本發(fā)明涉及8,11,13-羅漢松科-13-醇及其中間體的制備方法。
背景技術(shù)：
：松香是一種重要的化工原料，廣泛應(yīng)用于肥皂、造紙、油漆、橡膠等行業(yè)。松香是多種樹脂酸和少量脂肪酸以及中性物質(zhì)的混合物，其中松香酸是主要成分，具有三環(huán)二萜結(jié)構(gòu)，松香酸在工業(yè)上具有廣泛的應(yīng)用。近年來，研究表明松香酸及其衍生物具有重要的生物學(xué)功能。技術(shù)實現(xiàn)要素：為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種制備化合物9所示8,11,13-羅漢松科-13-醇，或其藥學(xué)上可接受的鹽，或其溶劑合物的方法，所述方法包括以下步驟：h、在氧化劑和酸的存在下，以化合物8為原料制備得到化合物9；其中，氧化劑選自雙氧水或過氧化叔丁醇，酸選自H2SO4、對甲基苯磺酸。進(jìn)一步地，氧化劑選自過氧化叔丁醇，酸選自H2SO4。進(jìn)一步地，過氧化叔丁醇與化合物8的摩爾比為1～3:1，優(yōu)選3:1。進(jìn)一步地，所述步驟h中，溶劑為二氯甲烷、四氫呋喃、乙酸或水。進(jìn)一步地，所述步驟h中，反應(yīng)的溫度為0～80℃，優(yōu)選50℃。進(jìn)一步地，所述方法還包括下述步驟：(1)將化合物1轉(zhuǎn)化為化合物5；(2)將化合物5轉(zhuǎn)化為化合物8。進(jìn)一步地，所述步驟(1)包括以下步驟：a、將化合物1與溴化氫反應(yīng)，制備得到化合物2；b、在堿性環(huán)境下，將化合物2轉(zhuǎn)化為化合物3；c、將化合物3轉(zhuǎn)化為化合物4；d、將化合物4轉(zhuǎn)化為化合物5。進(jìn)一步地，所述步驟a中，溶劑為乙酸，優(yōu)選的反應(yīng)溫度為20～30℃；所述步驟b中，所用的堿為LiOH，溶劑為二甲基甲酰胺；優(yōu)選的反應(yīng)溫度為80℃；所述步驟c中，包括將化合物3與碘乙烷在堿性環(huán)境下反應(yīng)的步驟；優(yōu)選的，所用的堿為碳酸鉀，溶劑為丙酮；進(jìn)一步優(yōu)選的反應(yīng)溫度為60℃；所述步驟d中，包括將化合物4與LiAlH4反應(yīng)的步驟；優(yōu)選的，溶劑為四氫呋喃；進(jìn)一步優(yōu)選的反應(yīng)溫度為20～30℃。進(jìn)一步地，所述步驟(2)包括以下步驟：e、將化合物5轉(zhuǎn)化為化合物6；f、將化合物6轉(zhuǎn)化為化合物7；g、將化合物7轉(zhuǎn)化為化合物8。進(jìn)一步地，所述步驟e中，包括將化合物5與對甲基苯磺酰氯反應(yīng)的步驟；優(yōu)選的，所述的溶劑選自二氯甲烷、吡啶、四氫呋喃、乙腈，更優(yōu)選吡啶；進(jìn)一步優(yōu)選的反應(yīng)溫度為20～30℃；所述步驟f中，包括將化合物6與碘化鈉和鋅粉反應(yīng)的步驟；優(yōu)選的，所述的溶劑選自N,N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、六甲基磷酰三胺，優(yōu)選六甲基磷酰三胺；進(jìn)一步優(yōu)選的反應(yīng)溫度為105℃；所述步驟g中，包括將化合物7與SeO2反應(yīng)的步驟；優(yōu)選的溶劑選自二氯甲烷、四氫呋喃、乙腈，更優(yōu)選四氫呋喃；進(jìn)一步優(yōu)選的反應(yīng)溫度為0℃。本發(fā)明的制備化合物9的方法，方法簡便，收率高，易于放大，適合于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。