專利名稱：有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑的制作方法
有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑發(fā)明背景本發(fā)明涉及氟化2-氨基曱基噻吩并嘧啶酮化合物，其是有絲分裂 驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑，特別是有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白KSP的抑制劑，可用于治 療細(xì)胞增殖疾病，例如癌、增生、再狹窄、心臟Ji巴大、免疫性病癥和 炎癥。用于治療癌癥的治療劑包括紫杉烷(taxane)和長春花生物堿。紫 杉烷與長春花生物堿作用于微管，所述微管存在于各種細(xì)胞結(jié)構(gòu)中。 微管是有絲分裂紡錘體的主要結(jié)構(gòu)元素。有絲分裂紡錘體負(fù)責(zé)將基因 組的復(fù)制模板分配到由細(xì)胞分裂產(chǎn)生的兩個(gè)子細(xì)胞的每一個(gè)中。據(jù)推 測，有絲分裂紡錘體被這些藥物破壞，從而抑制了癌細(xì)胞分裂并且誘 導(dǎo)癌細(xì)胞死亡。然而，微管形成其他類型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，包括神經(jīng)過程 中用于胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)的軌道(track)。因?yàn)檫@些藥物不能特異性地靶向于有 絲分裂紡錘體，因此它們具有限制其應(yīng)用性的副作用。改善癌癥治療用藥物的特異性具有重要意義，因?yàn)?，如果與這些 藥物給藥有關(guān)的副作用能被減少，則將實(shí)現(xiàn)其治療學(xué)益處。常規(guī)性地，癌癥治療中的突出改善與識別通過新機(jī)制起作用的治療劑有關(guān)。其例 子不僅包括紫杉烷，而且還包括拓樸異構(gòu)酶I抑制劑的喜樹堿類。從這 兩個(gè)角度考慮，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是新型抗癌劑的更具前景的目標(biāo)。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是有絲分裂紡錘體裝配和發(fā)揮作用中不可或缺 的酶，但是通常不是其它微管結(jié)構(gòu)的一部分，如在神經(jīng)過程中。有絲 分裂驅(qū)動(dòng)蛋白在有絲分裂所有階段過程中都扮演重要角色。這些酶是 "分子馬達(dá)"，它們將ATP水解釋放的能量轉(zhuǎn)變成機(jī)械力，其驅(qū)動(dòng)細(xì)胞 貨物(cellular cargoes)沿著微管進(jìn)行定向運(yùn)動(dòng)。完成這一任務(wù)足夠的催 化結(jié)構(gòu)域(catalyticdomain)是約340個(gè)氨基酸的致密結(jié)構(gòu)。在有絲分裂 期間，驅(qū)動(dòng)蛋白將微管組構(gòu)為作為有絲分裂紡錘體的雙極結(jié)構(gòu)。驅(qū)動(dòng) 蛋白介導(dǎo)染色體沿紡錘體微管的移動(dòng)，以及與有絲分裂的特定階段有 關(guān)的有絲分裂紡錘體中的結(jié)構(gòu)變化。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白功能的試驗(yàn)性 擾動(dòng)引起有絲分裂紡錘體的畸形或者機(jī)能障礙，通常導(dǎo)致細(xì)胞周期停 滯與細(xì)胞死亡。
在有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白中，已經(jīng)被識別的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白有KSP。 KSP屬于正端定向的微管馬達(dá)(plus end-directed microtubule motors)的進(jìn)化保存下來的驅(qū)動(dòng)蛋白亞家族，所述微管馬達(dá)裝配成由反向平行的同型二聚體構(gòu)成的雙極同型四聚體。在有絲分裂期間，KSP 與有絲分裂紡錘體的微管結(jié)合。將針對KSP的抗體顯微注射到人細(xì)胞 中，防止在前中期期間紡錘體極分離，生成單極紡錘體并引起有絲分 裂停滯和誘導(dǎo)細(xì)胞程序性死亡。KSP與在其他非人的有機(jī)體中的相關(guān) 驅(qū)動(dòng)蛋白，使反向平行微管集束，并使它們彼此相對滑行，因此驅(qū)動(dòng) 兩個(gè)紡錘體極分離。KSP也可在分裂后期介導(dǎo)B紡錘體伸長和微管在 紡錘體極處的聚集。已經(jīng)描述了人KSP(也稱為HsEg5)[Blangy等人，Cell, 83 : 1159-69(1995); Whitehead等人，Arthritis Rheum.， 39: 1635-42(1996); Galgio 等人,J. Cell Biol" 135: 339-414(1996); Blangy等人，J Biol. Chem.， 272 : 19418-24(1997); Blangy等人，Cell Motil Cytoskeleton， 40 : 174-82(1998); Whitehead和Rattner， J. Cell Sci. ，111: 2551-61(1998); Kaiser等人， JBC 274: 18925-31(1999); GenBank登記號X85137, NM004523和 U37426，并且已經(jīng)描述了 KSP基因片段(TRIP5)[Lee等人，Mol Endocrinol" 9 : 243-54(1995); GenBank登記號L40372。已經(jīng)報(bào)導(dǎo)了非 洲爪蟾屬KSP同系物(Eg5)，以及果蠅K-LP61 F/KRP 130。已經(jīng)描述了某些全唑啉酮作為KSP抑制劑(PCT公開WO 01/30768 和WO 03/039460)。最近還已經(jīng)公開了某些漆吩并嘧啶酮化合物作為 KSP抑制劑(PCT公開WO 03/050064)。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白對于發(fā)現(xiàn)和開發(fā)新型有絲分裂化學(xué)治療藥物是 具吸引力的靶標(biāo)。因此，本發(fā)明的目的是提供可用于抑制有絲分裂驅(qū) 動(dòng)蛋白KSP的化合物、方法與組合物。發(fā)明概述本發(fā)明涉及氟化2-氨基甲基塞吩并嘧啶酮化合物，以及它們的衍 生物，其可用于治療細(xì)胞增殖疾病，用于治療與KSP驅(qū)動(dòng)蛋白活性有 關(guān)的病癥，并用于抑制KSP驅(qū)動(dòng)蛋白。已經(jīng)意外地發(fā)現(xiàn)，當(dāng)與先前公 開的2-氨基曱基噻吩并嘧啶酮KSP抑制劑化合物相比時(shí)，本發(fā)明的化 合物對于PGP(p-糖蛋白)介導(dǎo)的流出物顯示減少的敏感性。本發(fā)明的化
