本發(fā)明涉及生物，尤其是涉及一種抗西酞普蘭的抗體或其抗原結(jié)合片段及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、如下陳述僅提供與本發(fā)明有關(guān)的背景信息，而不必然地構(gòu)成現(xiàn)有技術(shù)。

2、抑郁癥是精神科常見的一種精神疾病，且多數(shù)患者伴有焦慮癥狀，這種抑郁與焦慮的共病現(xiàn)象不但普遍存在年輕患者中，而且在老年患者中更為常見，甚至成為患者就醫(yī)的主要癥狀之一。西酞普蘭(citalopram)在治療抑郁癥同時(shí)伴隨焦慮癥狀的老年抑郁癥患者方面，取得了良好的療效，以其作用溫和，藥物相互作用較少，安全性較好，而對(duì)其他神經(jīng)遞質(zhì)的作用影響很少，特別是對(duì)膽堿能毒蕈堿受體、組織胺受體和α-腎上腺素能受體無抑制作用。特別適用于老年人群體。

3、西酞普蘭的分子結(jié)構(gòu)式如式(ⅰ)所示:

4、

5、受基因多態(tài)性影響，個(gè)體體內(nèi)藥物濃度差異較大，血藥濃度與臨床療效和不良反應(yīng)密切相關(guān)，在精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)時(shí)代，需要監(jiān)測(cè)患者血藥濃度并根據(jù)血藥濃度來調(diào)整藥物劑量，以實(shí)現(xiàn)個(gè)體化用藥。因此，測(cè)定血液中西酞普蘭濃度對(duì)保證其藥物療效具有重要作用。

6、常用的西酞普蘭血藥濃度的測(cè)定方法主要包括毛細(xì)管電泳-電化學(xué)發(fā)光法、高效液相色譜-熒光檢測(cè)法、高效液相色譜-紫外檢測(cè)法、高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法等。其中，高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法成本較高，對(duì)人員及場(chǎng)地要求高，不適于在中小型醫(yī)院等廣泛開展，故目前國(guó)內(nèi)外檢測(cè)人體血漿中西酞普蘭濃度的方法主要是常規(guī)高效液相色譜法，但西酞普蘭在人體中的血藥濃度較低，且目前方法存在前處理操作較復(fù)雜，分析時(shí)間較長(zhǎng)，消耗有機(jī)溶劑較多，易污染和損壞色譜柱等問題。液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)成本高，不同的樣品，方法配置復(fù)雜，系統(tǒng)維護(hù)成本高；回收率較低，測(cè)試不精確等。上述方法大部分僅局限于實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)，而直接用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的較少。實(shí)現(xiàn)對(duì)西酞普蘭的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，將對(duì)西酞普蘭血藥濃度的醫(yī)學(xué)監(jiān)測(cè)具有重大的意義，因此建立快速、靈敏、準(zhǔn)確的檢測(cè)技術(shù)是很有必要的。

7、為了解決現(xiàn)場(chǎng)大規(guī)模應(yīng)用的問題，免疫學(xué)法由于其檢測(cè)速度快，成本低，通量高，部分免疫學(xué)檢測(cè)方法(膠體金紙層析法)還具有操作簡(jiǎn)單，不需要額外設(shè)備等優(yōu)點(diǎn)，倍受重視。因此，開發(fā)出優(yōu)良的西酞普蘭診斷用的抗體成為了決定免疫學(xué)法應(yīng)用前景的關(guān)鍵。

8、有鑒于此，特提出本發(fā)明。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、第一方面，提供了一種抗西酞普蘭的抗體或其抗原結(jié)合片段，該抗體或其抗原結(jié)合片段含有重鏈可變區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)hcdr1、hcdr2和hcdr3，和輕鏈可變區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)lcdr1、lcdr2和lcdr3；

2、所述hcdr1、hcdr2和hcdr3包括與seq?id?no.1所示的重鏈可變區(qū)的hcdr1、hcdr2和hcdr3一致的氨基酸序列；所述lcdr1、lcdr2和lcdr3包括與seq?id?no.2所示的輕鏈可變區(qū)的lcdr1、lcdr2和lcdr3一致的氨基酸序列。

3、第二方面，還提供了一種生物材料，所述生物材料選自(ⅰ)～(ⅲ)中任一項(xiàng)：

4、(ⅰ)多核苷酸，所述多核苷酸編碼第一方面所述的抗西酞普蘭的抗體或其抗原結(jié)合片段的核苷酸序列。

5、(ⅱ)載體，所述載體攜帶所述(ⅰ)中多核苷酸。

6、(ⅲ)細(xì)胞，所述細(xì)胞攜帶所述(ⅰ)中多核苷酸，或含有所述(ⅱ)中載體，或表達(dá)所述抗西酞普蘭的抗體或其抗原結(jié)合片段。

7、第三方面，還提供了一種含有抗體的組合物，該含有抗體的組合物包含連接的或分別獨(dú)立包裝的如下(ⅰ)和(ⅱ)：

8、(ⅰ)第一方面所述的抗西酞普蘭的抗體或其抗原結(jié)合片段。

9、(ⅱ)示蹤標(biāo)記物和/或固相載體。

10、第四方面，還提供了一種含有抗體的綴合物，所述綴合物包含第一方面所述的抗西酞普蘭的抗體或其抗原結(jié)合片段和功能分子，所述功能分子與所述抗體或其抗原結(jié)合片段共價(jià)連接，所述功能分子包括糖、蛋白質(zhì)、多肽、脂質(zhì)、核酸和小分子化合物中的一種或多種。

