一種高含量蒜氨酸的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[OOCM ]本發(fā)明涉及一種大赫提取物的生廣工藝，具體涉及一種尚含量赫氣酸的制備方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 大蒜是百合科蔥屬植物蒜的地下鱗莖?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證實，大蒜集100多種藥用和 保健于一身，其中含硫揮發(fā)物43種，硫化亞磺酸(如大蒜素)酯類13種、氨基酸9種、肽類8種、 甙類12種、酶類11種。它對健康的廣泛益處歸功于含硫化合物，有機硫化物中蒜氨酸、大蒜 素、雙烯丙基二硫化物(DADS)、S-烯丙基.L-半胱氨酸(SAC)和幾種儲備縮二氨酸均參與了 大蒜抗心血管病和抗癌的保護機制，可以有效降低心血管和癌癥的風(fēng)險。其中蒜氨酸是大 蒜獨具的成分，主要存在于大蒜鱗莖的細胞中，是大蒜中含量最多的含硫化合物，也是大蒜 中獨特的非蛋白類的含硫氨基酸。蒜氨酸大約占大蒜干重的0.6%-2%，在水中極易溶解，不 溶于純無水乙醇、氯仿、丙酮、乙醚和苯。蒜氨酸無氣味，并且穩(wěn)定，具有抗氧化、清除自由 基、抗血栓、抗腫瘤等功效。當(dāng)它進入血液時便成為大蒜素，這種大蒜素即使稀釋10萬倍仍 能在瞬間殺死傷寒桿菌、痢疾桿菌流感病毒等。此外，大蒜還能促進新陳代謝，降低膽固醇 和甘油三酯的含量，并有降血壓、降血糖的作用，故對高血壓、高血脂、動脈硬化糖尿病等有 一定療效?，F(xiàn)有技術(shù)雖然對大蒜提取物已經(jīng)有很多方面研究，但是關(guān)于其中的一種含硫化 合物-蒜氨酸的高效分離提取的生產(chǎn)工藝還不夠成熟。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是提供了一種更加高效快捷的蒜氨酸分離提取工藝，從而制得高含 量蒜氨酸的大蒜提取物。
[0004] 為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下： 一種高含量蒜氨酸的制備方法，所述制備方法包括以下步驟： (1) 對去皮的大蒜進行尚火微波加熱處理； (2) 加入乙酸乙酯進行打漿，并過篩，所述大蒜和乙酸乙酯的質(zhì)量體積比為1:1-1:4; (3) 棄乙酸乙酯層，收集濾渣，并按所述濾渣與提取劑質(zhì)量體積比為1:1-1:5進行提 取，超聲提取，離心； (4) 收集提取并離心過濾后的所有濾液，旋蒸濃縮至總體積的1/5-1/10倍； (5) 用鹽酸調(diào)節(jié)濃縮液的pH值至小于4.5; (6) 用強酸型陽離子交換樹脂進行分離，待濃縮液上柱吸附后，用0.2M-1M的氨水進行 洗脫，收集組分，進行TLC鑒定，確定蒜氨酸存在的所有組分并收集匯總，旋蒸濃縮至總體積 的 1/5-1/10 倍； (7) 將濃縮液干燥后，即獲得蒜氨酸粗品； (8) 向蒜氨酸粗品中加入乙醇水溶液，冷藏靜置結(jié)晶，得蒜氨酸精品。
[0005] 進一步的:所述步驟(1)中對大蒜進行高火微波加熱處理的時間為l_8min。
[0006]進一步的:所述步驟(2)中大蒜和乙酸乙酯的質(zhì)量體積比為1:2,并過20目篩。
[0007] 進一步的:所述步驟(3)中提取劑為體積比為20%_80%的乙醇水溶液。
[0008] 進一步的:所述步驟(3)中超聲提取3次，每次時間10-20min，4000rpm離心10min。 [0009]進一步的:所述步驟(4)中旋蒸溫度控制在55°C_70°C。
