一種從植物山藥中提取山藥素的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從植物山藥中提取山藥素的方法，包括下列步驟：1）取植物山藥，粉碎后加入低碳醇與水混合制成的提取劑進(jìn)行加熱回流提取，將所得提取液濃縮除去低碳醇，得濃縮液或浸膏A；2）取濃縮液或浸膏A，加入弱極性或中等極性的有機(jī)萃取劑進(jìn)行萃取，取萃取所得有機(jī)相，濃縮除去有機(jī)萃取劑，得浸膏B；3）將浸膏B加入第一有機(jī)溶劑中進(jìn)行溶解后過(guò)濾，取濾液降溫結(jié)晶并過(guò)濾，即得山藥素粗品。本發(fā)明的從植物山藥中提取山藥素的方法，工藝簡(jiǎn)單、操作方便，能耗小；所用溶劑可以循環(huán)使用，無(wú)環(huán)境污染；提取率高，可得到含量為99%以上的山藥素；工藝簡(jiǎn)單、操作方便，能耗小，適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說(shuō)明】一種從植物山藥中提取山藥素的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物活性成分提取【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種從植物山藥中提取山藥素的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]山藥(D1scorea opposita Thunb)為薯菌科薯菌屬植物,纏繞草質(zhì)藤本；其塊莖為長(zhǎng)圓柱形，垂直生長(zhǎng)，長(zhǎng)可達(dá)lm，新鮮時(shí)斷面白色，富黏性，干后呈白色粉質(zhì)，為常見(jiàn)的食材、藥材。本植物的莖葉(山藥藤)、葉腋間的珠芽(零余子，也稱山藥豆)亦可供藥用。山藥作為中藥，性甘、平；功用主治:補(bǔ)脾，養(yǎng)肺，固腎，益精；主治脾虛泄瀉，食少浮腫，肺虛咳喘，消渴等。
[0003]現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，山藥素類化合物(Batatasin)具有植物激素樣作用，是不少植物的化感物質(zhì)。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，山藥素在低濃度時(shí)能促進(jìn)種子萌發(fā)或植物生長(zhǎng)，當(dāng)其濃度高于一定范圍時(shí)，對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育有一定的抑制作用。同時(shí)有報(bào)道表明山藥素具有抗炎、抗菌、解疫等生理活性，在醫(yī)藥領(lǐng)域具有重要應(yīng)用。但是，現(xiàn)有技術(shù)中還沒(méi)有從植物山藥中提取山藥素的工藝方法的介紹。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種從植物山藥中提取山藥素的方法。
[0005]為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:一種從植物山藥中提取山藥素的方法，包括下列步驟:
[0006]I)取植物山藥，粉碎后加入低碳醇與水混合制成的提取劑，加熱回流提取，將所得提取液濃縮除去低碳醇，得濃縮液或浸膏A ；
[0007]2)取步驟I)所得濃縮液或浸膏A，加入弱極性或中等極性的有機(jī)萃取劑進(jìn)行萃取，取萃取所得有機(jī)相，濃縮除去有機(jī)萃取劑，得浸膏B ；
[0008]3)將步驟2)所得浸膏B加入第一有機(jī)溶劑中進(jìn)行溶解后過(guò)濾，取濾液降溫結(jié)晶并過(guò)濾，即得山藥素粗品。
[0009]所述植物山藥包括薯蕷科植物薯蕷(山藥)的根莖、葉、山藥豆(零余子)及山藥皮。
[0010]所述低碳醇為碳原子為I?10的醇。
