從辣木中提取一種膠原蛋白肽的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種從辣木中提取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的制備方法，尤其涉及一種從辣木材料中提取出辣木膠原蛋白肽的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]辣木，為一種多年生熱帶落葉喬木，拉丁名是“Moringa oleifera”，經(jīng)國(guó)際醫(yī)學(xué)界及國(guó)家權(quán)威部門檢測(cè)認(rèn)定:其根、莖、葉、果均有著極高的醫(yī)學(xué)價(jià)值，被國(guó)際醫(yī)學(xué)界譽(yù)為“奇跡之樹”，“植物中的鉆石”。
[0003]現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究指出:辣木是一種高營(yíng)養(yǎng)、多功效的天然綠色植物；辣木中富含的蛋白質(zhì)、18種人體必須的氨基酸、及高含量對(duì)人體有益的微量元素；具有排毒養(yǎng)顏、降“三高”、治療糖尿病、痛風(fēng)、抑制腫瘤等功效。其次還含有甾體類化合物。高級(jí)不飽和脂肪酸以DHA (廿二碳六烯酸為主)，它亦是人類生活中具有重要作用的生物活性物質(zhì)，能改善大腦機(jī)能、活化大腦神經(jīng)細(xì)胞，降低血液中膽固醇濃度，防止血栓形成及動(dòng)脈硬化等癥，能很好地改善老年人的癡呆病，能有效的抗氧化、抗自由基。此外，辣木還含有超氧化物歧化酶和多糖，它們對(duì)人體的生命活性同樣具有很重要的功能。
[0004]國(guó)際生命科學(xué)會(huì)成立年會(huì)指出:激活機(jī)體免疫功能的物質(zhì)，調(diào)節(jié)人體代謝生理平衡的物質(zhì)，影響生物鐘節(jié)律的物質(zhì)，抑制人體過早衰老及老年病自由基的物質(zhì)，親和活化細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生干擾素的物質(zhì)，這些都是生命活動(dòng)的生物活性物質(zhì)，而辣木經(jīng)生化處理的產(chǎn)物會(huì)不同程度地包含上述物質(zhì)的作用和功能?？梢?，如何高效、低成本地從辣木的根、莖、葉、果中提取出人體所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、醫(yī)藥中間體，成為本領(lǐng)域技術(shù)人員面臨的一個(gè)新的技術(shù)課題。
[0005]長(zhǎng)久以來，如何從樹木、植物中提取膠原蛋白肽和其他重要成份，這在本領(lǐng)域技術(shù)人員中很少涉及和關(guān)注。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種從辣木中提取辣木膠原蛋白肽的制備方法，用該方法提取的膠原蛋白肽純度高、雜質(zhì)少、原料來源廣泛，且營(yíng)養(yǎng)豐富、工藝成本低、產(chǎn)品產(chǎn)率高、質(zhì)量?jī)?yōu)秀。
[0007]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的方案如下:從辣木中提取一種膠原蛋白肽的制備方法，主要包括如下步驟:
[0008](I)以經(jīng)過預(yù)處理后的辣木的根、莖、葉為原料，經(jīng)清洗、粉碎后加入酸性浸泡液中進(jìn)行恒溫浸泡；
[0009](2)浸泡后的原料漂洗至中性后，加入到含纖維素酶2%?6%的處理液中進(jìn)行預(yù)處理，預(yù)處理時(shí)可調(diào)pH至6.0?7.5，在30°C?50°C溫度下進(jìn)行酶解預(yù)處理，冷卻后再進(jìn)入下一步；
[0010](3)將經(jīng)步驟(I)的浸泡液過濾，對(duì)浸泡后的原料用清水漂洗三次，然后置入酶解罐的脂肪酶酶解液中進(jìn)行酶解處理，脂肪酶酶解液主要由脂肪酶和溫水配制而成，脂肪酶的用量為初始原料質(zhì)量的0.2?0.4%，溫水的用量為初始原料質(zhì)量的2倍；酶解處理的溫度控制在30°C?50°C，酶解處理的pH值約為:6.0?7.5，酶解處理的間隔攪拌反應(yīng)的總時(shí)間為8?12小時(shí)；酶解處理完成后再滅酶，過濾清水漂洗至中性；
[0011](4)將經(jīng)步驟(3)酶解后的原料置入蛋白酶酶解液中進(jìn)行酶解處理，再滅酶活處理；
[0012](5)將經(jīng)步驟(3)酶解后的膠液以6000r/min?8000r/min轉(zhuǎn)速進(jìn)行高速離心分離，分離后的上層膠原清液經(jīng)真空濃縮、真空干燥后得到膠原蛋白肽。
