本發(fā)明涉及光動(dòng)力治療的光敏劑藥物技術(shù)領(lǐng)域。更具體地，涉及一種含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌素衍生物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

光動(dòng)力療法(Photodynamic Therapy，簡(jiǎn)稱PDT)是近年來迅速發(fā)展起來的一種針對(duì)血管增生性病變組織的選擇性治療新技術(shù)，該療法使用光照射被光敏劑染色的生物組織，產(chǎn)生光化學(xué)效應(yīng)，從而對(duì)這些疾病產(chǎn)生治療作用。光動(dòng)力療法已成為繼手術(shù)、放療和化療而后的第四種特殊類型的腫瘤治療方法，其優(yōu)勢(shì)在于它的高效性和安全性，在光照射下它可以連續(xù)產(chǎn)生成千萬個(gè)高反應(yīng)性能的活性氧物種，從而導(dǎo)致病變細(xì)胞和組織的損傷或壞死，和傳統(tǒng)的藥物只能殺死單個(gè)目標(biāo)分子相比具有顯著的高效性。另一方面，光化學(xué)治療具有藥物定位性和光照定位的雙向選擇性，降低了對(duì)正常細(xì)胞的損傷，大大降低了毒副作用，增加了安全性。PDT不僅在臨床治療癌癥中取得了重大成就，同時(shí)也用于非腫瘤型疾病，如尖銳濕疣、牛皮癬、鮮紅斑痣、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、眼底黃斑病變等疾病的治療。PDT在抗病毒、殺菌、光動(dòng)力農(nóng)藥等方面也有了成功的應(yīng)用，并開始向某些常規(guī)治療法難以治愈的良性常見病變發(fā)展，取得了許多突破性的進(jìn)展。

PDT是以光、光敏劑和氧的相互作用為基礎(chǔ)的一種新的疾病治療手段，光敏劑(光動(dòng)力治療藥物)的研究是影響光動(dòng)力治療的關(guān)鍵。光敏劑能夠吸收光子而被激發(fā)，又將吸收的光能通過能量傳遞給另一組分的分子產(chǎn)生光活性物種。目前已知的光敏劑中，用于臨床的主要是卟啉類光敏劑和酞菁類光敏劑，商品化的藥物有Photofrin、Visudyne、Photosens等。Visdyne是目前唯一被美國FDA批準(zhǔn)用于老年視網(wǎng)膜黃斑變性治療的光動(dòng)力藥物，它的化學(xué)成分為苯并卟啉單酸環(huán)A(DPD-MA)，其在紅光區(qū)的最大吸收波長(zhǎng)在689nm，此波長(zhǎng)的組織穿透深度可達(dá)5mm。該藥物價(jià)格十分昂貴，市場(chǎng)價(jià)達(dá)到1500美元/15mg。用于臨床的酞菁類光敏劑Photosens，其最突出的優(yōu)點(diǎn)是在紅光區(qū)(600-700nm)吸收更強(qiáng)，其消光系數(shù)通常比其它光敏劑大一個(gè)數(shù)量級(jí)。然而，卟啉類光敏劑和酞菁類光敏劑的最突出問題是幾何異構(gòu)體的分離困難，難以得到單組分的純化合物；相對(duì)復(fù)雜的組分也不利于后期的藥物代謝、毒理分析的評(píng)估。其它臨床或臨床前研究的光敏劑主要包括二氫卟吩類、葉綠素類、苝醌類等，其中苝醌類光敏藥物自上世紀(jì)八十年代起相繼被發(fā)現(xiàn)，如尾孢素、金絲桃蒽酮、痂蘘腔菌素、竹紅菌甲素和乙素等，都已被證實(shí)有抗癌活性。其中竹紅菌素是由我國云南高原海拔4000米、箭竹上的一種寄生真菌－竹紅菌中提取的天然光敏劑，光毒性好、暗毒性低、體內(nèi)代謝快、化學(xué)結(jié)構(gòu)明確，具有廣泛的應(yīng)用前景。

天然的竹紅菌素主要包括竹紅菌甲素(Hypocrellin A,簡(jiǎn)稱HA)和竹紅菌乙素(Hypocrellin B，簡(jiǎn)稱HB)。近年來，人們對(duì)竹紅菌素的光物理、光化學(xué)和光生物性質(zhì)做了較為詳細(xì)的研究(Medicinal Chemistry,2010,10,332-341；Progress in Chemistry,20,1345-1352)，均認(rèn)為竹紅菌素是一種較有應(yīng)用前景的光敏劑。然而竹紅菌素的主要吸收波長(zhǎng)范圍在450-550nm，這個(gè)波長(zhǎng)能組織穿透還不足1毫米，在光動(dòng)力治療窗口(600-900nm)吸收光能力較弱。過去的十多年已經(jīng)有許多針對(duì)竹紅菌素的化學(xué)修飾(New J.Chem.,2002,26,1130–1136；J.Org.Chem.2003,68,2048-2050；2001,61,122-128；Photochem.Photobiol.,2001,74,143-148；Dyes and Pigments,1999,41,93-100；Bioorg.Med.Chem.Let.,2004,14,1499-1501；2012,22,5003-5007)。相對(duì)來說，化學(xué)修飾的竹紅菌素衍生物不同程度的改善了其紅光吸收，但仍然比酞菁類光敏劑低一個(gè)數(shù)量級(jí)，所以從光吸收角度評(píng)價(jià)，其光動(dòng)力治療腫瘤不具備明顯的優(yōu)勢(shì)。后來研究者發(fā)現(xiàn)正丁基氨修飾的竹紅菌素其吸收波長(zhǎng)明顯紅移至600-700nm，摩爾消光系數(shù)顯著增大，這種現(xiàn)象又從其它的氨基修飾的竹紅菌素(正己胺、環(huán)己氨、苯胺、卞氨、氨基乙醇等)上得到了證實(shí)(Photochem.Photobiol.,2003,78,411-415；Bioorg.Med.Chem.Let.,2011,11,2045-2047；J.Photochem.Photobiol.B:1998,44,21-28)。

