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一種利用復合菌種協(xié)同作用處理六價鉻污染的方法_2

文檔序號:8523804閱讀:來源:國知局
造條件,Gl的快速繁殖加快六價鉻的去除,提高六價鉻的去除率,除pH=2外其余均能達到100%去除廢水中的六價鉻。
【附圖說明】
[0016]圖1酸堿度對微生物生長繁殖的影響;
圖2酸堿度分別對兩種微生物去除六價鉻的影響(G1、B2);
圖3復合微生物不同酸堿度下對六價鉻的去除。
【具體實施方式】
[0017]下面通過實例對本發(fā)明做進一步詳細說明,這些實例僅用來說明本發(fā)明,并不限制本發(fā)明的范圍。
[0018]實施例1 馴化篩選步驟:
(1)取鉻污染土壤樣品10g加入到100 ml牛肉膏蛋白胨液態(tài)培養(yǎng)基中,30°C培養(yǎng)24h,搖床轉速為120 rpm ;
(2)取步驟(I)培養(yǎng)液Iml轉移進100 ml無機鹽液態(tài)培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含六價鉻20mg/L,六價鉻以重鉻酸鉀配制,30°C培養(yǎng)24 h,搖床轉速為120 rpm ;
(3)取步驟(2)培養(yǎng)液Iml轉移至100 ml無機鹽液態(tài)培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含六價鉻30mg/L,六價鉻以重鉻酸鉀配制,30°C培養(yǎng)24 h,搖床轉速為120 rpm,以此類推其余條件不變以10 mg/L的增量,逐步增加六價鉻的含量,直至六價鉻濃度達到50 mg/L,培養(yǎng)24 h后得到馴化菌液;
(4)取馴化菌液Iml轉移至9 ml無菌生理鹽水中,稀釋10倍,菌液依次梯度稀釋至菌液濃度為10_7 (即每次取前一步驟的稀釋液加入到9 ml無菌生理鹽水中);
(5)從10_6、10_7g兩個稀釋組中分別取0.1 ml涂布在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)箱中30°C培養(yǎng)24 h ;
(6)從上述步驟中分別挑取單菌落,平板劃線純化,得到一株芽孢桿菌Bacillus和一株地霉菌Geotrichum,斜面保存?zhèn)溆谩?br>[0019]所述牛肉膏蛋白胨液態(tài)培養(yǎng)基的成分為:牛肉膏3 g/L、蛋白胨10 g/L、氯化鈉5g/L、水 I L0
[0020]所述牛肉膏蛋白胨固態(tài)培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨液態(tài)培養(yǎng)基中加入15~25 g瓊脂。
[0021]所述無機鹽液態(tài)培養(yǎng)基成分為0.5g/L K2HPO4, lg/L KH2PO4, 0.5g/L MgSO4,0.01g/L CaCl2, lg/L NH4C1,0.01 g/L FeSO4, 1.0g/L NaCl,0.003g/L MnSO4, 5g/L 葡萄糖。
[0022]挑取兩株菌分別在含40 mg/L六價鉻的100 ml無機鹽培養(yǎng)基中培養(yǎng)24 h后,各取I ml菌液同時加入pH為4的150 ml無機鹽培養(yǎng)基(六價鉻含量為40mg/L)中,搖床轉速為120 rpm, 30°C培養(yǎng),每隔一定的時間取樣5 ml,在9280Xg離心力作用下離心15 min,取上清液,稀釋10倍后按標準法(HJ687-2014)測定并計算六價鉻殘留量,結果如圖3:由圖可知進水pH在4能處理六價鉻,主要是地霉菌Gl的生長繁殖使六價鉻被去除。
[0023]實施例2 馴化篩選步驟:
(1)取鉻污染土壤樣品10g加入到100 ml牛肉膏蛋白胨液態(tài)培養(yǎng)基中,30°C培養(yǎng)24h,搖床轉速為120 rpm ;
(2)取步驟(I)培養(yǎng)液Iml轉移進100 ml無機鹽液態(tài)培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含六價鉻20mg/L,六價鉻以重鉻酸鉀配制,30°C培養(yǎng)24 h,搖床轉速為120 rpm ;
(3)取步驟(2)培養(yǎng)液Iml轉移至100 ml無機鹽液態(tài)培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含六價鉻30mg/L,六價鉻以重鉻酸鉀配制,30°C培養(yǎng)24 h,搖床轉速為120 rpm,以此類推其余條件不變以10 mg/L的增量,逐步增加六價鉻的含量,直至六價鉻濃度達到50 mg/L,培養(yǎng)24 h后得到馴化菌液;
(4)取馴化菌液Iml轉移至9 ml無菌生理鹽水中,稀釋10倍,菌液依次梯度稀釋至菌液濃度為10_7 (即每次取前一步驟的稀釋液加入到9 ml無菌生理鹽水中);
(5)從10_6、10_7g兩個稀釋組中分別取0.1 ml涂布在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)箱中30°C培養(yǎng)24 h ;
(6)從上述步驟中分別挑取單菌落,平板劃線純化,得到一株芽孢桿菌Bacillus和一株地霉菌Geotrichum,斜面保存?zhèn)溆谩?br>[0024]所述牛肉膏蛋白胨液態(tài)培養(yǎng)基的成分為:牛肉膏3 g/L、蛋白胨10 g/L、氯化鈉5g/L、水 I L0
[0025]所述牛肉膏蛋白胨固態(tài)培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨液態(tài)培養(yǎng)基中加入15~25 g瓊脂。
