本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種用于細(xì)胞復(fù)蘇的恒溫水浴鍋及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

恒溫水浴鍋廣泛應(yīng)用于干燥濃縮、蒸餾、浸漬化學(xué)試劑、浸漬藥品和生物制劑，也可用于水浴恒溫加熱和其他溫度試驗(yàn)，是生物、遺傳、病毒、水產(chǎn)、環(huán)保、醫(yī)藥、衛(wèi)生、生化實(shí)驗(yàn)室、分析室和教育科研的必備工具。恒溫水浴鍋表面一般采用靜電噴涂工藝，內(nèi)膽、上蓋均采用不銹鋼板制作，抗腐蝕，使用數(shù)顯控溫，控溫精度高，性能穩(wěn)定。

傳統(tǒng)的恒溫水浴鍋是在普通的實(shí)驗(yàn)室中使用，但在層流要求較高的潔凈車間內(nèi)使用傳統(tǒng)的恒溫水浴鍋有以下缺點(diǎn)：水浴鍋內(nèi)的水在敞開(kāi)條件和適宜的溫度下易長(zhǎng)污垢及滋生細(xì)菌，通常我們會(huì)使用防腐劑，例如硫酸銅、疊氮鈉等處理，但這些物質(zhì)有毒有害，且易腐蝕不銹鋼內(nèi)壁，而且不能完全避免微生物的滋生。在細(xì)胞復(fù)蘇階段，需要將剛從液氮罐中取出的凍存管快速融化，由于凍存管會(huì)間接或直接與水浴鍋內(nèi)的水接觸，容易造成污染，因此水浴鍋的水中的微生物對(duì)細(xì)胞復(fù)蘇存在著較大的風(fēng)險(xiǎn)。因此，有必要提供一種可滅菌恒溫水浴鍋及其應(yīng)用以解決上述問(wèn)題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了解決上述問(wèn)題，本申請(qǐng)的發(fā)明人提供一種細(xì)胞復(fù)蘇的方法及一種可滅菌恒溫水浴鍋，使用前預(yù)先將不銹鋼鍋體內(nèi)加入適量的純化水后，放入濕熱滅菌柜中滅菌，并在密封條件下進(jìn)行恒溫，使水處于相對(duì)隔絕的潔凈環(huán)境中，保證了在開(kāi)蓋前的潔凈度，使用后，重新?lián)Q水滅菌，待下次細(xì)胞復(fù)蘇使用，有效降低水中微生物對(duì)細(xì)胞復(fù)蘇以及潔凈室環(huán)境的影響。

因此，本發(fā)明的第一個(gè)目的在于提供一種細(xì)胞復(fù)蘇的方法。

本發(fā)明的第二個(gè)目的在于提供一種可滅菌恒溫水浴鍋。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

根據(jù)本發(fā)明的第一個(gè)方面，提供了一種細(xì)胞復(fù)蘇的方法，包括將裝有待復(fù)蘇細(xì)胞的凍存管放入可滅菌恒溫水浴鍋內(nèi)融化的步驟，所述可滅菌恒溫水浴鍋包括鍋蓋、鍋體、底座、內(nèi)置溫度電極、加熱盤、磁力攪拌器、溫度攪拌控制面板、溫度控制裝置和磁力攪拌馬達(dá)，所述鍋蓋上設(shè)置有空氣過(guò)濾器，所述磁力攪拌器設(shè)置于所述鍋體內(nèi)，所述內(nèi)置溫度電極的一端設(shè)置于所述鍋體內(nèi)，另一端與所述溫度控制裝置可拆卸地電路連接，所述加熱盤設(shè)置于所述底座上，所述溫度控制裝置和所述磁力攪拌馬達(dá)集成設(shè)置于所述底座內(nèi)，所述溫度攪拌控制面板分別與所述溫度控制裝置和所述磁力攪拌馬達(dá)電路連接。

較佳的，所述將裝有待復(fù)蘇細(xì)胞的凍存管放入可滅菌恒溫水浴鍋內(nèi)融化包括以下步驟：

A、在所述鍋體中加入適量的純化水，將所述鍋蓋蓋在所述鍋體上；

B、將所述鍋體和所述鍋蓋進(jìn)行高溫滅菌；

C、滅菌結(jié)束后取出所述鍋體和所述鍋蓋，置于所述加熱盤上，將所述內(nèi)置溫度電極和所述溫度控制裝置電路連接；

D、打開(kāi)所述溫度攪拌控制面板，設(shè)定水浴溫度及攪拌速度；

E、待所述鍋體內(nèi)水浴溫度控制在設(shè)定溫度范圍內(nèi)，打開(kāi)所述鍋蓋，將裝有待復(fù)蘇細(xì)胞的凍存管放入所述鍋體內(nèi)融化。