合物可由式I舉例i兌明或?yàn)槠渌帉W(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體，其中a為0或1; b為0或1; n為0到2; p為0到2; r為0或1; s為0或1; X和Y中的一個(gè)是S以及X和Y中的另 一個(gè)是CH;W選自氫和氟；R2選自1) H，2) d-Cm烷基，3) 芳基，4) C2-da烯基，5) C3-Cs環(huán)烷基，6) C2-do炔基，和7) 雜環(huán)基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、環(huán)烷基和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多 個(gè)選自W的取代基取代； R3獨(dú)立地選自1) (C-0)aObC廣d。烷基，2) (C=0)aOb芳基，4) (C=0)aObC2-C1()炔基，5) C02H,6) 鹵素，7) OH，8) ObCVC6全氟烷基，9) (C=0)aNR6R7，10) CN，11) (c=o)aobc3-c8環(huán)烷基，12) (C-0)aOb雜環(huán)基，13) S02NR6R7，和14) S02d-do烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、環(huán)烷基和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多 個(gè)選自W的取代基取代； 114獨(dú)立地選自1) H 3) (C=0)aOb芳基，4) C2-Cm烯基，5) C2-C1G炔基，6) (C-0)aOb雜環(huán)基，7) C02H，8) 鹵素，9) CN，10) OH，11) Obd-C6全氟烷基，12) Oa(C=0)bNR6R7，13) 氧代，14) CHO，15) (N=0)R6R7，16) (C=0)aObC3-C8環(huán)烷基，17) S02CirdQ烷基，和18) S02NR6R7，所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選被一個(gè)或多 個(gè)選自W的取代基取代； R5選自1) (C二O)rOs(C廣Cm)烷基，2) Or(d-C3)全氟烷基，3) (Co-C6)亞烷基-S(0)mRa，4) 氧代，5) OH，6) 鹵素，7) CN，8) (C:0)rOs(C2-d。)烯基，9) (C:0)rOs(C2-do)炔基，10) (00)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，11) (00)rOs(OC6)亞烷基-芳基，12) (00)rOs(CVC6)亞烷基-雜環(huán)基，13) (C-0)rOs(C。國C6)亞烷基-N(Rb)2，14) C(0)Ra，15) (CVC6)亞烷基-C02Ra，16) C(0)H，17) (C(rC6)亞烷基-C02H,和18) C(0)N(Rb)2，所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基任選被最多三個(gè) 取代基取代，所述取代基選自Rb、 OH、 (d-C6)烷氧基、鹵素、C02H、 CN、 0(C:0)d-C6烷基、氧代和N(Rb)2;116和117獨(dú)立地選自1) H，2) (C:0)ObC廣do烷基，3) (C:0)ObC3-Cs環(huán)烷基，4) (C=0)Ob芳基，5) (C二0)Ob雜環(huán)基，6) C廣d。烷基，7) 芳基，8) C2誦Cm烯基，9) C2-C1()炔基，10) 雜環(huán)基，11) C3-Cs環(huán)烷基，12) S02Ra，和13) (C=0)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基和炔基任選被一個(gè)或多 個(gè)選自RS的取代基取代，或R6和R7可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為4-7元環(huán)并且除了 所述氮之外還任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、 O和S的雜原子的 單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)選自W的取 代基取代；Ra為(d-C6)烷基、(QrC6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基；和Rb為H、 (C廣C6)烷基、(d-C6)烷基-NR 、(C廣C6)烷基-NH2、 (d-C6)烷基-NHRa、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C=0)Od-C6烷基、(C^O)d-C6烷基或S(0)2Ra。
本發(fā)明的第二實(shí)施方案為式II的化合物，<formula>formula see original document page 20</formula>或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體，其中a為O或1; b為0或1; p為O到2; r為0或1; s為0或1;X和Y中的一個(gè)是S以及X和Y中的另 一個(gè)是CH;R2選自1) H，2) d-Cm烷基，所述烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自Rs的取代基取代； R3獨(dú)立地選自1) (C-O)aObd國do烷基，2) (00)aOb芳基，3) 鹵素，4) OH，5) ObC廣C6全氟烷基，6) (00)aNR6R7，7) CN，8) (C=0)aObC3-C8環(huán)烷基，9) (C-0)aOb雜環(huán)基，10) SO2NR6R7，和11) S02d-d。烷基，所述烷基、芳基、環(huán)烷基和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)選自RS的取 代基取代； R4選自1) (OO)aObd-do烷基，2) (C=0)aOb芳基，3) 鹵素，4) OH，5) Obd-C6全氟烷基，6) Oa(C=0)bNR6R7，7) (C=0)aObC3-C8環(huán)烷基，8) S02d-dn烷基，和9) S02NR6R7，所述烷基、芳基和環(huán)烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R5的取代基取代；R5選自1) (C-O)rOs(d-do)烷基，2) Or(C廣C3)全氟烷基，3) (C。-C6)亞烷基國S(0)mRa，4) 氧代，5) OH，6) 鹵素，7) CN，8) (C-0)rOs(C2-do)烯基，9) (00)rOs(C2-do)炔基，10) (00)rOs(CVC6)環(huán)烷基，11) (C-0)rOs(CVC6)亞烷基-芳基，12) (C-0)rOs(Co-C6)亞烷基-雜環(huán)基，13) (C-0)rOs(C。誦C6)亞烷基-N(Rb)2，14) C(0)Ra，15) (Cfl-Cfi)亞烷基-C02Ra ，16) C(0)H，17) (CVC6)亞烷基-C02H，和18) C(0)N(Rb)2，所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基任選被最多三個(gè) 取代基取代，所述取代基選自Rb、 OH、 (d-C6)烷氧基、卣素、C02H、 CN、 0(C:0)d-C6烷基、氧代和N(Rb)2;116和117獨(dú)立地選自1) H，2) (C-O)0bd陽do烷基，3) (C二0)ObC3-Cs環(huán)烷基，4) (C=0)Ob芳基，5) (C二0)Ob雜環(huán)基，6) d-Cm烷基，7) 芳基，8) C2-Cm烯基，9) C2-C1G炔基，10) 雜環(huán)基，11) C3-Cs環(huán)烷基，12) S02Ra，和13) (00)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基和炔基任選被一個(gè)或多 個(gè)選自RS的取代基取代，或R6和R7可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為4-7元環(huán)并且除了 所述氮之外還任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、 O和S的雜原子的 單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)選自W的取 代基取代；Ra為(d-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基；和Rb為H、 (C廣C6)烷基、(C廣C6)烷基-NRa2、 (d-C6)烷基-NH2、 (d-C6)烷基-NHRa、芳基、雜環(huán)基、(CVC6)環(huán)烷基、(C-0)Od-C6烷基、 (C二0)C廣C6烷基或S(0)2Ra。本發(fā)明的第三實(shí)施方案為式III的化合物，
