實心橡膠塞密封單口燒瓶，然后將單口燒瓶放入水浴搖床中，60℃，搖24h。反應完成后，將得到印跡聚合物用超強磁鐵分離，用超純水洗滌兩次，超強磁鐵分離，然后用甲醇/乙酸(v/v,9:1)洗滌四次，超強磁鐵分離，60℃真空干燥，得到Fe₃O₄@MIP。

實施例3

磁性分子印跡材料Fe₃O₄@MIP的制備。

具體包括如下步驟：

S31：磁性四氧化三鐵(Fe₃O₄)納米粒子的合成

稱取5.07g六水合物氯化鐵和1.49g四水合物氯化亞鐵，然后分別溶于18mL和4mL超純水后，兩者混合并通入N₂保護。取178mL超純水和11mL氨水倒入500mL三口燒瓶中，置于35℃水浴鍋中，在機械攪拌器作用下充分攪拌，并通入N₂，除去溶液中的O₂，然后將上述含有Fe³⁺和Fe²⁺的混合溶液逐滴加入，反應在35℃，N₂保護和充分機械攪拌下進行1h，反應完成后將得到的黑色物質用超強磁鐵分離，用超純水洗滌，再用永久磁鐵分離，重復用超純水洗滌分離5次，置于60℃真空干燥，得到磁性Fe3O4納米粒子。

S32：甲基丙烯酸(MAA)接枝改性磁性Fe₃O₄納米粒子的制備

稱取0.8g Fe₃O₄并加入40mL甲苯，超聲分散30min后，加入8mL甲基丙烯酸(MAA)，充分機械攪拌24h。反應完成后，將得到的修飾好的Fe₃O₄用超強磁鐵分離，用水和乙醇洗滌，再用永久磁鐵分離，重復用水和乙醇洗滌分離3次，置于60℃真空干燥，得到甲基丙烯酸表面修飾的磁性Fe₃O₄納米粒子(Fe₃O₄-MAA)。

S33:識別葉綠素的磁性分子印跡材料Fe₃O₄@MIP的制備

稱取0.1g Fe₃O₄-MAA溶于5mL乙腈中，超聲30min，再稱取0.0317g模板分子四苯基卟啉，0.0167g MAA溶于15mL乙腈中，超聲30min后，然后兩者混合后倒入單口燒瓶中超聲30min。向混合液中加入180μL二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)和20mg偶氮二異丁腈(AIBN)，通N₂ 5min后，用實心橡膠塞密封單口燒瓶，然后將單口燒瓶放入水浴搖床中，60℃，搖24h。反應完成后，將得到印跡聚合物用超強磁鐵分離，用超純水洗滌兩次，超強磁鐵分離，然后用甲醇/乙酸(v/v,9:1)洗滌四次，超強磁鐵分離，60℃真空干燥，得到Fe₃O₄@MIP。

對比例

對比例提供磁性非分子印跡材料Fe₃O₄@NIP的制備方法，參照實施例1，對比例中具體的制備過程除在步驟S13中不添加模板分子外，其余步驟均與實施例1相同。

實施例4

為了驗證本發(fā)明的有益效果，采用本發(fā)明實施例1所制備的分子印跡材料進行性能測試，步驟如下：

(1)分別稱取13份5mg實施例1制備的Fe₃O₄@MIP和對比例制備的Fe₃O₄@NIP分別加入到15mL的離心管中，再分別加入10mL初始濃度為0.03-0.72mg/mL的葉綠素乙醇溶液，在恒溫水浴搖床中30℃振蕩30min，通過超強磁鐵分離上層液后，用紫外-可見光譜儀測定并計算各上層液中葉綠素濃度，波長掃描范圍為400-750nm，葉綠素最大吸收波長在670nm。檢測結果如圖3所示。

由圖3可以看出，隨著葉綠素溶液濃度的增加，磁性分子印跡材料和非分子印跡材料對葉綠素的吸附能力都趨于增加，但磁性分子印跡材料對葉綠素的吸附能力顯著高于非分子印跡材料，這說明所制備的磁性分子印跡材料Fe₃O₄@MIP對葉綠素的吸附是特異性的。經(jīng)計算，F(xiàn)e₃O₄@MIP和Fe₃O₄@NIP對葉綠素的飽和吸附容量分別為135.4mg/g、478.9mg/g。