在一具體實(shí)例中，所述空氣過(guò)濾器的外形為碟狀過(guò)濾器，接口為梯形軟管接口，與所述鍋蓋之間采用硅膠軟管連接，外殼尺寸約為62mm，內(nèi)膜采用疏水的PTFE膜作為空氣過(guò)濾介質(zhì)，所述PTFE膜的孔徑為0.2μm，可高壓滅菌重復(fù)使用，在高壓滅菌過(guò)程中用于水浴鍋內(nèi)外的氣體交換，確保水浴鍋內(nèi)外的壓力保持平衡。

較佳的，所述鍋蓋與所述鍋體之間使用橡膠密封圈密封，高溫滅菌后避免與外界微生物接觸。

較佳的，所述鍋體的外部?jī)蓚?cè)設(shè)置有把手，便于拿放，且易于鍋體內(nèi)的清潔。

較佳的，所述溫度攪拌控制面板設(shè)置于所述底座的外部。

較佳的，所述鍋體的材質(zhì)為不銹鋼。

根據(jù)本發(fā)明的第二個(gè)方面，提供了一種可滅菌恒溫水浴鍋，包括鍋蓋、鍋體、底座、內(nèi)置溫度電極、加熱盤、磁力攪拌器、溫度攪拌控制面板、溫度控制裝置和磁力攪拌馬達(dá)，所述鍋蓋上設(shè)置有空氣過(guò)濾器，所述磁力攪拌器設(shè)置于所述鍋 體內(nèi)，所述內(nèi)置溫度電極的一端設(shè)置于所述鍋體內(nèi)，另一端與所述溫度控制裝置可拆卸地電路連接，所述加熱盤設(shè)置于所述底座上，所述溫度控制裝置和所述磁力攪拌馬達(dá)集成設(shè)置于所述底座內(nèi)，所述溫度攪拌控制面板分別與所述溫度控制裝置和所述磁力攪拌馬達(dá)電路連接。

較佳的，所述鍋蓋與所述鍋體之間使用橡膠密封圈密封。

較佳的，所述鍋體的外部?jī)蓚?cè)設(shè)置有把手。

本發(fā)明的有益效果：

1、不銹鋼鍋體可隨時(shí)拿放，使用前在鍋體內(nèi)加入適量的純化水，蓋上鍋蓋放入濕熱滅菌柜中進(jìn)行滅菌，有效防止水中微生物對(duì)環(huán)境的影響。已滅菌的鍋體放置在溫度加熱盤上，通過(guò)控制面板設(shè)定水浴溫度及攪拌速度，鍋內(nèi)溫度通過(guò)加熱盤的加熱及鍋體自然散熱來(lái)實(shí)現(xiàn)恒溫控制，攪拌使溫度混合均勻，鍋體密閉性好。使用前，打開(kāi)鍋蓋，將凍存管直接放入水浴鍋內(nèi)，加快轉(zhuǎn)速，相比手動(dòng)復(fù)蘇，在操作簡(jiǎn)便性、時(shí)間、體力消耗、污染率等方面有明顯優(yōu)勢(shì)。

2、解決了潔凈車間內(nèi)恒溫水浴鍋中的水為污染源的問(wèn)題，從而有效降低水中微生物對(duì)環(huán)境的影響。本發(fā)明的可滅菌恒溫水浴鍋適用于潔凈車間，能有效控溫、恒溫，最大可能地降低水浴鍋對(duì)潔凈環(huán)境的影響的同時(shí)，對(duì)細(xì)胞復(fù)蘇的安全性提供了很高的保障。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明的可滅菌恒溫水浴鍋的主視圖。

圖2為本發(fā)明的可滅菌恒溫水浴鍋的俯視圖。

附圖標(biāo)記說(shuō)明：1-空氣過(guò)濾器；2-把手；3-內(nèi)置溫度電極；4-加熱盤；5-鍋蓋；6-鍋體；7-磁力攪拌器；8-溫度攪拌控制面板；9-底座。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。

如圖1和圖2所示，本發(fā)明的可滅菌恒溫水浴鍋，包括鍋蓋5、鍋體6、底座9、內(nèi)置溫度電極3、加熱盤4、磁力攪拌器7、溫度攪拌控制面板8、溫度控制裝置和 磁力攪拌馬達(dá)。