或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體，其中a為0或1; b為0或1; P為0到2; r為0或1; s為0或1;X和Y中的一個(gè)是S以及X和Y中的另一個(gè)是CH;R2選自1) H，2) d-dt)烷基，所述烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自Rs的取代基取代； 113獨(dú)立地選自1) (C二O)aObd-do烷基，2) (C=0)aOb芳基，3) 鹵素，4) OH，5) Obd-C6全氟烷基，6) (C=0)aNR6R7，7) CN，8) (C-0)aObC3-Cs環(huán)烷基，9) (C二0)aOb雜環(huán)基，10) SO2NRbR ，和11) S02d-do烷基，所述烷基、芳基、環(huán)烷基和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)選自115的取代基取代；114獨(dú)立地選自 "H;2) (C-0)aObd國d。烷基，3) (C=0)aOb芳基，4) 鹵素，5) OH，6) ObC廣C6全氟烷基，7) Oa(C=0)bNR6R7，8) (C=0)aObC3-C8環(huán)烷基，9) S02d-d。烷基，和10) SO2NR6R7,所述烷基、芳基和環(huán)烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R5的取代基取代；R5選自1) (OO)rOs(C廣C一烷基，2) Or(d-C3)全氟烷基，3) (Co-C6)亞烷基-S(0)加Ra，4) 氧代，5) OH，6) 鹵素，7) CN，8) (00)rOs(CVd。)烯基，9) (00)rOs(C2腸C一炔基，10) (C-0)rOs(C3-C6)環(huán)坑基，11) (C二0)rOs(CVC6)亞烷基-芳基，12) (C二0)rOs(Co-C6)亞烷基-雜環(huán)基，13) (00)rOs(CVC6)亞烷基-N(Rb)2，14) C(0)Ra，15) (C。-C6)亞烷基-C02Ra，16) C(0)H，17) (QrC6)亞烷基-C02H，和18) C(0)乖b)2，所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基任選被最多三個(gè)取代基取代，所述取代基選自Rb、 OH、 (CVC6)烷氧基、鹵素、C02H、 CN、 0(C-0)d-C6烷基、氧代和N(Rb)2; R6和iT獨(dú)立地選自1) H，2) (C-0)ObCrdo烷基，3) (00)ObC3-Cs環(huán)烷基，4) (C=0)Ob芳基，5) (00)Ob雜環(huán)基，6) d-Cm烷基，7) 芳基，8) C2-do烯基，9) C2-C1()炔基，10) 雜環(huán)基，11) C3-Q環(huán)烷基，12) S02Ra，和13) (00)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基和炔基任選被一個(gè)或多 個(gè)選自RS的取代基取代，或R6和R7可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為4-7元環(huán)并且除了 所述氮之外還任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、 O和S的雜原子的 單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)選自RS的取代基取代；Ra為(d-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基；和Rb為H、 (d畫C6)烷基、(C廣C6)烷基-NRa2、 (d畫C6)烷基-NH2、 (d-C6)烷基-NHRa、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C=0)Od-C6烷基、 (C-0)C廣C6烷基或S(0)2Ra。本發(fā)明化合物的具體例子包括N-(3-氨基-2-(R，S》氟代丙基)-N-[l-(3-芐基-4-氧代-3,4-二氫噻吩并 [2，3-(1]嘧啶-2-基)-2-(11，8)-甲基丙基]-4-曱基苯甲酰胺；N-(3-氨基-2-(R)-氟代丙基)-N- [1 -(3-芐基-4-氧代-3，4- 二氫噻吩并 [2，3-d]嘧啶-2-基)-2-(R卜曱基丙基-4-曱基苯甲酰胺；N-(3-氨基-2-(R)-氟代丙基)-N-[l-(3-千基-4-氧代-3，4-二氫噻吩并 [2，3-d]嘧啶-2-基)-2-(8)-曱基丙基-4-曱基苯曱酰胺；N-(3-氨基-2-(S)-氟代丙基)-N-[l-(3-芐基-4-氧代-3，4-二氫噻吩并2，3-d嘧啶-2-基)-2-(R卜曱基丙基-4-曱基苯曱酰胺；以及N-(3-氨基-2-(S)-氟代丙基)-N-[l-(3-節(jié)基-4-氧代-3，4-二氫噻吩并 [2，3-d]嘧啶-2-基)-2-(S)-曱基丙基]-4-甲基苯曱酰胺； 或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明的化合物可具有不對稱中心、手性軸以及手性平面(如在E. L. Eliel和S. H. Wilen， 5^m c^附/欲j; Co附/70MwA， JohnWiley & Sons, New York, 1994， 1119-1190頁中所述)并作為外消旋物、 外消旋混合物、以及作為單個(gè)的非對映體存在，其所有可能的異構(gòu)體 及其混合物，包括光學(xué)異構(gòu)體，都被歸入本發(fā)明。另外，本文所公開 的化合物可作為互變異構(gòu)體存在，兩種互變異構(gòu)形式都包括在本發(fā)明 的范圍內(nèi)，即使只描述了一種互變結(jié)構(gòu)。例如，可以理解，對于以下 化合物A的任何權(quán)利要求包括互變結(jié)構(gòu)B，或者反之亦然，以及它們 的混合物。當(dāng)任一變量(如R3、 R4、 Rs等)在任何結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)超過一次時(shí)，在 每種情況中的定義與其它每種情況中的定義相獨(dú)立。另外，只有當(dāng)取 代基與變量的組合產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物時(shí)才允許進(jìn)行取代基與變量的這 種組合。從取代基到環(huán)系統(tǒng)中的線條表示所示鍵可與任一個(gè)可取代的 環(huán)原子連接。如果環(huán)體系是多環(huán)的，則表示鍵與僅在最接近的環(huán)上的
適當(dāng)?shù)奶荚拥娜我粋€(gè)連接。很清楚，本發(fā)明化合物上的取代基與取 代形式可由本領(lǐng)域技術(shù)人員進(jìn)行選擇，以得到化學(xué)上穩(wěn)定的化合物， 并且其可通過本領(lǐng)域已知的技術(shù)及下述方法容易地從易獲得的起始原 料合成。如果取代基自身被多于一個(gè)基團(tuán)取代，可以理解，這些多個(gè) 基團(tuán)可在相同的碳或者不同的碳上，只要得到穩(wěn)定結(jié)構(gòu)即可。術(shù)語"任 選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代"應(yīng)該等價(jià)于術(shù)語"任選被至少一個(gè)取代基取代"，并且在此情況下優(yōu)選實(shí)施方案具有0-3個(gè)取代基。如同本文使用的，術(shù)語"烷基，，及"亞烷基"是指包括具有指定 碳原子數(shù)的支鏈及直鏈的飽和脂族烴基。例如，"CVC^烷基"中的 CVd。定義為包括具有1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9或10個(gè)碳的直鏈 或者支鏈排列的基團(tuán)。例如，"CVdo烷基"具體包括甲基、乙基、 正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、戊基、己基、庚基、辛 基、壬基、癸基等等。術(shù)語"環(huán)烷基"是指具有指定碳原子數(shù)的單環(huán) 飽和脂族烴基。例如，"環(huán)烷基"包括環(huán)丙基、甲基-環(huán)丙基、2，2-二 曱基-環(huán)丁基、2-乙基-環(huán)戊基、環(huán)己基等等。"