一種四環(huán)素的精制方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種四環(huán)素的精制方法，包括下列步驟：1）取粗四環(huán)素加入酸性溶劑中，再加入酸化沉淀劑和硼砂進(jìn)行溶解，得混合物A；2）調(diào)節(jié)混合物A的pH為1.2～2.8，靜置后過濾得濾液A；3）在濾液A中加入硫酸鋅、亞鐵氰化鉀、活性炭得混合物B，靜置并過濾得濾液B；4）將濾液B進(jìn)行超濾，得濾液C，調(diào)節(jié)濾液C的pH為4.5～5.0，靜置后過濾得濾餅A；5）取濾餅A，用酸性溶劑溶解后，調(diào)節(jié)pH為4.5～5.0，靜置后過濾得濾餅B；6）將濾餅B進(jìn)行真空干燥，即得。本發(fā)明的精制方法，所得產(chǎn)品收率高、純度高，方法簡(jiǎn)單可行，所需設(shè)備簡(jiǎn)單，原料廉價(jià)易得，成本低，適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說明】—種四環(huán)素的精制方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于抗生素精制【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種四環(huán)素的精制方法。

【背景技術(shù)】
[0002]四環(huán)素是一種廣譜的四環(huán)素類抗生素，主要用于防治豬、牛、羊及家禽的立克次體、支原體、衣原體和部分革蘭氏陰性菌感染，對(duì)于痢疾、皮膚化膿感染和地方性肺炎有明顯的療效。四環(huán)素微溶于水，可溶于乙醇等有機(jī)溶劑，可制成散劑、注射液等，便于臨床的應(yīng)用。
[0003]目前市場(chǎng)上多為口服級(jí)粗四環(huán)素，用藥次數(shù)較多，引起的動(dòng)物應(yīng)激反應(yīng)較強(qiáng)，且含有熱源、病毒等等雜質(zhì)，容易引起毒性反應(yīng)；并且目前精制四環(huán)素的方法制得的四環(huán)素純度不高，且操作繁瑣，不利于工業(yè)上的廣泛應(yīng)用。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種四環(huán)素的精制方法，解決現(xiàn)有精制方法所得產(chǎn)品收率及純度不高、操作繁瑣的問題。
[0005]為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:一種四環(huán)素的精制方法，包括下列步驟:
[0006]I)取粗四環(huán)素加入酸性溶劑中，攪拌溶解，再加入酸化沉淀劑和硼砂進(jìn)行溶解，得混合物A;
[0007]2)調(diào)節(jié)混合物A的pH為1.2~2.8，靜置后過濾至澄清，得濾液A ；
[0008]3)在濾液A中加入硫酸鋅、亞鐵氰化鉀、活性炭，加熱攪拌得混合物B，將混合物B靜置，過濾至澄清，得濾液B;
[0009]4)將濾液B進(jìn)行超濾,得濾液C,調(diào)節(jié)濾液C的pH為4.5~5.0,靜置后過濾,得濾餅A ；
[0010]5)取步驟4)所得濾餅A，用酸性溶劑進(jìn)行溶解后，調(diào)節(jié)pH為4.5~5.0，靜置后過濾，得濾餅B ;
[0011]6)將步驟5)所得濾餅B進(jìn)行真空干燥，即得精制四環(huán)素。
[0012]步驟I)和步驟5)中所述酸性溶劑為pH為1.0的鹽酸或pH為1.0的硫酸。
[0013]所述混合物A中酸化沉淀劑的質(zhì)量濃度為1.5%~3.0%，硼砂的質(zhì)量濃度為
1.5% ~2.5%ο
[0014]所述酸化沉淀劑為硫氰酸銨或硫氰酸。
[0015]步驟2)中所述靜置的時(shí)間為Ih ;步驟3)中所述靜置的時(shí)間為2h ;步驟4)中所述靜置的時(shí)間為4h ;步驟5)中所述靜置的時(shí)間為4h ;步驟6)中所述真空干燥的溫度為50~60°C，干燥時(shí)間為2h。
[0016]所述混合物B中硫酸鋅與亞鐵氰化鉀的總質(zhì)量濃度為4~6g/L，活性炭的質(zhì)量濃度為4~9g/L。
