本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種極易溶解且高分子雜質(zhì)含量較低的鹽酸頭孢甲肟的制備方法。

背景技術(shù)：

鹽酸頭孢甲肟(Cefmenoxime Hydrochloride)，化學名為：(6R，7R)–7–[(Z)-2–(2-氨基-4-噻唑基)-2-甲氧亞氨基乙酰氨基]-3-[[(1-甲基-1H-四唑-5-基)-硫]甲基]-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸鹽酸鹽(2:1)。其化學結(jié)構(gòu)式如下：

鹽酸頭孢甲肟是由日本武田藥品工業(yè)株式會社開發(fā)、生產(chǎn)的半合成廣譜抗生素，1996年進入中國市場。

本品為第三代半合成的頭孢菌素類廣譜抗生素,通過抑制細菌細胞壁的生物合成而達到殺菌作用。本品對革蘭陰性菌具有強抗菌作用是由于其具有良好的細胞外膜通透性，對β-內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定,且對青霉素結(jié)合蛋白(PBPs)1A、1B和3的親和力強,從而對細胞壁粘肽交聯(lián)形成具有較強的阻礙作用。

體外試驗表明,本品對革蘭陽性菌和陰性菌均有作用。對革蘭陽性菌的抗菌力，以化膿性鏈球菌和肺炎鏈球菌而論，作用強于頭孢替胺(CTM)和頭孢唑啉 (CEZ)。對消化球菌屬、消化鏈球菌屬顯示有強抗菌力。對革蘭陰性菌的抗菌力，以大腸桿菌和肺炎桿菌而論，稍強于CTM，遠強于CEZ。對流感桿菌、變形桿菌屬、粘質(zhì)沙雷氏桿菌，枸櫞酸桿菌屬、腸道菌屬的抗菌力比CTM強，遠比CEZ強。另外對擬桿菌屬也顯示有強抗菌力。

本品適用于頭孢甲肟敏感的鏈球菌屬{腸球菌除外}、肺炎鏈球菌、消化球菌屬、消化鏈球菌屬、大腸桿菌、檸檬酸桿菌屬、克雷白菌屬、腸桿菌屬、沙雷菌屬、變形菌屬、流感嗜血桿菌、擬桿菌屬等引起的感染，如：肺炎、支氣管炎、肺膿腫、腎孟腎炎、膀胱炎、子宮內(nèi)膜炎、膽囊炎、肝膿腫、腹膜炎等。

鹽酸頭孢甲肟溶解性差，在水及葡萄糖、氯化鈉等溶液中微溶，制劑中加入了助溶劑碳酸鈉，但溶解性仍然很差，臨床應(yīng)用中溶解困難，一般需要10-20分鐘才能完全溶解。這就使得溶解過程中降解雜質(zhì)增加，形成高分子雜質(zhì)，增加臨床上的過敏反應(yīng)，嚴重者可引起休克、死亡，直接威脅患者的生命；且未完全溶解的微粒進入人體后，能夠形成血栓，嚴重者可危及人的生命安全。

因此，制成快速溶解、質(zhì)量穩(wěn)定且高分子雜質(zhì)(聚合物)含量低的鹽酸頭孢甲肟產(chǎn)品，保障臨床用藥的安全性和有效性，具有十分重要的意義。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

基于上述原因，我們研究發(fā)現(xiàn)一種新的制備方法，該方法采用：取7-ACA，與AE活性酯混合，加入三乙胺，攪拌后，用鹽酸調(diào)節(jié)pH至2.0-2.5，過濾，干燥，得到鹽酸頭孢甲肟粗品；鹽酸頭孢甲肟粗品加水后，常溫加入L-谷氨酸，升溫后加入二乙醇胺，降溫后加入乙酸乙酯，獲得一種新的鹽酸頭孢甲肟原料，該鹽酸頭孢甲肟具有更好的的穩(wěn)定性，減少高分子雜質(zhì)的生成。本發(fā)明方法得到的鹽酸頭孢甲肟中高分子雜質(zhì)含量小于0.1％，5秒鐘之內(nèi)完全溶解。

本發(fā)明通過技術(shù)方案如下：

一種鹽酸頭孢甲肟原料的制備方法，采用7-ACT為原料，與AE活性酯進行反應(yīng)，在鹽酸調(diào)節(jié)下，生成鹽酸頭孢甲肟粗品；再在常溫加入L-谷氨酸，升溫后加入二乙醇胺，降溫后加入乙酸乙酯，獲得一種新的鹽酸頭孢甲肟原料。