烷氧基"表示通過氧橋連接的具有指示數(shù)目的碳原子的環(huán)狀或 者非環(huán)狀烷基。因此，"烷氧基"包括上述烷基和環(huán)烷基的定義。如果未指定碳原子數(shù)，則術(shù)語"烯基"是指直鏈、支鏈或環(huán)狀的 包含2-10個(gè)碳原子和至少一個(gè)碳-碳雙鍵的非芳香烴基。優(yōu)選存在一個(gè) 碳-碳雙鍵，并且可存在最多四個(gè)非芳香碳-碳雙鍵。因此，"CVC6烯 基"是指具有2-6個(gè)碳原子的烯基。烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、2- 曱基丁烯基和環(huán)己烯基。烯基的直鏈、支鏈或者環(huán)狀部分可含有雙鍵 并且如果指明是取代烯基，則其可被取代。術(shù)語"炔基"是指直鏈、支鏈或環(huán)狀的包含2-10個(gè)碳原子和至少 一個(gè)碳-碳三鍵的烴基?？纱嬖谧疃嗳齻€(gè)碳-碳三鍵。因此，"C2-C6炔 基"是指具有2-6個(gè)碳原子的炔基。炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、3- 曱基丁炔基等。炔基的直鏈、支鏈或者環(huán)狀部分可含有三鍵并且如果 指明是取代炔基，則其可被取代。在某些情況下，取代基可用包括0的碳原子范圍定義，如(CcrC6) 亞烷基-芳基。如果芳基為苯基，則該定義包括苯基自身，以及-CH2Ph、 -CH2CH2Ph、 CH(CH3)CH2CH(CH3)Ph，等等。如本文使用的，"芳基"是指任何在各環(huán)中具有最多7個(gè)原子的
穩(wěn)定的單環(huán)或者雙環(huán)碳環(huán)，其中至少一個(gè)環(huán)是芳香性的。這些芳基單元的例子包括苯基、萘基、四氫萘基、2，3-二氫化茚基以及聯(lián)苯基。在 其中芳基取代基是雙環(huán)的并且一個(gè)環(huán)是非芳香的情況中，很清楚，通 過芳環(huán)進(jìn)行連接。本文使用的術(shù)語雜芳基表示在每個(gè)環(huán)中具有最多7個(gè)原子的穩(wěn)定 的單環(huán)或者雙環(huán)，其中至少一個(gè)環(huán)是芳香的并含有1-4個(gè)選自O(shè)、 N及 S的雜原子。在該定義范圍內(nèi)的雜芳基包括但不限于吖啶基、唑基、 噌啉基、喹喔啉基、吡唑基、吲哚基、苯并三唑基、呋喃基、噻吩基、 苯并噻吩基、苯并呋喃基、喹啉基、異喹啉基、^惡唑基、異喵唑基、吲 咮基、吡噢基、歧秦基、吡咬基、嘧咬基、吡略基、四氫會(huì)啉。正如 以下雜環(huán)定義一樣，"雜芳基，，也可以理解為包括任何含氮雜芳基的 N-氧化物衍生物。如果雜芳基取代基是雙環(huán)的并且一個(gè)環(huán)是非芳香的 或者不包含雜原子，可以理解，分別通過芳環(huán)或者含雜原子的環(huán)進(jìn)行 連接。如本文使用的，術(shù)語"雜環(huán)"或者"雜環(huán)基"是指含l-4個(gè)選自O(shè)、 N及S的雜原子的5-10元芳香或者非芳香雜環(huán)，并且包括雙環(huán)基團(tuán)。 因此，"雜環(huán)基，，包括上述的雜芳基，及其二氬和四氫類似物。另外 的"雜環(huán)基，，例子包括但不限于以下苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯 并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并嚅唑基、唑 基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氫吲哚基、吲哚基、吲"秦 基(indolazinyl)、吲唑基、異苯并呋喃基、異吲哚基、異喹啉基、異 噻唑基、異"惡唑基、萘并吡啶基、嚅二唑基、嚅唑基、喁唑啉、異嚅唑 啉、氧雜環(huán)丁基、吡喃基、吡秦基、吡唑基、噠秦基、吡咬并吡咬基、 噠溱基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、 四氫他喃基、四哇基、四哇并吡咬基、塞二唑基、塞哇基、塞喻基、 三唑基、氮雜環(huán)丁基、1，4-二氧雜環(huán)己基、六氫氮雜萆基、哌嗪基、哌 啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、二氫苯并咪唑 基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并"惡唑基、二氫呋喃基、 二氫咪唑基、二氫吲哚基、二氫異唑基、二氫異噻唑基、二氫喁二唑 基、二氫-惡唑基、二氫吡嗪基、二氫吡唑基、二氫吡啶基、二氫嘧啶基、 二氫吡咯基、二氫喹啉基、二氫四唑基、二氫噻二唑基、二氫噻唑基、 二氫噻吩基、二氫三唑基、二氫氮雜環(huán)丁基、亞甲二氧基苯甲?；?br> 四氫呋喃基、及四氫噻吩基、及其N-氧化物?？赏ㄟ^碳原子或者通過 雜原子連接雜環(huán)基取代基。在一實(shí)施方案中，雜環(huán)選自2-氮雜萆酮、苯并咪唑基、2-二氮雜罩 酮、咪唑基、2-咪唑烷酮、吲哚基、異喹啉基、嗎啉基、哌啶基、哌溱 基、吡啶基、吡咯烷基、2-p底啶酮、2-嘧咬酮、2-吡咯烷酮、全啉基、 四氬吹喃基、四氫異喹啉基、和逸汾基。本領(lǐng)域技術(shù)人員可理解，本文使用的"卣代"或"囟素"包括氯 代、氟代、溴代和碘代。除非另外明確說明，烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基 和雜環(huán)基取代基可為取代的或未取代的。例如，(CVC6)烷基可被一個(gè)、 兩個(gè)或三個(gè)選自以下的取代基取代OH、氧代、卣素、烷氧基、二烷 基氨基、或雜環(huán)基如嗎啉基、哌啶基等。在這種情況下，如果一個(gè)取 代基是氧代并且另一個(gè)取代基是OH，則定義包括以下-C=0)CH2CH(OH)CH3、 -(CO)OH、 CH2(OH)CH2CH(0)等等。在某些情況下，116和117的定義為使得它們可與它們所連接的氮一 起形成每個(gè)環(huán)為5-7元環(huán)并且除了所述氮之外還任選含有一個(gè)或兩個(gè) 選自N、 O和S的另外的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)任選被 一個(gè)或多個(gè)選自RS的取代基取代。可如此形成的雜環(huán)的例子包括但不 限于以下，切記雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)(并且優(yōu)選被1、 2或3個(gè))選自 RS的取代基取代
<formula>formula see original document page 30</formula>在一實(shí)施方案中，R1是氫。 在一實(shí)施方案中，r2選自(Q-c6)烷基。在一實(shí)施方案中，R3選自卣素、(C廣C6)烷基和(C-0)0(d-C6) 烷基，其中所述烷基任選被l-3個(gè)RS取代且p是l。在另一實(shí)施方案中，RS選自溴代、氟代和氯代，且p是l。在 另一實(shí)施方案中，rs是氣代，且p是l。在一實(shí)施方案中，n是0或1。在另一實(shí)施方案中，n是l。在一實(shí)施方案中，p是0或l。在另一實(shí)施方案中，p是0。在一實(shí)施方案中，R"的定義為氫、卣代、三氟曱基及CVC6烷基， 任選被l-3個(gè)選自RS的取代基取代。在另一實(shí)施方案中，R"是卣素或 Q-C6烷基，且相對于OO是對位。在式II化合物的一個(gè)實(shí)施方案中，RZ是(C廣C6)烷基，p是0以及 R"是囟素或CVC6烷基。本發(fā)明包括式I化合物的游離形式、及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體 異構(gòu)體。本文中示例性的某些具體化合物是胺化合物的質(zhì)子化鹽。術(shù) 語"游離形式"是指非鹽形式的胺化合物。包括在本文范圍內(nèi)的藥學(xué)