[0011]所述低碳醇為甲醇或乙醇。
[0012]所述提取劑中低碳醇的重量百分比為65%?75%。
[0013]步驟I)中所述加熱回流提取的溫度為60?80°C ;加熱回流提取的次數(shù)為3?5次，每次提取時(shí)間為2?3h。
[0014]每次加熱回流提取時(shí)，每Ikg植物山藥加入提取劑的量為4?10L。
[0015]步驟2)中所述萃取的次數(shù)為2?3次。每次萃取加入的有機(jī)萃取劑與所述濃縮液或浸膏A等體積。
[0016]步驟2)中所述有機(jī)萃取劑為極性在石油醚以上、乙酸乙酯以下的有機(jī)溶劑。
[0017]所述有機(jī)萃取劑為石油醚、正己烷、環(huán)己烷或乙酸乙酯。
[0018]所述第一有機(jī)溶劑是由甲醇與丙酮或者乙醇與丙酮按照體積比為10?15:1的比例混合制成的混合溶劑。
[0019]將所得山藥素粗品加入第二溶劑中進(jìn)行溶解后過(guò)濾，取濾液降溫結(jié)晶并過(guò)濾，SP得山藥素晶體。
[0020]所述第二溶劑為甲醇與水或者乙醇與水按照體積比為90?95:5?10的比例混合制成的混合溶劑。
[0021 ] 本發(fā)明的從植物山藥中提取山藥素的方法，選擇合適的溶劑對(duì)植物山藥進(jìn)行提取、濃縮、萃取、濃縮、溶解、結(jié)晶等一系列操作，成功從植物山藥中提取山藥素；所用溶劑可以循環(huán)使用，無(wú)環(huán)境污染；提取率高，可得到含量為99%以上的山藥素；工藝簡(jiǎn)單、操作方便，能耗小，適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。所得山藥素產(chǎn)品可用于抗菌、抗炎、抗癌以及抗過(guò)敏、抗病毒等藥物的研發(fā)，也可用于作物的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑以及化感研究等。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0022]圖1為實(shí)施例1所得山藥素單晶的核磁共振圖；
[0023]圖2為實(shí)施例1所得山藥素單晶的單晶衍射圖；
[0024]圖3為實(shí)施例1所得山藥素單晶的質(zhì)譜圖；
[0025]圖4為實(shí)施例1所得山藥素單晶的高效液相色譜圖。

【具體實(shí)施方式】
[0026]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。
[0027]實(shí)施例1
[0028]本實(shí)施例的從植物山藥中提取山藥素的方法，包括下列步驟:
[0029]I)取山藥皮(來(lái)源為河南焦作懷山藥飲片制作廢棄物)35kg，粉碎后加入乙醇與水混合制成的提取劑，加熱至60°C回流提取4次，每次加入提取劑的量為300L(每Ikg山藥皮約加入提取劑8.57L)，所述提取劑中乙醇的重量百分比為70%，每次的提取時(shí)間分別為3h、3h、2h、2h，將所得提取液合并后減壓濃縮至無(wú)乙醇，得山藥皮提取物的濃縮液；
[0030]2)取步驟I)所得濃縮液，用石油醚萃取三次，每次加入的石油醚與濃縮液等體積，將萃取所得有機(jī)相合并后，減壓濃縮除去石油醚，得浸膏；
[0031]3)將步驟2)所得浸膏加入甲醇-丙酮混合溶劑中進(jìn)行溶解，所述甲醇-丙酮混合溶劑中甲醇與丙酮的體積比為10:1，溶解后過(guò)濾，取濾液降溫結(jié)晶并過(guò)濾，得山藥素粗品；
[0032]4)將所得山藥素粗品加入乙醇-水混合溶劑中進(jìn)行溶解，所述乙醇-水混合溶劑中乙醇的體積分?jǐn)?shù)為95%，溶解后過(guò)濾，取濾液降溫結(jié)晶并過(guò)濾，即得山藥素單晶。
[0033]實(shí)施例2
[0034]本實(shí)施例的從植物山藥中提取山藥素的方法，包括下列步驟:
[0035]I)取山藥零余子(山藥豆，來(lái)源為河南焦作)300g，粉碎后加入乙醇與水混合制成的提取劑，加熱至80°C回流提取3次，每次加入提取劑的量為2L (每Ikg山藥零余子約加入提取劑6.67L)，所述提取劑中乙醇的重量百分比為75%，每次提取時(shí)間分別為3h、2h、2h，將所得提取液合并后減壓濃縮至無(wú)乙醇，得零余子提取物的濃縮液；
[0036]2)取步驟I)所得濃縮液，用乙酸乙酯萃取兩次，每次加入乙酸乙酯的量與濃縮液等體積，將萃取所得有機(jī)相合并，減壓濃縮除去乙酸乙酯，得浸膏；
[0037]3)將步驟2)所得浸膏加入乙醇-丙酮混合溶劑中進(jìn)行溶解，所述乙醇-丙酮混合溶劑中乙醇與丙酮的體積比為15:1，溶解后過(guò)濾，取濾液降溫結(jié)晶并過(guò)濾，得山藥素粗品。
[0038]本實(shí)施例所得山藥素粗品的純度為95%。
[0039]實(shí)施例3
[0040]本實(shí)施例的從植物山藥中提取山藥素的方法，包括下列步驟:
[0041]I)取山藥皮(來(lái)源為河南焦作)500g，粉碎后加入甲醇與水混合制成的提取劑，力口熱至70°C回流提取5次，每次加入的提取劑的量為2L(每Ikg山藥皮加入提取劑4L)，所述提取劑中甲醇的重量百分比為65%，每次的提取時(shí)間分別為3h、3h、2h、2h、2h，將所得提取液合并后減壓濃縮至無(wú)甲醇，得山藥皮提取物的濃縮液；
[0042]2)取步驟I)所得濃縮液，用正己烷萃取兩次，每次加入的正己烷與濃縮液等體積，將萃取所得有機(jī)相合并，減壓濃縮除去正己烷，得浸膏；
[0043]3)將步驟2)所得浸膏加入甲醇-丙酮混合溶劑中進(jìn)行溶解，所述甲醇-丙酮混合溶劑中甲醇與丙酮的體積比為10:1，溶解后過(guò)濾，取濾液降溫結(jié)晶并過(guò)濾，得山藥素粗品；
[0044]4)將所得山藥素粗品加入甲醇-水混合溶劑中進(jìn)行溶解，所述甲醇-水混合溶劑中甲醇的體積分?jǐn)?shù)為90%，溶解后過(guò)濾，取濾液降溫結(jié)晶并過(guò)濾，即得山藥素單晶。
[0045]實(shí)驗(yàn)例
[0046]本實(shí)驗(yàn)例對(duì)實(shí)施例1所得山藥素單晶進(jìn)行產(chǎn)物鑒定，具體如下:
[0047]I)性狀:山藥素晶體中山藥素含量為100%，淺黃色結(jié)晶。
[0048]2)產(chǎn)物鑒定:對(duì)實(shí)施例1所得山藥素單晶進(jìn)行核磁共振、X射線衍射和質(zhì)譜分析，結(jié)果如圖1、2、3所不。
[0049]從圖1、2、3 可知，E1-TOF-MS(正離子模式)m/z:285.1184[M+H]+，307.1004 [M+Na]+，323.0749 [M+K]+，分子式為 C17H16O4 ；在 1H-Nmr(^OHz1CDCI3) δ 中，9.11 (1Η, s)為 5 位上的氫，7.61(lH，d，J=8.8Hz)和 7.51 (1H，d，J=8.8Hz)的峰分別歸屬為9位和10位上的氫質(zhì)子信號(hào)，7.20 (1H, s)對(duì)應(yīng)的為8位上的氫，Hl和H3的峰則對(duì)應(yīng)的是6.86 (1H, d, J=2.4Hz)和 6.73 (1H, d, J=2.4Hz)的峰，5.85( 1H, broad)處的峰為酚羥基的氫，
4.09 (3H, s)、4.04 (3H, s)和3.95 (3H, s)的三個(gè)峰分別歸屬于2、5、7的甲氧基的質(zhì)子信號(hào)。
[0050]綜合所有光譜數(shù)據(jù)，經(jīng)與文獻(xiàn)[①Koji Hasegawa, Planta (Berl.), 1972,108，369-374 AKIRA SHIRATA, Phytochemistry, 1981，26，371-375]對(duì)照，確定該化合物為6_輕基-2、4、7_ 二甲氧基菲，即山藥素I。
[0051]3)含量測(cè)定:選用依利特高效液相色譜儀，UV-230 II紫外-可見(jiàn)檢測(cè)器檢測(cè)實(shí)施例I所得山藥素單晶的純度，結(jié)果如圖4所示。
