生物酶法制備花生蛋白胨的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及生物酶法制備花生蛋白胨的方法，屬于用于工業(yè)發(fā)酵的氮源培養(yǎng)基生產(chǎn)制備方法領(lǐng)域。生物酶法制備花生蛋白胨的方法，包括步驟一，烘干粉碎；步驟二，生物酶解；步驟三，離心分離；步驟四，干燥和收集。由本方法所得的發(fā)酵專(zhuān)用花生蛋白胨中的花生粕蛋白通過(guò)生物酶解和噴霧干燥技術(shù)，酶反應(yīng)條件溫和，工藝設(shè)備要求簡(jiǎn)單，得到的花生蛋白胨成分比例適當(dāng)，解決了工業(yè)發(fā)酵中對(duì)營(yíng)養(yǎng)全面的氮源培養(yǎng)基的需求問(wèn)題，滿足了工業(yè)發(fā)酵過(guò)程中合成代謝產(chǎn)物的要求，而且該發(fā)酵專(zhuān)用培養(yǎng)基能夠?yàn)槲⑸锇l(fā)酵產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的過(guò)程中，提供適宜的各種活性蛋白多肽等，從而能夠有效地提高發(fā)酵水平，為發(fā)酵企業(yè)創(chuàng)造更大的經(jīng)濟(jì)效益。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
生物酶法制備花生蛋白胨的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及生物酶法制備花生蛋白胨的方法，屬于用于工業(yè)發(fā)酵的氮源培養(yǎng)基生產(chǎn)制備方法領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]目前工業(yè)發(fā)酵，特別是抗生素發(fā)酵如白介素、鏈霉菌素、阿維菌素、等主要用蛋白胨作為培養(yǎng)基的主要氮源。一般的花生餅經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單的粉碎加工，花生餅中蛋白質(zhì)含量?jī)H46%左右，蛋白含量低，蛋白分子量大，這些主要應(yīng)用于飼料養(yǎng)殖方面，然而生物醫(yī)藥發(fā)酵對(duì)氮源的需求越來(lái)越大，品質(zhì)越來(lái)越高，要求花生蛋白胨的蛋白含量高達(dá)85%以上，并且含有豐富的多肽和微生物發(fā)酵所需的前提物質(zhì)等，通過(guò)對(duì)花生柏的深加工，制備成花生蛋白胨可以拓展其在工業(yè)發(fā)酵領(lǐng)域的應(yīng)用。利用生物酶工程技術(shù)，將特定的酶分批次對(duì)花生柏進(jìn)行酶解，在多種酶的協(xié)同作用條件下對(duì)花生柏進(jìn)行可控化酶解，將蛋白水解成蛋白多肽等物質(zhì)，通過(guò)離心分離和噴霧干燥等技術(shù)，進(jìn)行提取，制備出花生蛋白胨。因此，利用花生柏制造出滿足工業(yè)發(fā)酵用氮源培養(yǎng)基的需要，將大大緩解國(guó)內(nèi)植物蛋白胨短缺的問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供生物酶法制備花生蛋白胨的方法，可通過(guò)對(duì)花生柏的深加工制備一種發(fā)酵專(zhuān)用花生蛋白胨，以解決微生物發(fā)酵行業(yè)中對(duì)營(yíng)養(yǎng)需求的個(gè)性化問(wèn)題，滿足了工業(yè)發(fā)酵過(guò)程中不同發(fā)酵階段的氮源需求，提供適宜的豐富的前體物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)素等，大幅度地提高發(fā)酵水平，提高花生蛋白胨的生物利用率，減少發(fā)酵企業(yè)對(duì)廢渣等的處理。
[0004]
本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn):
生物酶法制備花生蛋白胨的方法，包括如下步驟:步驟一，烘干粉碎:取新鮮的花生柏進(jìn)行烘干，粉碎過(guò)篩后，得到花生柏粉備用;步驟二，生物酶解:按照料水質(zhì)量比為1:4?1:6，將花生柏粉與水混合均勻，然后分為兩步進(jìn)行酶解:首先，按照花生柏粉質(zhì)量0.13?0.21 %的比例加入木瓜蛋白酶，于50?65 °C的酶解2?5h，酶解過(guò)程中控制pH值為6.0?7.5；其次，按照花生柏粉質(zhì)量0.04?0.15%的比例加入風(fēng)味蛋白酶，于53?66°C的酶解2?4h，酶解過(guò)程中控制pH值為6.5?7.5 ；酶解完成后酶解液加熱至85?95 °C滅酶;步驟三，離心分離:將酶解液離心分離得到殘?jiān)蜕锨逡?，備?步驟四，干燥和收集:將上清液干燥5?10h，然后收集得到花生蛋白胨。
[0005]進(jìn)一步，在步驟一中，烘干的溫度為90?105°C，干燥至含水量<10%，粉碎后過(guò)20?40目篩網(wǎng)。