[0013]所述步驟(I)中酸性浸泡液中含有乙酸，所述酸性浸泡液中乙酸的質(zhì)量濃度為0.1 %?0.3%。酸性浸泡液的用量為所述原料質(zhì)量的2?4倍。
[0014]所述步驟⑴中恒溫浸泡的溫度為30°C?50°C，恒溫浸泡時(shí)間不少于8小時(shí)。
[0015]所述步驟(4)中蛋白酶酶解液主要由中性蛋白酶、酸性蛋白酶、胰蛋白酶、膠原酶和水配制而成，所述中性蛋白酶的用量為初始原料質(zhì)量的0.08%?1.0%，所述酸性蛋白酶的用量為初始原料質(zhì)量的0.4 %?1.0 %，所述胰蛋白酶的用量為初始原料質(zhì)量的0.02%?0.08%，所述膠原酶的用量為初始原料質(zhì)量的0.02%?0.06%，所述水的用量為初始原料質(zhì)量的2?4倍。
[0016]所述步驟(3)中酶解處理的溫度為40°C?60 °C，酶解處理的pH值為6.0?7.5，酶解處理的時(shí)間為8?10小時(shí)。
[0017]所述步驟(2)中的預(yù)處理包括以下步驟:取辣木的根、莖、葉經(jīng)清洗、干燥后粉碎作為原料，將原料加入至預(yù)處理液中進(jìn)行浸泡預(yù)處理。
[0018]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:本發(fā)明提供了一種從辣木的根、莖、葉中提取的膠原蛋白肽產(chǎn)品，該產(chǎn)品主要是從辣木的根、莖、葉中獲??；本產(chǎn)品獲取，不僅原料來源廣泛，而且提取步驟簡(jiǎn)便易行，提取后所得的膠原蛋白及膠原蛋白肽產(chǎn)品不僅純度極高，雜質(zhì)很少，而且營(yíng)養(yǎng)豐富。另外，本發(fā)明的提取方法不僅操作簡(jiǎn)單，而且保留了辣木含有的對(duì)人體有利的有效成分，提取的多肽活性強(qiáng)，能與人體細(xì)胞親密結(jié)合，且能活化細(xì)胞，使受損細(xì)胞恢復(fù)活力，能誘導(dǎo)細(xì)胞干擾素而增強(qiáng)抗癌能力。整個(gè)提取工藝不僅原料利用充分，工藝成本低，且產(chǎn)品產(chǎn)率高，為辣木膠原蛋白肽的工業(yè)化生產(chǎn)應(yīng)用提供了前提和基礎(chǔ)。
【具體實(shí)施方式】
[0019]下面通過【具體實(shí)施方式】本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)地說明。
[0020]從辣木中提取一種膠原蛋白肽的制備方法，主要包括如下步驟:
[0021](I)以經(jīng)過預(yù)處理后的辣木的根、莖、葉為原料，經(jīng)清洗、粉碎后加入酸性浸泡液中進(jìn)行恒溫浸泡；
[0022](2)浸泡后的原料漂洗至中性后，加入到含纖維素酶2%?6%的處理液中進(jìn)行預(yù)處理，預(yù)處理時(shí)可調(diào)pH至6.0?7.5，在30°C?50°C溫度下進(jìn)行酶解預(yù)處理，冷卻后再進(jìn)入下一步；
[0023](3)將經(jīng)步驟(I)的浸泡液過濾，對(duì)浸泡后的原料用清水漂洗三次，然后置入酶解罐的脂肪酶酶解液中進(jìn)行酶解處理，脂肪酶酶解液主要由脂肪酶和溫水配制而成，脂肪酶的用量為初始原料質(zhì)量的0.2?0.4%，溫水的用量為初始原料質(zhì)量的2倍；酶解處理的溫度控制在30°C?50°C，酶解處理的pH值約為:6.0?7.5，酶解處理的間隔攪拌反應(yīng)的總時(shí)間為8?12小時(shí)；酶解處理完成后再滅酶，過濾清水漂洗至中性；
[0024](4)將經(jīng)步驟(3)酶解后的原料置入蛋白酶酶解液中進(jìn)行酶解處理，再滅酶活處理；
[0025](5)將經(jīng)步驟(3)酶解后的膠液以6000r/min?8000r/min轉(zhuǎn)速進(jìn)行高速離
[0026]在本發(fā)明的步驟(I)中酸性浸泡液中含有乙酸，所述酸性浸泡液中乙酸的質(zhì)量濃度為0.1 %?0.3%。酸性浸泡液的用量為所述原料質(zhì)量的2?4倍。
[0027]在本發(fā)明的步驟(I)中，恒溫浸泡的溫度為30°C?50°C，恒溫浸泡時(shí)間不少于8小時(shí)。
[0028]在本發(fā)明的步驟(4)中，提到的蛋白酶酶解液主要由中性蛋白酶、酸性蛋白酶、胰蛋白酶、膠原酶和水配制而成，中性蛋白酶的用量為初始原料質(zhì)量的0.08%?1.0%，酸性蛋白酶的用量為初始原料質(zhì)量的0.4%?1.0%，胰蛋白酶的用量為初始原料質(zhì)量的0.02%?0.08%，膠原酶的用量為初始原料質(zhì)量的0.02%?0.06%，水的用量為初始原料質(zhì)量的2?4倍。
[0029]在本發(fā)明的步驟(3)中，酶解處理的溫度為40°C?60°C，酶解處理的pH值為
6.0?7.5，酶解處理的時(shí)間為8?10小時(shí)。
