專利名稱：大花金雞菊中查爾酮的提取方法及其新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化學(xué)與農(nóng)業(yè)領(lǐng)域，具體來說是提供一種大花金雞菊中查爾酮的提取方法及其用途。
背景技術(shù)：
大花金雞菊((Sbreop1Si1S grandiflora Hogg.)又名劍葉波斯菊、狹葉金雞菊和劍葉金雞菊，是菊科金雞菊屬多年生宿根 草本植物，原產(chǎn)美洲，1938年作為觀賞植物傳入我國，是外來雜草之一。該草耐貧瘠，抗污染，繁殖力強，因此在我國許多地區(qū)大量種植，并逃逸為野生雜草，資源豐富。已有研究表明，該植物根莖葉的揮發(fā)油對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、巨大芽孢桿菌等均具有的抑制作用(李希紅，陳榮，紀(jì)付江.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，37 (23) : 10996，10998.)，從該植物花中分離得到的KPY-78-菊黃色素被用于食品添加劑(李鴻英，陸長根，李秀華.植物學(xué)報.1981，23(6) :511-514.);而根、莖、葉三種器官的水浸提液能不同程度的抑制白菜pekinensis、$冗^ Y Daucus caroia、狗牙根dactylon、l股穎 Agros tis infirma、結(jié)縷草 Zoysia japonica、二月蘭 Orychophragmus violaceus、石
Dianthus和雞冠花cristata等植物的種子萌發(fā)及幼苗生長(曾建
軍，楊麗英，孫敏·西南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，2009,31(6):88-91 ;郭榮群，趙宏，張柯，江征，楊振美，聞啟.北方園藝，2010(4) :45-48;杜明利，高巖，張汝民，等.浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報，2011,28(1) :109-114.)。本發(fā)明人也發(fā)現(xiàn)大花金雞菊的根、莖、葉、葉柄、花、萼片及種子粉末對生菜、反枝莧、黃瓜、苘麻、小麥和稗等受體植物幼苗的生長均具有很高的抑制活性(趙妹，羅小勇，儀銘，孟昭禮.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2009,36(3) :369-372.)。在對大花金雞菊花中有效成分的研究中，首次分離出2’，4’，4-三輕基-3’，3- 二甲氧基查爾酮(2〃，4’，4-Trihydroxy-3’，3-dimethoxychalcone),并首次發(fā)現(xiàn)其具有高除草活性，從而完成了本發(fā)明。盡管此前Calanasan等人已從膨蜞菊屬植物Wedeliaasperrima中分離到該化合物(Calanasan CA,Macleod JK. Phytochemistry, 1998，47(6): 1093-1099)，但尚未見其生物活性的任何報道。而且，本發(fā)明中所述的提取分離方法，系采用活性追蹤法一步步探索而成，它非常適合于大花金雞菊中該物質(zhì)的提取分離，提取分離的過程及方法不同于Calanasan等人的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一在于從大花金雞菊中分離出活性物質(zhì)2’，4’，4_三羥基-3’，3-二甲氧基查爾酮。本發(fā)明的另外一個目的是提供所述化合物的提取方法。本發(fā)明的又一個目的是提供所述化合物的農(nóng)藥用途，更進(jìn)一步的是提供該化合物的除草用途。
具體的，一種大花金雞菊中查爾酮的提取方法，包括如下步驟
取大花金雞菊植物干粉，用體積比90 - 95%乙醇浸泡提取2 — 5次，每次浸泡時間3 -7d，提取液合并后減壓回收溶劑，得乙醇提取浸膏，將乙醇提取浸膏加入8 — 10倍重量蒸餾水混懸后，加入乙酸乙酯萃取3 — 5次，回收溶劑后得乙酸乙酯萃取物浸膏，取乙酸乙酯萃取物經(jīng)硅膠柱層析，依次用體積比2:1和I: I的石油醚+氯仿，純氯仿，100 :Γ1:5體積比的氯仿+甲醇以及純甲醇進(jìn)行梯度洗脫得到2’，4’，4-三羥基-3’，3- 二甲氧基查爾酮。優(yōu)選的，植物干粉為大花金雞菊植物花干粉。用濃度為95%乙醇提取3次，時間分別為3d、5d、7d，用乙酸乙酯萃取4次。
