Rrm2b基因或其蛋白在肝癌轉(zhuǎn)移中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及腫瘤診療領(lǐng)域。具體地，本發(fā)明涉及RRM2B基因或其蛋白在肝癌轉(zhuǎn)移 診斷和治療中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 原發(fā)性肝癌是一種嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的惡性腫瘤，而包括中國(guó)在內(nèi)的東亞地區(qū)是 肝癌的高發(fā)區(qū)，由于其惡性程度高、預(yù)后不良，在中國(guó)原發(fā)性肝癌已經(jīng)成為第二位致死性腫 瘤。其中肝細(xì)胞癌化巧atocellular carcinoma,肥C)占原發(fā)性肝癌的90%W上。研究表 明肝癌的發(fā)生與病毒性肝炎及攝入黃曲霉素污染的食物等等有密切關(guān)系，其發(fā)生發(fā)展與癌 基因異常表達(dá)及抑癌基因失活密切相關(guān)。肥C發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制十分復(fù)雜，目前尚不完全 清楚。因此，進(jìn)一步探索研究新的基因功能改變與肝癌發(fā)生發(fā)展及其惡性特征的關(guān)系，對(duì)掲 示其發(fā)生發(fā)展的精確分子機(jī)制、設(shè)計(jì)合理的治療方案及判斷預(yù)后，進(jìn)一步提高肝癌的治療 水平具有重要意義。
[0003] 核巧酸是DNA和RNA的構(gòu)件分子，核巧酸生物合成的奈亂廣泛影響正常細(xì)胞的生 理功能，最終導(dǎo)致正常細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化，由于腫瘤細(xì)胞具有無(wú)限增殖的能力，機(jī)體必須為其 需要提供更多的核巧酸。因此核巧酸代謝在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮非常重要的作用。研 究表明有一系列關(guān)鍵的酶調(diào)節(jié)核巧酸的合成和修飾，其中核糖核巧酸還原酶（RR)就是其 中的一個(gè)。
[0004] 在人體中RR由有H個(gè)亞基構(gòu)成，一個(gè)大亞基（RRM1)和兩個(gè)小亞基（RRM2和 RRM2B)構(gòu)成。每個(gè)亞基所起的作用各不相同，如RRM1被廣泛認(rèn)同為抑癌基因，RRM2和RRM2B 則被認(rèn)為通過(guò)p53的調(diào)節(jié)影響DNA修復(fù)。然而，關(guān)于該兩個(gè)亞基的具體功能和作用機(jī)制的 研究頗有爭(zhēng)議，尤其是RRM2B，目前尚未明確該基因的作用機(jī)制W及在癌癥中起到的具體作 用。
[0005] 因此，本領(lǐng)域迫切需要進(jìn)行對(duì)腫瘤相關(guān)基因的研究，尤其是在中國(guó)發(fā)病率很高的 肝癌的相關(guān)基因，并闡明該些基因與肝癌的發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，并且為肝癌的診斷和治療提 供新的思路。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明提供了一種診斷肝癌轉(zhuǎn)移的標(biāo)志物RRM2B，W及RRM2B在治療肝癌轉(zhuǎn)移中 的應(yīng)用。
[0007] 本發(fā)明第一方面，提供了 一種核糖核巧酸還原酶亞基 M2lURibonucleoside-di地OS地ate reductase subunit M2B，RRM2B)基因或其蛋白檢測(cè)試 劑的用途，用于制備診斷肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的試劑盒。
[0008] 在另一優(yōu)選例中，所述的轉(zhuǎn)移包括肝內(nèi)轉(zhuǎn)移和肝外轉(zhuǎn)移。
[0009] 在另一優(yōu)選例中，所述的肝外轉(zhuǎn)移包括肺轉(zhuǎn)移、骨轉(zhuǎn)移、或腦轉(zhuǎn)移。
[0010] 在另一優(yōu)選例中，所述的RRM2B基因或其蛋白來(lái)自哺乳動(dòng)物，較佳地，來(lái)自曬齒動(dòng) 物（小鼠或大鼠）或靈長(zhǎng)動(dòng)物（例如人）；更佳地，來(lái)源于人。
[0011] 在另一優(yōu)選例中，所述的RRM2B基因的編碼序列如SEQ ID NO. ;42佑enbank ID : NM_015713. 4)：
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 核糖核苷酸還原酶亞基 M2B(Ribonucleoside_diphosphate reductase subunit M2B，RRM2B)基因或其蛋白檢測(cè)試劑的用途，其特征在于，用于制備診斷肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的試 劑盒。
