專利名稱：提高甜菊糖總甙的新方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物工程和新型甜味劑領(lǐng)域，特別涉及甜菊糖總甙含量的方法。
背景技術(shù)：
甜菊糖是從菊科草本植物甜葉菊中精提的新型天然甜味劑。它具有高甜度、低熱能的特點，其甜度是蔗糖的200— 350倍，熱值僅為蔗糖的I / 300。是繼甘蔗、甜菜之外第三種最具有開價值和健康推崇的天然蔗糖替代品，被譽為“世界第三糖源”。甜菊糖在一般著色性，安全無毒，被廣泛應(yīng)用于食品、釀酒、醫(yī)藥、日用化工等行業(yè)。甜菊糖的九種甜味成分中，甜菊甙、萊鮑迪甙A(RA)和萊鮑迪甙C(RC)的相對含量較高，共占90%以上，是決定甜菊糖味質(zhì)的主要成分。RA甜度最高，相當(dāng)于蔗糖的450倍，甜 味特性也與蔗糖相接近；甜菊甙甜味相當(dāng)于蔗糖的300倍，具有一定的苦味和不愉快的后味，影響了甜菊糖的味質(zhì)，限制了其更為廣泛的應(yīng)用?，F(xiàn)在中國市場上的甜菊糖產(chǎn)品有相當(dāng)一部分產(chǎn)品的總甙含量較低，不能滿足客戶的需求，需要再次精制以提高產(chǎn)品總甙。本發(fā)明提供一種簡單易行的方法能將總甙含量較低的產(chǎn)品總甙提高到95%以上。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明解決的技術(shù)問題是提供一種提高甜菊糖總甙的方法。本發(fā)明提供ー種利用下述エ藝提高甜菊糖總甙含量的方法。エ藝流程為將甜菊糖原料溶于有機(jī)溶劑中，保持溫度為25-45°C，保持4-10小時進(jìn)行結(jié)晶；結(jié)晶過程中進(jìn)行攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為50_100rpm ;上述結(jié)晶溶液進(jìn)行固液分離，烘干獲得精制甜菊糖；結(jié)晶溶液的固液分離選擇抽濾或離心分離；所述甜菊糖原料的質(zhì)量與溶劑的質(zhì)量體積比為1:2-15 ；上述甜菊糖原料總甙含量不得低于80%。所述有機(jī)溶劑為甲醇、異丙醇中的一種或其混合；有機(jī)溶劑優(yōu)選甲醇和異丙醇的混合溶劑；所述甲醇純度為95-100%，異丙醇純度為100% ；甲醇與異丙醇的比例為1:3-8 ;甲醇與異丙醇的比例優(yōu)選1:4-7 ；所述結(jié)晶溫度優(yōu)選30_35°C，結(jié)晶時間優(yōu)選6-8小時；所述結(jié)晶過程中攪拌轉(zhuǎn)速優(yōu)選60_80rpm ；所述離心機(jī)轉(zhuǎn)速為1500-3000rpm ；所述精制樣品的烘干溫度為50_70°C。有益效果
本發(fā)明可將甜菊糖原料的總甙由80%提高至95%以上；本發(fā)明產(chǎn)品的收率較高，一般在40%_70%之間。
具體實施例方式下面通過具體的實施方案敘述本發(fā)明方法。另外，實施方案應(yīng)理解為說明性的，而非限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的實質(zhì)和范圍僅由權(quán)利要求書所限定。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，在不背離本發(fā)明實質(zhì)和范圍的前提下，對這些實施方案中的結(jié)晶條件進(jìn)行的各種改變或改動也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明提高甜菊糖總甙含量的エ藝如下 將甜菊糖原料溶于有機(jī)溶劑中，保持溫度為25-45°C，保持4-10小時進(jìn)行結(jié)晶；結(jié)晶過程中進(jìn)行攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為50_100rpm ;上述結(jié)晶溶液進(jìn)行固液分離，烘干獲得精制甜菊糖；結(jié)晶溶液的固液分離選擇抽濾或離心分離；所述甜菊糖原料的質(zhì)量與溶劑的質(zhì)量體積比為1:2-15 ；上述甜菊糖原料總式含量不得低于80%。所述有機(jī)溶劑為甲醇、異丙醇中的一種或其混合；有機(jī)溶劑優(yōu)選甲醇和異丙醇的混合溶劑；所述甲醇純度為95-100%，異丙醇純度為100% ；甲醇與異丙醇的比例為1:3-8 ;甲醇與異丙醇的比例優(yōu)選1:4-7;所述結(jié)晶溫度優(yōu)選30_35°C，結(jié)晶時間優(yōu)選6-8小時；所述結(jié)晶過程中攪拌轉(zhuǎn)速為50_100rpm ；所述離心機(jī)轉(zhuǎn)速為1500_3000rpm ；所述精制樣品的烘干溫度為50_70°C。甜菊糖總甙的測定法法如下HPLC定量測定方法(JECFA 2010會議標(biāo)準(zhǔn))檢測步驟按照以下液相色譜條件檢測每種糖甙的含量。試劑こ腈，在210nm下檢測透光度>95%.標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格甜菊甙標(biāo)準(zhǔn)品干重純度>99% 萊鮑迪式A標(biāo)準(zhǔn)品干重純度>99%含有9種甜菊糖甙的基準(zhǔn)溶液鮑含甜菊甙、萊鮑迪甙A、萊鮑迪甙B、萊鮑迪甙C、萊鮑迪甙D、萊鮑迪甙F、杜爾克甙A、懸鉤子甙和甜菊雙糖甙。用7:3的水こ腈溶液將含有9種甜菊糖甙的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行稀釋，以便用來確定各個糖甙的出峰時間。標(biāo)準(zhǔn)品可在日本W(wǎng)ako公司和美國ChromaDex公司買到。標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制精確稱取50毫克甜菊甙標(biāo)準(zhǔn)品和50毫克萊鮑迪甙A標(biāo)準(zhǔn)品，分別放入50毫升的容量瓶中，然后加入7:3的水こ腈溶液進(jìn)行溶解至50毫升刻度。樣品溶液的配制精確稱取50 — 100毫克甜菊甙樣品，放入50毫升的容量瓶中，然后加入7:3的水こ腈溶液進(jìn)行溶解至50毫升刻度。檢測步驟