[0052]色譜條件:色譜柱:Hypersil0DS2C18 (4.6mmX 200mm，5 μ m)，流動(dòng)相:甲醇-水(65:35v/v);流速:1.0mL.mirT1 ;檢測(cè)波長(zhǎng):260nm ;柱溫:30°C ;進(jìn)樣量:20μ L，選用甲醇為色譜純，其它試劑均為分析純。
[0053]經(jīng)HPLC面積歸一化法測(cè)定，山藥素純度大于99%。
【權(quán)利要求】
1.一種從植物山藥中提取山藥素的方法，其特征在于:包括下列步驟: 1)取植物山藥，粉碎后加入低碳醇與水混合制成的提取劑進(jìn)行加熱回流提取，將所得提取液濃縮除去低碳醇，得濃縮液或浸膏A ； 2)取步驟I)所得濃縮液或浸膏A，加入弱極性或中等極性的有機(jī)萃取劑進(jìn)行萃取，取萃取所得有機(jī)相，濃縮除去有機(jī)萃取劑，得浸膏B ； 3)將步驟2)所得浸膏B加入第一有機(jī)溶劑中進(jìn)行溶解后過(guò)濾，取濾液降溫結(jié)晶并過(guò)濾，即得山藥素粗品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從植物山藥中提取山藥素的方法，其特征在于:所述低碳醇為甲醇或乙醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從植物山藥中提取山藥素的方法，其特征在于:所述提取劑中低碳醇的重量百分比為65%?75%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從植物山藥中提取山藥素的方法，其特征在于:步驟I)中所述加熱回流提取的溫度為60?80°C ;加熱回流提取的次數(shù)為3?5次，每次提取時(shí)間為2?3h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的從植物山藥中提取山藥素的方法，其特征在于:每次加熱回流提取時(shí)，每Ikg植物山藥加入提取劑的量為4?10L。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從植物山藥中提取山藥素的方法，其特征在于:步驟2)中所述有機(jī)萃取劑為極性在石油醚以上、乙酸乙酯以下的有機(jī)溶劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或6所述的從植物山藥中提取山藥素的方法，其特征在于:所述有機(jī)萃取劑為石油醚、正己烷、環(huán)己烷或乙酸乙酯。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從植物山藥中提取山藥素的方法，其特征在于:所述第一有機(jī)溶劑是由甲醇與丙酮或者乙醇與丙酮按照體積比為10?15:1的比例混合制成的混合溶劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從植物山藥中提取山藥素的方法，其特征在于:將所得山藥素粗品加入第二溶劑中進(jìn)行溶解后過(guò)濾，取濾液降溫結(jié)晶并過(guò)濾，即得山藥素晶體。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的從植物山藥中提取山藥素的方法，其特征在于:所述第二溶劑為甲醇與水或者乙醇與水按照體積比為90?95:5?10的比例混合制成的混合溶劑。
【文檔編號(hào)】C07C41/34GK104292081SQ201410083342
【公開日】2015年1月21日 申請(qǐng)日期:2014年3月7日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月7日
【發(fā)明者】劉繡華, 胡衛(wèi)平, 白冰, 李明靜, 趙東保 申請(qǐng)人:河南大學(xué)