加尼瑞克前體以及由其制備醋酸加尼瑞克的方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于藥物合成【技術(shù)領(lǐng)域】，公開了一種制備醋酸加尼瑞克的方法，其采用Fmoc-Lys(Boc)-OH和Fmoc-D-Lys(Boc)-OH或Fmoc-Lys(Alloc)-OH和Fmoc-D-Lys(Alloc)-OH分別替代Fmoc-HArg(Et)2-OH和Fmoc-D-HArg(Et)2-OH，預(yù)先合成加尼瑞克前體I或加尼瑞克前體II-肽樹脂，再分別對前體I或前體II-肽樹脂中Lys和D-Lys的側(cè)鏈氨基進(jìn)行修飾、處理即可獲得醋酸加尼瑞克。本發(fā)明合成的醋酸加尼瑞克純度高，雜質(zhì)少，且成本相對較低，適合規(guī)?；a(chǎn)。
【專利說明】加尼瑞克前體以及由其制備醋酸加尼瑞克的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物合成【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及加尼瑞克前體以及由其制備醋酸加尼瑞 克的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 醋酸加尼瑞克，英文名稱為Ganirelix acetate ;化學(xué)名稱為N-acetyl-3 -(2-napthyl)-D-alanyl-4-chlor〇-D-phnylalanyl-3-(3-pyridyl)-D-alanyl-L -tyrosyΙ-Ng, N10diethyl-D-homoarginyl-L_leucyl-N9, N10_diethyl-L-homoargin yl-L-prolyl-D-alanylamide acetate ;分子式為 C8(IH113C1N18013 ;相對分子質(zhì)量為 1570. 3 ; CAS登記號為123246-29-7。其化學(xué)結(jié)構(gòu)如下式所示：
[0003]

【權(quán)利要求】
1. 加尼瑞克前體I，其具有如下所示的結(jié)構(gòu)， Ac-D-2-Nal-D-Phe (4-G1) -DHal-Ser-Tyr-D-Lys-Leu-Lys-Pro-D-Ala-M^。
2. 制備權(quán)利要求1所述的加尼瑞克前體I的方法，包括如下步驟： 1. Fmoc-D-Ala-0H 和樹脂反應(yīng)，猶得 Fmoc_D_Ala_ 樹脂； 2. Fmoc-D-Ala-樹脂采用逐一偶聯(lián)的方式偶聯(lián)Fmoc保護(hù)基團(tuán)的其他氨基酸，經(jīng)乙?；?后得到加尼瑞克前體I-肽樹脂； 3) 加尼瑞克前體I-肽樹脂經(jīng)切割反應(yīng)，獲得加尼瑞克前體I。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中步驟2)所述的Fmoc保護(hù)基團(tuán)的其他氨 基酸分別為 Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Lys (Boc) -OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-D-Lys (Boc) -0H、 Fmoc-Tyr (tBu) -〇H、Fmoc-Ser (tBu) -〇H、Fmoc-D-Pal-〇H、Fmoc-D_Cpa-〇H 和 Fmoc-D-Nal-OH。
4. 一種制備醋酸加尼瑞克的方法，包括如下步驟： 1) 制備如權(quán)利要求1所述的加尼瑞克前體I ; 2) 對步驟1)獲得的加尼瑞克前體I的Lys和D-Lys的側(cè)鏈氨基進(jìn)行修飾，獲得加尼瑞 克粗品； 3) 步驟2)獲得的加尼瑞克粗品經(jīng)純化、轉(zhuǎn)鹽和凍干后獲得醋酸加尼瑞克純品。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中步驟2)所述的側(cè)鏈氨基修飾所用的試劑為乙氨 基乙亞氨基甲磺酸，所用溶劑為DMF、NMP、DMSO、乙腈、THF、1，4-二氧六環(huán)或MeOH，所用堿為 DIPEA、Et3N、TMP、吡啶、NaHC03 或 Na2C03。
