專利名稱：：作為抗糖尿病藥用于控制糖尿病高血糖癥和糖尿病并發(fā)癥的二甲雙胍r-(+)硫辛酸鹽的制作方法作為抗糖尿病藥用于控制糖尿病高血糖癥和糖尿病并發(fā)癥的二甲雙胍R-(+)硫辛酸鹽
背景技術(shù)：
：糖尿病已經(jīng)廣泛流行并且根據(jù)世界衛(wèi)生組織的預(yù)測，到2030年糖尿病患者的數(shù)量將急劇增加。這是不祥的預(yù)測，因為應(yīng)對糖尿病的長期并發(fā)癥將對公共衛(wèi)生預(yù)算產(chǎn)生嚴(yán)重影響，所述的并發(fā)癥包括腎病、神經(jīng)病、視網(wǎng)膜病變和心血管并發(fā)癥。糖尿病的標(biāo)志是慢性升高的血葡萄糖水平。還已知異常升高的葡萄糖水平對主要糖尿病組織中的谷胱甘肽水平具有不利影響。另外，高血糖病癥涉及氧化應(yīng)激增加和活性氧類別的產(chǎn)生增加。盡管早期發(fā)現(xiàn)的胰島素及其隨后廣泛用于治療糖尿病，以及后來發(fā)現(xiàn)并且應(yīng)用的磺酰脲類和瘞唑烷二酮類，例如作為口服降血糖藥的曲格列酮、羅格列酮或吡格列酮，但是糖尿病的治療仍然不能令人滿意。胰島素的應(yīng)用需要多個日劑量，通常是通過自行注射。確定胰島素的適合劑量需要經(jīng)常估算尿或血中的糖。施用過量的胰島素會引起低血糖，作用范圍從血糖的輕微異常到昏迷，或甚至死亡。非胰島素依賴性糖尿病(II型糖尿病，NIDDM)的治療通常包括飲食、運動、口服降血糖藥(例如嚷唑烷二酮類)和胰島素(在更嚴(yán)重的情況中)的組合。但是，臨床上可用的降血糖藥或者具有限制它們應(yīng)用的副作用或者藥物對特別的患者無效。在胰島素依賴性糖尿病(I型)的情況中，胰島素的施用通常構(gòu)成治療的主要過程。二曱雙胍是經(jīng)美國食品與藥品管理局批準(zhǔn)的用于治療性治療糖尿病的已知化合物。化合物及其制備和用途例如在美國專利No,3，174，卯1中公開。在治療2型糖尿病中二曱雙胍是口服有效的。二甲雙胍(N，N-二甲基亞M二碳亞胺二酰胺(dimethylimidodicarbonimidicdiamide))是雙胍抗高血糖藥，目前在美國以其鹽酸鹽l，l-二曱基雙胍鹽酸鹽的形式上市。根據(jù)英國糖尿病前瞻性研究(UKPDS)(Clarke等人，/)/"&似/^/，2005，448,868-877)，二甲雙胍治療能降低成本并且增加質(zhì)量調(diào)整的預(yù)期壽命。在UKPDS中，隨才幾用二甲雙胍進(jìn)行初期治療的超重和肥胖患者在心肌梗死和糖尿病相關(guān)死亡方面經(jīng)歷顯著降低。二曱雙胍不促進(jìn)體重增加并且對數(shù)個心血管危險因素具有有益的作用。因此，二甲雙J3/M皮廣泛認(rèn)為是大多數(shù)2型糖尿病患者的選擇藥物。但是，很多糖尿病患者對二曱雙胍產(chǎn)生抗性。a-硫辛酸(lipoicacid)具有多個名稱，包括硫辛酸(thiocticacid)、1,2-二石克戊環(huán)-3畫戊酸(pentanoicacid)、1，2-二石克戊環(huán)畫3-戊酸(valericacid)、6,8-硫辛酸、5-[3-(l，2-二硫戊環(huán)基)-戊酸、S-[3-(l，2-二硫戊環(huán)基)]戊酸、乙酸鹽代替因子和丙酮酸氧化因子。ot-硫辛酸具有不對稱碳原子并且通常以其R-和S-對映異構(gòu)體的外消旋混合物形式應(yīng)用，特別是以營養(yǎng)補充劑應(yīng)用。迄今為止，所有公開的臨床試驗(包括糖尿病患者中的那些)應(yīng)用外消旋的a-硫辛酸。a-硫辛酸(下文稱為硫辛酸)是抗氧化劑并且是活性氧類別(ROS)清除劑。其螯合金屬并且再循環(huán)內(nèi)源性抗氧化劑。硫辛酸可以清除單線態(tài)氧、H202、羥基、NO和ONOCT。硫辛酸的還原形式(二氫硫辛酸)可以進(jìn)一步清除02和過氧基。硫辛酸還可以螯合多種二價陽離子，例如1\1112+、Cu2+、Zn2+、Cd2+、Pb2+。因此，硫辛酸可以通過Cu2+抑制抗壞血酸誘導(dǎo)的H202的產(chǎn)生。硫辛酸可以再循環(huán)內(nèi)源性抗氧化劑，例如谷胱甘肽(GSH)和維生素C。GSH保護組織免受氧化應(yīng)激。硫辛酸還可以影響糖尿病患者中乳酸鹽和丙酮酸鹽的循環(huán)血漿水平。Estrada等人(Z)/Metes，1996，45，1798-1804)才艮道了硫辛酸誘導(dǎo)GLUT轉(zhuǎn)運體和葡萄糖攝取并且這表明石危辛酸還可以刺激胰島素信號傳導(dǎo)途徑。硫辛酸的施用在氧化應(yīng)激模型(包括缺血-再灌注損傷模型)中顯示出有效。另外，硫辛酸可以有效用作硫氧還蛋白(thiredoxin)和NF-kB轉(zhuǎn)錄因子的氧化還原調(diào)節(jié)劑。本文描述的硫辛酸的許多方面包括在Smith等人，Cwrew,M^//">ifl/C7^附/s^y，2004，11，1135-1146的綜述中。發(fā)明概述本發(fā)明描述了二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽的化學(xué)組合物以及治療糖尿病和糖尿病并發(fā)癥(例如白內(nèi)障、心肌病、腎病、神經(jīng)病和視網(wǎng)膜病變)的方法。本發(fā)明的化合物和組合物具有很高的水溶性并且當(dāng)施用于患者(優(yōu)選口月良施用)時，可以提供高血中水平的二甲雙胍R-(+)硫辛酸鹽。