上可接受的鹽不僅包括本文所述具體化合物的示例性的鹽，而且包括 式I化合物游離形式的所有典型的藥學(xué)上可接受的鹽。所述具體鹽化合 物的游離形式可使用本領(lǐng)域已知的技術(shù)進(jìn)行分離。例如，可通過用適當(dāng)?shù)南A水溶液，例如稀NaOH、碳酸鉀、氨和碳酸氫鈉的水溶液處 理鹽，而再生游離形式。游離形式在某些物理性能，例如在極性溶劑 中的溶解度方面，可多少不同于其各自鹽的形式，但是對本發(fā)明來說， 酸鹽和堿鹽在其它方面是在藥學(xué)意義上等價(jià)于它們各自的游離形式 的。方法合成得到本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。通常，通過離子交 換色譜法或者使游離堿與化學(xué)計(jì)量的或過量的形成鹽所需的無機(jī)酸或 有機(jī)酸在適當(dāng)?shù)娜軇┲谢蛟诟鞣N溶劑組合中反應(yīng)，而制備堿性化合物 的鹽。同樣地，通過與適當(dāng)?shù)臒o機(jī)堿或有機(jī)堿反應(yīng)，而制備酸性化合 物的鹽。因此，本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括通過使堿性的本發(fā)鹽。例如，常規(guī)的無毒鹽包括那些得自無機(jī)酸如鹽酸、氬溴酸、硫酸、 氨基磺酸、鱗酸、硝酸等的鹽，以及從有機(jī)酸如乙酸、丙酸、琥珀酸、 乙醇酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、雙羥 萘酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯基乙酸、谷氨酸、苯曱酸、水楊酸、 對氨基苯磺酸、2-乙酰氧基-苯甲酸、反丁烯二酸、曱苯磺酸、曱磺酸、 乙二磺酸、草酸、羥乙基磺酸、三氟乙酸等制備的鹽。當(dāng)本發(fā)明的化合物是酸性時(shí)，適當(dāng)?shù)?藥學(xué)上可接受的鹽"是指 從藥學(xué)上可接受的無毒堿包括無機(jī)堿和有機(jī)堿制備的鹽。得自無機(jī)堿 的鹽包括鋁、銨、鈣、銅、三價(jià)鐵、二價(jià)鐵、鋰、鎂、三價(jià)錳、二價(jià) 錳、鉀、鈉、鋅等的鹽。特別優(yōu)選銨、鈣、鎂、鉀和鈉的鹽。得自藥 學(xué)上可接受的有機(jī)無毒堿的鹽包括伯胺、仲胺和叔胺，包括天然存在 的取代胺的取代胺，環(huán)胺及堿性離子交換樹脂，例如精氨酸、甜菜堿 咖啡因、膽堿、N，NL二苯曱基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二曱基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎啉、N-乙基哌啶、葡糖 胺、氨基葡糖、組氨酸、哈胺、異丙胺、賴氨酸、甲基葡糖胺、嗎啉、 哌"秦、哌啶、聚胺樹脂、普魯卡因、嘌呤類、可可堿、三乙胺、三甲
胺三丙胺、氨基丁三醇等的鹽。Berg等人的"Pharmaceutical Salts" ， / P/m/TM. 1977: 66: 1陽19 更全面地描述了上述藥學(xué)上可接受的鹽和其它典型的藥學(xué)上可接受的 鹽的制備。還應(yīng)注意本發(fā)明的化合物是潛在的內(nèi)鹽或兩性離子，因?yàn)樵谏?條件下，化合物中的脫質(zhì)子化酸性結(jié)構(gòu)部分，例如羧基，可為陰離子 性的，然后該電荷對抗質(zhì)子化或烷基化的堿性結(jié)構(gòu)部分的陽離子電 荷，例如四價(jià)氮原子，可被內(nèi)部平衡掉。在以下實(shí)施例以及化學(xué)過程的說明中所使用的縮寫是Boc叔丁氧基羰基；DCE二氯乙烷DMF二甲基甲酰胺；EDCl-(3-二曱基氨基丙基)-3-乙基-碳二亞胺-鹽酸鹽;Et3N三乙胺；EtOAc乙酸乙酯；HOAT1-羥基偶氮苯并三唑HPLC高效液相色i普；KOH氫氧化鉀PyBop苯并三唑-l-基-氧基-三(吡咯烷-l-基)；TEA三乙胺TFA三氟乙酸；THF四氫吹喃。除了文獻(xiàn)中已知的或在實(shí)驗(yàn)過程中示例的其它標(biāo)準(zhǔn)操作之外，本 發(fā)明的化合物可以通過使用以下流程圖中所示反應(yīng)來制備。因此，以 下說明性的流程圖不限于所列化合物，或不限于任何用于說明性目的 所用的特定取代基。在流程圖中示出的取代基標(biāo)號不一定與權(quán)利要求中 所用的標(biāo)號相互關(guān)聯(lián)，并且，為了清楚起見，表示為單個(gè)取代基與化合 物連接，在化合物中，允許在上文式I定義條件下存在多個(gè)取代基。流程圖如流程圖A所示，中間體化合物A-7可以從2-氨基噻吩-3-曱酸酯 開始合成。Pan溴化，接著形成疊氮化物以及將所述環(huán)溴還原裂解并還 原所述疊氮化物得到A-7。然后可將中間體A-7用氟化醛A-10還原烷
基化從而得到仲胺A-ll。隨后酰化，接著將經(jīng)保護(hù)的羥基轉(zhuǎn)化為本化 合物伯胺A-16。如流程圖B所示，可使用適當(dāng)取代的2-塞吩基胺來制備環(huán)取代的 中間體B-3，其對應(yīng)于中間體A-3。如流程圖C所示，在噻吩并環(huán)上無取代基的中間體C-l的直接溴 化得到多溴化的中間體C-2及C-3。 6-溴代中間體可如上所述進(jìn)行反應(yīng) 而引入胺結(jié)構(gòu)部分，然后通過氫化除去溴從而得到本化合物，如流程 圖A所示?？蛇x地，如流程圖D所示，中間體D-1可與合適的硼酸進(jìn) 行偶聯(lián)反應(yīng)從而得到113取代的本化合物D-3。流程圖E圖解從D-1中間體合成酯及酰胺。流程圖F圖解制備塞吩并[2，3-d]嘧啶中間體F-2的可選合成路線。 流程圖G圖解制備相應(yīng)區(qū)域異構(gòu)的(regioisomeric)噻吩并[2，3-d]嘧啶中間體G-4及G-6的合成路線，其可通過如上所述的步驟轉(zhuǎn)化為區(qū)域異構(gòu)的本化合物G-7。流程圖A<formula>formula see original document page 33</formula>
流程圖A(續(xù))TBDPS-CI^pss Martin 向 碘烷TBDPSOA-10Na(OAc)3BH DCM, AcOHA-11iPr2NEt， DCM OTBDPSO PhOTBDPS1. TBAF2. MsCI3. 麵34. Ph3Pr4 A-12A-13 (R-OH) A-14 (R = OMs) A-15 (R = N3) A-16 (R=NH2)流程圖BSY,oc麵 sv斷 - 《R4BnNHc。2 、C02HB-ls NHBoc 1.HCI NHBn2. qCI'-R2,吡咬
流程圖c
<formula>formula see original document page 35</formula><formula>formula see original document page 36</formula>
流程圖GQ o實(shí)用性本發(fā)明的化合物可用于多種應(yīng)用。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所預(yù)料的， 有絲分裂可以多種方式被改變；也就是說，人們可通過增加或減少有 絲分裂路徑中組分的活性來影響有絲分裂。換句話說，有絲分裂可通 過干擾平衡，通過抑制或者激活某些組分，而受到影響(例如，破壞)。 類似方法可用來改變減數(shù)分裂。在一實(shí)施方案中，使用本發(fā)明的化合物調(diào)節(jié)有絲分裂紡錘體形 成，因此，引起有絲分裂中細(xì)胞周期停滯的延長。本文使用的"調(diào)節(jié)" 是指改變有絲分裂紡錘體形成，包括增加和減少紡錘體形成。本文使 用的"有絲分裂紡錘體形成"是指通過有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白將微管組構(gòu) 成為雙極結(jié)構(gòu)。本文中的"有絲分裂紡錘體機(jī)能障礙，，是指有絲分裂 停滯和單極紡錘體形成。本發(fā)明的化合物可用于與有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合和/或調(diào)節(jié)有絲分 裂驅(qū)動(dòng)蛋白的活性。在一實(shí)施方案中，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的bimC亞族成員(如美國專利No. 6，284，480第5欄中所述)。 