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一種代代花萼多糖及其制備方法與應(yīng)用與流程

文檔序號(hào):12092378閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種代代花萼粗多糖的制備方法,其特征在于:包含如下步驟:

(1)將代代花萼粉碎后過篩,得到代代花萼粉;蒸餾水加熱回流提取代代花萼粉,然后將提取液離心,并將上清液減壓濃縮,得到濃縮的代代花萼粗多糖溶液;

(2)將多糖溶液和經(jīng)過預(yù)處理的大孔吸附樹脂混合,脫色處理,過濾出多糖溶液,并用水反復(fù)洗出樹脂中吸附的多糖,將脫色后的多糖溶液合并,減壓濃縮,得到濃縮糖液;

(3)在濃縮糖液中加入沉淀劑進(jìn)行沉淀,然后離心,棄去上清液,收集沉淀物并干燥,得到代代花萼粗多糖。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述代代花萼粗多糖的制備方法,其特征在于:

步驟(1)中所述加熱回流的溫度為75~100℃;所述熱水回流提取的時(shí)間為2~4h;所述熱水回流提取的次數(shù)為2~4次;

步驟(2)所述脫色處理的條件為于40~60℃水浴2~4h;

步驟(3)中所述沉淀劑為無水乙醇或體積分?jǐn)?shù)為90~100%的乙醇溶液;所述的沉淀的溫度為0~4℃。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述代代花萼粗多糖的制備方法,其特征在于:步驟(2)中所述的大孔吸附樹脂選用為D354FD樹脂;

步驟(2)中所述大孔吸附樹脂的預(yù)處理的方法為:將大孔吸附樹脂先用蒸餾水浸泡12~24h,然后先用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3~5%的鹽酸溶液浸泡0.5~3h,蒸餾水洗至中性,再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3~5%的氫氧化鈉溶液浸泡0.5~3h,蒸餾水洗至中性,得到經(jīng)過預(yù)處理的大孔吸附樹脂。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述代代花萼粗多糖的制備方法,其特征在于:步驟(3)中所述沉淀劑的加入量為濃縮糖液體積的3~5倍;步驟(3)中所述沉淀的時(shí)間為8~24h;

步驟(1)中所述的熱水回流提取的水料比即質(zhì)量比為15:1~30:1;

步驟(1)和(2)中所述的減壓濃縮的溫度為40~60℃。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述代代花萼粗多糖的制備方法,其特征在于:

步驟(1)中所述離心的轉(zhuǎn)速為3000~5000r/min;所述離心的時(shí)間為8~12min;所述過濾的次數(shù)為2~4次;

步驟(3)中所述離心的轉(zhuǎn)速為3000~5000r/min;所述離心的時(shí)間為12~15min;步驟(3)中所述干燥的溫度為40~60℃。

6.一種由權(quán)利要求1~5任一項(xiàng)所述的制備方法得到的代代花萼粗多糖。

7.代代花萼精制多糖,其特征在于:通過將權(quán)利要求6所述的代代花萼粗多糖進(jìn)一步純化得到;所述代代花萼精制多糖為六種代代花萼精制多糖,

所述代代花萼精制多糖記為CP-I為均一組分,其Mn分子量為13169Da;

所述代代花萼精制多糖記為CP-II為均一組分,其Mn分子量為7538Da;

所述代代花萼精制多糖分別記為CP-III、CP-IV、CP-V和CP-VI非均一組分。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述代代花萼精制多糖,其特征在于:所述代代花萼精制多糖,通過如下步驟制備得到:

(1)將經(jīng)過預(yù)處理的DEAE-52樹脂于40~60℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除氣泡后轉(zhuǎn)入Z型層析柱中,用恒流泵泵送蒸餾水以使填料裝柱均勻,平衡后流速5~10s/滴;

(2)將代代花萼粗多糖配制成多糖溶液,轉(zhuǎn)入層析柱中,依次用蒸餾水、0.05mol/L NaCl、0.1mol/L NaCl、0.15mol/L NaCl、0.2mol/L NaCl、0.3mol/L NaCl溶液洗脫,流速5~10s/滴,分別收集各流份,苯酚-硫酸法跟蹤檢測(cè)洗脫液,測(cè)定490nm下的吸光度,繪制洗脫曲線,同一吸收峰內(nèi)的洗脫液合并;然后旋蒸濃縮,真空冷凍干燥,經(jīng)過DEAE-52離子交換柱層析后得到六個(gè)組分,其中,蒸餾水洗脫得到的精制多糖命名為CP-I,0.05mol/L NaCl洗脫得到的精制多糖命名為CP-II,0.1mol/L NaCl洗脫得到的精制多糖命名為CP-III,0.15mol/L NaCl洗脫得到的精制多糖命名為CP-IV,0.2mol/L NaCl洗脫得到的精制多糖命名為CP-V,0.3mol/L NaCl洗脫得到的精制多糖命名為CP-VI。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述代代花萼精制多糖,其特征在于:

步驟(1)中所述DEAE-52樹脂預(yù)處理的方法為:將DEAE-52樹脂用水4~30℃浸泡12~24h;再用0.5mol/L的鹽酸溶液浸泡0.5~2h;0.5mol/L的NaOH溶液浸泡0.5~2h,過濾,水洗至中性,得到經(jīng)過預(yù)處理的DEAE-52樹脂。

10.權(quán)利要求6所述的代代花萼粗多糖或權(quán)利要求7~9任一項(xiàng)所述的代代花萼精制多糖在制備免疫增強(qiáng)藥物中的應(yīng)用。

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