一種小鉆中長南五味子素d的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種小鉆中長南五味子素D的提取方法，包括如下步驟：萃取，將小鉆溶解后進行萃取，并將萃取產(chǎn)物與硅膠混合，得第一產(chǎn)物；將所述第一產(chǎn)物上硅膠柱，用氯仿和丙酮的混合液對所述第一產(chǎn)物洗脫，得第一洗脫產(chǎn)物；將第一洗脫產(chǎn)物進行薄層層析，在紫外光下觀察顯色，合并相同樣，依次與長南五味子素D的標樣對比，找出并提取含有長南五味子素D的粗樣，得第一粗樣；將第一粗樣上反相硅膠柱，用甲醇溶液對所述第一粗樣洗脫，得含有所述長南五味子素D的第二洗脫產(chǎn)物，對所述第二洗脫產(chǎn)物進行純化既得所述長南五味子素D。通過梯度洗脫長南五味子素D，能有效提高柱效，提高了長南五味子素D的分離能力，最后得高純度的長南五味子素D。
【專利說明】-種小鉆中長南五味子轟D的提取方法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及化合物的提取領域，尤其涉及一種瑤藥小鉆中長南五味子素D的提取 方法。

【背景技術】
[0002] 瑤藥小鉆來源于五味子科南五味子，屬植物長梗南五味子的根和莖。主要分布于 我國南部，如云南、四川、浙江、福建、廣東、廣西等地。小鉆味甘、苦、辛，性溫。屬風打相兼 藥。健脾補腎，理氣活血，巧風通絡，消腫止痛。小鉆為廣西瑤醫(yī)習用藥材，用于治療產(chǎn)后浮 腫、經(jīng)閉腹痛、疵氣痛、腎虛腰痛、胃痛、頭風痛、風濕性關節(jié)炎、跌打損傷和骨折等。但迄今 基本沒有小鉆對照品長南五味子素D的提取制備與純化的方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于根據(jù)小鉆中含有長南五味子素D，提供一種小鉆中長南五味子 素D的提取方法。
[0004] 本發(fā)明提供的技術方案為：
[0005] -種小鉆中長南五味子素D的提取方法，包括如下步驟：
[0006] 步驟一：萃取，將小鉆溶解后進行萃取，并將萃取產(chǎn)物與娃膠混合，得第一產(chǎn)物；
[0007] 步驟二：將所述第一產(chǎn)物上娃膠柱，用氯仿和丙麗的混合液對所述第一產(chǎn)物洗脫， 得第一洗脫產(chǎn)物；
[0008] 步驟H ;將第一洗脫產(chǎn)物進行薄層層析，在紫外光下觀察顯色，合并相同樣，依次 與長南五味子素D的標樣對比，找出并提取含有長南五味子素D的粗樣，得第一粗樣；
[0009] 步驟四：將第一粗樣上反相娃膠柱，用甲醇溶液對所述第一粗樣洗脫，得含有所述 長南五味子素D的第二洗脫產(chǎn)物，對所述第二洗脫產(chǎn)物進行純化既得所述長南五味子素D。
[0010] 優(yōu)選的是，所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述第二洗脫產(chǎn)物的純化 方法為：
[0011] 將所述第二洗脫產(chǎn)物繼續(xù)進行薄層層析，在英光下觀察顯色，將相同斑點的樣品 合并，并標記，得多組標記樣；將多組標記樣與長南五味子素D的標樣對比，找出并提取含 有長南五味子素D的樣品，若樣品在英光下觀察有其它雜質(zhì)，則繼續(xù)重復薄層層析步驟至 樣品中無雜質(zhì)，將無雜質(zhì)的樣品進行重結(jié)晶，即得所述長南五味子素D。
[0012] 優(yōu)選的是，所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述步驟一中小鉆的溶解， 將小鉆研磨成40-80目的粉末，之后將小鉆粉末與己醇按1 : 8-1 : 12的比例混合，浸泡 5-9天后將混合物蒸發(fā)至無醇味。
[0013] 優(yōu)選的是，所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述步驟一中萃取劑為己 酸己醋；娃膠為100-200目。
[0014] 優(yōu)選的是，所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述步驟二中娃膠柱中 的娃膠為200-300目，所述洗脫為梯度洗脫，氯仿和丙麗的配比依次為100 : 1、20 : 1、 10 : 1、5 : 1、1 : 1。
