一種吡喃萘醌類抗生素及其制備和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種吡喃萘醌類抗生素，其為霞客霉素A：1-甲基-9-羥基-6-(6’-甲基-5’-羥基-3，4-二氫吡喃)-萘并[2,3-c]呋喃并[4,5-e]2,3-二氫吡喃-5,10,12-三酮。本發(fā)明還提供一種所述的吡喃萘醌類抗生素的制備方法：首先發(fā)酵培養(yǎng)保藏編號為CGMCC?NO.9262的鏈霉菌菌株Streptomyces?sp.cc8-201，收獲發(fā)酵物；然后從發(fā)酵物中提取、分離吡喃萘醌類抗生素化合物。本發(fā)明提供的化合物是一個新型PNQs類抗生素—霞客霉素A，經(jīng)體外生物活性測定證明，該化合物具有較好的抗細菌活性以及抗腫瘤作用，作為一個新的抗感染藥物、抗腫瘤藥物有著較好的應(yīng)用前景。
【專利說明】一種吡喃萘醌類抗生素及其制備和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于有機化學領(lǐng)域，具體涉及一種結(jié)構(gòu)為雜環(huán)化合物的抗生素，及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]細菌對抗生素的耐藥尤其是多重藥物耐藥已成為全球關(guān)注的醫(yī)學與社會問題，嚴重威脅著感染性疾病的治療。目前，幾乎所有的病原菌，特別是“ESKAPE”病原菌(腸球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌和腸道桿菌屬)均呈現(xiàn)出抗生素耐藥性。此外，腫瘤作為嚴重威脅人類健康的惡性疾病，一直是科學家關(guān)注的焦點。然而，批準應(yīng)用于臨床的抗生素卻逐年減少，甚至到無藥可用的地步。因此，探索新型結(jié)構(gòu)的抗生素，特別是發(fā)現(xiàn)針對“ESKAPE”耐藥菌、惡性腫瘤和耐藥腫瘤的新型化合物分子是現(xiàn)在我國藥物領(lǐng)域的重點研究方向。
[0003]吡喃萘醌類(Pyranonaphthoquinones,PNQs)是II型聚酮類抗生素，主要來源于微生物。其母核含有一個萘醌并吡喃環(huán)結(jié)構(gòu)，還包括母核結(jié)構(gòu)中的二氫吡喃環(huán)并一個五元Y內(nèi)酯環(huán)，或者Y內(nèi)酯環(huán)開環(huán)成為一個羧基側(cè)鏈連在二氫吡喃環(huán)上。其中二氫吡喃環(huán)并五元Y內(nèi)酯環(huán)的PNQs抗生素大多是鏈霉菌產(chǎn)生，也有一些稀有放線菌，如諾卡氏菌屬、擬諾卡氏菌屬、小單孢 菌屬和高溫單胞菌屬等能產(chǎn)生該類抗生素。PNQs抗生素具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤、抗原蟲等多種生物學活性。Psychorubin是最簡單的該類化合物，對KB腫瘤細胞具有顯著的抑制活性；kalafungin對各種致病真菌(發(fā)癬菌、須瘡癬菌及白色念珠菌等)，原蟲(短膜蟲、四膜蟲)，革蘭氏陽性菌(如金黃色葡萄球菌、肺炎球菌等)及部分革蘭氏陰性菌(棲菜豆假單胞菌、桃李黃單胞菌)有抑制活性，此外，kalafungin也對L5178Y小鼠白血病細胞顯示出抑制活性。dihydrogranaticin對病毒、革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均表現(xiàn)出抑制活性。medermycin對包括MRSA在內(nèi)的革蘭氏陽性菌有強烈的抑制活性，還對K562人髓細胞性白血病細胞系和P-388鼠非白血性白血病細胞系以及L5178Y鼠淋巴細胞瘤細胞系顯示出抑制活性，medermycin對血小板集聚也有抑制作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供一種新型的吡喃萘醌類抗生素。
[0005]本發(fā)明的另一目的是提出一種制備霞客霉素A的方法。
[0006]本發(fā)明的第三個目的是提出所述霞客霉素的應(yīng)用。
[0007]實現(xiàn)本發(fā)明上述目的的技術(shù)方案為:
[0008]一種吡喃萘醌類抗生素，其特征在于，為霞客霉素A:1-甲基-9-羥基-6-(6’_甲基-5’-羥基-3，4-二氫吡喃)-萘并[2，3-c]呋喃并[4，5-e]2, 3-二氫吡喃-5，10，12-三