本發(fā)明涉及具有下面所示的式I結(jié)構(gòu)的化合物，其是二甲雙胍R-(十)-硫辛酸鹽并且旨在包括其任何多晶型物、溶劑化物和水合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>在某些該實施方案中，式I化合物包括(R)-(+)-硫辛酸鹽并且基本上沒有S-(-)-硫辛酸鹽。在某些該實施方案中，式1化合物包含少于5%、少于2%、少于1%或者甚至少于0.5。/o的二甲雙胍S-(-)-石克辛酸鹽。一方面，本發(fā)明涉及結(jié)晶形式的二曱雙胍(R)-(+)-硫辛酸鹽和制備結(jié)晶的二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽的方法，其基本上是與二甲雙胍S-(-)-硫辛酸鹽分離。在某些實施方案中，該方法包括a)從適合的二甲雙胍鹽新鮮制備二甲雙胍游離堿；和b)將新鮮制備的二甲雙胍游離堿與R-(+)硫辛酸在溫度約TC和約40。C之間反應(yīng)。在某些實施方案中，本發(fā)明涉及本發(fā)明的藥物組合物，該藥物組合物包含式I化合物和可藥用載體、介質(zhì)或稀釋劑。在某些實施方案中，本發(fā)明涉及多晶型結(jié)晶形式的二甲雙胍R-(+)硫辛酸鹽。一種該多晶型形式(如圖2中所表征的)基本上顯示出如下20角值，其表示X-射線粉末衍射圖中具有高相對強度的峰<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>在某些實施方案中，本發(fā)明涉及二曱雙胍或其可藥用鹽(例如鹽酸鹽、琥珀酸鹽、富馬酸鹽)與(R)-(+)-硫辛酸或其可藥用鹽(基本上無(S)-(-)-硫辛酸)的混合物。在某些實施方案中，本發(fā)明涉及本發(fā)明的藥物組合物，該藥物組合物進(jìn)一步包含可藥用載體、介質(zhì)或稀釋劑。在某些實施方案中，本發(fā)明涉及治療患有任何糖尿病(例如2型糖尿病)和糖尿病并發(fā)癥的個體的方法，該方法包括施用本文描述的化合物或組合物。本發(fā)明的某些方面涉及制備用于治療糖尿病(例如2型糖尿病)和糖尿病并發(fā)癥的本發(fā)明的藥物制劑的方法。在某些實施方案中，本發(fā)明涉及本發(fā)明的化合物或組合物的溶劑化物或水合物在治療糖尿病(例如2型糖尿病)或糖尿病并發(fā)癥中的用途。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物或組合物可以用于治療糖尿病或糖尿病并發(fā)癥，包括但不限于高血壓；微血管病，包括腎病(腎小球硬化、蛋白尿)、視網(wǎng)膜病變(微動脈瘤、血管硬化、瞳孔水腫(pupilleoedema)、增殖性視網(wǎng)膜病變)、白內(nèi)障、小動樂W更化(夕卜周循環(huán)系統(tǒng)疾病)和外周神經(jīng)病(多神經(jīng)炎)；大血管病和動脈粥樣硬化，包括冠狀動脈疾病、心肌缺血、心絞痛、中風(fēng)、腦血管疾病、心肌梗塞和外周血管疾病(間歇性跛行)；和潛在的糖尿病白內(nèi)障和糖尿病新生血管性青光眼。在某些實施方案中，本文描述的化合物和組合物可以用于治療肥胖(向心性肥胖/腹部肥胖)、胰島素抗性、高胰島素血癥、心臟代謝綜合征(具有發(fā)展成完全2型糖尿病的高危險)、多嚢卵巢綜合征(包括不排卵、雄激素過多癥和多毛癥)；神經(jīng)變性疾病，包括活性氧類另'J(ROS)和炎性過程(帕金森病、阿爾茨海默病)、HIV脂肪營養(yǎng)不良(代謝改變，包括高甘油三酯血癥、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性腎病、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、白內(nèi)障、高血糖癥、高胰島素血癥、動脈粥樣硬化、組織缺血，特別是心肌缺血(myocardialischemia)、心肌缺血(cardiacischemia)、糖尿病性心肌病、微血管病、大血管病和心M^t塞)。在某些方面，本發(fā)明涉及藥盒，該藥盒包含a)包含二甲雙胍(R)-(+)-硫辛酸鹽的單位劑型，或者包含二甲雙胍的可藥用鹽和(R)-(+)-硫辛酸或其可藥用鹽的組合的單位劑型；b)如何應(yīng)用藥盒的說明書；和c)至少一種用于容納單位劑型的容器。在某些該實施方案中，藥盒用于治療糖尿病和/或糖尿病并發(fā)癥的患者。附圖簡述圖1.二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽的晶體結(jié)構(gòu)，如實施例7中描述的。圖2.二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽的X-射線粉末衍射圖，如實施例7中描述的。圖3.二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽的，HNMR，如實施例7中描述的。圖4.二曱雙胍R-(+)-石克辛酸鹽的13CNMR，如實施例7中描述的。發(fā)明詳述定義本文所用的冠詞指的是一個或多于一個(即至少一個)該冠詞的遵循語法規(guī)則的個體。例如"一種成分"指的是一種成分或多于一種成分。本文所用的術(shù)語"障礙"和"疾病"指的是與身體任何部分、器官或系統(tǒng)的正常結(jié)構(gòu)或功能(或其任何組合)的任何偏差。特別的疾病通過特征癥狀和病征表現(xiàn)，包括生物學(xué)、化學(xué)和物理學(xué)變化，并且通常與多種其它因素有關(guān)，所述的其它因素包括但不限于人口統(tǒng)計學(xué)、環(huán)境、職業(yè)、遺傳和醫(yī)學(xué)史因素。某些特征病征、癥狀和相關(guān)因素可以通過多種方法來定量，以獲得重要的it斷信息。