[0015] 優(yōu)選的是，所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述步驟H中薄層層析包 括：將所述第一洗脫產(chǎn)物分成多份，每份400-600ml，用甲醇對所述第一洗脫樣進行萃取， 將萃取樣在娃膠下點板，在紫外光下觀察，分樣，依次與長南五味子素D的標樣對比，找出 含有長南五味子素D的樣品，得第一粗樣。
[0016] 優(yōu)選的是，所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述步驟四中洗脫為梯度 洗脫，甲醇溶液的質(zhì)量分數(shù)依次為70%、80%和100%。
[0017] 優(yōu)選的是，所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述第二洗脫產(chǎn)物的薄層 層析包括：將所述第二洗脫產(chǎn)物分成多份，每份40-60ml，用甲醇對第二洗脫產(chǎn)物萃取，將 萃取物用質(zhì)量比為2 : 1-4 : 1的石油離和己酸己醋的混合物點板，在英光下觀察，分樣， 找出含有長南五味子素D的樣品。
[0018] 本發(fā)明具有W下有益效果；一方面，本發(fā)明提取的長南五味子素D可W很好的治 療骨科疾病，如促進骨折愈合，治療骨折引發(fā)的感染等，療效好，組方簡單，可降低使用者的 經(jīng)濟負擔。另一方面，采用萃取和洗脫的方法來提取小鉆中的長南五味子素D，萃取具有提 取效率高，使長南五味子素D的提取更充分，小鉆具有熱穩(wěn)定性好的優(yōu)點，因此對溫度的敏 感度不高，利用醇來萃取操作簡單；通過梯度洗脫長南五味子素D，能有效提高柱效，改善 檢測器的靈敏度，縮短了分析樣品的周期，提高了長南五味子素D的分離能力，最后得到的 長南五味子素D的純度可達到98. 5 % W上。

【具體實施方式】
[0019] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明，W令本領域技術人員參照說明書 文字能夠據(jù)W實施。
[0020] 一種小鉆中長南五味子素D的提取方法，包括如下步驟：
[0021] 步驟一：萃取，將小鉆溶解后進行萃取，并將萃取產(chǎn)物與娃膠混合，得第一產(chǎn)物；
[0022] 步驟二：將所述第一產(chǎn)物上娃膠柱，用氯仿和丙麗的混合液對所述第一產(chǎn)物洗脫， 得第一洗脫產(chǎn)物；
[0023] 步驟H ;將第一洗脫產(chǎn)物進行薄層層析，在紫外光下觀察顯色，合并相同樣，依次 與長南五味子素D的標樣對比，找出并提取含有長南五味子素D的粗樣，得第一粗樣；
[0024] 步驟四：將第一粗樣上反相娃膠柱，用甲醇溶液對所述第一粗樣洗脫，得含有所述 長南五味子素D的第二洗脫產(chǎn)物，對所述第二洗脫產(chǎn)物進行純化既得所述長南五味子素D。 [00巧]所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述第二洗脫產(chǎn)物的純化方法為：
[0026] 將所述第二洗脫產(chǎn)物繼續(xù)進行薄層層析，在英光下觀察顯色，將相同斑點的樣品 合并，并標記，得多組標記樣；將多組標記樣與長南五味子素D的標樣對比，找出并提取含 有長南五味子素D的樣品，若樣品在英光下觀察有其它雜質(zhì)，則繼續(xù)重復薄層層析步驟至 樣品中無雜質(zhì)，將無雜質(zhì)的樣品進行重結(jié)晶，即得所述長南五味子素D。
[0027] 所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述步驟一中小鉆的溶解，將小鉆研 磨成40-80目的粉末，之后將小鉆粉末與己醇按1 : 8-1 : 12的比例混合，浸泡5-9天后 將混合物蒸發(fā)至無醇味。
[0028] 所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述步驟一中萃取劑為己酸己醋；娃 膠為100-200目。