[0006]進(jìn)一步，在步驟二中，木瓜蛋白酶的酶活力為500000U/g;風(fēng)味蛋白酶的酶活力為30000U/go
[0007]進(jìn)一步，在步驟三中，所述離心分離所用的離心機(jī)轉(zhuǎn)速為4900r/min?5500r/min。
[0008]進(jìn)一步，在步驟四中，所述干燥采用噴霧干燥技術(shù)，噴霧干燥機(jī)的進(jìn)風(fēng)溫度為110?130°C，出風(fēng)溫度為70?85°C。
[0009]進(jìn)一步，噴霧干燥機(jī)所設(shè)計(jì)的噴霧噴嘴直徑為3?5μπι，以保證花生蛋白胨的直徑<5ym0
[0010]由上述步驟所得花生蛋白胨的蛋白含量85.9?95.6%,多肽含量65.7?75.3%，月旨肪含量0.51?0.85%，灰分含量2.6?3.9%。
[0011]本發(fā)明的有益效果是:工藝簡(jiǎn)單、環(huán)境友好、操作方便，生產(chǎn)成本低；由本方法所得的發(fā)酵專(zhuān)用花生蛋白胨中的花生柏蛋白通過(guò)生物酶解和噴霧干燥技術(shù)，酶反應(yīng)條件溫和，工藝設(shè)備要求簡(jiǎn)單，得到的花生蛋白胨成分比例適當(dāng)，解決了工業(yè)發(fā)酵中對(duì)營(yíng)養(yǎng)全面的氮源培養(yǎng)基的需求問(wèn)題，滿足了工業(yè)發(fā)酵過(guò)程中合成代謝產(chǎn)物的要求，而且該發(fā)酵專(zhuān)用培養(yǎng)基能夠?yàn)槲⑸锇l(fā)酵產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的過(guò)程中，提供適宜的各種活性蛋白多肽等，從而能夠有效地提高發(fā)酵水平，為發(fā)酵企業(yè)創(chuàng)造更大的經(jīng)濟(jì)效益。
【附圖說(shuō)明】
[0012]圖1為本發(fā)明生物酶法制備花生蛋白胨的方法流程示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0013]以下對(duì)本發(fā)明的原理和特征進(jìn)行描述，所舉實(shí)例只用于解釋本發(fā)明，并非用于限定本發(fā)明的范圍。
[00Μ]下述實(shí)施例中所用木瓜蛋白酶的酶活力力為500000 U/g，風(fēng)味蛋白酶的酶活力力為30000U/g，均為南寧龐博生物工程有限公司生產(chǎn)并市售。
[0015]實(shí)施例1
生物酶法制備花生蛋白胨的方法，按如下步驟進(jìn)行:
步驟一，取新鮮的花生柏，在90°C下干燥后，使其水分為10%的條件下，經(jīng)過(guò)粉碎并通過(guò)20目網(wǎng)篩，取過(guò)篩后的物料，得花生柏粉。
[0016]步驟二，將由步驟一得到的花生柏粉按照料水質(zhì)量比1:4將花生柏粉與水混合均勻，然后分兩步進(jìn)行酶解:首先，按照花生柏粉質(zhì)量0.13%的比例加木瓜蛋白酶，于50°C的酶解2h，酶解過(guò)程中控制pH值為6.0;其次，按照花生柏粉質(zhì)量0.04 %的比例加入風(fēng)味蛋白酶，于53 °C的酶解2h，酶解過(guò)程中控制pH值為6.5 ；酶解完成后酶解液加熱至85 °C滅酶。
[0017]步驟三，離心分離:將酶解液在離心的轉(zhuǎn)速為4900r/min的條件下離心，得到殘?jiān)蜕锨逡?，備用?br>[0018]步驟四，干燥和收集:將步驟三中的上清液用噴霧干燥機(jī)進(jìn)行干燥，干燥條件為進(jìn)風(fēng)溫度110°c，出風(fēng)溫度為70°C，然后收集得到花生蛋白胨。
[0019]通過(guò)上述步驟所得的發(fā)酵專(zhuān)用花生蛋白胨，蛋白含量85.9%，多肽含量65.7%，脂肪含量0.51%，灰分含量2.6%。
[0020]實(shí)施例2
生物酶法制備花生蛋白胨的方法，按如下步驟進(jìn)行:
步驟一，取新鮮的花生柏，在100°c下干燥后，使其水分為9%的條件下，經(jīng)過(guò)粉碎并通過(guò)30目網(wǎng)篩，取過(guò)篩后的物料，得花生柏粉。
[0021]步驟二，將由步驟一得到的花生柏粉按照料水質(zhì)量比1:5將花生柏粉與水混合均勻，然后分兩步進(jìn)行酶解:首先，按照花生柏粉質(zhì)量0.18%的比例加木瓜蛋白酶，于55°C的酶解3h，酶解過(guò)程中控制pH值為7.0;其次，按照花生柏粉質(zhì)量0.10 %的比例加入風(fēng)味蛋白酶，于60 0C的酶解3h，酶解過(guò)程中控制pH值為7.2 ；酶解完成后酶解液加熱至90 °C滅酶。
[0022]步驟三，離心分離:將酶解液在離心的轉(zhuǎn)速為5100r/min的條件下離心，得到殘?jiān)蜕锨逡海瑐溆谩?br>[0023]步驟四，干燥和收集:將步驟三中的上清液用噴霧干燥機(jī)進(jìn)行干燥，干燥條件為進(jìn)風(fēng)溫度120°C，出風(fēng)溫度為75°C，然后收集得到花生蛋白胨。