氨基修飾的竹紅菌素已經(jīng)表現(xiàn)出較好的光物理、光化學(xué)和光生物學(xué)性質(zhì)，然而這類化合物的水溶性和生物相容性相對(duì)較差，還需要進(jìn)一步改進(jìn)。眾所周知，微血管類疾病的靶體是病灶區(qū)的異生密集微血管網(wǎng)絡(luò)，血運(yùn)豐富，對(duì)光動(dòng)力作用更敏感；光動(dòng)力治療時(shí)，藥物必須以靜脈注射的方式通過血液循環(huán)系統(tǒng)運(yùn)到病灶。然而，竹紅菌素是一類親脂性有機(jī)分子，在水中的溶解度很低，直接靜脈注射會(huì)在血液中自發(fā)聚集而造成血管堵塞?；撬崛〈难苌?J.Photochem.Photobiol.B.Biol.,1993,17,195-201)能很好的解決水溶性的問題，但由于其帶負(fù)電荷，和細(xì)胞和組織中大量的負(fù)電荷相互排斥，細(xì)胞攝取率較低，大大降低了光動(dòng)力學(xué)活性。因此，設(shè)計(jì)的目標(biāo)化合物不僅要滿足如上提出的光吸收條件，還要滿足優(yōu)化的脂水雙親性--既滿足靜脈注射針劑的濃度要求，又要保證高的細(xì)胞攝取率。

因此，需要提供一種即滿足光吸收條件，又具有優(yōu)化的脂水雙親性的含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌素衍生物。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌素衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌素衍生物的制備方法。

本發(fā)明的第三個(gè)目的在于提供一種含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌素衍生物的應(yīng)用。

本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有的竹紅菌素衍生物不能同時(shí)滿足光吸收條件，又滿足優(yōu)化的脂水雙親性的問題，提出了本發(fā)明的技術(shù)方案。申請(qǐng)人首次提出用長(zhǎng)鏈的季銨鹽來修飾竹紅菌素，增強(qiáng)其水溶性和生物相容性，改善竹紅菌素母體的油水比例。該類衍生物具有良好的脂水雙親性，可直接溶于生理鹽水。由于是季銨鹽結(jié)構(gòu)，不易受pH值得影響。光動(dòng)力特性通過實(shí)驗(yàn)證明這類取代的衍生物不僅可以滿足臨床用藥所需的水溶性要求，而且生物光動(dòng)力活性和母體相比，解決了靜脈注射給藥要求的親水性和細(xì)胞攝取要求的親脂性之間的矛盾。值得注意的是，現(xiàn)有技術(shù)中人們對(duì)竹紅菌素的修飾只涉及到中性產(chǎn)物和陰離子(磺酸基)產(chǎn)物，而對(duì)于陽離子修飾的竹紅菌素從未有過報(bào)道，該技術(shù)方案在本發(fā)明中首次披露。

為達(dá)到上述第一個(gè)目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：

一種含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌素衍生物，所述衍生物的結(jié)構(gòu)通式如式(1)或式(2)所示

其中，X為N、O或S原子；2≤m≤20，0≤n≤10，1≤p≤2，m、n、p均為正整數(shù)；R₁、R₂和R₃分別獨(dú)立地為含1-20個(gè)碳原子的烷基；A^-為F^-、Cl^-、Br^-、I^-離子；HA為竹紅菌甲素；HB為竹紅菌乙素；所述HA和HB的結(jié)構(gòu)式分別如式(3)和式(4)所示：

式(1)中HA與X的連接方式為：在式(3)中標(biāo)注的2位通過C-N單鍵相連接，或者在式(3)中標(biāo)注的2位通過C-O單鍵相連接，或者在式(3)中標(biāo)注的5位通過C-S單鍵相連接，或者在式(3)中標(biāo)注的17位通過C＝N雙鍵相連接；或者同時(shí)在式(3)中標(biāo)注的2位通過C-N單鍵、17位通過C＝N雙鍵相連接；

式(2)中HB與X的連接方式為：在式(4)中標(biāo)注的2位通過C-N單鍵相連接，或者在式(4)中標(biāo)注的2位通過C-O單鍵相連接，或者在式(4)中標(biāo)注的5位通過C-S單鍵相連接，或者在式(4)中標(biāo)注的17位通過C＝N雙鍵相連接；或者同時(shí)在式(4)中標(biāo)注的2位通過C-N單鍵、17位通過C＝N雙鍵相連接；

p＝1表示竹紅菌素母體修飾一個(gè)長(zhǎng)鏈季銨鹽；p＝2表示竹紅菌素母體修飾兩個(gè)長(zhǎng)鏈季銨鹽。

為達(dá)到上述第二個(gè)目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：

一種含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌素衍生物的制備方法，包括如下步驟：

將竹紅菌素和長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物溶于有機(jī)溶劑，惰性氣體保護(hù)下避光進(jìn)行反應(yīng)，最后經(jīng)分離純化，即可得到含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌素衍生物。

優(yōu)選地，所述竹紅菌素為竹紅菌甲素或竹紅菌乙素；所述長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物的通式為-X-(CH₂)_m-(OCH₂CH₂)_n-N⁺(R₁)(R₂)(R₃)，其中X為N、O或S原子，2≤m≤20，0≤n≤10，m、n均為正整數(shù)，R₁、R₂和R₃分別獨(dú)立地為含1-20個(gè)碳原子的烷基。

優(yōu)選地，所述有機(jī)溶劑選自乙腈、四氫呋喃、吡啶、甲醇和乙醇中的一種或多種。

優(yōu)選地，所述R₃為C₄H₉、C₆H₁₃、C₈H₁₇、C₁₀H₂₁或C₁₂H₂₅。

優(yōu)選地，所述長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物的結(jié)構(gòu)式為：

-NH-(CH₂)₂-N⁺(CH₃)₂(C₁₀H₂₁)、-NH-(CH₂)₂-N⁺(CH₃)₂(C₈H₁₇)、-NH-(CH₂)₃-N⁺(CH₃)₂(C₁₀H₂₁)、-NH-(CH₂)₃-N⁺(CH₃)₂(C₈H₁₇)、-NH-(CH₂)₄-N⁺(C₂H₅)₂(C₁₀H₂₁)、-NH-(CH₂)₄-N⁺(C₂H₅)₂(C₈H₁₇)、-O-(CH₂)₂-N⁺(CH₃)₂(C₁₀H₂₁)、-O-(CH₂)₂-N⁺(CH₃)₂(C₈H₁₇)、-NH-(CH₂)₂(OCH₂)₂-N⁺(CH₃)₂(C₈H₁₇)、-NH-(CH₂)₂(OCH₂)₄-N⁺(CH₃)₂(C₈H₁₇)、-S-(CH₂)₂-N⁺(CH₃)₂(C₁₀H₂₁)或-S-(CH₂)₂-N⁺(CH₃)₂(C₈H₁₇)。