(2)將20mg實施例1制備的Fe₃O₄@MIP和對比例制備的Fe₃O₄@NIP分別加入到40mL葉綠素濃度為0.36mg/mL的乙腈溶液中，在恒溫水浴搖床中30℃振蕩2h，期間定時通過超強磁鐵分離，取同等體積的上層液出來，用紫外-可見光譜儀測定并計算各上層液中葉綠素濃度。檢測結果如圖4所示，可以看出，制備的磁性納米材料50min內對葉綠素的吸附即可達到平衡。

(3)以QuEChERS前處理方法結合色譜質譜聯(lián)用儀(GC-MS/MS和UPLC-MS/MS)分析比較使用磁性分子印跡納米材料Fe₃O₄@MIP和石墨化炭黑(GCB)在吸附高色素農(nóng)產(chǎn)品樣品即韭菜、菠菜、茶葉中的葉綠素干擾物的效果，以及同等效果條件下評價所分析的68種目標平面結構農(nóng)藥的添加回收率和重復性試驗的相對標準偏差。

稱取10g勻漿粉碎后的樣品(韭菜、菠菜)或2g粉碎后的茶葉(綠茶)，加10mL水渦旋混勻水化，置于50mL離心管中，加入10mL預冷乙腈。加入2顆陶瓷均質子，手搖快速震蕩約30s；然后加入提取鹽包(含無水硫酸鎂4g、氯化鈉1g、檸檬酸鈉1g及檸檬酸氫二鈉0.5g)，手搖快速震蕩混勻約1min，防止鹽類結塊。于25℃，5000rpm/min離心10min。分別取1mL提取液分別放入含不同量的Fe₃O₄@MIP和GCB的2mL離心管內(按照各自的飽和吸附量通過預實驗確定加入量，使得提取液中葉綠素被吸附的水平一致)，充分渦旋震蕩使充分吸附去除葉綠素雜質。含GCB吸附劑的樣品于25℃，6000rpm/min離心10min，含F(xiàn)e₃O₄@MIP吸附材料的樣品在超強磁鐵作用下分離得到上清液。過0.2μm的微孔濾膜，分別用GC-MS/MS和UPLC-MS/MS進樣分析。

針對68種目標平面結構農(nóng)藥，3種基質樣品每種測試了3組添加濃度水平，每組濃度6個平行樣品(即n＝6)，計算平均添加回收率(AVE，％)和相對標準偏差(RSD，％)，結果如表1-表3所示。

表1 Fe₃O₄@MIP和GCB作為凈化葉綠素的吸附劑對68種平面結構農(nóng)藥添加回收率和相對標準偏差的結果比較(韭菜)

表2 Fe₃O₄@MIP和GCB作為凈化葉綠素的吸附劑對68種平面結構農(nóng)藥添加回收率和相對標準偏差的結果比較(菠菜)

表3 Fe₃O₄@MIP和GCB作為凈化葉綠素的吸附劑對68種平面結構農(nóng)藥添加回收率和相對標準偏差的結果比較(茶葉)

由結果可知，在3種高色素農(nóng)產(chǎn)品的多殘留分析檢測中，用Fe₃O₄@MIP作為吸附劑去除葉綠素的同時，對選取的68種目標平面結構農(nóng)藥均無明顯吸附，使得幾乎所有目標平面結構農(nóng)藥在3種濃度測試水平的添加回收率都在70％～120％之間，RSD≤30％，符合國家標準對于農(nóng)藥多殘留分析的檢測要求。而相應地用GCB作為吸附劑，絕大多數(shù)平面結構農(nóng)藥在3種高色素農(nóng)產(chǎn)品基質的3種濃度添加水平測試下，其平均回收率在70％以下，多數(shù)在40％～60％之間，甚至有一部分農(nóng)藥的添加回收率在20％～30％，有相當一部分的RSD波動范圍也超過30％。因此可以得出結論，F(xiàn)e₃O₄@MIP對葉綠素的吸附存在選擇性，它通過分子印跡材料的識別位點對葉綠素進行特異性吸附，而不影響平面結構農(nóng)藥。GCB對目標平面結構農(nóng)藥存在不同程度的吸附，從而影響農(nóng)藥的添加回收率和相對標準偏差，使得農(nóng)藥殘留測定的定量結果不準確，而Fe₃O₄@MIP對葉綠素的選擇性吸附，其效果大大優(yōu)于GCB通過物理方式對含有平面結構的物質均吸附的特性。