[0017]步驟3)中加入的硫酸鋅與亞鐵氰化鉀的質(zhì)量比為0.5~0.8:1。
[0018]步驟3)中所述加熱攪拌的溫度為50~60°C，攪拌時(shí)間為30min。
[0019]步驟4)中所述超濾的壓差為0.1MPa，超濾膜的截留分子量為1K~30K。
[0020]步驟4)和步驟5)中所述過濾是以中速定性濾紙進(jìn)行過濾。所述中速定性濾紙的過濾孔徑優(yōu)選為10~20 μ m。
[0021]本發(fā)明的四環(huán)素的精制方法，酸化沉淀劑可沉淀四環(huán)素發(fā)酵過程中產(chǎn)生的去酰胺四環(huán)素等雜質(zhì)；硼砂可以增加四環(huán)素成品的光澤度；硫酸鋅和亞鐵氰化鉀為絮凝劑，二者反應(yīng)生成絮凝沉淀，裹挾大量粗四環(huán)素中的蛋白及糖脂類雜質(zhì)析出；活性炭為吸附劑，可與絮凝劑協(xié)同作用，增加對(duì)大分子雜質(zhì)的吸附效果；超濾可以去除所有大分子雜質(zhì)和內(nèi)毒素，從而使所制得的精制四環(huán)素達(dá)到注射級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。
[0022]本發(fā)明的四環(huán)素的精制方法，采用多次溶解、過濾的工藝，產(chǎn)品收率高，達(dá)到了93.4%以上；所得精制四環(huán)素純度高，達(dá)到了 99.2%以上；經(jīng)過純化的精制四環(huán)素藥效高，雜質(zhì)少，提高了生物利用度，大大降低動(dòng)物的應(yīng)激反應(yīng)和毒性反應(yīng)，具有安全可靠、無毒副作用、生理生化性質(zhì)穩(wěn)定的優(yōu)點(diǎn)，可以在臨床上廣泛應(yīng)用，如制作長效四環(huán)素注射液等，臨床效果明顯，經(jīng)濟(jì)效益高；本發(fā)明的精制方法簡(jiǎn)單可行，所需設(shè)備簡(jiǎn)單，原料廉價(jià)易得，成本低，適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。

【具體實(shí)施方式】
[0023]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
[0024]實(shí)施例1
[0025]本實(shí)施例的四環(huán)素的精制方法，包括下列步驟:
[0026]I)取1g粗四環(huán)素加入pH為1.0的鹽酸中，攪拌溶解，再加入硫氰酸銨和硼砂進(jìn)行溶解，得混合物A，混合物A中硫氰酸銨的質(zhì)量濃度為1.5%，硼砂的質(zhì)量濃度為1.5% ；
[0027]2)用鹽酸調(diào)節(jié)混合物A的pH為1.2，靜置Ih后過濾至澄清，得濾液A ;
[0028]3)在濾液A中加入硫酸鋅、亞鐵氰化鉀、活性炭，加入的硫酸鋅與亞鐵氰化鉀的質(zhì)量比為0.5:1，50°C加熱攪拌30min得混合物B，混合物B中硫酸鋅與亞鐵氰化鉀的總質(zhì)量濃度為4.0g/L,活性炭的質(zhì)量濃度為4.0g/L,將混合物B靜置2h，過濾至澄清，得濾液B ；
[0029]4)將濾液B在0.1MPa壓差下進(jìn)行超濾，超濾膜截留分子量為10K，得濾液C，用氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)濾液C的pH為4.5,靜置4h后,用中速定性濾紙(過濾孔徑為10~15 μ m)過濾，得濾餅A ;
[0030]5)取步驟4)所得濾餅A，用pH為1.0的鹽酸進(jìn)行溶解后，再用氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH為4.5,靜置4h后,用中速定性濾紙(過濾孔徑為10~15 μ m)過濾,得濾餅B ；
[0031]6)將步驟5)所得濾餅B在50°C條件下進(jìn)行真空干燥，干燥時(shí)間2h，即得精制四環(huán)素。
[0032]實(shí)施例2
[0033]本實(shí)施例的四環(huán)素的精制方法，包括下列步驟:
[0034]I)取1g粗四環(huán)素加入pH為1.0的硫酸中，攪拌溶解，再加入硫氰酸銨和硼砂進(jìn)行溶解，得混合物A，混合物A中硫氰酸銨的質(zhì)量濃度為2.5%，硼砂的質(zhì)量濃度為2.0% ；
[0035]2)用鹽酸調(diào)節(jié)混合物A的pH為1.5，靜置Ih后過濾至澄清，得濾液A ;
[0036]3)在濾液A中加入硫酸鋅、亞鐵氰化鉀、活性炭，加入的硫酸鋅與亞鐵氰化鉀的質(zhì)量比為0.6:1，55°C加熱攪拌30min得混合物B，混合物B中硫酸鋅與亞鐵氰化鉀的總質(zhì)量濃度為6.0g/L,活性炭的質(zhì)量濃度為6.0g/L,將混合物B靜置2h，過濾至澄清，得濾液B ；
[0037]4)將濾液B在0.1MPa壓差下進(jìn)行超濾，超濾膜截留分子量為20K，得濾液C，用氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)濾液C的pH為4.8,靜置4h后,用中速定性濾紙(過濾孔徑為10~20 μ m)過濾，得濾餅A ;
[0038]5)取步驟4)所得濾餅A，用pH為1.0的鹽酸進(jìn)行溶解后，再用氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH為4.8,靜置4h后,用中速定性濾紙(過濾孔徑為10~20 μ m)過濾,得濾餅B ；
[0039]6)將步驟5)所得濾餅B在55°C條件下進(jìn)行真空干燥，干燥時(shí)間2h，即得精制四環(huán)素。
[0040]實(shí)施例3
[0041]本實(shí)施例的四環(huán)素的精制方法，包括下列步驟:
[0042]I)取1g粗四環(huán)素加入pH為1.0的鹽酸中，攪拌溶解，再加入硫氰酸銨和硼砂進(jìn)行溶解，得混合物A，混合物A中硫氰酸銨的質(zhì)量濃度為3.0%，硼砂的質(zhì)量濃度為2.5% ；
[0043]2)用鹽酸調(diào)節(jié)混合物A的pH為1.2，靜置Ih后過濾至澄清，得濾液A ;
[0044]3)在濾液A中加入硫酸鋅、亞鐵氰化鉀、活性炭，加入的硫酸鋅與亞鐵氰化鉀的質(zhì)量比為0.8:1，60°C加熱攪拌30min得混合物B，混合物B中硫酸鋅與亞鐵氰化鉀的總質(zhì)量濃度為5.0g/L,活性炭的質(zhì)量濃度為9.0g/L,將混合物B靜置2h，過濾至澄清，得濾液B ；
[0045]4)將濾液B在0.1MPa壓差下進(jìn)行超濾，超濾膜截留分子量為30K，得濾液C，用氨水調(diào)節(jié)濾液C的pH為5.0,靜置4h后,用中速定性濾紙(過濾孔徑為15~20 μ m)過濾,得濾餅A ;
[0046]5)取步驟4)所得濾餅A,用pH為1.0的鹽酸進(jìn)行溶解后,再用氨水調(diào)節(jié)pH為5.0,靜置4h后，用中速定性濾紙(過濾孔徑為15~20 μ m)過濾，得濾餅B ；
[0047]6)將步驟5)所得濾餅B在60°C條件下進(jìn)行真空干燥，干燥時(shí)間2h，即得精制四環(huán)素。
[0048]實(shí)驗(yàn)例I
[0049]本實(shí)驗(yàn)例對(duì)實(shí)施例1~3所得精制四環(huán)素稱量，計(jì)算收率；并且采用如下方法測(cè)定實(shí)施例1~3所得精制四環(huán)素的純度:
[0050]I)稱取精制四環(huán)素樣品25mg，置于50ml容量瓶中，加濃度為0.lmol/L的鹽酸5ml使之溶解，加水稀釋至刻度，搖勻；
[0051]2)量取步驟I)制得溶液5ml，置于25ml容量瓶中，加濃度為0.01mol/L的鹽酸稀釋至刻度，搖勻；
[0052]3)量取步驟2)制得溶液10 μ 1，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取四環(huán)素對(duì)照品，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積比計(jì)算其中的四環(huán)素含量。待測(cè)精制四環(huán)素樣品的含量(cx)=cK*Ax/AK，其中cK為對(duì)照品的四環(huán)素含量，Ak為對(duì)照品的峰面積，Ax為待測(cè)精制四環(huán)素樣品的峰面積。