酮，其結(jié)構(gòu)式為:
[0009]
【權(quán)利要求】
1.一種吡喃萘醌類抗生素，其特征在于，為霞客霉素A:1-甲基-9-羥基-6-(6’ -甲基-5’-羥基-3，4-二氫吡喃)-萘并[2，3-c]呋喃并[4，5-e]2, 3-二氫吡喃-5，10，12-三酮，其結(jié)構(gòu)式為:
2.一種制備權(quán)利要求1所述的吡喃萘醌類抗生素的方法，其特征在于，首先發(fā)酵培養(yǎng)保藏編號為CGMCC N0.9262的鏈霉菌菌株Str印tomyces sp.cc8-201，收獲發(fā)酵物；然后從發(fā)酵物中提取、分離吡喃萘醌類抗生素化合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)包括步驟: 1)將保藏編號為CGMCCN0.9262的鏈霉菌菌株Str印tomyces sp.cc8_201接種到種子培養(yǎng)基上培養(yǎng),培養(yǎng)條件為26-30°C，150-200r/min，培養(yǎng)36_48h ； 2)轉(zhuǎn)入發(fā)酵培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)成熟后收獲發(fā)酵液；在發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)條件為26-3(TC，150-200r/min，培養(yǎng) 144_168h。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述種子培養(yǎng)基組成為:葡萄糖10.0g,麥芽浸粉 5g，酵母粉 5.5g, ZnSO4.7Η200.0OlgjMnCl2.4Η200.0OlgjFeSO4.7Η200.002g，苯丙氨酸0.0Olg，丙氨酸0.0003g，維生素BI 0.0Olg,維生素B2 0.0Olg,維生素B60.0Olg，煙酸0.0Olg,生物素0.0Olg, 1.0L無菌蒸懼水； 所述的發(fā)酵培養(yǎng)基組成與所述種子培養(yǎng)基相同，或為每升種子培養(yǎng)基再加入可溶性淀粉20.0g而得。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述提取、分離包括步驟: 1)發(fā)酵物離心，取上清液； 2)上清液層析分析，用丙酮水溶液梯度洗脫，收集80%丙酮部分洗脫液，減壓旋轉(zhuǎn)濃縮去除有機溶劑后，得褐色粗提物。 3)粗提物經(jīng)凍干溶于甲醇中，進行層析分離，以甲醇洗脫，收集前端的褐色色帶；半純品溶于甲醇，用高效液相色譜法(HPLC)進行制備，冷凍干燥，得到桔紅色粉末狀目標化合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟2)中上清液用HP-20大孔吸附樹脂柱層析，然后用蒸餾水、30 %、50 %和80 %丙酮水溶液梯度洗脫。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟3)中，粗提物經(jīng)凍干溶于甲醇后用Sephadex LH-20凝膠柱層析。
8.權(quán)利要求1所述吡喃萘醌類抗生素在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，所述腫瘤為乳腺癌、結(jié)腸癌、神經(jīng)細胞瘤、肺癌、肝癌、前列腺癌和子宮頸癌。
9. 權(quán)利要求1所述吡喃萘醌類抗生素在制備抗細菌感染藥物中的應(yīng)用，所述細菌感染為耐β_內(nèi)酰胺抗生素的革蘭氏陽性菌葡萄球菌屬、耐萬古霉素的腸球菌屬細菌造成的感染。
10.含有權(quán)利要求1所述吡喃萘醌類抗生素的藥物組合物。
【文檔編號】C07D493/04GK103980285SQ201410251105
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年6月6日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月6日
【發(fā)明者】孫承航, 蔣忠科, 郭琳, 陳川, 何琪楊, 游雪甫, 劉少偉 申請人:中國醫(yī)學科學院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所