本發(fā)明涉及醫(yī)藥化工領(lǐng)域，具體涉及常壓柱層析制備高純度6’-O-反式桂皮酰梓醇的方法。

背景技術(shù)：

已有的制備6’-O-反式桂皮酰梓醇的主要技術(shù)為采用高壓制備液相進(jìn)行分離制得高純度的6’-O-反式桂皮酰梓醇，此法上樣量小、效率低、耗材昂貴，增加了6’-O-反式桂皮酰梓醇的生產(chǎn)成本；另種方法所用溶劑為丙酮，丙酮易燃、易揮發(fā)，有毒，為后期的殘留檢查帶來麻煩，同時也不利于工業(yè)化生產(chǎn)過程中的勞動保護(hù)。本技術(shù)采用常壓方法，上樣量大、成本低、效率高，采用無毒性溶劑等優(yōu)點(diǎn)，特別適用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種方法簡單、成本低、五毒的6’-O-反式桂皮酰梓醇提純方法。

具體技術(shù)方案為：

一種分離純6’-O-反式桂皮酰梓醇的方法，其步驟包括：

(1)先用2倍體積2mol/L的NaOH洗滌樹脂，用蒸餾水洗至中性后，再用2倍體積的2mol/LHCl洗滌，最后用蒸餾水洗至中性，得到處理好的樹脂，備用；將制備10-香莢酰梓醇后所剩的提取物為原料加入乙醇提取后獲得提取液；提取液沉淀后得到上清液；

(2)將步驟(1)處理好的樹脂各取30mL置于錐形瓶，加入上清液50mL，于室溫下振蕩6h，再用50mL30％濃度的乙醇溶液解吸，進(jìn)行靜態(tài)吸附解析，得到型號為D3520、D4020、NKA-9、SIPI-DA201、D14和HD-1樹脂；

(3)將步驟(2)得到的樹脂進(jìn)行動態(tài)吸附及解吸，取50mL上清液上樹脂柱，然后用50mL30％濃度的乙醇洗脫，檢測洗脫液中6’-O-反式桂皮酰梓醇含量，得到大孔樹脂NKA-9；

(4)將步驟(3)的大孔樹脂NKA-9，取50mL上清液上柱，用50mL濃度為30-70％的乙醇，pH2-7，洗脫，得到6’-O-反式桂皮酰梓醇提取物，并收集洗脫液；

(5)將步驟(4)所得的6’-O-反式桂皮酰梓醇提取物過0.45μm濾膜，再采用高效液相色譜儀進(jìn)行表征；

(6)將步驟(4)的洗脫液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，將所得的濃縮液用乙酸乙酯萃取，重復(fù)三次，合并水相，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮得6’-O-反式桂皮酰梓醇濃縮液；

(7)將步驟(6)得到的6’-O-反式桂皮酰梓醇濃縮液上樣，用凝膠色譜柱分離純化，收集6’-O-反式桂皮酰梓醇，用高效液相色譜儀進(jìn)行表征。

步驟(4)所述的6’-O-反式桂皮酰梓醇提取純化的條件為：預(yù)先用檸檬酸調(diào)乙醇的pH至2-3，再用50％濃度的乙醇洗脫。

本發(fā)明提供的一種分離純6’-O-反式桂皮酰梓醇的方法，工藝方法簡單、成本低、五毒的6’-O-反式桂皮酰梓醇提純方法。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，但本發(fā)明不僅限于這些實(shí)施例，在未脫離本發(fā)明宗旨的前提下，所作的任何改進(jìn)均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

一種分離純6’-O-反式桂皮酰梓醇的方法，其步驟包括：

(1)先用2倍體積2mol/L的NaOH洗滌樹脂，用蒸餾水洗至中性后，再用2倍體積的2mol/LHCl洗滌，最后用蒸餾水洗至中性，得到處理好的樹脂，備用；將制備10-香莢酰梓醇后所剩的提取物為原料加入乙醇提取后獲得提取液；提取液沉淀后得到上清液；

(2)將步驟(1)處理好的樹脂各取30mL置于錐形瓶，加入上清液50mL，于室溫下振蕩6h，再用50mL30％濃度的乙醇溶液解吸，進(jìn)行靜態(tài)吸附解析，得到型號為D3520、D4020、NKA-9、SIPI-DA201、D14和HD-1樹脂；

(3)將步驟(2)得到的樹脂進(jìn)行動態(tài)吸附及解吸，取50mL上清液上樹脂柱，然后用50mL30％濃度的乙醇洗脫，檢測洗脫液中6’-O-反式桂皮酰梓醇含量，得到大孔樹脂NKA-9；

(4)將步驟(3)的大孔樹脂NKA-9，取50mL上清液上柱，用50mL濃度為30-70％的乙醇，pH2-7，洗脫，得到6’-O-反式桂皮酰梓醇提取物，并收集洗脫液；

(5)將步驟(4)所得的6’-O-反式桂皮酰梓醇提取物過0.45μm濾膜，再采用高效液相色譜儀進(jìn)行表征；

(6)將步驟(4)的洗脫液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，將所得的濃縮液用乙酸乙酯萃取，重復(fù)三次，合并水相，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮得6’-O-反式桂皮酰梓醇濃縮液；

(7)將步驟(6)得到的6’-O-反式桂皮酰梓醇濃縮液上樣，用凝膠色譜柱分離純化，收集6’-O-反式桂皮酰梓醇，用高效液相色譜儀進(jìn)行表征。

步驟(4)所述的6’-O-反式桂皮酰梓醇提取純化的條件為：預(yù)先用檸檬酸調(diào)乙醇的pH至2-3，再用50％濃度的乙醇洗脫。

以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。