[0053]實(shí)施例1~3的四環(huán)素的精制方法的收率及所得精制四環(huán)素的純度檢測(cè)結(jié)果如表I所示。
[0054]表1實(shí)施例1~3的四環(huán)素的精制方法的收率及所得精制四環(huán)素的純度檢測(cè)結(jié)果
[0055]

【權(quán)利要求】
1.一種四環(huán)素的精制方法，其特征在于:包括下列步驟: 1)取粗四環(huán)素加入酸性溶劑中，攪拌溶解，再加入酸化沉淀劑和硼砂進(jìn)行溶解，得混合物A ; 2)調(diào)節(jié)混合物A的pH為1.2~2.8，靜置后過濾至澄清，得濾液A ; 3)在濾液A中加入硫酸鋅、亞鐵氰化鉀、活性炭，加熱攪拌得混合物B，將混合物B靜置，過濾至澄清，得濾液B; 4)將濾液B進(jìn)行超濾，得濾液C，調(diào)節(jié)濾液C的pH為4.5~5.0，靜置后過濾，得濾餅A ； 5)取步驟4)所得濾餅A，用酸性溶劑進(jìn)行溶解后，調(diào)節(jié)pH為4.5~5.0，靜置后過濾，得濾餅B ； 6)將步驟5)所得濾餅B進(jìn)行真空干燥，即得精制四環(huán)素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四環(huán)素的精制方法，其特征在于:步驟I)和步驟5)中所述酸性溶劑為pH為1.0的鹽酸或pH為1.0的硫酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四環(huán)素的精制方法，其特征在于:所述混合物A中酸化沉淀劑的質(zhì)量濃度為1.5%~3 .0%，硼砂的質(zhì)量濃度為1.5%~2.5%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的四環(huán)素的精制方法，其特征在于:所述酸化沉淀劑為硫氰酸銨或硫氰酸。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四環(huán)素的精制方法，其特征在于:步驟2)中所述靜置的時(shí)間為Ih ;步驟3)中所述靜置的時(shí)間為2h ;步驟4)中所述靜置的時(shí)間為4h ;步驟5)中所述靜置的時(shí)間為4h ;步驟6)中所述真空干燥的溫度為50~60°C，干燥時(shí)間為2h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四環(huán)素的精制方法，其特征在于:所述混合物B中硫酸鋅與亞鐵氰化鉀的總質(zhì)量濃度為4~6g/L，活性炭的質(zhì)量濃度為4~9g/L。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的四環(huán)素的精制方法，其特征在于:步驟3)中加入的硫酸鋅與亞鐵氰化鉀的質(zhì)量比為0.5~0.8:1。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四環(huán)素的精制方法，其特征在于:步驟3)中所述加熱攪拌的溫度為50~60°C，攪拌時(shí)間為30min。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四環(huán)素的精制方法，其特征在于:步驟4)中所述超濾的壓差為0.1MPa，超濾膜的截留分子量為1K~30K。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四環(huán)素的精制方法，其特征在于:步驟4)和步驟5)中所述過濾是以中速定性濾紙進(jìn)行過濾。
【文檔編號(hào)】C07C237/26GK104163773SQ201310391365
【公開日】2014年11月26日 申請(qǐng)日期:2013年8月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月30日
【發(fā)明者】張聽盼, 李亞娥, 李建正 申請(qǐng)人:鄭州后羿制藥有限公司