具體實施例方式本發(fā)明所述的化合物具有下列結(jié)構(gòu)式
OH O
3 j n
HOOH
O、
CH3
該化合物是從大花金雞菊的花根、莖、葉、葉柄、花、萼片及種子中分離出來的，優(yōu)選是從大花金雞菊的干花中提取。具體的，將植物大花金雞菊干燥花的粗粉用90 - 95%乙醇提取，提取液減壓回收溶劑，得乙醇提取浸膏；取浸膏加10倍量蒸餾水混懸后，加入乙酸乙酯萃??；回收溶劑后得乙酸乙酯萃取物；乙酸乙酯萃取物經(jīng)硅膠柱層析，依次用石油醚+氯仿、純氯仿、氯仿+甲醇及甲醇進(jìn)行梯度洗脫得到本發(fā)明的活性物質(zhì)。本發(fā)明所述化合物具有較強的抑制植物幼苗生長活性。具體來說本發(fā)明所分離的化合物對生菜、反枝莧、苘麻、小麥和稗等幼苗胚根和胚軸的生長具有很強的抑制作用，可用于直接開發(fā)植物源除草劑或作為先導(dǎo)化合物開發(fā)仿生除草劑。
通過實施例和實驗例對本發(fā)明進(jìn)行更詳細(xì)的說明。實施例I化合物2’，4’，4-三羥基-3’，3_ 二甲氧基查爾酮的提取
大花金雞菊干花粗粉5000g用95%乙醇浸泡提取3次，時間分別為3d、5d和7d。提取液合并后減壓回收溶劑，得95%乙醇提取浸膏1140g。將95%乙醇提取浸膏1140g加入10倍量蒸餾水混懸后，加入乙酸乙酯萃取4次?；厥杖軇┖蟮靡宜嵋阴ポ腿∥锝?72g。取乙酸乙酯萃取物40g經(jīng)硅膠柱層析，依次用體積比2:1和I: I的石油醚+氯仿，純氯仿，100: f 1:5體積比的氯仿+甲醇以及純甲醇進(jìn)行梯度洗脫得到2’，4’，4-三羥基-3’，3- 二甲氧基查爾酮，為橘黃色結(jié)晶。對上述分離的化合物2’，4’，4-三羥基-3’，3- 二甲氧基查爾酮的結(jié)構(gòu)鑒定波譜數(shù)據(jù)見下表I。質(zhì)譜測得的化合物分子量為317. O。表I化合物的1H和13C NMR數(shù)據(jù)(in DMS0)
權(quán)利要求
1.一種大花金雞菊中查爾酮的提取方法，其特征在于包括如下步驟 取大花金雞菊植物干粉，用體積比90 — 95%こ醇浸泡提取2 — 5次，每次時間3 — 7d，提取液合并后減壓回收溶劑，得こ醇提取浸膏，將こ醇提取浸膏加入8 — 10倍重量蒸餾水混懸后，加入こ酸こ酯萃取3 — 5次，回收溶劑后得こ酸こ酯萃取物浸膏，取こ酸こ酯萃取物經(jīng)硅膠柱層析，依次用體積比2:1和I: I的石油醚+氯仿，純氯仿，100: f 1:5體積比的氯仿+甲醇以及純甲醇進(jìn)行梯度洗脫得到2’，4’，4-三羥基-3’，3- ニ甲氧基查爾酮。
2.如權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于用濃度為95%こ醇提取3次，時間分別為3d、5d、7d，用こ酸こ酯萃取4次。
3.如權(quán)利要求I一 2任一所述的方法，其特征在于植物干粉為大花金雞菊植物花干粉。
4.2’，4’，4-三羥基-3’，3- ニ甲氧基查爾酮的除草用途。
5.如權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于所述的2’，4’，4-三羥基-3’，3-ニ甲氧基查爾酮是按權(quán)利要求I 一 3任一所述的方法提取的。
全文摘要
本發(fā)明涉及化學(xué)與農(nóng)業(yè)領(lǐng)域，具體來說是提供一種大花金雞菊中查爾酮的提取方法，包括取大花金雞菊植物干粉，用乙醇、乙酸乙酯萃取，經(jīng)硅膠柱色譜，依次用石油醚+氯仿、純氯仿、氯仿+甲醇以及純甲醇進(jìn)行梯度洗脫得到2',4',4-三羥基-3',3-二甲氧基查爾酮。本發(fā)明進(jìn)一步提供2',4',4-三羥基-3',3-二甲氧基查爾酮的除草新用途。
文檔編號C07C49/84GK102766035SQ20121028365
公開日2012年11月7日 申請日期2012年8月10日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月10日
發(fā)明者羅小勇, 趙姝 申請人:青島農(nóng)業(yè)大學(xué)