在另外的實(shí)施方案中，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是人KSP，不過得自其他有 機(jī)體的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的活性也可通過本發(fā)明的化合物進(jìn)行調(diào)節(jié)。 關(guān)于這一點(diǎn)，調(diào)節(jié)是指增加或者減少紡錘體極的分離，引起有絲分裂 紡錘體極的畸形，即，張開，或引起有絲分裂紡錘體的形態(tài)學(xué)擾動(dòng)。 對此而言，在KSP定義中還包括KSP的變體和/或片段。另外，其他 有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白可被本發(fā)明化合物的抑制。本發(fā)明的化合物可用于治療細(xì)胞增殖疾病?？赏ㄟ^本文提供的方 法和組合物治療的疾病狀態(tài)包括但不限于癌癥(在下文中進(jìn)一步討 論)、自身免疫病、關(guān)節(jié)炎、移植排斥反應(yīng)、炎癥性腸病、醫(yī)療過程(包 括但不限于手術(shù)、血管成形術(shù)等)后引發(fā)的增殖。可以預(yù)料，有時(shí)候細(xì) 胞不處在過度增殖或不足增殖狀態(tài)(異常狀態(tài))下并且仍然需要治療。例 如，在傷口愈合期間，細(xì)胞可"正常地，，增殖，但是可需要增強(qiáng)增殖。 同樣地，正如以上討論的，在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域中，細(xì)胞可處在"正常的，，狀 態(tài)下，但是可需要調(diào)節(jié)增殖以通過直接強(qiáng)化作物生長、或通過抑制對 作物有不利影響的植物或有機(jī)體的生長而強(qiáng)化作物。因此，在一個(gè)實(shí) 施方案中，本發(fā)明包括對經(jīng)受或即將經(jīng)受這些病癥或狀態(tài)中任一種折 磨的細(xì)胞或個(gè)體進(jìn)4亍施用。本文提供的化合物、組合物和方法特別認(rèn)為可用于治療癌癥，所 述癌癥包括實(shí)體瘤，例如皮膚、乳房、腦、宮頸癌、睪丸癌等等。更 特別地，可通過本發(fā)明的化合物、組合物和方法治療的癌癥包括但不 限于心臟:肉瘤(血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肪肉瘤)，粘 液瘤，橫紋肌瘤，纖維瘤，脂肪瘤和畸胎瘤；絕支氣管癌(鱗狀上皮 細(xì)胞癌、未分化小細(xì)胞癌、未分化大細(xì)胞癌、腺癌)，肺泡(細(xì)支氣管) 癌，支氣管腺瘤，肉瘤，淋巴瘤，軟骨錯(cuò)構(gòu)瘤，間皮瘤；胃腸:食管(鱗 狀細(xì)胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)，胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)， 胰腺(導(dǎo)管腺癌、胰島素瘤、胰升糖素瘤、胃泌素瘤、類癌瘤、血管活 性腸多肽瘤)，小腸(腺癌、淋巴瘤、類癌瘤、卡波西氏肉瘤、平滑肌瘤、
血管瘤、脂肪瘤、神經(jīng)纖維瘤、纖維瘤)，大腸(腺癌、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、錯(cuò)構(gòu)瘤、平滑肌瘤)；泌尿生殖道:腎(腺癌、維爾姆斯瘤[腎 胚胎瘤l、淋巴瘤、白血病)，膀胱和尿道(鱗狀細(xì)胞癌、移行細(xì)胞癌、 腺癌)，前列腺(腺癌、肉瘤)，睪丸(精原細(xì)胞瘤、畸胎瘤、胚胎性癌、 畸胎癌、絨毛膜癌、肉瘤、間質(zhì)細(xì)胞癌、纖維瘤、纖維腺瘤、腺瘤樣 瘤、脂肪瘤)；肝細(xì)胞瘤(肝細(xì)胞癌)，膽管癌，肝母細(xì)胞瘤，血 管肉瘤，肝細(xì)胞性腺瘤，血管瘤；疊骨原性肉瘤(骨肉瘤)，纖維肉瘤， 惡性纖維組織細(xì)胞瘤，軟骨肉瘤，尤因氏肉瘤，惡性淋巴瘤(網(wǎng)狀細(xì)胞 肉瘤)，多發(fā)性骨髓瘤，惡性巨細(xì)胞瘤脊索瘤，骨軟骨瘤(骨軟骨性外生 骨疣)，良性軟骨瘤，成軟骨細(xì)胞瘤，軟骨粘液纖維瘤，骨樣骨瘤和巨 細(xì)胞瘤；神經(jīng)系統(tǒng):頭顱(骨瘤、血管瘤、肉芽瘤、黃瘤、畸形性骨炎)， 腦脊膜(腦膜瘤、腦膜肉瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤病)，腦(星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng) 管細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、室管膜瘤、生殖細(xì)胞瘤[松果體瘤]、多形性惡 性膠質(zhì)瘤、少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤、神經(jīng)鞘瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、先天性腫 瘤)，脊髓神經(jīng)纖維瘤，腦膜瘤，神經(jīng)膠質(zhì)瘤，肉瘤)；婦科:子宮(子 宮內(nèi)膜癌)，子宮頸(宮頸癌、腫瘤前子宮頸發(fā)育異常)，卵巢(卵巢癌[漿 液性嚢腺癌、粘液性嚢腺癌、未分類癌]，粒膜細(xì)胞瘤，塞-萊細(xì)胞瘤， 無性細(xì)胞瘤，惡性畸胎瘤)，陰門(鱗狀細(xì)胞癌、上皮內(nèi)癌、腺癌、纖維 肉瘤、黑素瘤)，陰道(透明細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、葡萄簇樣肉瘤(胚胎 橫紋肌肉瘤)、輸卵管(癌)；血液學(xué):血液(髓性白血病[急性和慢性的， 急性淋巴細(xì)胞白血病，慢性淋巴細(xì)胞白血病，骨髓增生性疾病，多發(fā) 性骨髓瘤，脊髓發(fā)育不良綜合征)，霍奇金病，非霍奇金氏淋巴瘤惡性 淋巴瘤；皮膚:惡性黑素瘤、基底細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、卡波西氏肉 瘤、胎塊發(fā)育不良痣、脂肪瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤、瘢痕瘤、牛皮 褲；和腎上腺:成神經(jīng)細(xì)胞瘤。因此，本文所述術(shù)語"癌細(xì)胞"包括 受到上述所認(rèn)定的條件中任一種折磨的細(xì)胞。通過調(diào)節(jié)bimC驅(qū)動(dòng)蛋白亞族的真菌成員的活性，本發(fā)明的化合物 也可用做抗真菌藥，如美國專利No. 6,284,480中所述。進(jìn)一步包括在本發(fā)明范圍內(nèi)的是應(yīng)用本化合物包被支架以及因此 使用在包被支架上的本化合物治療和/或預(yù)防再狹窄(W003/032809)。可被本發(fā)明的化合物、組合物及方法治療的癌癥包括但不限于 乳房、前列腺、結(jié)腸、肺、腦、睪丸、胃、胰腺、皮膚、小腸、大腸、
喉、頭及頸部、口腔、骨骼、肝臟、膀胱、腎臟、甲狀腺及血液。 本發(fā)明的化合物還可用于制備對治療癌癥有用的藥物。 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)操作規(guī)程，可將本發(fā)明的化合物單獨(dú)或與藥學(xué)上可 接受的載體、賦形劑或者稀釋劑組合以藥物組合物形式給藥給哺乳動(dòng) 物，優(yōu)選人。所述化合物可以口服或胃腸外給藥，包括靜脈內(nèi)、肌肉 內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下、直腸及局部給藥途徑。含有活性成分的藥物組合物可為適合口服給藥的形式，例如，片 劑、錠劑、菱形片、水性懸浮液或油性懸浮液、可分散性粉劑或者顆 粒劑、乳劑、硬膠嚢劑或軟膠嚢劑、或糖漿劑或酏劑。口服用組合物 可根據(jù)本領(lǐng)域已知的用于制備藥物組合物的任何方法制備，并且該組合物可含有一種或多種選自甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑的試劑， 以提供藥學(xué)上形色味兼具的制劑。片劑含有與適于制造片劑的無毒藥 學(xué)上可接受的賦形劑混合的活性成分。