鹿茸蛋白提取物及其藥學(xué)用圖
【專利說明】
[0001] 本申請要求相同申請人于2015年7月13日提交的中國發(fā)明專利申請?zhí)枮?201510408556. 9，題為"鹿茸提取物的制備方法及其相關(guān)產(chǎn)品"的發(fā)明專利申請的優(yōu)先權(quán)。
技術(shù)領(lǐng)域
[0002] 本申請涉及一種中藥材提取物及其藥學(xué)方面用途，具體為一種鹿茸蛋白提取物及 其制藥用途。
【背景技術(shù)】
[0003] 鹿茸為脊索動(dòng)物門哺乳綱鹿科的動(dòng)物梅花鹿或馬鹿的雄鹿未骨化密生茸毛的幼 角。鹿茸始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為中品，是我國的傳統(tǒng)名貴中藥之一。性溫，味甘、咸入 肝、腎經(jīng)。功能主治壯元陽，補(bǔ)氣血，益精髓，強(qiáng)筋骨。
[0004] 鹿茸是哺乳動(dòng)物中唯一具有完全再生能力的附屬器官，在其生長期間以每天2cm 的速度生長，而不會(huì)形成腫瘤。因此我們推測鹿茸中含有促進(jìn)組織再生的物質(zhì)?，F(xiàn)代藥理 研究證實(shí)，鹿茸中蛋白類成分高達(dá)55. 26%，但由于檢測方法的限制對(duì)鹿茸蛋白口服后的藥 理作用的研究有限。
[0005] 心肌梗死是導(dǎo)致突然死亡的主要原因之一。其治療原則包括保護(hù)和維持心臟功 能，挽救瀕死心肌，防止梗死區(qū)擴(kuò)大，縮小心肌缺血范圍，處理并發(fā)癥。數(shù)年來，中藥治療心 血管疾病的開發(fā)及應(yīng)用對(duì)心血管疾病的防治顯示出良好的前景。鹿茸秉承純陽之實(shí)質(zhì)，富 含生發(fā)之氣，生精補(bǔ)髓，益氣強(qiáng)智，養(yǎng)血壯陽，強(qiáng)筋健骨，治一切虛損，可用來治療神經(jīng)衰弱、 貧血癥、心功能減退、心臟功能減弱等疾病。已有研究證明，鹿茸提取物可提高缺血心肌組 織S0D活性、降低MDA含量。鹿茸醇提物有較好的抗心率失常作用，改善左室的收縮和舒張 功能。然而鹿茸蛋白混合物的心肌損傷保護(hù)作用目前研究較少。本實(shí)驗(yàn)從減小心梗面積， 挽救瀕死心肌的角度出發(fā)，對(duì)鹿茸蛋白混合物治療小鼠心肌缺血的作用進(jìn)行了研究。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明一方面提供了一種鹿茸蛋白提取物。本發(fā)明所述的鹿茸蛋白提取物通過 下述步驟獲得：1)將鹿茸進(jìn)行粉碎，得到鹿茸粉碎物；用水浸提所述鹿茸粉碎物，收集水 溶性物質(zhì)得到鹿茸水溶性提取物；2)對(duì)所述鹿茸水溶性提取物用水進(jìn)行透析至pH值為 6. 5-8. 5 (如7. 0)，結(jié)束透析，得到所述鹿茸蛋白提取物。
[0007] 本發(fā)明所述的鹿茸蛋白提取物包含至少157種蛋白，通過對(duì)蛋白的功能和作用分 析研究，可以把這157種蛋白分為如下幾類：鈣結(jié)合蛋白4個(gè)，細(xì)胞粘附分子3個(gè)，細(xì)胞連 接蛋白2個(gè)，分子伴侶3個(gè)，細(xì)胞骨架蛋白9個(gè)，防御/免疫蛋白6個(gè)，酶調(diào)節(jié)劑14個(gè)，細(xì)胞 外基質(zhì)蛋白7個(gè)，水解酶15個(gè)，激酶6個(gè)，連接酶3個(gè)，裂解酶7個(gè)，膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2個(gè)，核酸 結(jié)合蛋白10個(gè)，氧化還原酶10個(gè)，磷酸酶1個(gè)，蛋白酶6個(gè)，受體15個(gè)，信號(hào)分子9個(gè)，貯 藏蛋白1個(gè)，結(jié)構(gòu)蛋白1個(gè)，表面活性劑2個(gè)，轉(zhuǎn)錄因子14個(gè)，傳輸/載體蛋白8個(gè)，轉(zhuǎn)移酶 11個(gè)，跨膜受體調(diào)節(jié)/接頭蛋白5個(gè)，轉(zhuǎn)運(yùn)體9個(gè)。這157種蛋白的名稱及GI號(hào)見下文表 1-表27,蛋白的功能不是唯一的，一種蛋白可能同時(shí)具有兩種或兩種以上的功能。其中與 發(fā)育和繁殖相關(guān)蛋白共有15個(gè)，如表28所示。
[0008] 表 1、|丐結(jié)合蛋白（Calcium-bindingprotein)
[0009]
[0010] 表 2、細(xì)胞粘附分子（Celladhesionmolecule)
[0013] 表 3、細(xì)胞連接蛋白（Celljunctionprotein)
[0014]
[0015] 表 4、分子伴侶（Molecularchaperones)
[0016]
[0017] 表 5、細(xì)胞骨架蛋白（Cytoskeletalprotein)
[0018]
[0019] 表 6、防御 / 免疫蛋白（Defense/immunityprotein)
[0020]
[0021] 表 7、酶調(diào)節(jié)劑（Enzymemodulator)
[0022]
[0023] 表 8、細(xì)胞外基質(zhì)蛋白（Extracellularmatrixprotein)
[0024]
[0025] 表 9、水解酶（Hydrolase)