更優(yōu)選地，所述長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物的結(jié)構(gòu)式為X＝N，m＝2，n＝0，R₁與R₂均為甲基，R₃為C₁₀H₂₁，其合成路線如圖3所示。

優(yōu)選地，所述竹紅菌素和長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物的投料摩爾比為1:2～10，具體可為1:2、1:3、1:4、1:6或1:10；反應(yīng)的溫度為30-60℃；反應(yīng)的時(shí)間為6-12小時(shí)。反應(yīng)需要惰性氣體如氬氣或氮?dú)獗Ｗo(hù)下進(jìn)行，并且要避光反應(yīng)。

更優(yōu)選地，所述有機(jī)溶劑為乙腈或四氫呋喃；所述竹紅菌素和長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物的投料摩爾比為1:4；反應(yīng)的溫度為50℃；反應(yīng)的時(shí)間為8小時(shí)。

優(yōu)選地，所述分離純化的過程為：

除去反應(yīng)有機(jī)溶劑得到殘留物，將殘留物用二氯甲烷溶解；依次用稀鹽酸水溶液以及水洗滌；隨后將有機(jī)層干燥、過濾、除去溶劑得到粗產(chǎn)物；將粗產(chǎn)物用硅膠板層析，即得到含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌素衍生物。

優(yōu)選地，硅膠板層析時(shí)所用的展開劑為含有丙酮、乙酸乙酯、乙醇和二乙胺的混合液，所述混合液中丙酮、乙酸乙酯、乙醇和二乙胺的體積比為20:1:1:1～3。

優(yōu)選地，所述分離純化的過程為：

除去反應(yīng)有機(jī)溶劑，得到藍(lán)黑色固體殘留物用二氯甲烷溶解，用等體積的稀鹽酸水溶液(5％)洗滌三次、水洗一次，有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥、過濾、除去溶劑得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物用硅膠板層析法進(jìn)一步分離，展開劑為丙酮：乙酸乙酯：乙醇：二乙胺(體積比為20:1:1:1～3)，優(yōu)選比例為20:1:1:1，得到含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌素衍生物，產(chǎn)率10～30％，產(chǎn)物為藍(lán)黑色固體。

為達(dá)到上述第三個(gè)目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：

如上所述的一種含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌素衍生物作為光動(dòng)力治療中的光敏劑藥物的應(yīng)用。

本發(fā)明所得的含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌素衍生物，其吸收光譜波長(zhǎng)在630nm左右，比竹紅菌素母體(450-550nm)大大紅移，表現(xiàn)出較好的光吸收能力，摩爾消光系數(shù)5000-10000M^-1cm^-1；其水溶性較好，生理鹽水中可以配置10uM～1mM濃度范圍內(nèi)儲(chǔ)備液。

與竹紅菌甲素、竹紅菌乙素母體相比，本發(fā)明的含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌素衍生物中引入了季銨鹽大大增強(qiáng)了其水溶性，通過改變脂肪鏈的鏈長(zhǎng)來調(diào)節(jié)油水比例，使得該類衍生物具有良好的脂水雙親性，在細(xì)胞或組織中也具有很好的生物相溶性；該類化合物以季銨鹽形式存在，不易于受pH影響，可用于復(fù)雜的生物體中；這類帶正鹽的竹紅菌素可以有效的結(jié)合生物體內(nèi)負(fù)電荷物種，尤其是對(duì)腫瘤細(xì)胞具有很好的親核性；通過調(diào)節(jié)季銨鹽和竹紅菌素母體之間的距離來改變光療效果。因此，該類帶長(zhǎng)鏈季銨鹽竹紅菌素衍生物可直接溶于生理鹽水做成制劑藥，提高藥用效果；且是天然產(chǎn)物制成，不會(huì)產(chǎn)生毒副作用，為開發(fā)竹紅菌素類治療癌癥和抗癌病毒的藥物奠定了基礎(chǔ)。

本發(fā)明的有益效果如下：

1)本發(fā)明中的竹紅菌素原料從天然產(chǎn)物提取，原料易得、成本低、可大量制備、不含任何毒副作用、易于代謝；

2)該合成和分離方法簡(jiǎn)單，無需昂貴的反應(yīng)原料、復(fù)雜的分離手段；

3)所制備的含長(zhǎng)鏈季銨鹽氨基取代的竹紅菌素衍生物相比于竹紅菌素母體，其吸收光譜顯著紅移且摩爾消光系數(shù)大大增加，光敏條件下能高效產(chǎn)生活性氧；本法明中引入了季銨鹽大大增強(qiáng)了其水溶性，通過調(diào)節(jié)其脂肪鏈的長(zhǎng)度調(diào)節(jié)油水比例，該類衍生物具有良好的脂水雙親性：可直接溶于生理鹽水，在細(xì)胞或組織中也具有很好的生物相溶性；

4)正電荷脂肪鏈有一定的靶向性，可以有效的結(jié)合生物體中許多負(fù)電荷物種；

5)本發(fā)明中的光敏劑和臨床使用的第一代卟啉類光敏劑和第二代酞菁類光敏劑相比，其吸收波長(zhǎng)和吸光能力完全相當(dāng)，重要的是產(chǎn)物易于分離、純化、結(jié)構(gòu)明確，克服了卟啉和酞菁類光敏劑不易分離和組成復(fù)雜結(jié)構(gòu)難以確定的問題，具有很好的靶向性及很高的光動(dòng)力滅活腫瘤細(xì)胞的能力。

附圖說明

下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。

圖1示出本發(fā)明含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌甲素或竹紅菌乙素衍生物的結(jié)構(gòu)通式。

圖2示出本發(fā)明實(shí)施例2提取的竹紅菌乙素HB(a)和實(shí)施例4制備的含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌乙素衍生物HB2(b)的吸收光譜對(duì)比圖。

圖3示出本發(fā)明實(shí)施例3中的長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物的合成反應(yīng)路線圖。

圖4示出本發(fā)明實(shí)施例4中的含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌乙素衍生物的合成反應(yīng)路線圖。

圖5示出本發(fā)明實(shí)施例12中的含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌乙素衍生物的合成反應(yīng)路線圖。