這些賦形劑可為例如，惰性稀釋劑，例如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鉀或者磷酸鈉；造粒劑和崩 解劑，例如微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、玉米淀粉或者藻酸； 粘合劑，例如淀粉、明膠、聚乙烯吡咯烷酮或者阿拉伯膠；和潤滑劑， 例如硬脂酸鎂、硬脂酸或者滑石。片劑可為未包衣的，或者它們可通 過已知技術(shù)進(jìn)行包衣以掩蓋藥物的令人不快的味道或延遲藥物在胃腸 道中的崩解和吸收，從而在較長時(shí)期內(nèi)提供持續(xù)作用。例如，可使用 水溶性掩味物質(zhì)如羥丙基曱基纖維素或羥丙基纖維素，或可使用延時(shí) 物質(zhì)如乙基纖維素、乙酸丁酸纖維素?？诜弥苿┮部蔀橛裁髂z膠嚢形式，其中活性成分與惰性固體稀 釋劑如碳酸鈣、磷酸鈣或者高呤土混合，或者口服用制劑也可為軟明 膠膠嚢形式，其中活性成分與水溶性載體如聚乙二醇或者油性介質(zhì)如 花生油、液體石蠟或者橄欖油混合。水性懸浮液含有與適合制造水性懸浮液的賦形劑混合的活性物 質(zhì)。這些賦形劑是助懸劑，例如羧曱基纖維素鈉、曱基纖維素、羥丙 基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍樹膠和阿拉伯樹膠； 分散劑或潤濕劑可以為天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或者烯氧化物 類與脂肪酸的縮合產(chǎn)物例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或者是環(huán)氧乙烷與長 鏈脂族醇的縮合產(chǎn)物如十七亞乙氧基鯨蠟醇，或者是環(huán)氧乙烷與得自 脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產(chǎn)物例如聚氧乙烯山梨糖醇一油酸酯，
或者是環(huán)氧乙烷與得自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產(chǎn)物例如聚乙 烯脫水山梨糖醇一油酸酯。水性懸浮液也可含有一種或多種防腐劑， 例如對羥基苯曱酸乙酯或正丙酯， 一種或多種著色劑， 一種或多種矯 味劑和一種或多種甜味劑例如蔗糖、糖精或者阿司帕坦。油性懸浮液可通過將活性成分懸浮在植物油例如花生油、橄攬 油、芝麻油或者椰子油、或懸浮在礦物油例如液體石蠟中而制備。油 性懸浮液可含有增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或者鯨蠟醇。可加入例如 上述那些甜味劑和矯味劑以提供適口的口服制劑。這些組合物可通過加入抗氧化劑例如丁基化羥基茴香醚或者a-生育酚得以]^存。適于通過加入水制備水性懸浮液的可分散性粉劑和顆粒劑提供與 分散劑或潤濕劑、助懸劑和一種或多種防腐劑混合的活性成分。適當(dāng) 的分散劑或潤濕劑和助懸劑如上面已經(jīng)描述的那些。還可存在另外的 賦形劑，例如甜味劑、矯味劑和著色劑。這些組合物可通過加入抗氧 化劑例如抗壞血酸得以保存。本發(fā)明的藥物組合物也可為水包油型乳液劑形式。油相可是植物 油例如橄欖油或者花生油，或者可是礦物油例如液體石蠟，或者是它 們的混合物。適當(dāng)?shù)娜榛瘎┛墒翘烊淮嬖诘牧字绱蠖孤蚜字?自脂肪酸和己糖醇酐的酯或者偏酯例如脫水山梨糖醇單油酸酯，以及 所述偏酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物例如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸 酯。乳劑也可含有甜味劑、矯味劑、防腐劑和抗氧化劑。糖漿劑和酏劑可用甜味劑例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或者蔗糖 進(jìn)行配制。這些制劑也可含有緩和劑、防腐劑、矯味劑、著色劑和抗 氧化劑。藥物組合物可為無菌注射用水溶液形式。在可接受的介質(zhì)和溶劑 中，可使用水、林格溶液和等滲氯化鈉溶液。無菌可注射制劑也可是無菌可注射水包油型微乳液劑，其中活性 成分溶于油相中。例如，活性成分可首先溶于大豆油和卵磷脂的混合 物中，然后將油性溶液引入到水和甘油的混合物中，并加工形成微乳液劑。可注射溶液或者微乳液劑可通過局部快速濃注-故引入到患者的血 流中。或者，以保持本化合物的恒定循環(huán)濃度的方式給用溶液或者微 乳液劑是有利的。為了維持這一恒定濃度，可使用連續(xù)靜脈內(nèi)輸送裝
置。這種裝置的例子是Deltec CADD-PLUSTM 5400型靜脈內(nèi)泵。藥物組合物可為用于肌肉內(nèi)和皮下給藥用的無菌可注射水性懸浮 液或油性懸浮液的形式。該懸浮液可根據(jù)本領(lǐng)域已知的技術(shù)使用上述 適當(dāng)?shù)姆稚┗蛘邼櫇駝┮约爸鷳覄┡渲?。無菌可注射制劑也可為在 無毒胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或懸浮液，如 作為在1，3-丁二醇中的溶液。另外，無菌非揮發(fā)油類通常用作溶劑或者 懸浮介質(zhì)。為了這一目的，可使用任何包括合成甘油一酯或甘油二酯 的溫和的非揮發(fā)油。另外，脂肪酸例如油酸可用在可注射制劑中。式I的化合物也可以直腸給藥用栓劑的形式給藥。這些組合物可以 通過將藥物與適當(dāng)?shù)臒o刺激性的賦形劑混合制備，所述賦形劑在通常 溫度下為固體，在直腸溫度下為液體，從而在直腸中融化，釋放藥物。 這些物質(zhì)包括可可脂、甘油明膠、氫化植物油、各種分子量的聚乙二 醇的混合物和聚乙二醇脂肪酸酯。對于局部施用，使用含有式I所示化合物的霜?jiǎng)?、膏劑、凝膠劑、 溶液或者懸浮液等。(對于這一應(yīng)用而言，局部施用將包括漱口劑和含 嗽液。)本發(fā)明的化合物可以通過局部使用適當(dāng)?shù)谋莾?nèi)介質(zhì)和輸送裝置的 鼻腔內(nèi)形式給藥，或通過透皮路徑給藥，使用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已 知的透皮貼片的那些形式。為了以透皮給藥系統(tǒng)的形式給藥，劑量給 藥當(dāng)然會(huì)以連續(xù)而不是間歇的方式貫穿于給藥方案的全過程。本發(fā)明 的化合物也可作為使用基質(zhì)例如可可脂、甘油明膠、氫化植物油、各 種分子量的聚乙二醇的混合物和聚乙二醇脂肪酸酯的栓劑形式進(jìn)行遞 送。當(dāng)本發(fā)明的化合物給藥進(jìn)入受治療人時(shí)，每日劑量通常根據(jù)開處 方醫(yī)師進(jìn)行判斷，劑量通常隨著個(gè)體患者的年齡、體重、性別和應(yīng)答， 以及隨著患者癥狀的嚴(yán)重程度的不同而不同。在一個(gè)示例性應(yīng)用中，對經(jīng)歷癌癥治療的哺乳動(dòng)物給用適當(dāng)量的 化合物。給藥量為每天約0.1亳克/公斤體重到約60毫克/公斤體重，優(yōu) 選每天0.5毫克/公斤體重到約40毫克々^斤體重。本化合物也用于與已知的治療劑和抗癌藥聯(lián)合使用。例如，本化 合物與已知的抗癌藥聯(lián)合使用。本公開的化合物與其它抗癌藥或化療 藥的聯(lián)合4吏用在本發(fā)明的范圍內(nèi)。這些藥物的例子可見于Cawcw
