專利名稱：一種純化銀膠菊酮的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種采用高速逆流色譜分離技術(shù)純化銀膠菊酮的方法。
背景技術(shù)：
銀膠菊{(diào)Parthenium hysterophorus)為菊科銀膠菊屬植物，一年生草本，生于曠地、路旁、河邊、荒地，從海岸附近到海拔1500m有分布，在西南地區(qū)垂直分布上限可達(dá)2400m。其原產(chǎn)于美國(guó)及墨西哥北部，是一種毒性植物。銀膠菊酮是從銀膠菊中分離出的一種倍半萜類化合物，具有抗真菌活性，在I. Omg/mL濃度時(shí)，8天后對(duì)黑曲霉生長(zhǎng)抑制率為40%。銀膠菊酮為黃色油狀物，[α]25/D-0. 011。(c=0. 475，氯仿)。分子式=C14H18O3,分子量:234. 3，分子結(jié)構(gòu)為
OCH30。
CHs CH3經(jīng)檢索，尚未見(jiàn)分離純化銀膠菊酮的相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于解決現(xiàn)有技術(shù)的不足和缺陷，提供一種純化銀膠菊酮的方法。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下
取銀膠菊粉碎，加80-90%乙醇超聲提取60-100min，提取液減壓回收試劑，依次用石油醚，二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，用3%碳酸鈉溶液洗滌后，濃縮至小體積，再以正己烷-氯仿-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜分離，流分減壓濃縮干燥即得銀膠菊酮。本發(fā)明在超聲提取時(shí)，選用超聲波功率3_20kw，超聲頻率20-60KHZ。本發(fā)明在高速逆流色譜分離萃取物時(shí)，所述的正己烷-氯仿-甲醇-水溶劑系統(tǒng)比例為 3 :(10-18) (7-13) :8。本發(fā)明在高速逆流色譜分離萃取物時(shí)，是以溶劑系統(tǒng)上相為固定相，下相為流動(dòng)相，設(shè)備轉(zhuǎn)速控制在750-950rpm，流動(dòng)相流速為l_3ml/min。本發(fā)明優(yōu)勢(shì)在于本發(fā)明采用超聲提取，提取時(shí)間短，提取效率高；本發(fā)明采用高速逆流色譜分離，分離過(guò)程無(wú)產(chǎn)品損失，制備周期短，制備量大，易操作，克服了傳統(tǒng)硅膠柱分離過(guò)程中樣品死吸附、工藝繁瑣、重現(xiàn)性差的技術(shù)缺陷。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I :
取銀膠菊1kg，粉碎，置于超聲提取罐中，加10L90%乙醇超聲提取60min，啟動(dòng)功率3kw，超聲頻率 20KHZ，提取液濃縮，加適量水分散，放入分液漏斗，依次用石油醚，二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，用5倍量3%碳酸鈉溶液洗滌，再回收二氯甲烷得濃縮液。取正己烷-氯仿-甲醇-水按3 :18 13 8比例混合均勻，靜置分層，取上相泵入色譜管，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)整轉(zhuǎn)速為700rpm，同時(shí)把下相以每分鐘6mL的流速泵入，當(dāng)所有多余固定相溢出分離柱時(shí)，流動(dòng)相流速調(diào)節(jié)為3ml/min，注入濃縮液，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，收集流分，減壓濃縮干燥即得銀膠菊酮，含量98. 5%，收率83. 5%。實(shí)施例2:
取銀膠菊1kg，粉碎，置于超聲提取罐中，加12L80%乙醇超聲提取lOOmin，啟動(dòng)功率20kw,超聲頻率20KHZ，提取液濃縮，加適量水分散，放入分液漏斗，依次用石油醚，二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，用3倍量3%碳酸鈉溶液洗滌，再回收二氯甲烷得濃縮液。取正己烷-氯仿-甲醇-水按3 :10 13 8比例混合均勻，靜置分層，取上相泵入色譜管，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)整轉(zhuǎn)速為850rpm，同時(shí)把下相以每分鐘6mL的流速泵入，當(dāng)所有多余固定相溢出分離柱時(shí)，流動(dòng)相流速調(diào)節(jié)為lml/min，注入濃縮液，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，收集流分，減壓濃縮干燥即得銀膠菊酮，含量97. 3%，收率78. 5%。
權(quán)利要求
1.I. 一種純化銀膠菊酮的方法，其特征在于包括以下步驟取銀膠菊粉碎，加80-90%乙醇超聲提取60-100min，提取液減壓回收試劑，依次用石油醚，二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，用3%碳酸鈉溶液洗滌后，濃縮至小體積，再以正己烷-氯仿-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜分離，流分減壓濃縮干燥即得銀膠菊酮。
2.2.根據(jù)權(quán)利要求I所述純化銀膠菊酮的方法，其特征在于所述的正己烷-氯仿-甲醇-水溶劑系統(tǒng)比例為3 : (10-18) : (7-13) :8。
全文摘要
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種純化銀膠菊酮的方法。方法步驟如下取銀膠菊粉碎，加80-90%乙醇超聲提取60-100min，提取液減壓回收試劑，依次用石油醚，二氯甲烷萃取，收集二氯甲烷萃取液，用3%碳酸鈉溶液洗滌后，濃縮至小體積，再以正己烷-氯仿-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜分離，流分減壓濃縮干燥即得銀膠菊酮。采用本發(fā)明純化銀膠菊酮，工藝簡(jiǎn)單易操作，收率高，易于工業(yè)化制備。
文檔編號(hào)C07C49/753GK102659548SQ20121012490
公開日2012年9月12日 申請(qǐng)日期2012年4月26日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月26日
發(fā)明者劉東鋒, 吳艷波 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司