云芝多糖的提取制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及云芝有效成分的提取方法，尤其涉及一種云芝多糖的提取制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]云芝多糖是藥用真菌云芝的藥用成分之一，可從擔(dān)子菌雜色云芝菌種提取，也可從人工培養(yǎng)的菌絲體中分離得到，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)功能，是良好的免疫增強(qiáng)劑，具有保護(hù)肝臟的功能，可顯著降低血清轉(zhuǎn)氨酶，對肝組織病變和肝壞死有明顯修復(fù)作用。傳統(tǒng)的云芝多糖的提取方法為熱水提取法，即將云芝浸泡在熱水中，高溫煎煮，從云芝中提取出水溶性多糖，但此方法耗時長，多糖的提取率較低，成本高，而且云芝提取物中大分子蛋白質(zhì)含量高，因云芝多糖是含糖苷鍵的葡聚糖，而大分子蛋白質(zhì)會影響其溶解性和吸收率，限制其生物活性，造成提取得到的云芝多糖腫瘤細(xì)胞抑制率較低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，本發(fā)明提供了一種云芝多糖的提取制備方法，在簡化提取工藝，縮短提取時間的同時，還可以提高云芝多糖的提取率，保證云芝中多糖類有效成分被充分提取，而且有效避免提取操作對云芝多糖生物活性的影響，提高獲得的云芝多糖的生物活性。
[0004]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明云芝多糖的提取制備方法，包括以下步驟:
[0005]a、微波浸提:將云芝子實(shí)體粉碎，過10?20目篩，得到的云芝子實(shí)體粉末加水浸泡，然后于55?60°C下微波浸提，過濾，收集濾液，得到的濾渣再加水浸泡，于55?60°C下再次微波浸提，過濾，收集濾液，將兩次濾液合并，得到云芝多糖水浸液;所述微波浸提操作中微波頻率為2450MHz，微波浸提時間為10?20分鐘；
[0006]b、醇析:向步驟a得到的云芝多糖水浸液不斷加入乙醇，攪拌混合均勻，使云芝多糖水浸液中乙醇的質(zhì)量含量達(dá)到75 %時，停止加入、停止攪拌，于55?60°C下靜置24小時以上，得到有大量沉淀析出的溶液，收集沉淀，將沉淀離心甩干，即為云芝多糖提取物。
[0007]本發(fā)明的提取制備方法，通過將云芝子實(shí)體粉末用水浸泡后再于55?60°C下進(jìn)行微波提取，利用微波作用，一方面對云芝細(xì)胞破壁，使云芝多糖充分溶解，提高提取率;另一方面對提取物中的大分子蛋白質(zhì)進(jìn)行微波分解，解決大分子蛋白質(zhì)對云芝多糖生物活性的影響，提高云芝多糖的生物活性;再一方面相對于加熱、煎煮提取可保護(hù)云芝多糖的生物活性，并有效縮短提取時間，減少云芝多糖在長時間提取過程的損失；另外，通過兩次微波浸提操作從云芝子實(shí)體中充分、高效地提取云芝多糖。之后利用乙醇作為溶析劑，將云芝多糖從水浸液中析出、沉淀、離心甩干，避免加熱干燥對云芝多糖活性的損耗，從而得到高生物活性的云芝多糖提取物。該提取制備方法，可簡化提取工藝，縮短提取時間，而且還可提高云芝多糖的提取率，提高獲得的云芝多糖的生物活性。
[0008]作為對上述方法的限定，步驟a所述云芝子實(shí)體粉末加水浸泡操作中加水量為云芝子實(shí)體粉末重量的3倍，浸泡時間為2小時。
[0009]作為對上述方法的限定，步驟a所述濾渣加水浸泡操作中加水量為濾渣重量的2倍，浸泡時間為I小時。
[0010]先浸泡再微波浸提，充分發(fā)揮微波作用效果，降低對提取物的影響，通過限定水浸泡用量和浸泡時間，使微波提取達(dá)到最佳。
[0011 ]作為對上述方法的限定，步驟a所述過濾操作為板框過濾。
[0012]作為對上述方法的限定，步驟b所述云芝多糖水浸液不斷加入乙醇操作中加入的乙醇為質(zhì)量含量為95%的乙醇。