本文所用的術(shù)語"包括"指的是"包括但不限于"并且可與短語"包括但不限于"互換應(yīng)用。本文所用的"說明書"指的是描述關(guān)于藥盒或包裝藥物的組裝、制備或應(yīng)用的相關(guān)材料或方法學(xué)的產(chǎn)品標(biāo)簽和/或文件。這些材料可以包括以下的任何組合背景信息、遵循的步驟或方法、組分列表、建議的劑量、關(guān)于可能的副作用的注意事項、施用藥物的說明書、技術(shù)支持和任何其它相關(guān)文件。本文所用的術(shù)語"或"指的是"和/或"并且與術(shù)語"和/或"互換應(yīng)用，除非上下文明確指出。8"患者，，或"個體"優(yōu)選是需要治療的哺乳動物，例如人，但是還可以是寵物(例如狗、貓等)、家畜(例如牛、羊、豬、馬等)或?qū)嶒瀯游?例如大鼠、小鼠、豚鼠等)。術(shù)語"預(yù)防"是領(lǐng)域公認(rèn)的，并且當(dāng)用于病癥例如局部復(fù)發(fā)(例如疼痛)、疾病例如癌癥、綜合征復(fù)合例如心力衰竭或任何其它醫(yī)學(xué)病癥時，在本領(lǐng)域是眾所周知的并且包括施用組合物，與沒有接受組合物的個體相比，其能降低個體醫(yī)學(xué)病癥癥狀的頻率或延緩發(fā)作。因此，預(yù)防癌癥包括例如與未治療的對照A^相比降低接受預(yù)防性治療的患者群中可檢測癌性生長的數(shù)量，和/或與未治療的對照人群相比延緩治療A^中可檢測癌性生長的出現(xiàn)，例如通過統(tǒng)計學(xué)和/或臨床上有意義的數(shù)量。預(yù)防感染包括例如與未治療的對照A^相比降低治療中感染診斷的數(shù)量，和/或與未治療的對照人群相比延緩治療人群中感染癥狀的發(fā)作。預(yù)防疼痛包括例如與未治療的對照A^相比降低治療中個體經(jīng)歷的疼痛感覺的強度或可選擇的是延緩疼痛感覺。本文所用的術(shù)語"溶劑化物"指的是式I化合物或式I化合物的可藥用鹽，其中將適合的溶劑分子摻入至晶格中。適合的溶劑在施用的劑量下是生理學(xué)可耐受的。適合的溶劑的實例是乙醇、水等。當(dāng)水是溶劑時，分子指的是"7jc合物"。術(shù)語"需要治療障礙的個體"是被診斷為該障礙、可能發(fā)展成該障礙或懷疑患有該障礙的個體。本文所用的"基本上沒有"包括例如至少約70%、至少約80%、至少約卯％、至少約95%或至少約99%沒有指定化合物的組合物或化合物。例如，基本上與二甲雙胍S-(-)-a-硫辛酸鹽分離的二甲雙胍R-(+)-a-硫辛酸鹽指的是其中二曱雙胍R-(+)-a-硫辛酸鹽占總量的二甲雙胍a-疏辛酸鹽的至少約70%、至少約80%、至少約卯％、至少約95%或至少約99%(例如剩余物是二甲雙胍S-(-)-a-硫辛酸鹽)。本文所用的術(shù)語"例如，，指的是"例如但不限于"并且與短語"例如但不限于"互換應(yīng)用。本文所用的術(shù)語藥物的"足夠量"或"有效量"指的U以引起有利9的或預(yù)期的結(jié)果(包括臨床結(jié)果)的量，并且同樣"有效量"取決于所應(yīng)用的上下文。例如在施用抑制癌細(xì)胞增殖的藥物的上下文中，藥物的有效量是例如與沒有施用藥物所獲得的響應(yīng)相比，足以實現(xiàn)癌細(xì)胞增殖減少的量。關(guān)于治療的主題方法，化合物的"治療有效量"指的是制劑中化合物的量，當(dāng)作為預(yù)期的劑量方案的一部分施用(于哺乳動物，優(yōu)選人)時，根據(jù)所治療的障礙或病癥或美容目的的臨床可接受的標(biāo)準(zhǔn)，其能緩解癥狀、改善病癥或減緩疾病病癥的發(fā)作，例如以可應(yīng)用于任何醫(yī)學(xué)治療的合理的益處/風(fēng)險比。本文所用的術(shù)語"治療"指的是在一定程度上消除醫(yī)學(xué)病癥(例如運動障礙)，根據(jù)臨床上可接受的標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)學(xué)病癥得到改善。例如"治療運動障礙，，指的是改善患者的運動障礙或緩解患者的特別運動障礙的癥狀，其中將改善和緩解用臨床上可接受的標(biāo)準(zhǔn)試驗(例如患者自我評價尺度)和/或經(jīng)驗試驗(例如PET掃描)來評價。"單位劑型，，在本文中定義為包含治療劑配方的分離單元。適合的單位劑型的實例包括但不限于片劑、膠嚢或凝皿嚢劑。在某些方面，化合物式1是結(jié)晶的并且純度大于95%、大于98%并且優(yōu)選大于99%。在某些實施方案中，下文中命名為多晶型物A的結(jié)晶形式的式I化合物具有有利的性質(zhì)，包括純度、穩(wěn)定性(包括熱力學(xué)穩(wěn)定性和抵抗空氣中的濕氣(吸濕性))和/或生物利用度。另外，多晶型物A具有良好的處理性質(zhì)，以致于方〗更地將其摻入至藥物配方中。式I化合物，即二甲雙胍(R)-(+)-硫辛酸鹽可以制備如下將二甲雙胍鹽(例如鹽酸鹽、琥珀酸鹽、富馬酸鹽等)和石克辛酸溶于適合的惰性溶劑中。在某些實施方案中，用于該反應(yīng)的適合的溶劑是甲醇。當(dāng)將二甲雙胍的可藥用鹽代替游離堿應(yīng)用時，加入堿以形成二甲雙胍的游離堿。適合的堿包括堿和堿金屬氫氧化物、堿和堿金屬碳酸鹽和碳酸氫鹽以及叔胺。還包括樹脂堿。堿的實例包括但不限于氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、三乙胺、N-甲基異丙基胺和離子交換樹脂amberlystA26(OH)?？梢詫⒎磻?yīng)混合物在約環(huán)境溫度至約所用的溶劑的回流溫度下攪拌約2小時至約6小時，優(yōu)選在環(huán)境溫度下攪拌約2小時。