具體實施方式下述實施例中：松香酸1購于安耐吉化學(xué)；氫氧化鋰、氫化鋁鋰、石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇、丙酮、吡啶、四氫呋喃、碳酸鉀、對甲苯磺酰氯、過氧化叔丁醇、冰醋酸、碘乙烷、N,N-二甲基甲酰胺、33％氫溴酸等購于成都市科龍化工試劑廠；鋅粉、碘化鈉、六甲基磷酰三胺、氯鉻酸吡啶嗡鹽、二氧化硒等試劑購于成都瑞歐克科技有限公司。試驗中所應(yīng)用的試劑除特殊說明外，其余均為市面所售分析純，無水試劑與溶劑均按要求處理；薄層層析所用的硅膠預(yù)制板為青島海洋化工有限公司所生產(chǎn)的硅膠GF254預(yù)制板；快速硅膠柱層析采用青島海洋化工廠生產(chǎn)的硅膠H。實施例1化合物8的合成路線如下：(a)33％HBr/AcOH,rt.,6h,81％；(b)LiOH,N,N-二甲基甲酰胺,80℃,7h,100％；(c)EtI,K2CO3,丙酮,60℃,3h,98％；(d)LiAlH4,四氫呋喃,rt.,3h,92％；(e)TsCl,吡啶,rt,5h,80％；(f)Zn,NaI,六甲基磷酰三胺,105℃,6h,75％；(g)SeO2,四氫呋喃,0℃,5-10h,80％；(h)t-BuOOH,H2SO4,50℃,1h,90％.1、二溴化物(2)的合成將化合物(1)(20.00g，66.40mmol)溶于64ml冰醋酸中，冰浴下滴加33％HBr/AcOH溶液(64ml，132.80mmol)，室溫攪拌6h，析出大量固體，TLC顯示原料完全反應(yīng)。過濾，濾餅經(jīng)冰醋酸洗滌至近白色，真空干燥過夜，得固體(25.00g，收率81％)，未經(jīng)純化直接投下一步。2、脫溴化物(3)的合成將二溴化物(2)(12.00g，25.88mmol)溶于244mlN,N-二甲基甲酰胺中，在常溫攪拌下加入LiOH(2.64g，64.72mmol)，升溫至80℃，反應(yīng)液基本呈無色透明，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，反應(yīng)液又變?yōu)樯詈稚?，反?yīng)7h，TLC顯示完全反應(yīng)。旋去DMF，加水用稀鹽酸將反應(yīng)液的pH調(diào)至2～3，用乙酸乙酯萃取3次，用飽和食鹽水洗滌，干燥，濃縮，得淡黃色油狀物，真空干燥過夜，收率定量。未經(jīng)純化直接投下一步。3、化合物(4)的合成將化合物(3)(15.00g，49.67mmol)用150ml丙酮溶解，常溫下加入K2CO3(20.00g)，攪拌反應(yīng)15min。將碘乙烷(11.12ml，149.01mmol)逐滴加入到反應(yīng)液中，升溫至60℃，隨著反應(yīng)的進(jìn)行反應(yīng)液變?yōu)槿辄S色。反應(yīng)24h，TLC顯示完全反應(yīng)。旋盡丙酮，加水，用乙酸乙酯提取3次，用飽和食鹽水洗滌，干燥，濃縮，粗品經(jīng)柱層析(PE:EA＝20：1)純化得淡黃色固體(16.15g，收率98％)。4、化合物5的合成將化合物(4)(16.00g，48.78mmol)用50mlTHF溶解，在冰浴攪拌下加入到LiAlH4(7.00mg,195.12mmol)的50mlTHF混合液中，有氣體產(chǎn)生，室溫攪拌反應(yīng)3h，TLC顯示完全反應(yīng)。冰浴下用稀鹽酸將pH調(diào)至6，過濾。旋盡濾液，加水，用乙酸乙酯提取3次，用飽和食鹽水洗滌，干燥，濃縮，得無色透明油狀物(13.45g，收率92％)。