TCCTCCTCCATGCCAAAACCCAAAAATCCCTTGGTGAAAGTTTTGGGGTAAAATAAAAACTCCTGAACTAATATACC TGGTTGGGTGGTGGGGGCCCTCCCCCCATGGGGAACAAAAAACCCACTAAAGGTCCCTTCCCAAGGTTCCCCACAGA AAAG〇
[0028] 以下培養(yǎng)基根據(jù)需要進(jìn)行使用。后續(xù)實(shí)驗(yàn)均為說明畢赤酵母YPD-YL2所具有的除 臭效果，以及含有畢赤酵母YPD-YL2的固體除臭劑、復(fù)合菌劑的運(yùn)用范圍及其效果進(jìn)行，實(shí) 際保護(hù)范圍并不限于實(shí)驗(yàn)中所列技術(shù)方案。
[0029] 本菌株的培養(yǎng)基：
[0030] YH)液體培養(yǎng)基：1000ml中的培養(yǎng)基中，含酵母浸出粉5g，蛋白胨10g，葡萄糖 20g，調(diào)節(jié)pH值約為5. 4,滅菌后室溫保存，得到Y(jié)H)液體培養(yǎng)基；
[0031] YPD固體培養(yǎng)基：1000ml中的培養(yǎng)基中，含酵母浸出粉5g，蛋白胨10g，葡萄糖 20g，調(diào)節(jié)pH值約為5. 4后，14g瓊脂粉，滅菌后，在超凈工作臺上倒平板，后封閉保存。
[0032] YPD-YL2 菌株培養(yǎng)：
[0033] 菌株分離培養(yǎng)：用接種環(huán)或接種針劃線接種于含YH)固體培養(yǎng)基平板內(nèi)，培養(yǎng)溫 度為30°C，培養(yǎng)時間為2-3天，得到單克隆菌落；
[0034] 菌株接種培養(yǎng)：挑取單克隆菌落，接種于含5ml的無菌試管中，30°C，200rpm振蕩 培養(yǎng)48~72小時，至培養(yǎng)基渾濁；
[0035] 菌液保存：將上述含菌株的液體培養(yǎng)基和滅菌的甘油按7 : 3的比例在超凈工作 臺中混合后，保存在-80 °C超低溫冰箱中；
[0036] 發(fā)酵液生產(chǎn)：菌種經(jīng)擴(kuò)培后，按1%接種于50L發(fā)酵罐中，好氧發(fā)酵，30°C培養(yǎng)3天 左右。
[0037] 本文中所用發(fā)酵菌液：用接種環(huán)或接種針劃線接種于含YPD固體培養(yǎng)基平板內(nèi)， 培養(yǎng)溫度為30°C，培養(yǎng)時間為3天，得到單克隆菌落，挑取單克隆菌落，接種于含5ml的無菌 試管中，30°C，200rpm振蕩培養(yǎng)48~72小時，至培養(yǎng)基渾濁。菌種經(jīng)擴(kuò)培后，按1 %接種于 50L發(fā)酵罐中，好氧發(fā)酵，30°C培養(yǎng)3天左右，得到畢赤酵母YPD-YL2發(fā)酵液。如果所需發(fā)酵 液量較少時可按小量除臭液的生產(chǎn)方法進(jìn)行：將菌種經(jīng)斜面培養(yǎng)基活化后，分別接種到裝 有500ml液態(tài)培養(yǎng)基的三角瓶中，置于恒溫?fù)u床培養(yǎng)箱中，在30°C恒溫條件下，200r/分鐘 培養(yǎng)3-5天既得畢赤酵母YPD-YL2發(fā)酵液。菌種增擴(kuò)培養(yǎng)步驟可以參照CN201210030324. 0 中公開的方法進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)得到相應(yīng)和發(fā)酵液。
[0038] 本文中氫氧化鎘吸收液：稱量4. 3g硫酸鎘（3CdS04 ? 8H20)、0? 3g氫氧化鈉和10g 聚乙烯醇磷酸銨分別溶于水中，臨用時，將三種溶液相混合，強(qiáng)烈振搖至完全混溶，再用水 稀釋至1L取用。此溶液為白色懸浮液，每次用時要強(qiáng)烈振搖均勻再量取，貯于冰箱中可保 存一周。
[0039] 本文中所用感官評價法為召集100名嗅覺正常的志愿者，分別對不同處理樣進(jìn)行 人體嗅覺辨識。對感受進(jìn)行評分后統(tǒng)計(jì)結(jié)果求取平均值。其中評分標(biāo)準(zhǔn)為：5分代表無惡 臭；4分代表輕微惡臭；3分代表存在惡臭；2分代表沒有改變的惡臭；1分代表惡臭增強(qiáng)。統(tǒng) 計(jì)結(jié)果分為三級：+++表示強(qiáng)惡臭味，所得分?jǐn)?shù)為1~2分；++表示惡臭味，所得分?jǐn)?shù)為3~ 4分；+表不輕微惡臭味，所得分?jǐn)?shù)為4~5分。
[0040] 實(shí)驗(yàn)1、畢赤酵母YPD-YL2發(fā)酵液對氨水和硫化氫降解效果
[0041 ] 取18ml菌液于2L大燒杯中，并加入濃度為1000ml/L的氨水2ml，再往大燒杯中 放入裝有20ml濃度為0. 005mol/L的硫酸吸收液的小燒杯（硫酸吸收液：量取2. 8ml密度 為1. 84g/ml的濃硫酸加入水中稀釋定容至1L。臨用時再稀釋10倍），蓋上雙層塑料薄膜 將大燒杯密封密封，進(jìn)行降氨實(shí)驗(yàn)。