然后可以將式I的鹽通過本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的方法從反應(yīng)混合物中分離，并且在適合的溶劑或溶劑的混合物中重結(jié)晶。醇是優(yōu)選的結(jié)晶溶劑，優(yōu)選甲醇。還包括本發(fā)明的式I化合物的7JC合物和溶劑化物。普通技術(shù)的化學(xué)家和藥學(xué)科學(xué)家還將意識到本發(fā)明的式I化合物可以以不同的固態(tài)多晶型形式存在。二曱雙胍鹽酸鹽可以例如如丄C&肌Soc.，1922，121，17卯中公開的制備。疏辛酸是可商購獲得的并且其合成在C7^附.Owi附"".，1986，1408中報道。本發(fā)明涉及治療糖尿病和糖尿病并發(fā)癥的方法，該方法包括施用二甲雙胍-R-(+)-硫辛酸鹽。通常地，在進(jìn)行本發(fā)明的方法中，二甲雙胍-R-(+)一石危辛酸鹽的有效劑量范圍為約1mg/kg/天至約60mg/kg/天或約1mg/kg/天至約30mg/kg/天(以單劑量或分劑量)，優(yōu)選5mg/kg/天至約50mg/kg/天(以單劑量或分劑量)。當(dāng)應(yīng)用二甲雙胍和硫辛酸的組合時，二甲雙胍的劑量范圍為3mg/kg/天至約40mg/kg/天，并且硫辛酸的劑量為5mg/kg/天至約70mg/kg/天。同樣，本文公開的這些方法包括適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)治療(急性)和/或預(yù)防性(預(yù)防)施用。所施用的化合物的量和時限當(dāng)然將取決于所治療的個體、疾病的嚴(yán)重程度、施用方法和開處方醫(yī)師的判斷。因此，由于患者與患者的差異，以上給出的劑量是指導(dǎo)原則并且醫(yī)師可以逐步增加藥物劑量，以獲得醫(yī)師認(rèn)為適合于患者的治療?？紤]預(yù)期的治療程度，醫(yī)師必須平衡多種因素，例如患者的年齡、存在的預(yù)成疾病以及存在的其它疾病。治療組合物本發(fā)明的組合物可以作為包含藥用有效量的二曱雙胍-R-(+)-硫辛酸鹽和可接受的載體和/或賦形劑的組合物施用于個體?？伤幱幂d體包括任何生理學(xué)相容的溶劑、M介質(zhì)或包衣。優(yōu)選的載體是適合靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、口腔、皿內(nèi)、皮內(nèi)、經(jīng)皮、局部或皮下施用的。另外，本發(fā)明的活性組合物可以鼻內(nèi)施用，作為直腸栓劑或應(yīng)用"快速，，制劑，即4吏得藥物無需應(yīng)ii用水而能在口腔中溶解。另外，本發(fā)明的活性組合物可以通過控釋劑型施用于需要治療的個體。一種示例性的可藥用栽體是生理鹽水。其它可藥用載體及其制劑是眾所周知的并且通常在例如7e附/"gtow，s尸/^/7fmc^^/ca/Sc/ewce(雷明頓藥物學(xué))(第18版，編者Gennaro，MackPublishingCo"Easton，PA，19卯)中描述。多種可藥用賦形劑是本領(lǐng)域眾所周知的并且可以在例如i/am/^do/戶A"尸歸c^/cfl/五x"^"te(藥物賦形劑手冊)(第4版，編者Rowe等人，PharmaceuticalPress,Washington,D.C.)中找到。該組合物可以配制成溶液劑、微乳劑、脂質(zhì)體、膠嚢劑、片劑或其它適合的形式。本發(fā)明的藥物組合物優(yōu)選在給藥時是無菌且無熱源的，并且優(yōu)選在制備和儲存條件下是穩(wěn)定的。通過將本發(fā)明組合物與可藥用載體、介質(zhì)或稀釋劑組合形成的藥物組合物是以多種劑型施用的，所述的劑型包括以下任何形式片劑、散劑、錠劑、糖漿劑和可注射溶液劑。這些藥物組合物可以進(jìn)一步包含例如矯味劑、粘合劑和/或賦形劑的成分。對于口服施用的目的，片劑可以包含多種賦形劑(例如檸檬酸鈉、碳酸鉀和磷酸釣)和/或多種崩解劑(例如淀粉、海藻酸和某些硅酸鹽絡(luò)合物)以及粘合劑(例如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明膠和阿拉伯膠)。另外，潤滑劑(例如硬脂酸鎂、月桂基^危酸鈉和滑石粉)可以用于制備片劑。組合物還可以制備^A軟的和硬的填充明膠膠嚢中。用于該制備的優(yōu)選材料包括乳糖(lactose)或乳糖(milksugar)和高分子量聚乙二醇。當(dāng)水混懸劑或酏劑預(yù)期用于口服施用時，其中必需的活性成分可以與多種甜味劑或矯味劑、著色劑或染料和(如果需要)乳化劑或助懸劑以及稀釋劑(例如水、乙醇、丙二醇、甘油)組合。本發(fā)明的化合物或組合物還可以非腸道或腹膜內(nèi)施用。本發(fā)明化合物(作為游離堿或可藥用鹽或溶劑化物)的溶液劑可以在適當(dāng)?shù)嘏c表面活性劑(例如羥丙基纖維素)混合的水中制備。分散劑還可以在甘油、液體聚乙二醇、DMSO和它們的混合物中(包含或不包含醇)以及在油中制備。在通常的儲存和應(yīng)用條件下，這些制劑包含防腐劑以防止微生物的生長。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將知道如何制備適合的制劑。用于選擇和制備適合的制劑的常規(guī)方法和成分例如在Remington'sPharmaceuticalSciences(雷明頓藥物學(xué))(1990-第18版)中和在1999年出版的UnitedStatesPharmacopeia(美國藥典)TheNationalFormulary(美國國家處方集)(USP24NF19)中描述。