其中7-ACT與AE活性酯的重量比為1：1.2。

其中鹽酸調(diào)節(jié)pH至2.0-2.5。

其中鹽酸頭孢甲肟粗品的制備方法為：取7-氨基-3-[1-甲基-1H-四唑-5-硫甲基]-頭孢-3-烯-4-羧酸(7-ACT)溶于二氯甲烷中，冰水浴冷卻至5℃左右，加入AE活性酯，然后加入三乙胺，攪拌4小時，用水萃取兩次，合并水相，加入活性炭，攪拌脫色30分鐘，抽濾，用水洗滌碳餅，合并水相。濾液用10％鹽酸調(diào)至pH2.5，析出白色固體，攪拌養(yǎng)晶3小時，過濾。用無水乙醇洗滌二遍，抽干。低于40℃減壓干燥，至水分低于1.0％，得鹽酸頭孢甲肟粗品。

其中鹽酸頭孢甲肟原料的制備方法為：取鹽酸頭孢甲肟粗品，加注射用水，加入L-谷氨酸，升溫至35℃-40℃，加入二乙醇胺，降溫至5℃-10℃，加入乙酸乙酯，5℃-10℃靜置8-12小時，乙酸乙酯層40℃減壓干燥，得到鹽酸頭孢甲肟原料。

一種鹽酸頭孢甲肟原料的制備方法：

第一步：取7-氨基-3-[1-甲基-1H-四唑-5-硫甲基]-頭孢-3-烯-4-羧酸(7-ACT)溶于二氯甲烷中，冰水浴冷卻至5℃左右，加入AE活性酯，然后加入三乙胺，攪拌4小時，用水萃取兩次，合并水相，加入活性炭，攪拌脫色30分鐘，抽濾，用水洗滌碳餅，合并水相。濾液用10％鹽酸調(diào)至pH2.5，析出白色固體，攪拌養(yǎng)晶3小時，過濾。用無水乙醇洗滌二遍，抽干。低于40℃減壓干燥，至水分低于1.0％，得鹽酸頭孢甲肟粗品。其中7-ACT與AE活性酯的 重量比為1：1.2。

第二步：取鹽酸頭孢甲肟粗品，加注射用水，加入L-谷氨酸，升溫至35℃-40℃，加入二乙醇胺，降溫至5℃-10℃，加入乙酸乙酯，5℃-10℃靜置8-12小時，乙酸乙酯層40℃減壓干燥，得到鹽酸頭孢甲肟原料。

具體實施方式

實施例1：

取7-氨基-3-[1-甲基-1H-四唑-5-硫甲基]-頭孢-3-烯-4-羧酸(7-ACT)100g，二氯甲烷1000ml，冰水浴冷卻至5℃左右，加入AE活性酯120g，然后加入三乙胺100ml，繼續(xù)攪拌4小時，用水500ml萃取兩次，合并水相，加入10克活性炭，攪拌脫色30分鐘，抽濾，用200ml水洗滌碳餅，合并水相。濾液用10％鹽酸調(diào)至pH2.5，析出白色固體，攪拌養(yǎng)晶3小時，過濾。用500ml乙醇洗滌二遍，抽干。低于40度減壓干燥10小時，至水分低于1.0％，得鹽酸頭孢甲肟粗品82.5克。

第二步：取鹽酸頭孢甲肟粗品50g，加注射用水200mL，加入L-谷氨酸5g，升溫至38℃，加入二乙醇胺1g，降溫至8℃，加入乙酸乙酯100mL，8℃靜置10小時，乙酸乙酯層40℃減壓干燥，得到鹽酸頭孢甲肟原料48.3g。色級為黃色3號，水分0.8％，純度98.9％，高分子雜質(zhì)0.07％。取1.0g鹽酸頭孢甲肟產(chǎn)品，加入10ml注射用水，5秒鐘之內(nèi)完全溶解。

實施例2：

取7-氨基-3-[1-甲基-1H-四唑-5-硫甲基]-頭孢-3-烯-4-羧酸(7-ACT)100g，二氯甲烷1000ml，冰水浴冷卻至5℃左右，加入AE活性酯120g，然后加入三乙胺100ml，繼續(xù)攪拌4小時，用水500ml萃取兩次，合并水相，加入10克活性炭，攪拌脫色30分鐘，抽濾，用200ml水洗滌碳餅，合并水相。濾液用10％ 鹽酸調(diào)至pH2.5，析出白色固體，攪拌養(yǎng)晶3小時，過濾。用500ml乙醇洗滌二遍，抽干。低于40度減壓干燥，至水分低于1.0％，得鹽酸頭孢甲肟粗品83.2克。

第二步：取鹽酸頭孢甲肟粗品50g，加注射用水200mL，加入L-谷氨酸5g，升溫至35℃，加入二乙醇胺1g，降溫至5℃，加入乙酸乙酯100mL，5℃靜置8小時，乙酸乙酯層40℃減壓干燥，得到鹽酸頭孢甲肟原料48.0g。色級為黃色3號，水分0.75％，純度99.1％，高分子雜質(zhì)0.06％。取1.0g的鹽酸頭孢甲肟產(chǎn)品，加入10ml 0.9％氯化鈉注射液，5秒鐘之內(nèi)完全溶解。