[0042] 取18ml菌液放入2L大燒杯中，并加入2ml濃度為100mg/L的硫化氫溶液，之后再 往大燒杯中放入裝有20ml氫氧化錦吸收液的50ml小燒杯，蓋上雙層塑料薄膜密封，開展降 硫化氫試驗(yàn)。
[0043] 進(jìn)行上面兩個實(shí)驗(yàn)時，均以等量的無菌水分別替代氫氧化鎘吸收液和硫酸吸收液 作為空白對照組，在相同條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)條件為：置于30°C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每個處 理重復(fù)3次。24小時后，分別取出大燒杯中的小燒杯，采用納氏試劑比色法測定氨的去除 率，采用亞甲基藍(lán)比色法測定硫化氫的去除率，所得結(jié)果列于表1中。
[0044] 表1除臭液氨氣和硫化氫去除率結(jié)果表
[0045]
[0046] 由上可見，使用本發(fā)明提供的畢赤酵母YPD-YL2可以有效分解氣體中的氨氣和硫 化氫氣體，平均對于氨氣的去除率可達(dá)95. 6%，對硫化氫氣體的去除率可以達(dá)到72. 6%。 相對未使用發(fā)酵液的空白對照樣兩種氣體的去除效果明顯。這可能與發(fā)酵液中所含菌體對 氨氣和硫化氫氣體的利用率較高，從而提高了對空氣中氨氣和硫化氫氣體的去除效率。實(shí) 驗(yàn)過程中所用燒杯均處于密封狀態(tài)，這有利于防止氨氣和硫化氫氣體的流失，有利于防止 其他氣體對發(fā)酵液分解結(jié)果的干擾。所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠。
[0047] 實(shí)驗(yàn)2、畢赤酵母YPD-YL2對生活垃圾的除臭效果
[0048] 生活垃圾的除臭效果檢測：生活垃圾來源于學(xué)校食堂的廚房垃圾，主要成分為剩 飯菜、果蔬皮肩、塑料袋和木質(zhì)纖維等物質(zhì)。按畢赤酵母YPD-YL2發(fā)酵液和水體積比為1 : 3 混合得到除臭稀釋液，取新鮮生活垃圾總質(zhì)量10 %的除臭稀釋液，將其均勻噴灑于生活垃 圾上，實(shí)現(xiàn)接種。同時以相同條件，以稀釋除臭液所用水作為對照，在相同實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行 空白實(shí)驗(yàn)。分別于接種后4、8、24小時，采用感官評價法測定臭氣等級。結(jié)果列于表2中。
[0049] 表2畢赤酵母YPD-YL2發(fā)酵液對生活垃圾除臭結(jié)果表
[0050]
[0051] 注：+++表示強(qiáng)惡臭味；++表示惡臭味；+表示輕微惡臭味道
[0052] 由表2可見，處理前，生活垃圾惡臭強(qiáng)烈，使用了本發(fā)明提供的畢赤酵母YPD-YL2 發(fā)酵液處理后的生活垃圾，隨著處理時長的增加，垃圾產(chǎn)生的臭味強(qiáng)度逐漸降低，當(dāng)接種24 小時后，垃圾的臭味降至輕微，基本達(dá)到人體可接受范圍。由此可知，本發(fā)明提供的畢赤酵 母YPD-YL2的發(fā)酵液中所含菌體本身一方面可以充分利用垃圾中的各類有機(jī)物作為自身 所需碳源和氮源，對垃圾進(jìn)行分解利用，另一方面菌體在生長過程中所產(chǎn)生的各類酶還可 以對菌體不能直接利用的物質(zhì)進(jìn)行分解，以利于后續(xù)的菌體利用，從而在無需添加任何額 外的碳、氮源的情況下，提高畢赤酵母YPD-YL2發(fā)酵液對垃圾的分解能力。實(shí)現(xiàn)對垃圾中產(chǎn) 生惡臭氣體的物質(zhì)的分解。另一方面，畢赤酵母YPD-YL2菌體所產(chǎn)各類酶，還可以對已經(jīng)產(chǎn) 生的惡臭氣體中的主要成分進(jìn)行分解，從而降低已經(jīng)產(chǎn)生的惡臭氣體的濃度。兩種作用協(xié) 同作用，提高了經(jīng)過處理后垃圾臭味降低的效果的可持續(xù)性，無需反復(fù)添加發(fā)酵液，還能抑 制新的惡臭形成。
[0053] 實(shí)驗(yàn)3、畢赤酵母YPD-YL2發(fā)酵液制得固體除臭劑的脫硫?qū)嶒?yàn)
[0054] 畢赤酵母YPD-YL2發(fā)酵液制得固體除臭劑的制作：取畢赤酵母YPD-YL2發(fā)酵液 100ml與200g木肩均勻混合后，在35°C下對所得木肩進(jìn)行干燥，至其含水率為60%時，得到 固體除臭劑，用于后續(xù)脫硫?qū)嶒?yàn)中。同時以滅菌水按照如上方法干燥得到空白木肩，作為空 白對照實(shí)驗(yàn)所用空白除臭菌劑。