圖6示出本發(fā)明實(shí)施例13中的含季銨鹽的竹紅菌乙素衍生物的合成反應(yīng)路線圖。

圖7示出本發(fā)明實(shí)施例15中的含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌乙素衍生物的合成反應(yīng)路線圖。

具體實(shí)施方式

為了更清楚地說明本發(fā)明，下面結(jié)合優(yōu)選實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說明。附圖中相似的部件以相同的附圖標(biāo)記進(jìn)行表示。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，下面所具體描述的內(nèi)容是說明性的而非限制性的，不應(yīng)以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。

本發(fā)明所用的竹紅菌素可以通過以下方法提取，也可以通過市售購買獲得。

實(shí)施例1

竹紅菌甲素(HA)的提?。禾崛》椒▍⒖?989年9卷252-254頁趙開弘有機(jī)化學(xué)的參考書，做了適當(dāng)改進(jìn)。具體方法如下：

100g竹紅菌用粉碎機(jī)粉碎，置于索氏提取器中，以1000mL丙酮作溶劑連續(xù)提取一天至提取液近無色，提取液過濾除去少量滲入的固體不溶物，然后旋干除去丙酮，用500mL二氯甲烷溶解，4×400mL蒸餾水洗滌，分離出有機(jī)層旋干，固體殘余物用5×100mL石油醚洗滌，該固體在空氣中自燃風(fēng)干，然后用氯仿-石油醚重結(jié)晶兩次，所得晶體為目標(biāo)產(chǎn)物竹紅菌甲素(HA)，純度在98％以上。利用薄層硅膠板層析法，以石油醚：乙酸乙酯：無水乙醇(30:10:1)作展開劑，可以進(jìn)一步純化得到高純度的竹紅菌甲素。

實(shí)施例2

竹紅菌乙素(HB)的制備：竹紅菌乙素由甲素在堿性條件下脫水而得，制備方法參考1989年9卷252-254頁趙開弘有機(jī)化學(xué)的參考書，做了適當(dāng)改進(jìn)。具體方法如下：

1克竹紅菌甲素溶解于1000mL 1.5％的KOH水溶液中，避光攪拌反應(yīng)24小時(shí)后，用稍過量稀鹽酸中和，用氯仿提取產(chǎn)物，分離純化后得到竹紅菌乙素0.98g，產(chǎn)率98％。

本發(fā)明所用的長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物由以下類似通用方法制得，以X＝N，m＝2,n＝0，R₁＝R₂＝Me，R₃＝C₁₀H₂₁為列說明。

實(shí)施例3

長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物(X-(CH₂)_m-(OCH₂CH₂)_n-N⁺(R₁)(R₂)(R₃)；其中X＝N，m＝2，n＝0，R₁＝R₂＝Me，R₃＝C₁₀H₂₁)的制備，其合成路線圖如附圖3所示：

中間體1的制備：

N,N-二甲基乙二胺(4.4g,0.05mol)和碳酸二乙酯(7.10g,0.06mol)混合于100毫升圓底燒瓶，反應(yīng)液在70℃下反應(yīng)48h，然后減壓蒸餾得到淡黃色的液體7.20g，產(chǎn)率89％。¹H NMR(CDCl₃,δ,ppm):5.45(s,-NH-,1H),4.10(d,J＝6.5Hz,-CH₂O,2H),3.24(s,-NH-CH₂-,2H),2.39(m,-CH₂N,2H),2.22(d,J＝1.5Hz,CH₃NCH₃,6H),1.23(t,J＝6.5Hz,-CH₂CH₃,3H)。所述中間體S1的結(jié)構(gòu)式如式(5)所示：

中間體2的制備：

中間體1和1-溴葵烷(15.25g,0.05mol)在100℃下反應(yīng)48h下反應(yīng)72h。粗產(chǎn)物用丙酮-乙醚(1:1)得到白色晶體2共15.83g，產(chǎn)率約68％。¹H NMR(CDCl₃,δ,ppm):6.73(s,CONH-,1H),4.10(q,J＝7.1Hz,-CH₂O-,2H),3.77(s,-CH₂N+,4H),3.53(s,CH₃N+,6H),3.39(s,-NHCH₂-,2H),1.78-1.67(m,-N+CH₂CH₂-,2H),1.31–1.20(m,-CH₂-,29H),0.88(t,J＝6.8Hz,-CH₃,3H).MS(ESI+):m/z calcd for C₂₃H₅₀N₂O₂⁺(M+H⁺),385.3794,found:385.3788。所述中間體2的結(jié)構(gòu)式如式(6)所示：

長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物3的制備：

中間體2(10.60g,0.02mol)中加入50mL 48％氫溴酸和50mL蒸餾水，加熱回流反應(yīng)72h。旋蒸除去氫溴酸，固體殘留物用乙醇：乙醚(1:1)重結(jié)晶得到白色絮狀晶體13.62g，產(chǎn)率69％。¹H NMR(D2O,δ,ppm):5.34(s,NH₂,2H),3.65(m,NH₂CH₂CH₂-,2H),3.48(m,-N⁺CH₂CH₂-,2H),3.38(m,NH₂CH₂-,2H),3.12(s,N⁺-CH₃,6H),1.78(m,N⁺CH₂CH₂-,2H),1.37-0.99(m,-CH₂-,26H),0.76(t,J＝6.5Hz,-CH₃,3H).MS(ESI+):m/z calcd for C₂₀H₄₆N₂+(M+H⁺),313.3583,found:313.3590。所述長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物3的結(jié)構(gòu)式如式(7)所示：

實(shí)施例4

N,N-二甲基-N-葵基乙二胺-2-氨基竹紅菌乙素(X＝NH,m＝2,n＝0,R₁＝R₂＝CH₃,R₃＝C₁₀H₂₁)的制備，其合成路線如附圖4所示。

將竹紅菌乙素HB(100mg,0.18mmol)和實(shí)施例3制備的長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物3(224mg,0.72mmol)溶解于20mL無水乙腈中，充分混合后，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至50℃，避光攪拌反應(yīng)10h，反應(yīng)完畢后，旋蒸去除溶劑。藍(lán)黑色固體殘留物用200mL二氯甲烷溶解，依次用50mL稀鹽酸水溶液洗滌一次、蒸餾水洗滌兩次，有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥、過濾、有機(jī)相懸干得到粗產(chǎn)品。所得粗品用硅膠板層析法進(jìn)一步分離，展開劑為丙酮：乙酸乙酯：乙醇：二乙胺(體積比為20:1:1:3)，分別得到兩種藍(lán)黑色得固體產(chǎn)物，Rf值分別為0.38和0.62，其中Rf為0.38的產(chǎn)物通過表征證實(shí)為2位氨基取代產(chǎn)物，記為HB2，產(chǎn)率為7.2％。