適合可注射應(yīng)用的藥物形式包括無菌水溶液劑或+軟劑和用于臨時制備無菌可注射溶液劑或分散劑的無菌粉末。在所有情況中，該形式必須是無菌的并且必須在一定程度上是流體，以存在容易的可注射性。制劑包括但不限于片劑，所述的片劑包含約200mg至約2000mg、優(yōu)選約500mg至約1000mg、例如500、750、850或1000mg二曱雙胍R-(+)-ot-硫辛酸鹽。通常，本發(fā)明的組合物可以口服或非腸道(例如靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下或髓內(nèi))施用，但是任何其它適合的施用途徑是可以考慮的。局部施用也可以指出，例如其中患者患有胃腸道障礙，或如主治醫(yī)師決定的藥物最適用于組織或器官的表面。對于口腔施用，本發(fā)明的組合物可以采用常規(guī)方法配制的片劑或錠劑的形式。對于經(jīng)皮(例如局部)施用的目的，制備稀釋的無菌、含水或部分含水溶液劑(通常濃度為約0.1%至5%),或制備類似于以上的非腸道溶液劑。如以上討論的，二甲雙胍和硫辛酸可以分開施用，本發(fā)明還包括藥盒形式的組合的或分開的藥物組合物。當(dāng)二甲雙胍和硫辛酸分開施用時，施用可以是同時的或依次的并且可以以任何順序。在某些實施方案中，當(dāng)施用;l:依次的時，它們可以例如在l天、12小時、6小時、4小時、2小時、l小時、30分鐘、10分鐘或甚至5分鐘內(nèi)依次施用。藥盒包含含單位劑型的容器，例如分開的瓶或分開的箔包裝。典型地，藥盒包含用于施用組分的說明書。當(dāng)組分優(yōu)選以不同劑型(例如口服和非腸道)施用、以不同劑量間隔施用時，或當(dāng)組合的單個組分的需要開處方醫(yī)師逐步增加時，藥盒形式是特別有利的。該藥盒的另一個實例是水泡眼包裝。水泡眼包裝在包裝業(yè)中是眾所周知的并且廣泛用于包裝藥物單位劑型(片劑、膠嚢劑等)。水泡眼包裝通常包括相對硬的材料的薄板，其被優(yōu)選透明塑料材料的箔覆蓋。在包裝過程13中，在塑料箔中形成凹槽。該凹槽具有用于包裝的片劑或膠嚢劑的大小和形狀。隨后，將片劑或膠嚢劑置于凹槽中并且在箔表面將相對硬的材料的薄板封住塑料箔，其與形成凹槽的方向相反。從而將片劑或膠嚢劑密封在塑料箔和薄板之間的凹槽中。薄板優(yōu)選的強度是通過用手在凹槽上施加壓力，借此在凹槽的地方的薄板上形成開口，從而可以將片劑或膠嚢劑從水泡眼包裝中取出。然后將片劑或膠嚢劑經(jīng)所述的開口取出。以下實施例說明本發(fā)明的特別實施方案。實施例l-6描述了制備二甲雙胍-R-(+)-^琉辛酸鹽的方法。然后將實施例1-6的產(chǎn)物進(jìn)行實施例7的方法以獲得結(jié)晶形式的二甲雙胍-R-(+)-硫辛酸鹽，附有表征(圖1-4)。實施例1:二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽的制備步驟l.l二甲雙胍游離堿的制備將AmberlystA26(OH)離子交換樹脂(60g)用去離子水洗滌3次并且用在曱醇中的2。/。(v/v)去離子水洗滌2次。將樹脂裝入直徑2.5cm的玻璃柱中(填充柱高度為20cm)。將柱進(jìn)一步用300mL在甲醇中的2V。(v/v)去離子水沖洗。將二甲雙胍鹽酸鹽(6.5g)溶于180mL在甲醇中的2。/。(v/v)去離子水中并且經(jīng)離子交換柱洗脫。將柱進(jìn)一步用200mL在甲醇中的2%(v/v)去離子水洗滌。將合并的洗脫液減壓濃縮，得到白色粉末。將粉末溶于丙酮中、經(jīng)硅藻土過濾并且將包含二甲雙胍游離堿的洗脫液減壓濃縮?；蛘咴跓?，將AmberlystA-26(OH)離子交換樹脂(60.097)與60mL去離子水混合并且浸泡l小時。將燒杯中的內(nèi)容物轉(zhuǎn)移至柱中(高度-25cm)。將填充柱用100mL、流速25mL/分鐘的去離子水沖洗(洗脫的溶劑幾乎是無色的；pH為6-7)。將柱用去離子水(2xl00mL)沖洗，直到洗脫的溶劑是無色的并且pH^5。將二甲雙胍鹽酸鹽(6.515g)溶于去離子水50mL中(溶液的pH為7-8)并且裝入柱中。將柱用去離子水洗脫，直到洗脫的溶液的pH為中性。將洗脫液在55。C下減壓濃縮，得到類白色固體。將固體溶于丙酮(300mL)中，過濾并且將濾液蒸發(fā)，得到白色固體粉末形式的二甲雙胍游離堿。步驟1.2二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽的制備14將二甲雙胍(50g，其游離堿形式)置于1L圓底燒瓶中，向其中加入79.84g結(jié)晶(R)-(+)-硫辛酸。在燒瓶中加入HPLC級的甲醇(750mL)并且將混合物攪拌2小時直到其變成溶液。將溶劑在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上、在40。C下減壓除去。將獲得的固體懸浮于水(750mL)中并且攪拌直到完全溶解。將獲得的溶液轉(zhuǎn)移至兩個325mL燒瓶中并且凍干48小時，得到129.84g(100。/。)的淡黃色粉末。將產(chǎn)生的黃色粉末(2.0g)溶于20mL溫甲醇中并且向其中滴加乙腈同時攪拌直到溶液變成渾濁。停止攪拌并且將混合物在室溫下放置48小時，得到高水溶性的、大的黃色針狀二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽；m.p.134-136°C;[aD25=+35.62。；<:1211251^50282計算值C42.99,H7.46，N20.89,S19.10;實測值C43.13,H7.60,N20.72,S18.99。