[0029] 所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述步驟二中娃膠柱中的娃膠為 200-300目，所述洗脫為梯度洗脫，氯仿和丙麗的配比依次為100 : 1、20 : 1、10 : 1、 5 : 1、1 : 1。
[0030] 所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述步驟H中薄層層析包括；將所述 第一洗脫產(chǎn)物分成多份，每份400-600ml，用甲醇對所述第一洗脫樣進行萃取，將萃取樣在 娃膠下點板，在紫外光下觀察，分樣，依次與長南五味子素D的標樣對比，找出含有長南五 味子素D的樣品，得第一粗樣。
[0031] 所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述步驟四中洗脫為梯度洗脫，甲醇 溶液的質(zhì)量分數(shù)依次為70%、80%和100%。
[0032] 所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述第二洗脫產(chǎn)物的薄層層析包括： 將所述第二洗脫產(chǎn)物分成多份，每份40-60ml，用甲醇對第二洗脫產(chǎn)物萃取，將萃取物用質(zhì) 量比為2 : 1-4 : 1的石油離和己酸己醋的混合物點板，在英光下觀察，分樣，找出含有長 南五味子素D的樣品。
[0033] 實施例1 ;
[0034] -種小鉆中長南五味子素D的提取方法，包括如下步驟：
[00巧]步驟一：萃取，將小鉆溶解后進行萃取，并將萃取產(chǎn)物與娃膠混合，得第一產(chǎn)物；
[0036] 步驟二：將所述第一產(chǎn)物上娃膠柱，用氯仿和丙麗的混合液對所述第一產(chǎn)物洗脫， 得第一洗脫產(chǎn)物；
[0037] 步驟H ;將第一洗脫產(chǎn)物薄層層析，在紫外光下觀察顯色，合并相同樣，依次與長 南五味子素D的標樣對比，找出并提取含有長南五味子素D的粗樣，得第一粗樣；
[0038] 步驟四：將第一粗樣上反相娃膠柱，用甲醇溶液對所述第一粗樣洗脫，得含有所述 長南五味子素D的第二洗脫產(chǎn)物，對所述第二洗脫產(chǎn)物進行純化既得所述長南五味子素D。
[0039] 所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述第二洗脫產(chǎn)物的純化方法為：
[0040] 將所述第二洗脫產(chǎn)物繼續(xù)進行薄層層析，在英光下觀察顯色，將相同斑點的樣品 合并，并標記，得多組標記樣；將多組標記樣與長南五味子素D的標樣對比，找出并提取含 有長南五味子素D的樣品，若樣品在英光下觀察有其它雜質(zhì)，則繼續(xù)重復薄層層析步驟至 樣品中無雜質(zhì)，將無雜質(zhì)的樣品進行重結(jié)晶，即得所述長南五味子素D。
[0041] 所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述步驟一中小鉆的溶解，將小鉆研 磨成60目的粉末，之后將小鉆粉末與己醇按1 : 10的比例混合，浸泡7天后將混合物蒸發(fā) 至無醇味。
[0042] 所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述步驟一中萃取劑為己酸己醋；娃 膠為150目。
[0043] 所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述步驟二中娃膠柱中的娃膠為 200-300目，所述洗脫為梯度洗脫，氯仿和丙麗的配比依次為100 : 1、20 : 1、10 : 1、 5 : 1、1 : 1。
[0044] 所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述步驟H中薄層層析包括；將所述 第一洗脫產(chǎn)物分成多份，每份500ml，用甲醇對所述第一洗脫樣進行萃取，將萃取樣在娃膠 下點板，在紫外光下觀察，分樣，依次與長南五味子素D的標樣對比，找出含有長南五味子 素D的樣品，得第一粗樣。
[0045] 所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述步驟四中洗脫為梯度洗脫，甲醇 溶液的質(zhì)量分數(shù)依次為70%、80%和100%。