2-位氨基取代產(chǎn)物HB2表征數(shù)據(jù)如下：¹HNMR(CDCl₃,δ,ppm):6.76(s,ArH,1H),6.66(S,ArH,1H),4.06(S,OCH₃,3H),4.02(CH,1H),4.01(S,OCH₃,3H),3.98(S,OCH₃,3H),3.68(m,NHCH₂-,2H),3.48(m,-N⁺CH₂,2H),3.23(CH,1H),3.18(s,N⁺CH₃,6H),2.32(S,COCH₃,3H),1.95(S,CH₃,3H),1.41-1.02(m,CH₂-,19H),0.78(t,CH₃,3H).MS(ESI+):m/z calcd for C₄₃H₅₃N₂O₈⁺(M+H⁺),725.4,found:726.3.紫外最大吸收波長(zhǎng)：470nm,636nm。所述2-位氨基取代產(chǎn)物HB2的結(jié)構(gòu)式如式(8)所示：

上述Rf為0.62的組分繼續(xù)用丙酮：乙酸乙酯：乙醇：二乙胺(體積比為20:1:1:1)板層析分離，得到Rf值分別為0.28(17位Schiff堿產(chǎn)物，記為HB17)和0.42(2位氨基取代和17位Schiff堿產(chǎn)物的二取代產(chǎn)物，記為HB2-17)，產(chǎn)率分別為6.5％和3.8％。

17位Schiff堿產(chǎn)物HB17表征數(shù)據(jù)如下：¹HNMR(CDCl₃,δ,ppm):6.63(s,ArH,1H),6.58(S,ArH,1H),5.32(S,N＝CH,1H),4.08(S,OCH₃,3H),4.06(S,OCH₃,3H),4.00(CH,1H),3.97(S,2OCH₃,6H),3.62(m,NHCH₂-,2H),3.54(m,-N⁺CH₂,2H),3.20(CH,1H),3.16(s,N⁺-CH₃,6H),1.92(S,CH3,3H),1.38-1.03(m,-CH₂-,19H),0.76(t,-CH₃,3H).MS(ESI+):m/z calcd for C₄₄H₅₅N₂O₈⁺(M+H⁺),739.4,found:741.2.紫外最大吸收波長(zhǎng)：478nm,642nm。所述17位Schiff堿產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)式如式(9)所示：

2位和17位同時(shí)反應(yīng)的二取代產(chǎn)物HB2-17表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₅₇H₈₄N₄O₇²⁺(M²⁺/2),469.5,found:470.2；紫外最大吸收波長(zhǎng)：482nm,638nm。所述二氨基取代產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)式如式(10)所示：

圖2示出本發(fā)明實(shí)施例2提取的竹紅菌乙素HB(a)和實(shí)施例4制備的含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌乙素衍生物HB2(b)的吸收光譜對(duì)比圖。從圖中可以得出含長(zhǎng)鏈季銨鹽的竹紅菌素衍生物其最大吸收光譜波長(zhǎng)在630nm左右，比竹紅菌素母體(450nm)大大紅移，表現(xiàn)出較好的光吸收能力，摩爾消光系數(shù)5000-10000M^-1cm^-1。

實(shí)施例5

N,N-二甲基-N-葵基乙二胺2-氨基竹紅菌甲素(X＝NH，m＝2,n＝0,R₁＝R₂＝CH₃,R₃＝C₁₀H₂₁)的制備：

將竹紅菌甲素HB(100mg,0.18mmol)和實(shí)施例3制備的長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物(112mg,0.36mmol)溶解于20mL無水乙腈中，充分混合后，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至50℃，避光攪拌反應(yīng)8h，反應(yīng)完畢后，旋蒸去除溶劑。藍(lán)黑色固體殘留物用100mL二氯甲烷溶解，用50mL稀鹽酸水溶液洗滌三次，再用蒸餾水洗滌一次，有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥、過濾、有機(jī)相懸干得到粗產(chǎn)品。所得粗品用硅膠板層析法進(jìn)一步分離，展開劑為丙酮：乙酸乙酯：乙醇：二乙胺(體積比為20:1:1:1)，得到兩種藍(lán)黑色得固體產(chǎn)物，分別記為2-位氨基取代產(chǎn)物S1(產(chǎn)率為5.4％，Rf為0.36)和17位Schiff堿產(chǎn)物S2(產(chǎn)率為12.5％，Rf為0.65)。

2-位氨基取代產(chǎn)物S1表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₃H₅₅N₂O₉⁺(M+H⁺),743.9,found:745.1.紫外最大吸收波長(zhǎng)：465nm,628nm。

17位Schiff堿產(chǎn)物產(chǎn)物S2表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₄H₅₇N₂O₉⁺(M+H⁺),757.9,found:759.2.紫外最大吸收波長(zhǎng)：469nm,632nm。

實(shí)施例6

N,N-二甲基-N-葵基丙二胺2-氨基竹紅菌乙素(X＝NH，m＝3,n＝0,R₁＝R₂＝CH₃,R₃＝C₁₀H₂₁)的制備：

將竹紅菌乙素HB(100mg，0.18mmol)和相應(yīng)的長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物(X＝N，m＝3，n＝0，R₁＝R₂＝CH₃，R₃＝C₁₀H₂₁)(236mg,0.72mmol)溶解于20mL無水乙腈中，充分混合后，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至45℃，避光攪拌反應(yīng)6h，反應(yīng)完畢后，旋蒸去除溶劑。藍(lán)黑色固體殘留物用100mL二氯甲烷溶解，用50mL稀鹽酸水溶液洗滌三次，再用蒸餾水洗滌一次，有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥、過濾、有機(jī)相懸干得到粗產(chǎn)品。所得粗品用硅膠板層析法進(jìn)一步分離，展開劑為丙酮：乙酸乙酯：乙醇：二乙胺(體積比為20：1：1：1)，得到兩種藍(lán)黑色得固體產(chǎn)物，分別記為2-位氨基取代產(chǎn)物S3(產(chǎn)率為4.8％，Rf為0.32)和17位Schiff堿產(chǎn)物S4(產(chǎn)率為10.6％，Rf為0.55)。