[0010] 進一步的:所述步驟(5)中用0.5M-2.5M的鹽酸調(diào)節(jié)濃縮液的pH值。
[0011] 進一步的:所述步驟(6)中用強酸型陽離子交換樹脂732型進行分離。
[0012] 進一步的:所述步驟(6)中旋蒸溫度控制55°C_70°C。
[0013] 進一步的:所述步驟(8)中用40%-85%乙醇水溶液溶解蒜氨酸粗品。
[0014]本發(fā)明具有下列優(yōu)點和效果： (1) 本發(fā)明選用有機溶劑乙酸乙酯而非純水進行打漿，可以更加有效地除去大蒜中其 他的非親水性雜質(zhì)； (2) 本發(fā)明選用50%的乙醇水溶液而非純水進行提取，可以減少其他親水性成分的影 響，還可以減少后續(xù)的旋蒸濃縮時間； (3) 控制旋蒸溫度在60°C可以保證蒜氨酸濃縮液的穩(wěn)定性； (4) 調(diào)整pH值小于4.5可以保證蒜氨酸濃縮液上柱后的吸附效果； (5) 最終制備蒜氨酸精品時，選擇70%乙醇溶解蒜氨酸粗品進行結(jié)晶，收率更尚。
[0015] 本發(fā)明的目的是獲得尚含量蒜氨酸的大蒜提取物，在提取過程中，既要考慮收率， 又要考慮除雜率，所以本發(fā)明通過改變打漿劑，提取劑，控制旋蒸濃縮時的溫度，調(diào)節(jié)濃縮 液的PH值，選擇合適的洗脫液濃度以及對蒜氨酸粗品進行結(jié)晶時的溶劑等各個方面，對蒜 氨酸的提取分離工藝實現(xiàn)最優(yōu)化，從而最終獲得高含量蒜氨酸的大蒜提取物。本發(fā)明制備 方法最終制得的大蒜提取物中的蒜氨酸含量更高，雜質(zhì)更少。
【具體實施方式】
[0016] 下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案做進一步詳細的說明。
[0017] 實施例1 本實施例所述高含量蒜氨酸的制備方法包括以下步驟： 1、 稱取去皮、干凈的大蒜瓣l〇〇g，高火微波加熱Imin后； 2、 用200ml的乙酸乙酯進行打漿，然后過20目篩； 3、 棄乙酸乙酯層，收集濾渣，然后加入100mL 20%的乙醇水溶液，混勻后，超聲提取，時 間15min，4000rpm離心10min，再重復(fù)提取2次，每次均加入100mL提取劑，震蕩混勾，超聲，離 心； 4、 收集3次提取后的濾液，60°C旋蒸濃縮至約35ml; 5、 之后用2M的鹽酸調(diào)節(jié)濃縮液pH值至小于4.5; 6、 用強酸型陽離子交換樹脂732型進行進一步分離，然后用0.5M的氨水進行洗脫，每 50ml-個收集瓶。TLC鑒定出蒜氨酸所在的所有組分，匯總后，60°C旋蒸濃縮； 7、 濃縮液干燥后獲得蒜氨酸粗品； 8、 最后用40%乙醇水溶液溶解上述粗品，冷藏靜置，結(jié)晶，即得蒜氨酸精品。
[0018] 本發(fā)明中乙醇水溶液的比例均為乙醇與總?cè)芤旱捏w積比例。
[0019] 本發(fā)明中，采用高火微波加熱的方式對大蒜瓣進行滅酶處理，時間l-8min，優(yōu)選時 間為5min。
[0020]本發(fā)明中，選用乙酸乙酯作為勻漿溶劑，大蒜和乙酸乙酯的質(zhì)量體積比為1:1-1: 4,優(yōu)選比例為1: 2。
[0021 ] 本發(fā)明中，選用20%-80%的乙醇水溶液作為提取劑，優(yōu)選提取劑為50%乙醇水溶液。 勻漿后的濾渣與提取劑的總質(zhì)量體積比為1:1-1:5,提取3次，優(yōu)選比例為1: 3。
[0022]本發(fā)明中，旋蒸濃縮時控制溫度在55°C_70°C，優(yōu)選溫度為60°C;旋蒸濃縮至總體 積的1 /5-1 /10，優(yōu)選濃縮至總體積的1 /8或者I /10。