[0046] 所述小鉆中長南五味子素D的提取方法中，所述第二洗脫產(chǎn)物的薄層層析包括： 將所述第二洗脫產(chǎn)物分成多份，每份50ml，用甲醇對第二洗脫產(chǎn)物萃取，將萃取物用質(zhì)量比 為3 : 1的石油離和己酸己醋的混合物點板，在英光下觀察，分樣，找出含有長南五味子素 D的樣品。
[0047] 下面通過對提取物長南五味子素D的樣品鑒定及純度檢查來進一步驗證小鉆中 的提取物。
[0048] 實驗一；提取物長南五味子素D的鑒定，將實施例1得到的提取物長南五味子素D 置于氣代氯仿中，進行核磁共振檢測其結(jié)果見表1。
[0049] 表1提取物長南五味子素D在氣代氯仿中氨和碳的數(shù)據(jù)
[0050]

【權(quán)利要求】
1. 一種小鉆中長南五味子素 D的提取方法，其特征在于，包括如下步驟： 步驟一：萃取，將小鉆溶解后進行萃取，并將萃取產(chǎn)物與硅膠混合，得第一產(chǎn)物； 步驟二：將所述第一產(chǎn)物上硅膠柱，用氯仿和丙酮的混合液對所述第一產(chǎn)物洗脫，得第 一洗脫產(chǎn)物； 步驟三：將第一洗脫產(chǎn)物進行薄層層析，在紫外光下觀察顯色，合并相同樣，依次與長 南五味子素 D的標樣對比，找出并提取含有長南五味子素 D的粗樣，得第一粗樣； 步驟四：將第一粗樣上反相硅膠柱，用甲醇溶液對所述第一粗樣洗脫，得含有所述長南 五味子素 D的第二洗脫產(chǎn)物，對所述第二洗脫產(chǎn)物進行純化既得所述長南五味子素 D。
2. 如權(quán)利要求1所述的小鉆中長南五味子素 D的提取方法，其特征在于，所述第二洗脫 產(chǎn)物的純化方法為： 將所述第二洗脫產(chǎn)物繼續(xù)進行薄層層析，在熒光下觀察顯色，將相同斑點的樣品合并， 并標記，得多組標記樣；將多組標記樣與長南五味子素 D的標樣對比，找出并提取含有長南 五味子素 D的樣品，若樣品在熒光下觀察有其它雜質(zhì)，則繼續(xù)重復薄層層析步驟至樣品中 無雜質(zhì)，將無雜質(zhì)的樣品進行重結(jié)晶，即得所述長南五味子素 D。
3. 如權(quán)利要求1所述的小鉆中長南五味子素 D的提取方法，其特征在于，所述步驟一中 小鉆的溶解，將小鉆研磨成40-80目的粉末，之后將小鉆粉末與乙醇按1 : 8-1 : 12的比 例混合，浸泡5-9天后將混合物蒸發(fā)至無醇味。
4. 如權(quán)利要求1所述的小鉆中長南五味子素 D的提取方法，其特征在于，所述步驟一中 萃取劑為乙酸乙酯；娃膠為100-200目。
5. 如權(quán)利要求1所述的小鉆中長南五味子素 D的提取方法，其特征在于，所述步驟二 中硅膠柱中的硅膠為200-300目，所述洗脫為梯度洗脫，氯仿和丙酮的配比依次為100 : 1、 20 : 1、10 : 1、5 : 1、1 : 1。
6. 如權(quán)利要求1所述的小鉆中長南五味子素 D的提取方法，其特征在于，所述步驟三中 薄層層析包括：將所述第一洗脫產(chǎn)物分成多份，每份400-600ml，用甲醇對所述第一洗脫樣 進行萃取，將萃取樣在硅膠下點板，在紫外光下觀察，分樣，依次與長南五味子素 D的標樣 對比，找出含有長南五味子素 D的樣品，得第一粗樣。
7. 如權(quán)利要求1所述的小鉆中長南五味子素 D的提取方法，其特征在于，所述步驟四中 洗脫為梯度洗脫，甲醇溶液的質(zhì)量分數(shù)依次為70^^80%和100%。
8. 如權(quán)利要求2所述的小鉆中長南五味子素 D的提取方法，其特征在于，所述第二洗脫 產(chǎn)物的薄層層析包括：將所述第二洗脫產(chǎn)物分成多份，每份40-60ml，用甲醇對第二洗脫產(chǎn) 物萃取，將萃取物用質(zhì)量比為2 : 1-4 : 1的石油醚和乙酸乙酯的混合物點板，在熒光下觀 察，分樣，找出含有長南五味子素 D的樣品。
【文檔編號】C07D493/10GK104447785SQ201410745886
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月9日
【發(fā)明者】繆劍華, 唐炳蘭, 王碩, 周小雷, 莫單丹, 龔小妹, 韋范, 樊溪源, 劉振杰 申請人:廣西壯族自治區(qū)藥用植物園