本發(fā)明涉及基因工程領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明涉及一種來源于果膠桿菌的蛋白HrpNX3及其基因與應(yīng)用。

背景技術(shù)：
Harpin蛋白是由植物革蘭氏陰性病原菌（如Pectobacterium、Erwinia、Pseudomonas、Xanthomonas和Ralstonia）等hrp基因簇成員編碼并通過III型分泌系統(tǒng)（T3SS）分泌的蛋白因子。由hrpN基因編碼的Hrp蛋白是病原菌擴散中是重要的結(jié)構(gòu)蛋白，在引起植物過敏反應(yīng)的同時，誘導(dǎo)宿主植物產(chǎn)生抗體的主要蛋白，可使植物體獲得對多種病原菌的廣譜抗性，同時Hrp蛋白又具有調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育等生物學(xué)效應(yīng)。對Erwiniaamylovora菌株Ea321的hrpN基因編碼的harpinEa蛋白生物學(xué)活性的研究，EdenBiosicence已開發(fā)出了高效安全的生物農(nóng)藥，其顯著防病、抗蟲和增產(chǎn)效果而引起廣泛關(guān)注。研究表明，水稻黃單孢細菌（Xanthomonasoryzae）不同菌株來源的HrfA基因編碼的Harpin蛋白在激發(fā)過敏性反應(yīng)和誘導(dǎo)抗性中表現(xiàn)出不同的生物活性（李平，陸徐忠，邵敏，龍菊英，王金生.2004.水稻黃單胞細菌Harpin蛋白的遺傳多樣性及其誘導(dǎo)煙草過敏反應(yīng)和抗病性功能，科學(xué)通報C輯，34(2):136-143）；果膠桿菌Pcc不同菌株來源hrpN基因編碼的Harpin蛋白能均引起典型過敏性癥狀，但生物活性存在顯著差異（湯承，2006，HarpinEcc蛋白對園藝植物的生物學(xué)效應(yīng)及其誘導(dǎo)抗性的分子機制解析，西南大學(xué)博士學(xué)位論文）。植物軟腐病在世界范圍內(nèi)廣泛發(fā)生，重要病原物有Pectobacteriumcarotovorumsubsp.carotovorum（Pcc）（原Erwiniacarotovorasubsp.carotovora,Ecc）、Pectobacteriumcarotovorumsubsp.atrosepticum（Pca）（原Erwiniacarotovorasubsp.atrosepticum,Eca）和Pectobacteriumchrysanthemi（Pch）（又名Dickeyadadantii，原Erwiniachrysanthemi,Ech）。這些破壞性致病菌侵染植物貯藏器官和新鮮組織，能迅速導(dǎo)致植物組織解離、腐爛，產(chǎn)生枯萎、莖腐和軟腐等癥狀，引起很多經(jīng)濟上重要的植物嚴重的經(jīng)濟損失，包括蔬菜作物（白菜和甘藍類蔬菜、胡蘿卜、番茄、馬鈴薯、洋蔥、蘿卜、辣椒和黃瓜等）、花卉植物（菊花、蝴蝶蘭、紫羅蘭和君子蘭等）、名貴藥材鐵皮石斛等，以及模式植物擬南芥（Arabidopsisthaliana）。軟腐菌生存能力強且易于傳播，加之缺乏有效的防治方法，該病害有擴散蔓延和逐年加重的趨勢。雖然鏈霉素、新霉素和四環(huán)素等抗生素在一定程度上能夠控制軟腐病菌，但這些廣譜性抗生素的大量使用，不僅出現(xiàn)了大量的耐藥致病菌株，而且不利于環(huán)境、食品和人類的安全。因此，獲得能顯著提高植物對軟腐病抗性的安全性生物農(nóng)藥具有重大意義。克隆和分離HrpN蛋白可以更好的應(yīng)用于植物軟腐病防治。

技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種來源于果膠桿菌Pectobacteriumcarotovorumssp.carotovorum（Pcc）菌株X3能顯著提高植物對軟腐病菌抗性的蛋白HrpNX3。本發(fā)明的另一目的是提供編碼上述蛋白HrpNX3的基因hrpNX3。本發(fā)明的另一目的是提供包含上述hrpNX3基因的重組表達載體pET30a(+)-hrpNX3。本發(fā)明的另一目的是提供包含上述hrpNX3基因的重組菌株BL21(Lyss)-hrpNX3。本發(fā)明的另一目的提供上述蛋白HrpNX3的應(yīng)用。本發(fā)明從菌株P(guān)ectobacteriumcarotovorumsubsp.carotovorumX3中分離得到一種新的HrpN蛋白，HrpNX3，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。SEQIDNO.1：MLNSLGGGASLQITIKAGGNGGLFQSQSSQNGGSPSQSAFGGQRSNIAEKLSDIMTTMMFMGSMMGGGMGGGLGGLGSSLGGLGGGLLGGGLGSSLGSGLGSALGGGLGGALGAGMNAMNPSAMMGSLLFSALEDLLGGGMSQQQGGLFGNKQPSSPEISAYTQGVNDALSAILGNGLSQTKGQTPPLQLGNNGL...