本申請涉及獸醫(yī)藥物，尤其是涉及一種肉雞α-干擾素、防治禽流感的藥物及其制備方法。

背景技術：

1、肉雞α-干擾素是一種具有高效和廣譜抗病毒作用的細胞因子，它能夠廣泛用于動物領域的抗病毒治療，誘導細胞表達抗病毒蛋白抑制病毒的增殖。這種肉雞α-干擾素對入侵的各種病毒均有強烈的抵抗或抑制作用，是機體防御病毒體系的一部分，具有廣譜的預防、治療病毒性疾病的作用。這種廣譜、非特異的肉雞α-干擾素不針對特定的病毒，而是對多種病毒都有抑制作用，因此被稱為“綠色”藥品，不污染環(huán)境，為動物健康提供了有效的保護。在獸醫(yī)臨床上，肉雞α-干擾素被用作一種抗病毒性較強的生物制品，用于預防和控制雞病毒性疾病的流行。

2、抗體治療是現(xiàn)在比較常見的禽類病毒疾病的治療手段。但是，抗體具有病毒特異性，每種病毒的血清型較多，并且變異性較強，針對性的抗體的制備具有很高的要求，所以對大范圍都適應的疫苗制作帶來了很大的困難。

3、禽流感是一種嚴重的家禽疾病，對肉雞的養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。目前，盡管有多種針對禽流感的治療和防控方法，但由于禽流感病毒的復雜性和易變性，利用禽流感抗體治療的效果并不理想。

4、因此，開發(fā)一種高效、安全的防治禽流感的藥物，對于肉雞養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展具有重要意義。

技術實現(xiàn)思路

1、為了提高肉雞α-干擾素的效率，提供一種高效安全的防治禽流感的藥物。

2、第一方面，本申請?zhí)峁┮环N肉雞α-干擾素，采用如下的技術方案實現(xiàn)。

3、一種肉雞α-干擾素，所述肉雞α-干擾素基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

4、第二方面，本申請?zhí)峁┮环N防治禽流感的藥物，包括具有生物活性的肉雞α-干擾素，所述肉雞α-干擾素基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

5、優(yōu)選的，還包括禽流感抗體。

6、第三方面，本申請?zhí)峁┮环N肉雞α-干擾素的制備方法，包括以下步驟：

7、從肉雞組織或細胞中提取基因組，采用以下肉雞α-干擾素基因的引物擴增目標基因片段：chi-a-p1：atggctgtgcctgcaag；

8、chi-a-p2：ctaagtgcgcgtgttgcctg；

9、對肉雞α-干擾素基因進行氨基酸優(yōu)化，去掉基因的信號肽序列，根據(jù)優(yōu)化后的基因序列和載體多克隆位點設計帶有酶切位點的引物如下：

10、chi-a-p1-site1：ggaattccatatggccaccaccgcctccg；

11、chi-a-p2-site2：ataagaatgcggccgcagtgcgcgtgttgcctgtga；

12、形成重組質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化到宿主細胞e.coli?bl21(de3)中，純化；肉雞α-干擾素具有如seq?id?no.1所示的核苷酸序列。

13、優(yōu)選的，還包括以下步驟：

14、制備保護劑：稱取稱量葡萄糖50-80g、吐溫-80?3-5g，加入注射用水溶解至1l后，115℃滅菌15min，放涼(4℃)后備用；

15、將肉雞α-干擾素與保護劑混合，加入無菌水，充分攪勻。

16、第四方面，本申請?zhí)峁┮环N防治禽流感的藥物的制備方法，制備如權利要求或的肉雞α-干擾素，還包括以下步驟：

17、制備禽流感抗體：

18、制備h9禽流感病毒免疫原：制備油相和水相，按礦物油佐劑與滅活病毒液3∶1(v/v)的比例配制免疫原；

19、對蛋雞進行免疫注射，使其產(chǎn)生特異性抗體；

20、雞蛋驗收消毒，分離蛋黃；

21、制備蛋黃抗體：

22、取蛋黃和滅菌生理鹽水，置于滅菌攪拌缸內(nèi)，勻漿，過濾加入硫柳汞和青、鏈霉素，充分搖勻；

23、與所述肉雞α-干擾素混合。

24、優(yōu)選的，所述肉雞α-干擾素與所述禽流感抗體的混合比例為1:2-2:1。

25、綜上所述，本申請包括以下至少一種有益技術效果。

26、1.利用肉雞α-干擾素的廣譜長效的抗病毒性提升機體的免疫力，抗體的即時抗病毒效果提升肉雞對禽流感病毒的抵抗力、增強治療效果。

27、2.通過利用肉雞α-干擾素和禽流感抗體的協(xié)同作用，提高治療效果，降低治療成本，同時減少藥物殘留，保障養(yǎng)殖安全、食品安全。

28、3.更有效地抑制禽流感病毒的復制和感染，減輕病毒對肉雞的危害，同時促進肉雞的康復。此外，由于肉雞α-干擾素和抗體均來源于肉雞自身，因此具有更好的生物相容性和安全性，減少了藥物殘留的風險。

29、附圖說明

30、圖1是肉雞α-干擾素基因的信號肽分析結(jié)果圖。

31、圖2是肉雞α-干擾素成熟肽片段的切膠回收檢測結(jié)果圖。

32、圖3是肉雞α-干擾素表達載體質(zhì)粒提取電泳檢測圖。

33、圖4是肉雞α-干擾素包涵體的洗滌液和溶解液的western?blot的檢測結(jié)果圖。

34、圖5是肉雞α-干擾素雞胚成纖維細胞對抗h9病毒的效果圖。

35、圖6是肉雞α-干擾素+保護劑雞胚成纖維細胞的對抗h9病毒的效果圖。

技術特征：

1.一種肉雞α-干擾素，其特征在于：所述肉雞α-干擾素基因的核苷酸序列如seqidno.1所示。

2.一種防治禽流感的藥物，其特征在于：包括具有生物活性的肉雞α-干擾素，所述肉雞α-干擾素基因的核苷酸序列如seqidno.1所示。

3.根據(jù)權利要求2所述的一種防治禽流感的藥物，其特征在于：還包括禽流感抗體。

4.一種肉雞α-干擾素的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

5.根據(jù)權利要求4所述的一種肉雞α-干擾素的制備方法，其特征在于，還包括以下步驟：

6.一種防治禽流感的藥物的制備方法，其特征在于，制備如權利要求或的肉雞α-干擾素，還包括以下步驟：

7.根據(jù)權利要求6所述的一種防治禽流感的藥物的制備方法，其特征在于：所述肉雞α-干擾素與所述禽流感抗體的混合比例為1:2-2:1。

技術總結(jié)
本申請涉及獸醫(yī)藥物技術領域，尤其是涉及一種肉雞α?干擾素、防治禽流感的藥物及其制備方法。一種肉雞α?干擾素，所述肉雞α?干擾素基因的核苷酸序列如SeqIDNO.1所示。通過利用肉雞α?干擾素和禽流感抗體的協(xié)同作用，提高治療效果，降低治療成本，同時減少藥物殘留，保障養(yǎng)殖安全、食品安全。更有效地抑制禽流感病毒的復制和感染，減輕病毒對肉雞的危害，同時促進肉雞的康復。此外，由于肉雞α?干擾素和抗體均來源于肉雞自身，因此具有更好的生物相容性和安全性，減少了藥物殘留的風險。

技術研發(fā)人員：杜新永,劉云峰,崔翠,崔耐,王卿君
受保護的技術使用者：青島潤達生物科技有限公司
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/1/9