實施例2:二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽在丙酮中的制備將上述步驟1.1中制備的二甲雙胍(游離堿)溶于70mL丙酮中。將R-(+)-硫辛酸溶于10mL丙酮中。將兩種溶液合并并且攪拌10分鐘。將產(chǎn)生的沉淀過濾并且將固體殘留物真空干燥，得到二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽(產(chǎn)率95%)。實施例3:二曱雙胍R-(+)-硫辛酸鹽在乙腈中的制備將上述步驟1.1中制備的二甲雙胍(游離堿)溶于50mL乙腈中。將R-(+)—硫辛酸溶于20mL乙腈中。將兩種溶液合并并且攪拌10分鐘。將產(chǎn)生的沉淀過濾并且將固體殘留物真空干燥，得到二曱雙胍R-(+)-硫辛酸鹽(產(chǎn)率95%)。實施例4:二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽的制備將甲醇鈉(0.31g)溶于甲醇(2mL)中并且在該溶液中加入二甲雙胍鹽酸鹽(lg)，同時攪拌。繼續(xù)攪拌10分鐘。然后加入丙酮(40mL)，攪拌20分鐘，并且將混合物過濾。在包含其游離堿形式的二甲雙胍的濾液中滴加R-(+硫辛酸(1.25g,溶于15mL丙酮中)，同時不斷攪拌，產(chǎn)生淡黃色固體沉淀。將混合物再攪拌20分鐘并且過濾。將淡黃色固體用丙酮(30mL)洗滌，過濾并且干燥，得到二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽；m.p.148-150。C;[aD20=+67.7o(c=l，7jc);d2H2sNs02S2計算值C42.99，H7.46，N20.89，S19.10;實測值C43.09，H7.62,N20.84，S19.23。實施例5:二曱雙胍R-(+)-硫辛酸鹽的制備在二甲雙胍鹽酸鹽(10.06g)的甲醇(400mL)懸浮液中加入溶于水(5mL)中的氫氧化鈉(2.23g)并且不斷攪拌。將溶液再攪拌20分鐘，然后濃縮，得到類白色固體。將固體用丙酮(500mL)洗滌，過濾并且不斷攪拌下在濾液中滴加在丙酮(250mL)中的R-(+)硫辛酸(12.5g)。二甲雙胍R-(+)硫辛酸鹽在加入硫辛酸的過程中沉淀出來。將混合物再攪拌20分鐘。然后將沉淀的二曱雙胍R-(+)-硫辛酸鹽過濾。將固體在攪拌下在丙酮中洗滌10分鐘，過濾并且干燥，得到二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽。實施例6:在二甲雙胍游離堿2.5g的丙酮(IOOmL)溶液中滴加R-(+)硫辛酸(4.3g)的丙酮(35mL)溶液同時攪拌。淡黃色沉淀物形成并且將混合物再攪拌30分鐘。將沉淀過濾并且再懸浮于丙酮中并且攪拌10分鐘。然后將其過濾并且千燥，得到二曱雙胍R-(+)-硫辛酸鹽。實施例1至6的產(chǎn)物可以通過重結(jié)晶進(jìn)一步純化。例如，可以將乙腈或丙酮加入至二甲雙胍R-(+)-硫辛酸的水或甲醇溶液中直到其變成渾濁，然后置于4""C的冰箱中，因此形成細(xì)針狀物?？蛇x擇的是，例如可以將四氫呋喃或乙酸乙酯加入至二甲雙胍R-(+)硫辛酸鹽的甲醇溶液中直到其變成渾濁，或者可以將正己烷加入至二曱雙胍R-(+)硫辛酸的無水乙醇溶液中直到其變成渾濁。純化方法的特別實例包括在實施例7中。實施例7:將二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽(250mg)溶于水(1.2mL)中。將乙腈緩慢加入至該溶液中，應(yīng)用連續(xù)的渦旋混合器。起初加入乙腈產(chǎn)生輕微的渾濁，但是當(dāng)渦旋時變成澄清。加入乙腈(100mL乙腈)直到半永久性的渾濁出現(xiàn)，進(jìn)一步攪拌變成澄清溶液。將該溶液靜置在4。C水箱中10-15小時。將細(xì)微的結(jié)晶針狀物過濾，干燥并且分析mpl50-152。C;比旋光60-65(c=l在水中；在20。C和589nm);，H匪R(圖3);"C匪R(圖4);DSC;起點在153.88。C，峰在156.03。C;晶體結(jié)構(gòu)在圖1中描述(細(xì)節(jié)如下)；粉末衍射X-射線圖語在圖2中描述(起始2.000。-終止49.997-步幅0.0050畫步幅時間10.3秒-陽極Cu-WL1:1.5406-產(chǎn)生23.05.200714:30:3116操作Smooth0.085I背景0.000,0.000I輸入)二甲雙胍R-(+)硫辛酸鹽的晶體數(shù)據(jù)和結(jié)構(gòu)精修經(jīng)驗式化學(xué)式量溫度波長晶系，空間群:晶胞尺寸:體積Z，計算的密度吸收系數(shù)F(000):晶體大小數(shù)據(jù)采集的0范圍限定指數(shù)收集的衍射點/獨立的衍射點完整度9=25.00吸收校正精^"方法數(shù)據(jù)/阻尼/參數(shù)F2擬合優(yōu)度最終議指數(shù)[1>2(7(1)R指數(shù)(所有數(shù)據(jù))絕對結(jié)構(gòu)參數(shù)最大的差異峰和空穴樣品分析CsHu02S2+.C4Hi2N5335.49294(2)K0.71073A單斜晶，P2,a=13.4597(16)Aa=90ob=8.9442(ll)AP=104.516(2)cc=14.5332(17)Ay=90°1693.7(4)A34,1.316Mg/mA30.326mm17200.18x0.15x0.06mm1.45至25.00。