5、化合物6的合成將化合物(5)(13.00g，45.14mmol)和TsCl(52.00g，270.8mmol)在100ml吡啶中室溫攪拌反應(yīng)5h，TLC顯示完全反應(yīng)。旋去吡啶，加水，用二氯甲烷提取3次，用飽和食鹽水洗滌，干燥，濃縮，粗品經(jīng)柱層析(PE:EA＝60：1)純化得無色透明透明油狀物(15.87g，收率80％)。6、化合物7的合成將化合物(6)(0.05g，0.11mmol)的1ml六甲基磷酰三胺溶液逐滴加入到NaI(0.08g,0.54mmol)和Zn(0.07g,1.07mmol)中，升溫至105℃攪拌反應(yīng)6h，TLC顯示完全反應(yīng)。用石油醚(乙酸乙酯不好分層)提取3次，用飽和食鹽水洗滌，干燥，濃縮，粗品經(jīng)柱層析(PE:EA＝60：1)純化得無色透明油狀物(200mg，收率75％)。7、化合物8的合成將化合物(7)(0.37g，1.36mmol)溶于265mlTHF中，原料完全溶解，在0℃下加入SeO2(300mg,2.72mmol)顯示多數(shù)原料反應(yīng)完全，有少量大極性雜質(zhì)生成。過濾，濾液用乙酸乙酯提取3次，用飽和食鹽水洗滌，干燥，濃縮，粗品經(jīng)柱層析(PE:EA＝5：1)純化得淡黃色油狀物(310mg，收率80％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.80(d,J＝8.2Hz,1H),7.37(d,J＝8.0Hz,1H),7.22(s,1H),5.32(s,1H),3.85(d,J＝9.3Hz,1H),3.62(d,J＝9.4Hz,1H),2.93～2.73(m,2H),2.48(s,3H),1.71(m,2H),1.60(s,3H),1.58(s,3H),1.51～1.30(m,6H),1.20(s,3H),0.91(s,3H).13CNMR(101MHz,CDCl3)δ147.84,144.70,1f34.55,133.00,127.92,124.82,72.29,43.52,38.01,37.39,37.18,37.09,35.02,31.63,29.96,29.71,25.15,21.67,18.80,18.30,17.14.HRMS(AP-ESI)Calcd.forC20H30NaO:309.2195(M+Na)+.Found:309.2185.8、化合物9的合成將化合物8(0.11g，0.40mmol)溶于1.6mlAcOH中，在室溫攪拌下依次加入t-BuOOH(115.2μL，1.20mmol)和H2SO4(2.0μL，0.04mmol)，室溫攪拌24h。TLC顯示完全反應(yīng)。旋去溶劑，用二氯甲烷提取3次，有機(jī)層用飽和NaHCO3洗滌三次，又取飽和NaHCO3層用稀鹽酸將pH調(diào)至3，再用二氯甲烷提取水層兩次，干燥，濃縮，粗品經(jīng)柱層析(PE:EA＝10：1)純化得淡黃色油狀物(88mg，收率90％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.14(d,J＝8.6Hz,1H),6.64(dd,J＝8.5,2.7Hz,1H),6.53(d,J＝2.6Hz,1H),4.77(s,1H),3.02～2.65(m,2H),1.88(m,1H)1.81～1.56(m,4H),1.54～1.23(m,4H),1.19(s,3H),0.97(s,3H),0.95(s,3H).13CNMR(300MHz,CDCl3)δ148.12,138.14,132.15,120.92,110.14,108.16,45.84,36.98,34.31,32.55,28.66,28.59,25.73,20.23,16.86,14.59,14.25HRMS(AP-ESI)Calcd.forC17H25O:245.1878(M+H)+.Found:245.1895.