實施例3：

取7-氨基-3-[1-甲基-1H-四唑-5-硫甲基]-頭孢-3-烯-4-羧酸(7-ACT)100g，二氯甲烷1000ml，冰水浴冷卻至5℃左右，加入AE活性酯120g，然后加入三乙胺100ml，繼續(xù)攪拌4小時，用水500ml萃取兩次，合并水相，加入10g活性炭，攪拌脫色30分鐘，抽濾，用200ml水洗滌碳餅，合并水相。濾液用10％鹽酸調(diào)至pH2.5，析出白色固體，攪拌養(yǎng)晶3小時，過濾。用500ml乙醇洗滌二遍，抽干。低于40度減壓干燥，至水分低于1.0％，得鹽酸頭孢甲肟粗品82.1克。

第二步：取鹽酸頭孢甲肟粗品50g，加注射用水200mL，加入L-谷氨酸5g，升溫至38℃，加入二乙醇胺1g，降溫至8℃，加入乙酸乙酯100mL，8℃靜置10小時，乙酸乙酯層40℃減壓干燥，得到鹽酸頭孢甲肟原料48.3g。色級為黃色3號，水分0.8％，純度99.0％，高分子雜質(zhì)0.06％。取1.0g，加入10ml 5％葡萄糖注射液，5秒鐘之內(nèi)完全溶解。

【含量測定】

照高效液相色譜法(中國藥典2015年版二部附錄V D)測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以水-冰醋酸-乙腈(85:1.7:15)為流動相；檢測波長為254nm。取鹽酸頭孢甲肟對照品10mg，加1mol/L氫氧化鈉溶液0.5ml，放置30分鐘，加1mol/L鹽酸溶液0.5ml中和，加pH6.8磷酸鹽緩沖液2ml使溶解，用流動相稀釋制成每1ml中約含40μg的溶液，取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，頭孢甲肟主峰的保留時間約為10分鐘，與相鄰分解產(chǎn)物峰(相對保留時間約為0.77)的分離度應(yīng)不小于4.5。

測定法取本品約20mg，精密稱定，加上述pH6.8磷酸鹽緩沖液4ml使溶解，用流動相定量稀釋制成每1ml中約含40μg的溶液，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取鹽酸頭孢甲肟對照品，同法測定。按外標法以峰面積計算，即得。

鹽酸頭孢甲肟高分子雜質(zhì)(聚合物)檢測方法為：

照分子排阻色譜法(中國藥典2015版二部附錄ⅤH)測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用葡聚糖凝膠G-10(40～120μm)為填充劑；以pH7.0的0.1mol/L磷酸鹽緩沖液[取磷酸氫二鈉21.85g和磷酸二氫鈉5.38g，加水1000ml溶解，調(diào)節(jié)pH值為7.0]為流動相A，流動相B為水，流速為每分鐘1.0ml，檢測波長為254nm。分別以流動相A、B為流動相，取0.3mg/ml藍色葡聚糖2000溶液200μl，注入液相色譜儀，理論板數(shù)按藍色葡聚糖2000峰計算均不低于700，拖尾因子均應(yīng)小于2.0。在兩種流動相藍色葡聚糖2000峰保留時間的比值應(yīng)在0.93～1.07之間，對照溶液主峰和供試品溶液中聚合物峰與相應(yīng)色譜系統(tǒng)中藍色葡聚糖2000峰保留時間的比值均應(yīng)在0.93～1.07之間。稱取供試品約0.08g置50ml量瓶中，用0.3mg/ml藍色葡聚糖2000稀釋至刻度，搖 勻，取200μl注入液相色譜儀，用流動相A進行測定，記錄色譜圖。高聚體的峰高與單體和高聚體之間的谷高比應(yīng)大于2.0。另以流動相B為流動相，精密量取對照溶液200μl，連續(xù)進樣5次，峰面積的相對標準偏差應(yīng)不大于5.0％。

對照品溶液的制備取頭孢甲肟對照品適量，精密稱定，置50ml量瓶中，加流動相A5ml溶解后加流動相B稀釋至刻度，搖勻；精密量取1ml，置50ml量瓶中，加流動相B制成每1ml中含15μg的溶液，搖勻。

測定法取供試品適量，加流動相A制成每1ml中約含頭孢甲肟1.5mg的溶液，精密量取200μl注入液相色譜儀，以流動相A為流動相進行測定，記錄色譜圖；另精密量取對照品溶液200μl注入液相色譜儀，以流動相B為流動相，記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算，含頭孢甲肟聚合物以頭孢甲肟計，不得過0.1％。

上述實施例獲得的鹽酸頭孢甲肟原料均符合質(zhì)量標準的其它檢查項的要求。

我們對三批樣品進行了加試穩(wěn)定性試驗，結(jié)果表明，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，極易溶解，說明了本發(fā)明的方法的重要意義。結(jié)果如下表：

表1 本發(fā)明方法得到的鹽酸頭孢甲肟穩(wěn)定性