2-位氨基取代產(chǎn)物S3表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₄H₅₇N₂O₉⁺(M+H⁺),755.9,found:757.8.紫外最大吸收波長(zhǎng)：475nm,638nm。

17位Schiff堿產(chǎn)物產(chǎn)物S4表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₅H₅₉N₂O₉⁺(M+H⁺),769.9,found:772.5.紫外最大吸收波長(zhǎng)：476nm,640nm。

實(shí)施例7

N,N-二甲基-N-葵基丙二胺2-氨基竹紅菌甲素(X＝NH，m＝3,n＝0,R₁＝R₂＝CH₃,R₃＝C₁₀H₂₁)的制備：

將竹紅菌甲素HB(100mg,0.18mmol)和相應(yīng)的長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物(X＝N，m＝3，n＝0，R₁＝R₂＝CH₃，R₃＝C₁₀H₂₁)(236mg,0.72mmol)溶解于20mL無水乙腈中，充分混合后，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至45℃，避光攪拌反應(yīng)6h，反應(yīng)完畢后，旋蒸去除溶劑。藍(lán)黑色固體殘留物用100mL二氯甲烷溶解，用50mL稀鹽酸水溶液洗滌三次，再用蒸餾水洗滌一次，有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥、過濾、有機(jī)相懸干得到粗產(chǎn)品。所得粗品用硅膠板層析法進(jìn)一步分離，展開劑為丙酮：乙酸乙酯：乙醇：二乙胺(體積比為20：1：1：1)，得到兩種藍(lán)黑色得固體產(chǎn)物，分別記為2-位氨基取代產(chǎn)物S5(產(chǎn)率為4.8％，Rf為0.28)和17位Schiff堿產(chǎn)物S6(產(chǎn)率為9.8％，Rf為0.55)。

2-位氨基取代產(chǎn)物S5表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₄H₅₅N₂O₈⁺(M+H⁺),737.9,found:739.8.紫外最大吸收波長(zhǎng)：472nm,634nm。

17位Schiff堿產(chǎn)物產(chǎn)物S6表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₅H₅₇N₂O₈⁺(M+H⁺),751.9,found:753.8.紫外最大吸收波長(zhǎng)：478nm,635nm。

實(shí)施例8

N,N-二甲基-N-葵基丙二胺2-氨基竹紅菌乙素(X＝NH，m＝3,n＝0,R₁＝R₂＝CH₃,R₃＝C₁₂H₂₅)的制備：

將竹紅菌乙素HB(100mg,0.18mmol)和相應(yīng)的長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物(X＝N，m＝3,n＝0，R₁＝R₂＝CH₃，R₃＝C₁₂H₂₅)(256mg,0.72mmol)溶解于20mL無水乙腈中，充分混合后，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至50℃，避光攪拌反應(yīng)12h，反應(yīng)完畢后，旋蒸去除溶劑。藍(lán)黑色固體殘留物用100mL二氯甲烷溶解，用50mL稀鹽酸水溶液洗滌三次，再用蒸餾水洗滌一次，有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥、過濾、有機(jī)相懸干得到粗產(chǎn)品。所得粗品用硅膠板層析法進(jìn)一步分離，展開劑為丙酮：乙酸乙酯：乙醇：二乙胺(體積比為20：1：1：2)，得到兩種藍(lán)黑色得固體產(chǎn)物，分別記為2-位氨基取代產(chǎn)物S7(產(chǎn)率為5.5％，Rf為0.28)和17位Schiff堿產(chǎn)物S8(產(chǎn)率為12.2％，Rf為0.48)。

2-位氨基取代產(chǎn)物S7表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₆H₆₁N₂O₉⁺(M+H⁺),779.9,found:782.2.紫外最大吸收波長(zhǎng)：472nm,652nm。

17位Schiff堿產(chǎn)物產(chǎn)物S8表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₇H₆₃N₂O₉⁺(M+H⁺),793.8,found:795.6.紫外最大吸收波長(zhǎng)：475nm,652nm。

實(shí)施例9

N,N-二甲基-N-葵基丁二胺2-氨基竹紅菌甲素(X＝NH，m＝4,n＝0,R₁＝R₂＝CH₃,R₃＝C₁₀H₂₁)的制備：

將竹紅菌甲素HB(100mg,0.18mmol)和相應(yīng)的長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物(X＝NH，m＝4,n＝0，R₁＝R₂＝CH₃，R₃＝C₁₀H₂₁)(248mg,0.72mmol)溶解于20mL無水乙腈中，充分混合后，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至45℃，避光攪拌反應(yīng)6h，反應(yīng)完畢后，旋蒸去除溶劑。藍(lán)黑色固體殘留物用100mL二氯甲烷溶解，用50mL稀鹽酸水溶液洗滌三次，再用蒸餾水洗滌一次，有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥、過濾、有機(jī)相懸干得到粗產(chǎn)品。所得粗品用硅膠板層析法進(jìn)一步分離，展開劑為丙酮：乙酸乙酯：乙醇：二乙胺(體積比為20：1：1：1)，得到兩種藍(lán)黑色得固體產(chǎn)物，分別記為2-位氨基取代產(chǎn)物S9(產(chǎn)率為9.2％，Rf為0.35)和17位Schiff堿產(chǎn)物S10(產(chǎn)率為8.8％，Rf為0.56)。

2-位氨基取代產(chǎn)物S9表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₅H₅₇N₂O₈⁺(M+H⁺),751.9,found:754.0.紫外最大吸收波長(zhǎng)：468nm,637nm。

17位Schiff堿產(chǎn)物產(chǎn)物S10表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₆H₅₉N₂O₈⁺(M+H⁺),763.9,found:765.8.紫外最大吸收波長(zhǎng)：475nm,640nm。