[0028] 表 10、激酶（Kinase)
[0029]
[0030] 表 11、連接酶（Ligase)
[0031]
[0032] 表 12、裂解酶（Lyase)
[0033]
[0034] 表I3、膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（Membranetrafficprotein)
[0035]
[0036] 表 14、核酸結(jié)合蛋白（Nucleicacidbindingprotein)
[0037]
[0038] 表 15、氧化還原酶（Oxidoreductase)
[0039]
[0040] 表 16、磷酸酶（Phosphatase)
[0041]
[0042] 表 17、蛋白酶（Protease)
[0043]
[0044] 表 18、受體（Receptor)

[0047] 表 19、信號(hào)分子（Signalingmolecule)
[0048]
[0049] 表 20、|C藏蛋白（Storageprotein)
[0050]
[0051] 表 21、結(jié)構(gòu)蛋白（Structuralprotein)

[0054] 表 22、表面活性劑（Surfactant)
[0055]
[0056] 表 23、轉(zhuǎn)錄因子（Transcriptionfactor)
[0057]
[0058] 表 24、傳輸 / 載體蛋白（Transfer/carrierprotein)
[0059]
[0060] 表 25、轉(zhuǎn)移酶（Transferase)
[0061]
[0062] 表 26、跨膜受體調(diào)節(jié)蛋白 / 接頭蛋白（Transmembranereceptoregulatory/ adaptorprotein)
[0063]
[0064] 表 27、轉(zhuǎn)運(yùn)體（Transporter)
[0065]
[0066]
[0067] 表28、與發(fā)育和繁殖相關(guān)蛋白（developmentalprocessandreproduction protein)
[0068]
[0069] 另一方面，本發(fā)明提供了所述鹿茸蛋白提取物的制備方法，包括：
[0070] 1)將鹿茸進(jìn)行粉碎，得到鹿茸粉碎物；用水浸提所述鹿茸粉碎物，收集水溶性物 質(zhì)得到鹿茸水溶性提取物；
[0071] 2)對(duì)所述鹿茸水溶性提取物用水進(jìn)行透析至pH值為6. 5-8. 5(如7. 0)，結(jié)束透 析，得到所述鹿茸蛋白提取物。
[0072] 上述方法中，所述鹿鸞粉碎物的粒徑可為50μm-100μm，具體可為75μm。
[0073] 上述方法中，所述用水浸提時(shí)水的pH值為3-4(如3. 5)，所述水的pH值可通過向 水中加入冰醋酸進(jìn)行調(diào)節(jié)。
[0074] 上述方法中，所述用水浸提為在2-6°C(如4°C)進(jìn)行20-26h(如24h)。
[0075] 上述方法中，所述鹿茸粉碎物和水的質(zhì)量比可為1 : (4-6)，具體可為1 : 5,所述 鹿茸的質(zhì)量為鮮重。
[0076] 上述方法中，所述鹿茸可為新鮮的鹿茸。
[0077] 上述方法中，可采用離心收集所述水溶性物質(zhì)。所述離心采用的離心力可為 3000g-5000g(如 4000g)，離心時(shí)間可為 10-20min(如lOmin)。
[0078] 上述方法中，所述透析采用截留分子量為lkDa的半透膜進(jìn)行。所述透析可在水中 進(jìn)行10-12h，每4h更換水一次。
[0079] 上述方法中，所述方法還包括將結(jié)束透析后得到的液體在50_60°C(如55°C) 進(jìn)行濃縮，得到濃縮液；將所述濃縮液在3000g-5