2. 如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的RRM2B基因或其蛋白檢測(cè)試劑包括 RRM2B的特異性抗體、特異性擴(kuò)增引物、探針或芯片。
3. 如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的檢測(cè)是測(cè)定肝癌組織、或正常肝組織 樣品。
4. 一種用于檢測(cè)肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的診斷試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒含有一容器， 所述容器中含有檢測(cè)RRM2B蛋白或mRNA的檢測(cè)試劑；以及標(biāo)簽或說(shuō)明書(shū)，所述標(biāo)簽或說(shuō)明 書(shū)注明所述試劑盒用于檢測(cè)肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移。 5. RRM2B基因、蛋白或其促進(jìn)劑的用途，其特征在于，用于制備抑制肝癌或抑制肝癌細(xì) 胞轉(zhuǎn)移的藥物組合物。
6. 如權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于，所述的藥物組合物包括治療有效量的RRM2B 基因、蛋白或其促進(jìn)劑，和藥學(xué)上可接受的載體。
7. -種篩選用于抑制肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的候選化合物的方法，其特征在于，包括步驟： (a) 測(cè)試組中，在肝癌細(xì)胞的培養(yǎng)體系中添加測(cè)試化合物，并觀(guān)察所述測(cè)試組的細(xì)胞中 RRM2B的表達(dá)量和/或活性；在對(duì)照組中，在相同細(xì)胞的培養(yǎng)體系中不添加測(cè)試化合物，并 觀(guān)察對(duì)照組的所述細(xì)胞中RRM2B的表達(dá)量和/或活性； 其中，如果測(cè)試組中細(xì)胞的RRM2B的表達(dá)量和/或活性高于對(duì)照組，就表明該測(cè)試化合 物是對(duì)RRM2B的表達(dá)和/或活性有促進(jìn)作用的抑制肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的化合物；和/或 (b) 對(duì)于步驟（a)中獲得的候選化合物，測(cè)試所述候選化合物對(duì)肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的抑制 作用。
8. 如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，在步驟（b)中包括步驟：向測(cè)試組肝癌細(xì)胞 的培養(yǎng)體系中添加測(cè)試化合物，并觀(guān)察肝癌細(xì)胞移動(dòng)的距離的數(shù)量和/或侵襲情況；向?qū)?照組肝癌細(xì)胞的培養(yǎng)體系中不添加測(cè)試化合物，并觀(guān)察肝癌細(xì)胞移動(dòng)的距離的數(shù)量和/或 侵襲情況；其中，如果測(cè)試組中肝癌細(xì)胞的遷移距離或侵襲數(shù)量顯著小于對(duì)照組，就表明該 測(cè)試化合物是對(duì)肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移有抑制作用的化合物。
9. 一種RRM2B抑制劑的用途，其特征在于，用于制備促進(jìn)肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的組合物或試 劑。
10. -種RRM2B基因的表達(dá)載體，其特征在于，所述的表達(dá)載體具有以下元件： (i) 啟動(dòng)子元件； (ii) RRM2B編碼序列；和 (iii) 終止密碼子元件； 其中，所述的啟動(dòng)子元件與Egrl不結(jié)合。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了RRM2B基因或其蛋白在肝癌轉(zhuǎn)移中的應(yīng)用。具體地，本發(fā)明提供了核糖核苷酸還原酶亞基M2B(Ribonucleoside-diphosphate reductase subunit M2B，RRM2B)基因或其蛋白檢測(cè)試劑的用途，其用于制備診斷肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的試劑盒。此外，本發(fā)明還提供了RRM2B對(duì)肝癌轉(zhuǎn)移具有抑制作用。為肝癌轉(zhuǎn)移提供了診斷和治療的新途徑。
【IPC分類(lèi)】G01N33-574, G01N33-573, A61K48-00, C12N15-85, C12Q1-02, C12Q1-68, A61K38-44, A61P35-00
【公開(kāi)號(hào)】CN104630338
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201310606030
【發(fā)明人】李錦軍, 田華, 李紅, 葛超, 張立行
【申請(qǐng)人】上海市腫瘤研究所
【公開(kāi)日】2015年5月20日
【申請(qǐng)日】2013年11月8日