實(shí)施例10

N,N-二甲基-N-葵基丙二胺2-氨基竹紅菌乙素(X＝NH，m＝4,n＝0,R₁＝R₂＝CH₃,R₃＝C₁₀H₂₁)的制備：

將100mg竹紅菌乙素HB(0.18mmol)和相應(yīng)的長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物(X＝N，m＝4,n＝0，R₁＝R₂＝CH₃，R₃＝C₁₀H₂₁)(248mg,0.72mmol)溶解于20mL無水乙腈中，充分混合后，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至50℃，避光攪拌反應(yīng)12h，反應(yīng)完畢后，旋蒸去除溶劑。藍(lán)黑色固體殘留物用100mL二氯甲烷溶解，用50mL稀鹽酸水溶液洗滌三次，再用蒸餾水洗滌一次，有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥、過濾、有機(jī)相懸干得到粗產(chǎn)品。所得粗品用硅膠板層析法進(jìn)一步分離，展開劑為丙酮：乙酸乙酯：乙醇：二乙胺(體積比為20：1：1：1)，得到兩種藍(lán)黑色得固體產(chǎn)物，分別記為2-位氨基取代產(chǎn)物S11和17位Schiff堿產(chǎn)物S12。兩者的Rf值分別為0.30(2位氨基取代產(chǎn)物)和0.55(17位Schiff堿產(chǎn)物)，產(chǎn)率分別為4.8％和15.5％。

2-位氨基取代產(chǎn)物S11表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₅H₅₉N₂O₉⁺(M+H⁺),767.9,found:769.2.紫外最大吸收波長(zhǎng)：468nm,650nm。

17位Schiff堿產(chǎn)物產(chǎn)物S12表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₆H₆₁N₂O₉⁺(M+H⁺),781.8,found:784.6.紫外最大吸收波長(zhǎng)：470nm,650nm。

實(shí)施例11

N,N-二甲基-N-葵基丁二胺2-氨基竹紅菌甲素(X＝NH，m＝4,n＝0,R₁＝R₂＝CH₃,R₃＝C₁₂H₂₅)的制備：

將竹紅菌甲素HB(100mg,0.18mmol)和相應(yīng)的長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物(X＝N，m＝4,n＝0，R₁＝R₂＝CH₃，R₃＝C₁₂H₂₅)(248mg,0.72mmol)溶解于20mL無水乙腈中，充分混合后，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至45℃，避光攪拌反應(yīng)6h，反應(yīng)完畢后，旋蒸去除溶劑。藍(lán)黑色固體殘留物用100mL二氯甲烷溶解，用50mL稀鹽酸水溶液洗滌三次，再用蒸餾水洗滌一次，有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥、過濾、有機(jī)相懸干得到粗產(chǎn)品。所得粗品用硅膠板層析法進(jìn)一步分離，展開劑為丙酮：乙酸乙酯：乙醇：二乙胺(體積比為20：1：1：1)，得到兩種藍(lán)黑色得固體產(chǎn)物，分別記為2-位氨基取代產(chǎn)物S13和17位Schiff堿產(chǎn)物S14。兩者的Rf值分別為0.35(2位氨基取代產(chǎn)物)和0.56(17位Schiff堿產(chǎn)物)，產(chǎn)率分別為9.2％和8.8％。

2-位氨基取代產(chǎn)物S13表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₅H₅₇N₂O₈⁺(M+H⁺),751.9,found:754.0.紫外最大吸收波長(zhǎng)：468nm,637nm。

17位Schiff堿產(chǎn)物產(chǎn)物S14表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₆H₅₉N₂O₈⁺(M+H⁺),763.9,found:765.8.紫外最大吸收波長(zhǎng)：475nm,640nm。

實(shí)施例12

N,N-二甲基-N-葵基銨-二縮三乙二醇-2-氨基竹紅菌乙素(X＝NH，m＝2,n＝2,R₁＝R₂＝CH₃，R₃＝C₁₀H₂₁)的制備，其合成路線如附圖5所示。

將竹紅菌乙素HB(100mg,0.18mmol)和相應(yīng)的長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物(X＝N，m＝2,n＝2，R₁＝R₂＝CH₃，R₃＝C₁₀H₂₁)(318mg,0.80mmol)溶解于30mL無水乙腈中，充分混合后，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至40℃，避光攪拌反應(yīng)8h，反應(yīng)完畢后，旋蒸去除溶劑。藍(lán)黑色固體殘留物用100mL二氯甲烷溶解，用50mL稀鹽酸水溶液洗滌三次，再用蒸餾水洗滌一次，有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥、過濾、有機(jī)相懸干得到粗產(chǎn)品。所得粗品用硅膠板層析法進(jìn)一步分離，展開劑為丙酮：乙酸乙酯：乙醇：二乙胺(體積比為20：1：1：1)，得到兩種藍(lán)黑色得固體產(chǎn)物，分別記為2-位氨基取代產(chǎn)物S15(產(chǎn)率為6.2％，Rf為0.40)和17位Schiff堿產(chǎn)物S16(產(chǎn)率為8.6％，Rf為0.60)。

2-位氨基取代產(chǎn)物S15表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₇H₆₁BrN₂O₁₀⁺(M+H⁺),813.4,found:813.9；紫外最大吸收波長(zhǎng)：463nm,645nm。所述2-位氨基取代產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)式如式(11)所示：

17位Schiff堿產(chǎn)物產(chǎn)物S16表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₄₈H₆₃N₂O₁₀⁺(M+H⁺),827.4,found:827.9.紫外最大吸收波長(zhǎng)：468nm,652nm。所述17位Schiff堿產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)式如式(12)所示：

實(shí)施例13

5-巰基取代竹紅菌乙素(X＝S,m＝2,n＝0,R₁＝R₂＝R₃＝C₂H₅)的制備，其合成路線如附圖6所示。

將竹紅菌乙素HB(100mg,0.18mmol)和巰基乙氨三乙基銨鹽(482mg,2mmol)加入到200mL乙醇-PBS緩沖溶液(3/1,V/V,pH＝11)中。光照反應(yīng)同時(shí)向反應(yīng)液中通入氧氣，反應(yīng)10h。反應(yīng)液濃縮，用氯仿萃取、水洗三次、干燥，粗產(chǎn)物用薄層層析分離得產(chǎn)物，產(chǎn)率32％。5-位巰基取代產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₃₈H₄₂NO₉S⁺(M+H⁺),688.2,found:690.1.紫外最大吸收波長(zhǎng)：451nm,608nm。所述5-位巰基取代產(chǎn)物S17的結(jié)構(gòu)式如式(13)所示：