[0024]通過(guò)上述步驟所得的發(fā)酵專(zhuān)用花生蛋白胨，蛋白含量90.4%，多肽含量67.3%，脂肪含量0.61%，灰分含量3.2%。
[0025]實(shí)施例3
生物酶法制備花生蛋白胨的方法，按如下步驟進(jìn)行:
步驟一，取新鮮的花生柏，在105°C下干燥后，使其水分為8%的條件下，經(jīng)過(guò)粉碎并通過(guò)40目網(wǎng)篩，取過(guò)篩后的物料，得花生柏粉。
[0026]步驟二，將由步驟一得到的花生柏粉按照料水質(zhì)量比1:6將花生柏粉與水混合均勻，然后分兩步進(jìn)行酶解:首先，按照花生柏粉質(zhì)量0.21%的比例加木瓜蛋白酶，于65°C的酶解5h，酶解過(guò)程中控制pH值為7.5;其次，按照花生柏粉質(zhì)量0.15 %的比例加入風(fēng)味蛋白酶，于53?66 °C的酶解4h，酶解過(guò)程中控制pH值為7.5 ；酶解完成后酶解液加熱至95 °C滅酶。
[0027]步驟三，離心分離:將酶解液在離心的轉(zhuǎn)速為5500r/min的條件下離心，得到殘?jiān)蜕锨逡?，備用?br>[0028]步驟四，干燥和收集:將步驟三中的上清液用噴霧干燥機(jī)進(jìn)行干燥，干燥條件為進(jìn)風(fēng)溫度130°C，出風(fēng)溫度為85°C，然后收集得到花生蛋白胨。
[0029]通過(guò)上述步驟所得的發(fā)酵專(zhuān)用花生蛋白胨，蛋白含量95.6%，多肽含量75.3%，脂肪含量0.85%，灰分含量3.9%。
[0030]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的原理和特征之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.生物酶法制備花生蛋白胨的方法，其特征在于，包括: 步驟一，烘干粉碎:取新鮮的花生柏進(jìn)行烘干，粉碎過(guò)篩后，得到花生柏粉備用； 步驟二，生物酶解:按照料水質(zhì)量比為1:4?1:6，將花生柏粉與水混合均勻，然后分為兩步進(jìn)行酶解:首先，按照花生柏粉質(zhì)量0.13?0.21 %的比例加入木瓜蛋白酶，于50?65°C的酶解2?5h，酶解過(guò)程中控制pH值為6.0?7.5 ；其次，按照花生柏粉質(zhì)量0.04?0.15 %的比例加入風(fēng)味蛋白酶，于53?66 °C的酶解2?4h，酶解過(guò)程中控制pH值為6.5?7.5 ；酶解完成后酶解液加熱至85?95 °C滅酶； 步驟三，離心分離:將酶解液離心分離得到殘?jiān)蜕锨逡?，備用? 步驟四，干燥和收集:將上清液干燥5?10h，然后收集得到花生蛋白胨。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物酶法制備花生蛋白胨的方法，其特征在于，在步驟一中，烘干的溫度為90?105°C，干燥至含水量<10%，粉碎后過(guò)20?40目篩網(wǎng)。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物酶法制備花生蛋白胨的方法，其特征在于，在步驟二中，木瓜蛋白酶的酶活力為500000U/g;風(fēng)味蛋白酶的酶活力為30000U/g。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物酶法制備花生蛋白胨的方法，其特征在于，在步驟三中，所述離心分離所用的裝置為離心機(jī)，轉(zhuǎn)速為4900r/min?5500r/min。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物酶法制備花生蛋白胨的方法，其特征在于，在步驟四中，所述干燥采用噴霧干燥機(jī)進(jìn)行，噴霧干燥機(jī)的進(jìn)風(fēng)溫度為110?130°C，出風(fēng)溫度為70?85Γ。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的生物酶法制備花生蛋白胨的方法，其特征在于，噴霧干燥機(jī)所設(shè)計(jì)的噴霧噴嘴直徑為3?5μπι，以保證花生蛋白胨的直徑<5μπι。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物酶法制備花生蛋白胨的方法，其特征在于，在步驟四中，所述花生蛋白胨的蛋白含量85.9?95.6%,多肽含量65.7?75.3%，脂肪含量0.51?0.85%，灰分含量2.6?3.9%。
【文檔編號(hào)】C12P21/06GK106011210SQ201610606356
【公開(kāi)日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年7月29日
【發(fā)明人】常藝海, 別松濤, 岳新建, 王因博, 畢婷
【申請(qǐng)人】河南振新生物技術(shù)股份有限公司