[0013]作為對上述方法的限定，步驟b所述靜置時間為26?28小時。
[0014]綜上所述，采用本發(fā)明的提取制備方法，獲得的云芝多糖提取物，含量高，生物活性高，對腫瘤細(xì)胞的抑制率有顯著提高。本發(fā)明的提取制備方法提取工藝簡單，縮短提取時間的同時，還可顯著提高云芝多糖的提取率，降低生產(chǎn)成本，適于大規(guī)模工業(yè)化應(yīng)用。
【具體實(shí)施方式】
[0015]實(shí)施例一
[0016]本實(shí)施例涉及一組云芝多糖的提取制備方法。
[0017]實(shí)施例1.1
[0018]本實(shí)施例涉及云芝多糖的提取制備，該提取制備方法包括以下步驟:
[0019]a、微波浸提:將云芝子實(shí)體粉碎，過20目篩，得到的云芝子實(shí)體粉末加水浸泡2小時，加水量為云芝子實(shí)體粉末重量的3倍，然后于55?60°C、微波頻率為2450MHz下微波浸提20分鐘，板框過濾，收集濾液，得到的濾渣再加入濾渣重量2倍的水浸泡I小時，于55?60°C、微波頻率為2450MHz下，再次微波浸提20分鐘，板框過濾，收集濾液，將兩次濾液合并，得到云芝多糖水浸液；
[0020]b、醇析:向步驟a得到的云芝多糖水浸液不斷加入質(zhì)量含量為95%的乙醇，攪拌混合均勻，使云芝多糖水浸液中乙醇的質(zhì)量含量達(dá)到75%時，停止加入、停止攪拌，于55?60°C下靜置26小時，得到有大量沉淀析出的溶液，棄掉上清液，將沉淀裝入離心機(jī)，離心甩干，得到的沉淀物裝于密閉容器，既得云芝多糖提取物。
[0021 ]該提取制備方法的提取收率為27.5% (按干燥品計算)，獲得的75:芝多糖，呈棕褐色粉末，其含量為46.8%(按干燥品計算)，干燥失重為40- 50 %，可直接應(yīng)用于患者，生物活性尚°
[0022]實(shí)施例1.2
[0023]本實(shí)施例涉及云芝多糖的提取制備，該提取制備方法包括以下步驟:
[0024]a、微波浸提:將云芝子實(shí)體粉碎，過10目篩，得到的云芝子實(shí)體粉末加55?60°C水浸泡2小時，加水量為云芝子實(shí)體粉末重量的3倍，然后于55?60°C、微波頻率為2450MHz下微波浸提15分鐘，板框過濾，收集濾液，得到的濾渣再加入濾渣重量2倍的55?60°C水浸泡I小時，于55?60°C、微波頻率為2450MHz下，再次微波浸提15分鐘，板框過濾，收集濾液，將兩次濾液合并，得到云芝多糖水浸液；
[0025]b、醇析:向步驟a得到的云芝多糖水浸液不斷加入質(zhì)量含量為95%乙醇，攪拌混合均勻，使云芝多糖水浸液中乙醇的質(zhì)量含量達(dá)到75%時，停止加入、停止攪拌，于55?60°C下靜置28小時，得到有大量沉淀析出的溶液，棄掉上清液，將沉淀裝入離心機(jī)，離心甩干，得到的沉淀物裝于密閉容器，既得云芝多糖提取物。
[0026]該提取制備方法的提取收率為26.5% (按干燥品計算)，獲得的75:芝多糖，呈棕褐色的粉末，其含量為46% (按干燥品計算)，干燥失重為40-50%，可直接應(yīng)用于患者，生物活性尚°
[0027]實(shí)施例二
[0028]本實(shí)施例涉及一組關(guān)于云芝多糖的提取制備方法的對照實(shí)驗(yàn)。
[0029]實(shí)施例2.1
[0030]本實(shí)施例與實(shí)施例1.1相同，提取收率之25% (按干燥品計算)，獲得的云芝多糖提取物，呈棕褐色粉末，其含量2 45% (按干燥品計算)，干燥失重40-50%,生物活性高。
[0031]實(shí)施例2.2
[0032]本實(shí)施例采用傳統(tǒng)云芝多糖提取工藝，提取收率為20%(按干燥品計算)，獲得的云芝多糖提取物，呈黑褐色粉末，粉末顯焦糊，其含量為40 % (按干燥品計算)，干燥失重為4-5%，生物活性低。
[0033]實(shí)施例2.3