化合物9的合成，過氧化重排試劑可為H2O2、p-TsOH，t-BuOOH、H2SO4，最優(yōu)為t-BuOOH、H2SO4；溶劑可用THF、冰醋酸，以冰醋酸為最優(yōu)；t-BuOOH的當(dāng)量可為1eq、2eq、3eq，以3eq為最優(yōu)。結(jié)果如表1所示。表1化合物9的合成條件摸索序號氧化重排試劑酸溶劑收率1過氧化氫(3eq)對甲苯磺酸(0.5eq)四氫呋喃70％2過氧化氫(2eq)對甲苯磺酸(0.5eq)冰醋酸46％3過氧化氫(1eq)對甲苯磺酸(0.5eq)冰醋酸34％4過氧化氫(3eq)對甲苯磺酸(0.5eq)冰醋酸79％5過氧化叔丁醇(3eq)濃硫酸(0.1eq)冰醋酸90％6過氧化叔丁醇(2eq)濃硫酸(0.1eq)冰醋酸55％7過氧化叔丁醇(1eq)濃硫酸(0.1eq)冰醋酸48％8過氧化叔丁醇(3eq)濃硫酸(0.1eq)四氫呋喃79％對比例1化合物8的制備路線發(fā)明人探索了多條化合物8的制備路線，其中的一條制備路線如下：(a)33％HBr/AcOH,rt.,6h,88％；(b)LiOH,二甲基甲酰胺,80℃,7h,100％；(c)SeO2,四氫呋喃,0℃,5h,80％；(d)EtI,K2CO3,丙酮,60℃,3h,92％；(e)LiAlH4,四氫呋喃,rt.,3h,84％；(f)氯鉻酸吡啶嗡鹽,CH2Cl2,rt.,4h,90％.具體為：化合物2的合成：將松香酸1溶于溶劑中，再加入溴化氫，松香酸：溴化氫的摩爾比為1:2，于常溫下攪拌反應(yīng)5h～7h，過濾，用結(jié)冰狀的冰醋酸洗滌，洗滌后真空干燥12小時，得中間體2；化合物3的合成：將步驟(a)中得到得中間體2溶于溶劑中，在常溫下加入堿，中間體2與氫氧根離子摩爾比為1:2.5，升溫至80℃攪拌反應(yīng)4h～6h，加稀鹽酸將pH調(diào)至2～3，萃取、洗滌、濃縮，得到中間體3；化合物10的合成：將步驟(b)中得到得中間體3溶于溶劑中，在0℃攪拌下加入二氧化硒，中間體3:二氧化硒的摩爾比為1:2～8，0℃下恒溫攪拌反應(yīng)4h～12h，過濾、萃取、洗滌、濃縮，得到中間體4；化合物11的合成：將步驟(c)中得到得中間體4溶于丙酮中，在常溫攪拌下加入堿，攪拌十五分鐘，在加入碘乙烷，中間體10：碘乙烷的摩爾比為1:2，升溫至60℃反應(yīng)4h～6h，萃取、洗滌、濃縮，得到松香酸衍生物11；化合物12的合成：將步驟(d)得到的中間體11用四氫呋喃溶解，在冰浴攪拌下加入到四氫鋁鋰的四氫呋喃混合液中，中間體4：四氫鋁鋰的摩爾比為1:4，室溫攪拌反應(yīng)3h，調(diào)pH至6，過濾、萃取、洗滌、濃縮，得到松香酸衍生物12；化合物13的合成：分別用二氯甲烷將步驟(e)得到的中間體12和氯鉻酸吡啶鎓鹽溶解，中間體與氯鉻酸吡啶鎓鹽的摩爾比為1:1.5，25℃攪拌下將中間體12的二氯甲烷溶液逐滴滴加到氯鉻酸吡啶鎓鹽得二氯甲烷溶液中，常溫攪拌反應(yīng)4h，過濾，萃取，洗滌，干燥，濃縮，純化得松香酸衍生物13。但是在合成過程中，從化合物13合成化合物14十分困難。采用黃鳴龍還原時，原料13基本反應(yīng)完全，但點(diǎn)很雜沒有明顯的主點(diǎn)，且反應(yīng)溫度接近二甲基硅油的沸點(diǎn)。因此，該條路線不適合于化合物8的制備。對比例2化合物8的制備路線發(fā)明人探索了多條化合物8的制備路線，其中的一條制備路線如下：(a)EtI,K2CO3,丙酮,60℃,3h,94％；(b)LiAlH4,THF,rt.,3h,84％；(c)TsCl,吡啶,rt,5h,84％；(d)Zn,NaI,六甲基磷酰三胺,105℃,6h,98％.