[0026]所述無機鹽液態(tài)培養(yǎng)基成分為0.5g/L K2HPO4,1 g/L KH2PO4, 0.5g/L MgSO4,
0.0lg/L CaCl2, lg/L NH4C1,0.01 g/L FeSO4, 1.0g/L NaCl,0.003g/L MnSO4, 5g/L 葡萄糖。
[0027]挑取兩株菌分別在含40 mg/L六價鉻的100 ml無機鹽培養(yǎng)基中培養(yǎng)24 h后,各取
Iml菌液同時加入pH為10的150 ml無機鹽培養(yǎng)基(六價鉻含量為40mg/L)中,搖床轉速為120 rpm, 30°C培養(yǎng),每隔一定的時間取樣5 ml,在9280Xg離心力作用下離心15 min,取上清液,稀釋10倍后按標準法(HJ687-2014)測定并計算六價鉻殘留量,結果如圖3:由圖可知進水PH在10能處理六價鉻,初期由芽孢桿菌生長代謝去除部分六價鉻,同時代謝產(chǎn)物的積累使廢水PH降低,為Gl的生長繁殖創(chuàng)造條件,Gl的快速繁殖加快六價鉻的去除,提高六價鉻的去除率,達到100%去除廢水中的六價鉻。
[0028]實施例3 馴化篩選步驟:
(1)取鉻污染土壤樣品10g加入到100 ml牛肉膏蛋白胨液態(tài)培養(yǎng)基中,30°C培養(yǎng)24h,搖床轉速為120 rpm ;
(2)取步驟(I)培養(yǎng)液Iml轉移進100 ml無機鹽液態(tài)培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含六價鉻20mg/L,六價鉻以重鉻酸鉀配制,30°C培養(yǎng)24 h,搖床轉速為120 rpm ;
(3)取步驟(2)培養(yǎng)液Iml轉移至100 ml無機鹽液態(tài)培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含六價鉻30mg/L,六價鉻以重鉻酸鉀配制,30°C培養(yǎng)24 h,搖床轉速為120 rpm,以此類推其余條件不變以10 mg/L的增量,逐步增加六價鉻的含量,直至六價鉻濃度達到50 mg/L,培養(yǎng)24 h后得到馴化菌液;
(4)取馴化菌液Iml轉移至9 ml無菌生理鹽水中,稀釋10倍,菌液依次梯度稀釋至菌液濃度為10_7 (即每次取前一步驟的稀釋液加入到9 ml無菌生理鹽水中);
(5)從10_6、10_7g兩個稀釋組中分別取0.1 ml涂布在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)箱中30°C培養(yǎng)24 h ;
(6)從上述步驟中分別挑取單菌落,平板劃線純化,得到一株芽孢桿菌Bacillus和一株地霉菌Geotrichum,斜面保存?zhèn)溆谩?br>[0029]所述牛肉膏蛋白胨液態(tài)培養(yǎng)基的成分為:牛肉膏3 g/L、蛋白胨10 g/L、氯化鈉5g/L、水 I L0
[0030]所述牛肉膏蛋白胨固態(tài)培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨液態(tài)培養(yǎng)基中加入15~25 g瓊脂。
[0031]所述無機鹽液態(tài)培養(yǎng)基成分為0.5g/L K2HPO4, lg/L KH2PO4, 0.5g/L MgSO4,
0.01g/L CaCl2, lg/L NH4Cl, 0.0lg/L FeSO4, 1.0g/L NaCl,0.003g/L MnSO4, 5g/L 葡萄糖。
[0032]挑取兩株菌分別在含有40mg/L六價鉻的100 ml無機鹽培養(yǎng)基中培養(yǎng),各取I ml菌液分別加入pH為4的150 ml無機鹽培養(yǎng)基(六價鉻含量為40mg/L)中,搖床轉速為120rpm, 30°C培養(yǎng),按一定時間間隔,分別取樣5 ml,在9280Xg離心力作用下離心15 min,取上清液,稀釋10倍后按標準法(HJ687-2014)測定并計算六價鉻殘留量,結果如圖2 (GUB2):從圖中可以看出當pH為4時,地霉菌Gl能夠處理含六價鉻的廢水,并且在6天內(nèi)100%去除六價鉻;而芽孢桿菌B2在pH4時則生長繁殖完全被抑制,對六價鉻含量沒有影響。
[0033]實施例4 馴化篩選步驟:
(1)取鉻污染土壤樣品10g加入到100 ml牛肉膏蛋白胨液態(tài)培養(yǎng)基中,30°C培養(yǎng)24h,搖床轉速為120 rpm ;
(2)取步驟(I)培養(yǎng)液Iml轉移進100 ml無機鹽液態(tài)培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含六價鉻20mg/L,六價鉻以重鉻酸鉀配制,30°C培養(yǎng)24 h,搖床轉速為120 rpm ;
(3)取步驟(2)培養(yǎng)液Iml轉移至100 ml無機鹽液態(tài)培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含六價鉻30mg/L,六價鉻以重鉻酸鉀配制,30°C培養(yǎng)24 h,搖床轉速為120 rpm,以此類推其余條件不變以10 mg/L的增量,逐步增加六價鉻的含量,直至六價鉻濃度達到50 mg/L,培養(yǎng)24 h后得到馴化菌液;
(4)取馴化菌液Iml轉移至9 ml無菌生理鹽水中,稀釋10倍,菌液依次梯度稀釋至菌液濃度為10_7 (即每次取前一步驟的稀釋液加入到9 ml
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