本發(fā)明涉及一種微生物粉劑及其制備方法和應(yīng)用，具體涉及一種宛氏擬青霉粉劑及其制備方法和應(yīng)用，屬于農(nóng)業(yè)微生物
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：近年來(lái)，由于連作面積的不斷擴(kuò)大，以及不科學(xué)用藥，致使線蟲(chóng)發(fā)展蔓延速度較快，抗性增強(qiáng)，作物死苗率不斷增加，從而造成了作物嚴(yán)重減產(chǎn)，甚至絕產(chǎn)，品質(zhì)降低，已經(jīng)嚴(yán)重影響了農(nóng)作物生產(chǎn)。市場(chǎng)上存在多種防治線蟲(chóng)的菌劑，但是這些菌劑殺線蟲(chóng)效率低，保質(zhì)期短，孢子含量低。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種殺線蟲(chóng)效率高、孢子含量高、保質(zhì)期長(zhǎng)、能夠有效防治線蟲(chóng)的宛氏擬青霉粉劑及其制備方法。為了實(shí)現(xiàn)上述目標(biāo)，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案：一種宛氏擬青霉粉劑，其特征在于，由保藏編號(hào)為cgmccno.13772的宛氏擬青霉在玉米粉培養(yǎng)基上發(fā)酵得到。前述的宛氏擬青霉粉劑，其特征在于，粉劑中宛氏擬青霉的孢子含量≥300億/克。前述的宛氏擬青霉粉劑，其特征在于，制備方法如下：step1：將保藏編號(hào)為cgmccno.13772的宛氏擬青霉接種在pda平板培養(yǎng)基上，27℃暗培養(yǎng)7d，將培養(yǎng)好的平板作為原種；step2：將step1培養(yǎng)好的原種接種在pda液體培養(yǎng)基上，27℃、121rpm暗培養(yǎng)4d，將發(fā)酵好的液體作為種子液；step3：將玉米粉加水控制濕度在20％，121℃滅菌30min，作為發(fā)酵培養(yǎng)基；step4：將step2培養(yǎng)好的種子液加入到step3制得的發(fā)酵培養(yǎng)基中，27℃靜置暗培養(yǎng)，待孢子含量≥300億/克時(shí)停止發(fā)酵；step5：將step4制得的發(fā)酵液烘干，粉碎，過(guò)100目篩子，得到孢子含量≥300億/克的宛氏擬青霉粉劑。本發(fā)明的有益之處在于：(1)宛氏擬青霉可以寄生線蟲(chóng)卵，分泌次生代謝產(chǎn)物抑制線蟲(chóng)生長(zhǎng)，經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證，本發(fā)明的宛氏擬青霉粉劑能夠有效防治線蟲(chóng)，具有非常積極的使用效果；(2)本發(fā)明的宛氏擬青霉粉劑，其孢子含量≥300億/克，孢子含量高，殺線蟲(chóng)效率高，并且保質(zhì)期長(zhǎng)；(3)本發(fā)明的宛氏擬青霉粉劑，其制備工藝簡(jiǎn)單，適合工廠化生產(chǎn)。具體實(shí)施方式以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作具體的介紹。第一部分：獲取宛氏擬青霉1、篩選分離菌株從有線蟲(chóng)發(fā)病的大棚采集土壤，將土壤用水沖洗，然后顯微鏡下觀察水樣，挑取死亡長(zhǎng)有菌絲的線蟲(chóng)，并將其轉(zhuǎn)移到pda平板上培養(yǎng)。2、鑒定菌株利用28s進(jìn)行分子檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果顯示菌株為宛氏擬青霉。3、菌株保藏我們將篩選分離得到的宛氏擬青霉于2017年03月31日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào))，保藏編號(hào)為cgmccno.13772，拉丁文名稱(chēng)為paecilomycesvariotii。第二部分：制備宛氏擬青霉粉劑1、培養(yǎng)原種將保藏編號(hào)為cgmccno.13772的宛氏擬青霉接種在pda平板培養(yǎng)基上，27℃暗培養(yǎng)7d，將培養(yǎng)好的平板作為原種。2、培養(yǎng)種子液將前面培養(yǎng)好的原種接種在pda液體培養(yǎng)基上，27℃、121rpm暗培養(yǎng)4d，將發(fā)酵好的液體作為種子液。3、制作發(fā)酵培養(yǎng)基將玉米粉加水控制濕度在20％左右，121℃滅菌30min，作為宛氏擬青霉的發(fā)酵培養(yǎng)基，待用。4、發(fā)酵將前面培養(yǎng)好的種子液加入到前面制得的玉米粉發(fā)酵培養(yǎng)基中，27℃靜置暗培養(yǎng)，待孢子含量≥300億/克時(shí)停止發(fā)酵。5、制成粉劑將前面制得的發(fā)酵液烘干，粉碎，過(guò)100目篩子，即得到孢子含量≥300億/克的宛氏擬青霉粉劑。第三部分：研究宛氏擬青霉粉劑的作用在山東臨沂某南瓜大棚，選取兩畝地，一畝地使用本發(fā)明的宛氏擬青霉粉劑1kg(作為實(shí)驗(yàn)組)，施用方法是對(duì)根部土壤進(jìn)行沖施，一畝地不使用任何處理(作為對(duì)照組)。比較結(jié)果如下：得病率防效實(shí)驗(yàn)組33％66.0％對(duì)照組97％——在山東青島某黃瓜大棚，選取兩畝地，一畝地使用本發(fā)明的宛氏擬青霉粉劑1kg(作為實(shí)驗(yàn)組)，施用方法是對(duì)根部土壤進(jìn)行拌土施用，一畝地不使用任何處理(作為對(duì)照組)。比較結(jié)果如下：得病率防效實(shí)驗(yàn)組30％69.4％對(duì)照組98％——由此可見(jiàn)，本發(fā)明的宛氏擬青霉粉劑可以有效防治線蟲(chóng)。宛氏擬青霉可以寄生線蟲(chóng)，同時(shí)產(chǎn)生多種次生代謝產(chǎn)物抑制線蟲(chóng)生長(zhǎng)，所以本發(fā)明的宛氏擬青霉粉劑可以有效防治線蟲(chóng)。由于本發(fā)明的宛氏擬青霉粉劑中宛氏擬青霉的孢子含量≥300億/克，含量高，所以殺線蟲(chóng)效率也高。需要說(shuō)明的是，上述實(shí)施例不以任何形式限制本發(fā)明，凡采用等同替換或等效變換的方式所獲得的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)12