11、第五方面，還提供了第一方面所述的抗西酞普蘭的抗體或其抗原結(jié)合片段，或第二方面所述的生物材料，或第三方面所述的含有抗體的組合物，或所述第四方面所述的含有抗體的綴合物在如下(ⅰ)～(iv)任一項(xiàng)中的應(yīng)用：

12、(ⅰ)非診斷和治療目的地檢測(cè)西酞普蘭；

13、(ⅱ)非診斷和治療目的地檢測(cè)西酞普蘭代謝物；

14、(ⅲ)制備用于檢測(cè)西酞普蘭的產(chǎn)品；

15、(iv)制備用于檢測(cè)西酞普蘭代謝物的產(chǎn)品。

16、第六方面，還提供了一種用于檢測(cè)西酞普蘭的試劑盒，該試劑盒包含第一方面的抗西酞普蘭的抗體或其抗原結(jié)合片段，或第三方面的含有抗體的組合物，或所述第四方面所述的含有抗體的綴合物。

17、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：

18、本發(fā)明運(yùn)用西酞普蘭免疫balb/c小鼠，取小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，通過特異性的高通量篩選得到具有高度特異性的雜交瘤細(xì)胞，通過培養(yǎng)和再免疫獲得大量小鼠腹水，再經(jīng)多步分離及純化獲得高純度、高靈敏度和高特異性的抗西酞普蘭的單克隆抗體anti-citalopram-mab1，為開發(fā)檢測(cè)西酞普蘭的免疫檢測(cè)產(chǎn)品提供了所需的原料。本發(fā)明的抗西酞普蘭的抗體或其抗原結(jié)合片段經(jīng)驗(yàn)證具有良好的特異性結(jié)合能力，能夠?yàn)榛诿庖邔W(xué)原理的檢測(cè)西酞普蘭方法提供穩(wěn)定可靠的原料來源，降低產(chǎn)品對(duì)外購(gòu)原料的依賴，降低產(chǎn)品成本。同時(shí)提高了西酞普蘭快速診斷商品如金標(biāo)試紙條、elisa試劑盒等的檢出率及靈敏度，降低假陽性率。

技術(shù)特征：

1.一種抗西酞普蘭的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，所述抗體或其抗原結(jié)合片段含有重鏈可變區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)hcdr1、hcdr2和hcdr3，和輕鏈可變區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)lcdr1、lcdr2和lcdr3；

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，所述抗西酞普蘭的抗體或其抗原結(jié)合片段的hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2或lcdr3由kabat、chothia、imgt、abm或contact任意一種系統(tǒng)或多種定義系統(tǒng)組合定義；

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，所述重鏈可變區(qū)還含有框架區(qū)，和/或，所述輕鏈可變區(qū)還含有框架區(qū)；

4.根據(jù)權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，所述抗原結(jié)合片段為f(ab’)2、fab’、fab、fv、scfv、dsfv、雙特異抗體和抗體最小識(shí)別單位中的一種；

5.生物材料，其特征在于，所述生物材料選自(ⅰ)～(ⅲ)中任一項(xiàng)：

6.含有抗體的組合物，其特征在于，包含連接的或分別獨(dú)立包裝的如下(ⅰ)和(ⅱ)：

7.含有抗體的綴合物，其特征在于，包含權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的抗西酞普蘭的抗體或其抗原結(jié)合片段和功能分子，所述功能分子與所述抗體或其抗原結(jié)合片段共價(jià)連接，所述功能分子包括糖、蛋白質(zhì)、多肽、脂質(zhì)、核酸和小分子化合物中的一種或多種。

8.權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的抗西酞普蘭的抗體或其抗原結(jié)合片段，或權(quán)利要求5所述的生物材料，或權(quán)利要求6所述的含有抗體的組合物，或權(quán)利要求7所述的含有抗體的綴合物在如下(ⅰ)～(iv)任一項(xiàng)中的應(yīng)用：

9.用于檢測(cè)西酞普蘭的試劑盒，其特征在于，包含權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的抗西酞普蘭的抗體或其抗原結(jié)合片段，或權(quán)利要求6所述的含有抗體的組合物，或權(quán)利要求7所述的含有抗體的綴合物。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括用于免疫檢測(cè)的試劑盒；

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種抗西酞普蘭的抗體或其抗原結(jié)合片段及其應(yīng)用，涉及生物技術(shù)領(lǐng)域。該抗體或其抗原結(jié)合片段含有重鏈可變區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)和輕鏈可變區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)，重鏈可變區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)包括與SEQ?ID?NO.1所示的重鏈可變區(qū)的HCDR1、HCDR2和HCDR3一致的氨基酸序列；輕鏈可變區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)包括與SEQ?ID?NO.2所示的輕鏈可變區(qū)的LCDR1、LCDR2和LCDR3一致的氨基酸序列。該抗體或其抗原結(jié)合片段能夠結(jié)合西酞普蘭或其代謝產(chǎn)物，可用于免疫學(xué)檢測(cè)，為基于免疫學(xué)原理檢測(cè)西酞普蘭的方法提供了穩(wěn)定可靠的原料來源。

技術(shù)研發(fā)人員：陳媛,成含鋒,魏文濤
受保護(hù)的技術(shù)使用者：杭州旭科生物技術(shù)有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/2