-16<=h<=16，-10<=k<=10-17<=1<=1716237/5966[R(int)=0.0430100.0%無卩2全矩陣最小二乘法5966/14/3791.038Rl-0.0691,wR2=0.1528Rl=0.1034，wR2=0.16950.11(14)0.342和-0.285e.A;3將實施例1-6的產(chǎn)物應(yīng)用HPLC方法分析純度，該方法描述如下將安裝有脫氣機(G1379A)、二元泵(G1312A)和柱溫箱(G1316A)以及自動進(jìn)樣器(G1313A)的Agilent1100系列LC系統(tǒng)(AgilentTechnologies)用于注射15pL等份的樣品，應(yīng)用AgilentEclipseXDB-C18、4.6x150mm、5柱，溫度保持在45。C。流動相是水和在水中的95%乙腈。將流動相以0.8mL/分鐘遞送，按照如下梯度0-4.0分鐘-100%水，4.0-10.0分鐘100-0%水，10-17分鐘0%水和17-18分鐘0-100%水。定量通過ELSD檢測獲得，應(yīng)用PL-ELS2100系統(tǒng)(PolymerLabs)。R和S二甲雙胍硫辛酸鹽的手性純度是應(yīng)用手性固定相柱(ChiralAGP，ChromtechLtd.)通過色譜法確定的。將硫辛酸鹽水解并且分析形成的硫辛酸的對映異構(gòu)過量。由該方法推算的二甲雙胍R-硫辛酸鹽的純度通常>98%。樣品制備將2mg的二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽溶于lmL水中，用于HPLC分析。色i普條件儀器AgilentHPLC,配有DAD檢測器、二元泵、自動進(jìn)樣器、柱恒溫箱和適合的數(shù)據(jù)處理器。分析方法檢測DAD;波長210,225柱手性AGP100x4.0mmx5pm。(ChromTechLtd)柱溫25°C流速0.9mL/分鐘進(jìn)樣體積20流動相0.01M含9。/。異丙醇的磷酸二氫鈉緩沖液(p1^5.0，用磷酸調(diào)節(jié))。硫辛酸樣品制備將1mg硫辛酸溶于1mL曱醇中并且用10mL流動相稀釋。IGMD009樣品制備將1mgIGMD009溶于1mL水中并且用10mL流動相稀釋。實施例8:確定二甲雙胍(R)-(+)硫辛酸鹽生物學(xué)作用的動物模型糖尿病大鼠模型該實施例描述了用于確定條件的糖尿病大鼠模型，該條件引導(dǎo)治療和預(yù)防心臟和心臟組織局部缺血后損傷的方法。在本研究中應(yīng)用來自UniversityofMassachusettsMedicalCenter,Worcester飼養(yǎng)的群體中的自然產(chǎn)生的糖尿病Bio-Bred(BB/W)大鼠。選擇BB/W大鼠用于目前的研究，因為BB/W大鼠被認(rèn)為是自身免疫的人胰島素依賴性糖尿病(IDDM)的有用模型。正如人IDDM，自然產(chǎn)生的糖尿病出現(xiàn)在青少年期，具有突發(fā)的臨床發(fā)作特征體重減輕、高血糖、血胰島素過少和酮尿。正如人糖尿病的情況，視網(wǎng)膜、心肌、肝、腎、骨代謝和外周神經(jīng)的病理變化在BB大鼠中得到4艮好的證實；這在Diab.Metab.Rev.,8:9(1992)中描述。BB/W大鼠是3-4月齡，體重在300-350g之間。BB/W大鼠每日接受胰島素，其在進(jìn)行離體心臟灌注研究前24小時停止給藥，導(dǎo)致血糖過多狀態(tài)。這些大鼠是急性糖尿病，每日接受2.02士0.04單位的胰島素，并且已經(jīng)是糖尿病至少12±3天。這些糖尿病大鼠的平均血糖水平為386±24mg/dL。年齡一致的非糖尿病對照的平均血糖水平為92±12mg/dL。離體灌注心臟模型該實施例描述了用于開發(fā)本發(fā)明的離體灌注大鼠心臟模型。研究應(yīng)用等體積離體大鼠心臟標(biāo)本進(jìn)行。將急性糖尿病雄性BB/W大鼠和非糖尿病年齡一致的(3-4個月齡)對照用肝素(1000u;IP)預(yù)處理，隨后用戊巴比妥鈉(65mg/kg;IP)處理。在獲得深M醉(通過足反射的喪失確定)后，將心臟快速切除并且置于冰冷的鹽水中。在切除后2分鐘內(nèi)將停止的心臟通過主動脈逆行灌注成非再循環(huán)模型。左心室形成壓(LVDP)應(yīng)用左心室內(nèi)的乳膠氣球確定，其通過高壓壓力管與壓力傳感器連接。灌注壓應(yīng)用關(guān)閉灌注流的高壓管監(jiān)控。血液動力學(xué)測定在4-通道Gould記錄儀上記錄。該系統(tǒng)具有兩個平行的灌注流，其配有分開的充氧器、泵和氣泡捕捉器，但是共有的溫度控制能快速改變灌注介質(zhì)。心臟應(yīng)用準(zhǔn)確的蠕動泵灌注。灌注液包含(mM/L):NaClU8、KC147、CaCl212、MgCl212、NaHC0325和底物11mM葡萄糖。灌注裝置密切地控制溫度，配有用于灌注液和19輸液管周圍水套的加熱浴以在所有條件下保持心臟溫度在37°C±0.5°C。將室溫容器中的氧合的灌注液通過由37'C、用95%氧氣飽和的蒸餾水包圍的25尺的薄壁硅橡膠管。然后將灌注液輸入水套(37。C)管，通過水套氣泡捕捉器通入心臟。該制備提供了很好的氧合作用，其通常穩(wěn)定3-4小時。零流量缺血模型將糖尿病對照(DC)、糖尿病處理(DZ)、正常對照(C)和正常處理(CZ)心臟進(jìn)行20分鐘的含氧量正常的灌注，隨后進(jìn)行20分鐘的零流量缺血，其中灌注液流動完全停止，隨后進(jìn)行60分鐘的再灌注。將心臟用l微摩爾二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽處理。