[0034]本實(shí)施例與實(shí)施例1.1基本相同，不同之處在于微波浸提操作重復(fù)進(jìn)行3次，提取收率為25.2% (按干燥品計算)，獲得的云芝多糖提取物，呈棕褐色粉末，其含量為45% (按干燥品計算)，干燥失重為40-50%，生物活性稍低于實(shí)施例2.1，顯著高于實(shí)施例2.2。
[0035]實(shí)施例2.4
[0036]本實(shí)施例與實(shí)施例1.1基本相同，不同之處在于得到的云芝子實(shí)體粉末加水后不經(jīng)過浸泡，混合均勻直接微波浸提，提取收率為22%(按干燥品計算)，獲得的云芝多糖提取物，呈棕褐色粉末，其含量為43% (按干燥品計算)，干燥失重為40-50%，生物活性稍低于實(shí)施例2.1，顯著高于實(shí)施例2.2。
[0037]對比實(shí)施例2.1、2.2、2.3、2.4的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，本發(fā)明所述的云芝多糖的提取制備方法能夠顯著提高云芝多糖的提取收率、含量和生物活性，簡化提取工藝步驟，適用于工業(yè)應(yīng)用。
【主權(quán)項】
1.一種云芝多糖的提取制備方法，其特征在于，該提取制備方法包括以下步驟: a、微波浸提:將云芝子實(shí)體粉碎，過10?20目篩，得到的云芝子實(shí)體粉末加水浸泡，然后于55?60°C下微波浸提，過濾，收集濾液，得到的濾渣再加水浸泡，于55?60°C下再次微波浸提，過濾，收集濾液，將兩次濾液合并，得到云芝多糖水浸液;所述微波浸提操作中微波頻率為2450MHz，微波浸提時間為10?20分鐘； b、醇析:向步驟a得到的云芝多糖水浸液不斷加入乙醇，攪拌混合均勻，使云芝多糖水浸液中乙醇的質(zhì)量含量達(dá)到75%時，停止加入、停止攪拌，于55?60°C下靜置24小時以上，得到有大量沉淀析出的溶液，收集沉淀，將沉淀離心甩干，即為云芝多糖提取物。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的云芝多糖的提取制備方法，其特征在于:步驟a所述云芝子實(shí)體粉末加水浸泡操作中加水量為云芝子實(shí)體粉末重量的3倍，浸泡時間為2小時。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的云芝多糖的提取制備方法，其特征在于:步驟a所述濾渣加水浸泡操作中加水量為濾渣重量的2倍，浸泡時間為I小時。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的云芝多糖的提取制備方法，其特征在于:步驟a所述過濾操作為板框過濾。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的云芝多糖的提取制備方法，其特征在于:步驟b所述云芝多糖水浸液不斷加入乙醇操作中加入的乙醇為質(zhì)量含量為95 %的乙醇。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的云芝多糖的提取制備方法，其特征在于:步驟b所述靜置時間為26?28小時。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種云芝多糖的提取制備方法，通過對云芝子實(shí)體加水浸泡再微波浸提，最后用乙醇溶析，得到云芝多糖提取物。獲得的云芝多糖提取物，含量高，生物活性高，對腫瘤細(xì)胞的抑制率有顯著提高。本發(fā)明的提取制備方法提取工藝簡單，縮短提取時間的同時，還可顯著提高云芝多糖的提取率，降低生產(chǎn)成本，適于大規(guī)模工業(yè)化應(yīng)用。
【IPC分類】A61P37/04, C08B37/00, A61P1/16, A61P35/00
【公開號】CN105504083
【申請?zhí)枴緾N201610045476
【發(fā)明人】劉振強(qiáng), 金石, 馬寶利, 張磊, 李寶云
【申請人】哈爾濱合佳制藥有限公司
【公開日】2016年4月20日
【申請日】2016年1月24日