在以下條件下注入5 μ I的樣品溶液。色譜柱Shiseido公司的 Capcell pak C18 MG II 型色譜柱或者 Phenomenex 公司的Luna 5 μ C18⑵IOOA型色譜柱或者相當(dāng)規(guī)格的色譜柱(長度250毫米；內(nèi)徑4. 6毫米，填料粒度5μπι)。；流動相比例為32:68的こ腈和磷酸鈉緩沖液(規(guī)格10mmol/L，pH值2. 6)的混合液。磷酸鈉緩沖液的配置方法將2. 76克磷酸ニ氫鈉溶解到2升水中，加入磷酸將pH值調(diào)整到2. 6流速I毫升/毎分鐘。
檢測器210nm紫外檢測。色譜柱溫度40°C記錄大約30分鐘的檢測圖譜。峰值識別和計算將樣品溶液的出峰與含有9種甜菊糖甙的基準(zhǔn)溶液的出峰時間(見附后圖譜)相對比，確定樣品溶液中各個出峰對應(yīng)的糖甙。算出樣品溶液中9種糖甙對應(yīng)的峰面積，算出甜菊甙標(biāo)準(zhǔn)品溶液和萊鮑迪甙A標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積。按照以下公式，計算樣品中萊鮑迪甙A之外的8種糖甙中每ー種糖甙的百分比%X= [ffs/ff] X [fxAx/As] x 100按照以下公式，計算樣品中萊鮑迪甙A的百分比% 萊鮑迪式 A= [WR/ff] X [Ax/AR] X 100公式中X代表每種糖甙Ws是甜菊甙標(biāo)準(zhǔn)品溶液中甜菊甙的干重(mg)WR是萊鮑迪甙A標(biāo)準(zhǔn)品溶液中萊鮑迪甙A的干重(mg)W是樣品溶液中樣品的干重(mg)As是甜菊甙標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積AR是萊鮑迪甙A標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積Ax是樣品溶液每種糖甙的峰面積fx是每種糖甙的分子量與甜菊甙分子量的比值1. 00(甜菊甙)，I. 20 (萊鮑迪甙A), 1.00(萊鮑迪甙B)，I. 18 (萊鮑迪甙C)，1.40(萊鮑迪甙D)，I. 16(萊鮑迪甙F)，0. 98 (杜爾克甙A) ,0.80(懸鉤子甙),0.80(甜菊雙糖甙)。計算甜菊糖甙總量的百分比(將9種糖甙的百分比相加)實施例I取甜菊糖原料100g，加入200ml溶剤，甲醇純度為98%，異丙醇純度為100%，甲醇異丙醇=1: 3，充分溶解后置于三ロ燒瓶中，水浴控制溫度30攝氏度，攪拌速度為90rpm，養(yǎng)晶時間為10小吋，將結(jié)晶混合液用布氏漏斗進(jìn)行抽濾，所得晶體50°C過夜烘干，得干樣42. 3g。液相測定結(jié)果為
權(quán)利要求
1.一種提高甜菊糖總甙的方法，步驟如下 將甜菊糖原料溶于有機(jī)溶劑中，保持溫度為25-45°C，保持4-10小時進(jìn)行結(jié)晶，結(jié)晶過程中進(jìn)行攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為50-100rpm ;上述結(jié)晶溶液進(jìn)行固液分離，烘干獲得精制甜菊糖，所述有機(jī)溶劑為甲醇、異丙醇中的一種或其混合。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述結(jié)晶溶液的固液分離選擇抽濾或離心分離。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述甜菊糖原料的質(zhì)量與溶劑的質(zhì)量體積比為1:2-15。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述甜菊糖原料總甙含量不得低于80%。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述有機(jī)溶劑為甲醇和異丙醇的混合溶剤。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述甲醇純度為95-100%，異丙醇純度為100%。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述甲醇與異丙醇的比例為 1:3-8。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述甲醇與異丙醇的比例為 1:4-7。
9.根據(jù)權(quán)利要求I所述提高甜菊糖總甙的方法，其特征在于所述精制樣品的烘干溫度為 50-70 °C。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種提高甜菊糖總甙的新方法，本發(fā)明屬于生物工程和新型甜味劑領(lǐng)域，特別涉及甜菊糖總甙含量的方法。工藝流程為將甜菊糖原料溶于有機(jī)溶劑中，保持溫度為25-45℃，保持4-10小時進(jìn)行結(jié)晶；結(jié)晶過程中進(jìn)行攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為50-100rpm；上述結(jié)晶溶液進(jìn)行固液分離，烘干獲得精制甜菊糖；本發(fā)明可將甜菊糖原料的總甙由80%提高至95%以上；本發(fā)明產(chǎn)品的收率較高，一般在40%-70%之間。
文檔編號C07H15/256GK102690306SQ20121018583
公開日2012年9月26日 申請日期2012年6月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月6日
發(fā)明者喬長晟, 李利寧, 樓鵬, 王彥飛, 鐘海蛟 申請人:天津北洋百川生物技術(shù)有限公司