[0030]在本發(fā)明的步驟(2)中，預(yù)處理包括以下步驟:取辣木的根、莖、葉經(jīng)清洗、干燥后粉碎作為原料，將原料加入至預(yù)處理液中進(jìn)行浸泡預(yù)處理。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.從辣木中提取一種膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)以經(jīng)過預(yù)處理后的辣木的根、莖、葉為原料，經(jīng)清洗、粉碎后加入酸性浸泡液中進(jìn)行恒溫浸泡； (2)浸泡后的原料漂洗至中性后，加入到含纖維素酶2%?6%的處理液中進(jìn)行預(yù)處理，預(yù)處理時(shí)可調(diào)pH至6.0?7.5，在30°C?50°C溫度下進(jìn)行酶解預(yù)處理，冷卻后再進(jìn)入下一步； (3)將經(jīng)步驟(I)的浸泡液過濾，對(duì)浸泡后的原料用清水漂洗三次，然后置入酶解罐的脂肪酶酶解液中進(jìn)行酶解處理，脂肪酶酶解液主要由脂肪酶和溫水配制而成，脂肪酶的用量為初始原料質(zhì)量的0.2?0.4%，溫水的用量為初始原料質(zhì)量的2倍；酶解處理的溫度控制在30°C?50°C，酶解處理的pH值約為:6.0?7.5，酶解處理的間隔攪拌反應(yīng)的總時(shí)間為8?12小時(shí)；酶解處理完成后再滅酶，過濾清水漂洗至中性； (4)將經(jīng)步驟(3)酶解后的原料置入蛋白酶酶解液中進(jìn)行酶解處理，再滅酶活處理； (5)將經(jīng)步驟(3)酶解后的膠液以6000r/min?8000r/min轉(zhuǎn)速進(jìn)行高速離心分離，分離后的上層膠原清液經(jīng)真空濃縮、真空干燥后得到膠原蛋白肽。2.如權(quán)利要求1所述的從辣木中提取一種膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述步驟(I)中酸性浸泡液中含有乙酸，所述酸性浸泡液中乙酸的質(zhì)量濃度為0.1 %?0.3%。酸性浸泡液的用量為所述原料質(zhì)量的2?4倍。3.如權(quán)利要求1所述的從辣木中提取一種膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述步驟(I)中恒溫浸泡的溫度為30°C?50°C，恒溫浸泡時(shí)間不少于8小時(shí)。4.如權(quán)利要求1所述的從辣木中提取一種膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中蛋白酶酶解液主要由中性蛋白酶、酸性蛋白酶、胰蛋白酶、膠原酶和水配制而成，所述中性蛋白酶的用量為初始原料質(zhì)量的0.08%?1.0%，所述酸性蛋白酶的用量為初始原料質(zhì)量的0.4%?1.0%，所述胰蛋白酶的用量為初始原料質(zhì)量的0.02%?0.08%，所述膠原酶的用量為初始原料質(zhì)量的0.02%?0.06%，所述水的用量為初始原料質(zhì)量的2?4倍。5.如權(quán)利要求1所述的從辣木中提取一種膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中酶解處理的溫度為40°C?60 °C，酶解處理的pH值為6.0?7.5，酶解處理的時(shí)間為8?10小時(shí)。6.如權(quán)利要求1所述的從辣木中提取一種膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中的預(yù)處理優(yōu)選包括以下步驟:取辣木的根、莖、葉經(jīng)清洗、干燥后粉碎作為原料，將原料加入至預(yù)處理液中進(jìn)行浸泡預(yù)處理。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從辣木中提取一種膠原蛋白肽的制備方法，該辣木膠原蛋白肽是采用辣木的根、莖、葉為原料經(jīng)過浸泡、蛋白酶酶解及分離純化后得到的膠原蛋白肽產(chǎn)物。主要步驟分為原料預(yù)前處理步驟、材料浸泡步驟、脂肪酶酶解步驟、蛋白酶酶解步驟以及分離純化步驟，最后可得到膠原蛋白肽精粉；用該方法提取的膠原蛋白肽純度高、雜質(zhì)少、原料來源廣泛，且營(yíng)養(yǎng)豐富、工藝成本低、產(chǎn)品產(chǎn)率高、質(zhì)量?jī)?yōu)秀。
【IPC分類】C12P21/06
【公開號(hào)】CN105154504
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510542210
【發(fā)明人】任曉潔, 李高霖
【申請(qǐng)人】任曉潔, 李高霖
【公開日】2015年12月16日
【申請(qǐng)日】2015年8月23日