化合物15的合成：將松香酸1溶于丙酮中，在常溫攪拌下加入堿，攪拌十五分鐘，在加入碘乙烷，中間體10：碘乙烷的摩爾比為1:2，升溫至60℃反應(yīng)4h～6h，萃取、洗滌、濃縮，得到松香酸衍生物15；化合物16的合成：將步驟(a)得到的中間體15用四氫呋喃溶解，在冰浴攪拌下加入到四氫鋁鋰的四氫呋喃混合液中，中間體15：四氫鋁鋰的摩爾比為1:4，室溫攪拌反應(yīng)3h，調(diào)pH至6，過濾、萃取、洗滌、濃縮，得到松香酸衍生物16；化合物17的合成：將步驟(b)得到的中間體16和對甲苯磺酰氯用吡啶溶解，中間體16與對甲苯磺酰氯的摩爾比為1:5，室溫攪拌反應(yīng)5h。旋去吡啶，萃取、洗滌、濃縮、柱層析純化得松香酸衍生物17；化合物18的合成：將步驟(c)得到的中間體17用六甲基磷酰三胺溶解，逐滴加入到碘化鈉和鋅粉中，升溫至105℃攪拌反應(yīng)6h。用石油醚萃取，干燥，濃縮，柱層析純化得松香酸衍生物18；化合物19的合成：將步驟(d)得到的中間體18溶于冰醋酸中，冰浴下滴加33％溴化氫的冰醋酸溶液，室溫攪拌，當(dāng)放大投料量時反應(yīng)雜質(zhì)明顯增多，導(dǎo)致產(chǎn)品無法從冰醋酸溶液中析出，而產(chǎn)品、未反應(yīng)原料與雜質(zhì)的極性均很小，對產(chǎn)品的純化變得十分困難，收率極低。因此，該條路線不適合于化合物8的制備。試驗例本發(fā)明化合物的生物活性應(yīng)用購買的PTP1B重組蛋白(Sigma),以對硝基苯磷酸二鈉(pNPP)為底物檢測PTP1B活性。采用的陽性參照化合物為齊墩果酸。利用PTP1B能水解底物nNPP的磷酸酯鍵，得到的產(chǎn)物對硝基苯酚在堿性條件下于410nm處有很強(qiáng)的光吸收，通過直接檢測410nm處光吸收的變化以觀察化合物對酶活性的抑制情況，具體操作方法如下：將底物pNPP的水溶液48μL、PTP1B緩沖溶液50μL(25MmHEPES，PH7.2、1MmEDTA、1.5MmDTT、50MmNaCl)、化合物的DMSO溶液2μL依次加入96孔板中構(gòu)成100μL的反應(yīng)體系。37℃反應(yīng)30min后，每孔加入5μL1N的NaOH水溶液，利用EnSpire酶標(biāo)儀于410nm處測吸光度值。在不含待測化合物的反應(yīng)液中，吸光度(At)定義為100％活性。在不含PTP1B的反應(yīng)液中，吸光度(Ab)定義為0％活性。對于待測化合物，抑制率(％)＝[1-(A-Ab)/(At-Ab)]×100，其中A為含待測化合物的反應(yīng)液的吸光度。表2化合物在100μM濃度下的PTP1B抑制率以齊墩果酸OA作為陽性對照，對合成的松香酸衍生物的PTP1B抑制活性進(jìn)行測定?；衔锵鄳?yīng)的PTP1B在100μM濃度下的抑制率如表1所示。實驗數(shù)據(jù)表明，所合成的一系列松香酸衍生物中，大部分都具有一定的PTP1B抑制活性。通過實驗結(jié)果分析構(gòu)效關(guān)系，可以得出以下結(jié)論：當(dāng)松香酸衍生物的C-4位為羧基時，將萜類骨架部分進(jìn)行芳香化，引入羥基或叔丁醇，引入叔丁醇的化合物PTP1B抑制活性更好；而當(dāng)C-4位的羧基轉(zhuǎn)變?yōu)橘啥谆鶗r，萜類骨架同時芳香化，酚羥基化合物較叔丁醇化合物抑制活性好；當(dāng)松香酸衍生物的萜類骨架部分保持不變，C-4位基團(tuán)的變化對于化合物抑制活性的影響不明顯。當(dāng)前第1頁1 2 3