實(shí)施例14

2-氧取代竹紅菌乙素衍生物(X＝O,m＝2,n＝0,R₁＝R₂＝R₃＝C₂H₅)的制備。

將竹紅菌乙素HB(100mg,0.18mmol)和氨基乙醇三乙基銨鹽(450mg,2mmol)溶解于50mL THF中，充分混合后，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至50℃，避光攪拌反應(yīng)12h，反應(yīng)完畢后，旋蒸去除溶劑。藍(lán)黑色固體殘留物用200mL二氯甲烷溶解，依次用50mL稀鹽酸水溶液洗滌一次、蒸餾水洗滌兩次，有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥、過濾、有機(jī)相懸干得到粗產(chǎn)品。所得粗品用硅膠板層析法進(jìn)一步分離，展開劑為丙酮：乙酸乙酯：乙醇：二乙胺(體積比為20:1:1:1)，得到藍(lán)黑色得固體產(chǎn)物，產(chǎn)率為8.5％，Rf值分別為0.48。其表征數(shù)據(jù)如下：MS(ESI+):m/z calcd for C₃₇H₄₀BrNO₉⁺(M+H⁺),721.1,found:722.8.紫外最大吸收波長(zhǎng)：452nm,605nm。所述2-位氧取代產(chǎn)物S18的結(jié)構(gòu)式如式(14)所示：

實(shí)施例15

N,N-二甲基-N-辛基丁二胺-2-氨基竹紅菌乙素(X＝NH,m＝4,n＝0,R₁＝R₂＝CH₃,R₃＝C₈H₁₇)的制備，其合成路線如附圖7所示。

將竹紅菌乙素HB(100mg,0.18mmol)和長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物NH₂CH₂CH₂CH₂CH₂N(CH₃)₂(C₈H₁₇)(414mg,1.8mmol)溶解于50mL無水四氫呋喃中，充分混合后，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至60℃，避光攪拌反應(yīng)12h，反應(yīng)完畢后，旋蒸去除溶劑。藍(lán)黑色固體殘留物用200mL二氯甲烷溶解，水洗兩次，有機(jī)層干燥、過濾、有機(jī)相懸干得到粗產(chǎn)品。所得粗品用硅膠板層析法進(jìn)一步分離，展開劑為丙酮：乙酸乙酯：乙醇：二乙胺(體積比為20:1:1:1-20:1:1:3)，分別得到三種藍(lán)黑色得固體產(chǎn)物。

2位和17位同時(shí)取代產(chǎn)物S19(產(chǎn)率為8.5％，Rf為0.21)；MS(ESI+):m/z,found:1017.6；紫外最大吸收波長(zhǎng)：460nm,632nm。

2-位氨基取代產(chǎn)物S20(產(chǎn)率為6.7％，Rf為0.50)；(ESI+):m/z,found:806.6.紫外最大吸收波長(zhǎng)：456nm,628nm。

17位Schiff堿產(chǎn)物產(chǎn)物S21(產(chǎn)率為4.5％，Rf為0.35)；MS(ESI+):m/z found:819.5.紫外最大吸收波長(zhǎng)：452nm,630nm。

實(shí)施例16

N,N-二甲基-N-辛基己二胺-2-氨基竹紅菌乙素(X＝NH,m＝6,n＝0,R₁＝R₂＝CH₃,R₃＝C₈H₁₇)的制備。

將竹紅菌乙素HB(100mg,0.18mmol)和長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物NH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂N(CH₃)₂(C₈H₁₇)(462mg,1.8mmol)溶解于100mL無水四氫呋喃中，充分混合后，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至60℃，避光攪拌反應(yīng)12h，反應(yīng)完畢后，旋蒸去除溶劑。藍(lán)黑色固體殘留物用200mL二氯甲烷溶解，水洗兩次，有機(jī)層干燥、過濾、有機(jī)相懸干得到粗產(chǎn)品。所得粗品用硅膠板層析法進(jìn)一步分離，展開劑為丙酮：乙酸乙酯：乙醇：二乙胺(體積比為20:1:1:1-20:1:1:3)，分別得到三種藍(lán)黑色得固體產(chǎn)物。

2位和17位同時(shí)取代產(chǎn)物S22(產(chǎn)率為6.5％，Rf為0.24)；MS(ESI+):m/z,found:1072.6；紫外最大吸收波長(zhǎng)：462nm,634nm。

2-位氨基取代產(chǎn)物S23(產(chǎn)率為5.8％，Rf為0.56)；(ESI+):m/z,found:834.6.紫外最大吸收波長(zhǎng)：458nm,630nm。

17位Schiff堿產(chǎn)物產(chǎn)物S24(產(chǎn)率為7.5％，Rf為0.30)；MS(ESI+):m/z found:848.5.紫外最大吸收波長(zhǎng)：454nm,632nm。

實(shí)施例17

N,N-二甲基-N-奎基己二胺-2-氨基竹紅菌乙素(X＝NH,m＝6,n＝0,R₁＝R₂＝CH₃,R₃＝C₁₀H₂₁)的制備。

將竹紅菌乙素HB(100mg,0.18mmol)和長(zhǎng)鏈季銨鹽衍生物NH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂N(CH₃)₂(C₁₀H₂₁)(513mg,1.8mmol)溶解于100mL無水四氫呋喃中，充分混合后，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱至60℃，避光攪拌反應(yīng)12h，反應(yīng)完畢后，旋蒸去除溶劑。藍(lán)黑色固體殘留物用200mL二氯甲烷溶解，水洗兩次，有機(jī)層干燥、過濾、有機(jī)相懸干得到粗產(chǎn)品。所得粗品用硅膠板層析法進(jìn)一步分離，展開劑為丙酮：乙酸乙酯：乙醇：二乙胺(體積比為20:1:1:1-20:1:1:3)，分別得到三種藍(lán)黑色得固體產(chǎn)物。

2位和17位同時(shí)取代產(chǎn)物S25(產(chǎn)率為7.5％，Rf為0.28)；MS(ESI+):m/z,found:1128.2；紫外最大吸收波長(zhǎng)：463nm,636nm。

2-位氨基取代產(chǎn)物S26(產(chǎn)率為6.8％，Rf為0.58)；(ESI+):m/z,found:861.5；紫外最大吸收波長(zhǎng)：460nm,632nm。

17位Schiff堿產(chǎn)物產(chǎn)物S27(產(chǎn)率為8.5％，Rf為0.40)；MS(ESI+):m/z found:876.5.紫外最大吸收波長(zhǎng)：456nm,634nm。

顯然，本發(fā)明的上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說明本發(fā)明所作的舉例，而并非是對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式的限定，對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在上述說明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)，這里無法對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉，凡是屬于本發(fā)明的技術(shù)方案所引伸出的顯而易見的變化或變動(dòng)仍處于本發(fā)明的保護(hù)范圍之列。