鍋蓋5上設(shè)置有空氣過(guò)濾器1，用于高溫濕熱滅菌過(guò)程中氣體的置換。鍋蓋5與鍋體6之間使用橡膠密封圈密封，高溫滅菌后避免與外界微生物接觸。鍋體6的外部?jī)蓚?cè)設(shè)置有把手2，便于拿放，且易于鍋體內(nèi)的清潔。鍋體6的材質(zhì)優(yōu)選為不銹鋼。磁力攪拌器7設(shè)置于鍋體6內(nèi)，用于攪拌。內(nèi)置溫度電極3的一端設(shè)置于鍋體6內(nèi)，另一端與溫度控制裝置電路連接，用于測(cè)定水浴溫度。加熱盤4設(shè)置于底座9上，用于放置鍋體6。溫度攪拌控制面板8分別與溫度控制裝置和磁力攪拌馬達(dá)電路連接，用于設(shè)定水浴溫度和攪拌速度。優(yōu)選的，溫度攪拌控制面板8設(shè)置于底座9的外部。溫度控制裝置和磁力攪拌馬達(dá)集成設(shè)置于底座9內(nèi)，設(shè)定溫度后，通過(guò)溫度控制裝置調(diào)節(jié)水浴溫度，同時(shí)通過(guò)磁力攪拌馬達(dá)驅(qū)動(dòng)磁力攪拌器7轉(zhuǎn)動(dòng)，使鍋體6內(nèi)的水混合均勻，加熱效果好。

優(yōu)選的，空氣過(guò)濾器1外形為碟狀過(guò)濾器，接口為梯形軟管接口，與鍋蓋5之間采用硅膠軟管連接，外殼尺寸約為62mm，內(nèi)膜采用疏水的PTFE膜作為空氣過(guò)濾介質(zhì)，孔徑為0.2μm，可高壓滅菌重復(fù)使用，在高壓滅菌過(guò)程中用于水浴鍋內(nèi)外的氣體交換，確保水浴鍋內(nèi)外的壓力保持平衡。

本發(fā)明的可滅菌恒溫水浴鍋用于細(xì)胞復(fù)蘇的方法包括以下步驟：

1、首先將鍋蓋5打開(kāi)，使用把手2將鍋體6拿起，使用純化水將鍋體6內(nèi)壁清洗干凈后，加入適量的純化水，將已安裝好空氣過(guò)濾器1的鍋蓋5蓋在鍋體6上，使鍋蓋5與鍋體6間的橡膠密封圈密封良好；

2、將上述裝好純化水的鍋體6和鍋蓋5放置于濕熱滅菌柜中高溫滅菌；

3、滅菌結(jié)束后取出鍋體6和鍋蓋5，此時(shí)不要將鍋蓋5打開(kāi)，避免與外界接觸，利用空氣過(guò)濾器1置換氣體，待鍋體溫度稍降低后，置于加熱盤4上，將內(nèi)置溫度電極3和溫度控制裝置電路連接；

4、打開(kāi)溫度攪拌控制面板8，設(shè)定水浴溫度及攪拌速度，鍋體6內(nèi)的溫度通過(guò)加熱盤4的加熱及鍋體6自然散熱來(lái)實(shí)現(xiàn)恒溫控制，配合磁力攪拌器7，使加熱恒溫效果快且均勻；

5、待鍋體6內(nèi)水浴溫度控制在設(shè)定溫度范圍內(nèi)，打開(kāi)鍋蓋5，將剛從液氮罐中取出的裝有待復(fù)蘇細(xì)胞的凍存管放入鍋體內(nèi)快速融化，此時(shí)凍存管外壁與水浴鍋內(nèi)已滅菌的水接觸，有效控制水浴鍋內(nèi)水中微生物對(duì)細(xì)胞復(fù)蘇環(huán)節(jié)帶來(lái)的污染風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)配合攪拌，加快轉(zhuǎn)速，相比手動(dòng)復(fù)蘇，操作簡(jiǎn)便、節(jié)約時(shí)間、節(jié)省體力消耗、降低污染率，最重要的是能保證每次復(fù)蘇細(xì)胞操作的一致性，滿足日益嚴(yán)格的GMP要求；

6、水浴鍋使用結(jié)束后，可將鍋體6內(nèi)的水廢棄，清潔鍋體6，待下次細(xì)胞復(fù)蘇前按照上述方法使用。