在二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽處理的糖尿病組(DZ)中，將心臟用正常的Krebs-Hensddt緩沖液進(jìn)行10分鐘的含氧量正常的灌注并且用包含1微摩爾二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽的Krebs-Henseleit緩沖液進(jìn)行10分鐘的含氧量正常的灌注。然后將心臟進(jìn)行20分鐘的零流量缺血，隨后進(jìn)行60分鐘的再灌注。為了避免再灌注條件下的任何改變，將DC和DZ心臟都用正常的Krebs-Henseleit緩沖液再灌注。低流量缺血模型將糖尿病對照心臟(DC)以流速12.5mL/分鐘進(jìn)行20分鐘的含氧量正常的灌注，隨后進(jìn)行30分鐘的低流量缺血，其中灌注液流動緩慢降低至1.25mL/分鐘，即約10%的正常灌注，隨后以正常流速(12.5mL/分鐘)進(jìn)行30分鐘的再灌注。在二曱雙胍R-(+)-硫辛酸鹽處理的糖尿病或非糖尿病組(DZ或CZ)中，將心臟用正常的Krebs-Henseleit緩沖液進(jìn)行10分鐘的含氧量正常的灌注(流速12.5mL/分鐘)并且用包含1微摩爾二甲雙胍R-(+)-硫辛酸鹽的Krebs-Henseleit緩沖液進(jìn)行10分鐘的含氧量正常的灌注。將心臟進(jìn)行30分鐘的低流量缺血(流速1.25mL/分鐘)并且以正常流速(12.5mL/分鐘)進(jìn)行30分鐘的再灌注。物模型已經(jīng)由Tirabassi等人，/ZJ及/oww"/，2004，45，292-302綜述。式I化合物的抗糖尿病活性還可以根據(jù)以下專利中描述的方法來試驗美國專20利號4,340,605、4,342,771、4,367,234、4,617,312、4,687,777和4,703,052。糖尿病患者的紅細(xì)胞GSH水平可以根據(jù)Murakami等人，MCfl^/Zs附，1989，38，753-758中描述的測定。與本申請書相關(guān)的其它參考文獻(xiàn)包括以下法國專利2796551(2001年1月26日)和美國專利申請?zhí)?003-0220301(2003年11月27日)。應(yīng)當(dāng)理解的是本發(fā)明不局限在本文描述的特別的實施方案中，而是可以進(jìn)行多種變化和修改而不脫離以下權(quán)利要求中定義的本發(fā)明的精神和范圍。將以上引用的雜志文章、科學(xué)文獻(xiàn)和專利^^布的全部內(nèi)容并入本文作為參考。權(quán)利要求1.具有式I結(jié)構(gòu)的化合物，其是二甲雙胍R-(+)硫辛酸鹽，或其可藥用溶劑化物或水合物。2.權(quán)利要求1的化合物，其中所述的化合物是如通過單晶X-射線衍射確定并且在圖1中描述的結(jié)晶固體。3.權(quán)利要求1的化合物，其中所述的化合物顯示出如圖2描述的X-射線粉末衍射圖。4.包含二曱雙胍的可藥用鹽和R-(+)硫辛酸或其可藥用鹽的混合物。5.權(quán)利要求4的混合物，其中二曱雙胍的可藥用鹽是二甲雙胍鹽酸鹽。6.權(quán)利要求4的混合物，其包含R-(+)硫辛酸鈉。7.藥物組合物，該藥物組合物包含權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物和可藥用載體、介質(zhì)或稀釋劑。8.藥物組合物，該藥物組合物包含權(quán)利要求4的混合物和可藥用載體、介質(zhì)或稀釋劑。9.藥盒，該藥盒包含a)包含二甲雙胍(R)-(+)-硫辛酸鹽的單位劑型，或者包含二甲雙胍的可藥用鹽和(R)-(+)-硫辛酸或其可藥用鹽的組合的單位劑型；b)如何應(yīng)用藥盒的^兌明書；和c)至少一種用于容納單位劑型的容器。10.治療哺乳動物糖尿病的方法，該方法包括施用治療有效量的權(quán)利要求1或2的化合物。11.治療哺乳動物糖尿病的方法，該方法包括給所述的哺乳動物施用治療有效量的權(quán)利要求4的混合物。12.治療哺乳動物糖尿病并發(fā)癥的方法，該方法包括施用治療有效量的權(quán)利要求1或2的化合物。13.權(quán)利要求12的方法，其中所述的糖尿病并發(fā)癥選自腎病、神經(jīng)病、視網(wǎng)膜病變、白內(nèi)障、心肌病和心臟組織缺血。14.治療哺乳動物糖尿病并發(fā)癥的方法，該方法包括給所述的哺乳動物施用治療有效量的權(quán)利要求4的混合物。15.權(quán)利要求14的方法，其中所述的糖尿病并發(fā)癥選自腎病、神經(jīng)病、視網(wǎng)膜病變、白內(nèi)障、心肌病和心臟組織缺血。16.用于恢復(fù)糖尿病組織中谷胱甘肽水平的方法，該方法包括施用治療有效量的權(quán)利要求1或2的化合物。17.用于調(diào)節(jié)糖尿病組織中乳酸鹽和丙酮酸鹽水平的方法，該方法包括施用權(quán)利要求1或2的化合物。18.制備二曱雙胍R-(+)硫辛酸鹽的方法，該方法包括a)從適合的二甲雙胍鹽新鮮制備二甲雙胍游離堿；和b)將新鮮制備的二甲雙胍游離堿與R-(+)硫辛酸在溫度約rC和約40。C之間反應(yīng)。全文摘要本發(fā)明涉及式(I)化合物，其是天然存在的內(nèi)源性生物學(xué)化合物(R)-(+)-α硫辛酸的二甲雙胍鹽，本發(fā)明還涉及包含式(I)化合物的藥物組合物以及用式(I)化合物治療糖尿病或糖尿病并發(fā)癥的方法。文檔編號C07D339/04GK101522658SQ200780030276公開日2009年9月2日申請日期2007年6月14日優(yōu)先權(quán)日2006年6月16日發(fā)明者B·L·邁拉里,N·E·瓦曼勞申請人:因迪基恩藥物公司