6. 加尼瑞克前體II-肽樹脂，其具有如下所示的結(jié)構(gòu)， Ac-D-2-Nal-D-Phe(4-C1)-D-3-Pal-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Lys-Leu-Lys-Pr〇-D-Ala-樹脂。
7. 制備權(quán)利要求6所述的加尼瑞克前體II-肽樹脂的方法，包括如下步驟： 1. Fmoc-D-Ala-0H 和樹脂反應(yīng)，猶得 Fmoc_D_Ala_ 樹脂； 2. Fmoc-D-Ala-樹脂采用逐一偶聯(lián)的方式偶聯(lián)Fmoc保護(hù)基團(tuán)的其他氨基酸，經(jīng)乙酰化 和賴氨酸去保護(hù)后獲得加尼瑞克前體II-肽樹脂。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中步驟2)所述的Fmoc保護(hù)基團(tuán)的其他氨基 酸分別為 Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Lys (Alloc)-〇H、Fmoc_Leu-〇H、Fmoc-D-Lys (Alloc)-0H、 Fmoc-Tyr (tBu) -〇H、Fmoc-Ser (tBu) -〇H、Fmoc-D-Pal-〇H、Fmoc-D_Cpa-〇H 和 Fmoc-D-Nal-OH。
9. 一種制備醋酸加尼瑞克的方法，包括如下步驟： 1) 制備如權(quán)利要求6所述的加尼瑞克前體II-肽樹脂； 2) 對步驟1)制備的加尼瑞克前體II-肽樹脂中的Lys和D-Lys的側(cè)鏈氨基進(jìn)行修飾， 并經(jīng)切割樹脂后獲得加尼瑞克粗品； 3) 步驟2)獲得的加尼瑞克粗品經(jīng)純化、轉(zhuǎn)鹽和凍干后獲得醋酸加尼瑞克純品。
10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中步驟2)所述的側(cè)鏈氨基修飾所用的試劑為乙氨 基乙亞氨基甲磺酸，所用溶劑為DMF、DCM或DMS0,所用堿為DIPEA、Et 3N或NMM。
11. 根據(jù)權(quán)利要求2或7所述的方法，其中所述的樹脂為Rink Amide resin、Rink Amide AM resin 或 Rink Amide MBHA resin。
12. 根據(jù)權(quán)利要求2或9所述的方法，其中步驟3)或步驟2)所述的切割反應(yīng)所采用的 切割試劑為 TFA:Anisole:Thioanisole:TIS:H20:EDT = 90 ?95:0 ?5:0 ?3:0 ?3:0 ? 5:0 ?2 (V/V)。
13. 根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中所采用的切割試劑為 TFA:Anisole:Thioanisole:EDT = 90:5:3:2(V/V)〇
14. 根據(jù)權(quán)利要求4或9所述的方法，其中步驟3)所述的純化為HPLC。
15. 根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中HPLC純化的具體步驟為：以八烷基硅烷鍵合硅 膠為固定相的色譜柱，流動相A中高氯酸鈉溶液的溶度為20mM，用磷酸調(diào)pH為1. 5,B相為 乙腈，梯度洗脫為75% A+25% B變化至65% A+35% B。
16. 根據(jù)權(quán)利要求4或9所述的方法，其中轉(zhuǎn)鹽的具體步驟為：以反相C8色譜填料為 固定相的色譜柱，流動相A相為0. 20%冰醋酸（V/V)溶液，B相為色譜純乙腈，梯度洗脫為 95 % A+5 % B作為流動相洗脫20分鐘后，2分鐘內(nèi)流動相由95 % A+5 % B變化為50 % A+50 % B，然后用50% A+50% B作為流動相進(jìn)行洗脫。
【文檔編號】C07K7/23GK104231055SQ201410265647
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年6月13日 優(yōu)先權(quán)日:2013年6月18日
【發(fā)明者】陳友金, 劉建, 馬亞平, 袁建成 申請人:深圳翰宇藥業(yè)股份有限公司