Principles and Practice of Oncology, V. T. Devita和S. Hellman(編者), 第6版(2001年2月15日)，Lippincott Williams & Wilkins Publishers。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員根據(jù)藥物的具體特性和所涉及的癌癥，將能辨 別哪種藥物聯(lián)合是有用的。這些抗癌藥包括但不限于以下雌激素受 體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類視色素受體調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞毒/細(xì)胞生 長抑制劑、抗增殖藥、異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA 還原酶抑制劑及其他血管生成抑制劑，細(xì)胞增殖和存活信號抑制劑、 細(xì)胞程序死亡誘導(dǎo)劑以及干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的藥物。當(dāng)與放射治療聯(lián) 合給用時(shí)，本發(fā)明的化合物特別有用。在一實(shí)施方案中，本化合物也可用于與已知的抗癌藥聯(lián)合^f吏用， 所述抗癌藥包括以下雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類視 色素受體調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞毒劑、抗增殖藥、異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑 制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉(zhuǎn)錄酶抑制 劑、及其他血管生成抑制劑。"雌激素受體調(diào)節(jié)劑"是指干擾或者抑制雌激素與受體結(jié)合的化 合物，無論機(jī)制如何。雌激素受體調(diào)節(jié)劑的例子包括但不限于他莫昔 芬、雷洛昔芬、艾多昔芬、LY353381、 LY117081、托瑞米芬、氟維司 群、4-；(2，2-二曱基-l-氧丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯 基-2H-l-苯并吡喃-3-基]-苯基-2,2-二甲基丙酸酯、4，4'-二羥基二苯甲酮 -2，4-二硝基苯基-腙、和SH646。"雄激素受體調(diào)節(jié)劑"是指干擾或者抑制雄激素與受體結(jié)合的化 合物，無論機(jī)制如何。雄激素受體調(diào)節(jié)劑的例子包括非那雄胺及其他 5ot-還原酶抑制劑、尼魯米特、氟他胺、比卡魯胺、利阿唑和乙酸阿比 特龍。"類視色素受體調(diào)節(jié)劑"是指干擾或者抑制類視色素與受體結(jié)合 的化合物，無論機(jī)制如何。這些類視色素受體調(diào)節(jié)劑的例子包括貝沙 羅汀、維曱酸、13-順式-視黃酸、9-順式-視黃酸、a-二氟曱基鳥氨酸、 ILX23-7553、反式-N-[4'-羥苯基維甲酰胺和N-4-羧基苯基維甲酰胺。"細(xì)胞毒/細(xì)胞生長抑制劑"是指主要通過直接干擾細(xì)胞發(fā)揮功能 或者抑制或干擾細(xì)胞分裂(mytosis)引起細(xì)胞死亡或者抑制細(xì)胞增殖的 化合物，包括烷化劑、腫瘤壞死因子、嵌入劑、低氧可活化化合物、 微管抑制劑/微管穩(wěn)定劑、有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑、有絲分裂進(jìn)程中
所涉及的激酶的抑制劑、抗代謝藥；生物應(yīng)答調(diào)節(jié)劑；激素/抗激素治 療劑、造血生長因子、單克隆抗體靶向治療劑、拓樸異構(gòu)酶抑制劑、 蛋白酶抑制劑和泛素連接酶抑制劑。細(xì)胞毒劑的例子包括但不限于sertenef、惡液質(zhì)素(cachectin)、 異環(huán)磷酰胺、他索納明、氯尼達(dá)明、卡鉑、六曱蜜胺、潑尼莫司汀、 二溴衛(wèi)矛醇、雷莫司汀、福莫司汀、奈達(dá)鉑、奧沙利鉑、替莫唑胺、 庚鉑(heptaplatin)、雌莫司汀、托西酸英丙舒凡、曲磷胺、尼莫司汀、 二溴螺氯按、嘌嘧替派、洛鉑、沙鉑、泊非霉素(profiromycin)、順 鉑、伊羅夫文、右異環(huán)磷酰胺、順式胺二氯(2-曱基吡啶)鉑、節(jié)基鳥嘌 呤、葡磷酰胺、GPX100、(反式，反式，反式)-雙-mu-(己烷-l，6-二胺)-mu-[二 胺國鉤(II)]雙[二胺(氯代)鉑(II)]四氯化物、diarizidinylspermine、三氧化 二砷、l-(ll-十二烷基氨基-10-羥基十一烷基)-3，7-二甲基黃嘌呤、佐柔 比星、伊達(dá)比星、柔紅霉素、比生群、米托蒽醌、吡柔比星、吡萘非 特、戊柔比星、氨柔比星、抗瘤酮、3'-脫氨基-3'-嗎啉代-13-脫氧-10-羥基洋紅霉素、蒽環(huán)霉素(annamycin)、加柔比星、依利奈法德、 MEN10755、和4-脫曱氧基-3-脫氨基-3-氮雜環(huán)丙基-4-曱基磺?；?柔紅 霉素(參見WO 00/50032)。低氧可活化化合物的例子是替拉扎明。蛋白酶體抑制劑的例子包括但不限于乳胞素和保特佐米 (bortezomib )。微管抑制劑/微管穩(wěn)定劑的例子包括紫杉醇、硫酸長春地辛、3，，4，-二脫氫-4，-脫氧-8，-去甲長春堿、多西他賽、根霉素、多拉司他汀、羥 乙基磺酸米伏布林、auristatin、西馬多丁、 RPR109881、 BMS184476、 長春氟寧、自念珠藻環(huán)肽(crypt叩hycin)、 2，3,4，5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧 基苯基)苯磺酰胺、脫水長春堿、N,N-二曱基-L-纈氨酰-L-纈氨酰-N-曱 基-L-纈氨酰-L-脯氨酰-L-脯氨酸-叔丁基酰胺、TDX258、埃皮霉素 (epothilones)(參見例如美國專利Nos. 6,284,781和6,288,237)和 BMS188797。拓樸異構(gòu)酶抑制劑的一些例子為拓樸替康、hycaptamine、伊立替 康、盧比替康、6-乙氧基丙?；?3'，4'-0-外-亞苯甲基-教酒菌素 (chartreusin ) 、 9-曱氧基-N,N-二曱基-5-硝基吡唑并[3，4，5-kl]吖咬-2-(6H)丙胺、 1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氫-9-羥基-4-曱基-lH，12H-苯并[de
吡喃并[3',4':b，7-吲嚷并[l，2b]喹啉-10,13(9H，15H)二酮、勒托替康、7-[2-(N-異丙基氨基)乙基-(20S)喜樹堿、BNP1350、 BNPIllOO、 BN80915、 BN80942、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、索布佐生、2'-二曱基氨基-2'-脫 氧-依托泊苷、GL331、 N-[2-(二甲基氨基)乙基l-9-羥基-5，6-二曱基-6H-吡啶并[4，3畫b呼唑-l-曱酰胺、asulacrine、 (5a,5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2隱(二 甲基氨基)乙基-N-甲基氨基]乙基卜5-[4-羥基-3，5-二甲氧基苯基卜 5，5a，6，8，8a，9-六氫呋喃并(3'，4':6，7)萘并(2，3-d)-l，3- 二氧雜環(huán)戊烯-6-酮、2，3-(亞曱基二氧)-5-甲基-7-羥基-8-曱氧基苯并[c]-菲啶镥、6，9-二[(2-氨基乙基)氨基I苯并[g異喹啉-5，10-二酮、5-(3-氨基丙基氨基)-7， 10-二 羥基-2-(2-羥基乙基氨基曱基)-6H-吡唑并[4，5，l-de]吖咬-6-酮、N-[l-[2(二乙基氨基)乙基氨基1-7-曱氧基-9-氧代-9H-噻噸-4-基甲基曱酰 胺、N-(2-(二甲基氨基)乙基)吖啶-4-曱酰胺、6-[2-(二甲基氨基)乙基
氨基]-3-羥基-7H-茚并[2， 1 -c查啉-7-酮、和地美司鈉。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑的例子，特別是人的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白 KSP的抑制劑的例子在PCT公開WO 01/30768、 WO 01/98278、 WO 03/050,064、 WO 03/050,122、 WO 03/049,527、 WO 03歸，679、 WO 03/049,678和WO 03/39460和待審PCT公開Nos. US03/06403(提交日 2003年3月4日)、US03/15861(提交日2003年5月19日)、 US03/15810(提交日2003年5月19日)、US03/18482(提交日2003年6 月12日)和US03/18694(提交日2003年6月12日)中有述。在一實(shí)施 方案中，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑包括但不限于KSP抑制劑、MKLP1 抑制劑、CENP-E抑制劑、MCAK抑制劑、Kifl4抑制劑、Mphosphl 抑制劑和Rab6-KIFL抑制劑。"組蛋白脫乙?；敢种苿?的例子包括但不限于SAHA、 TSA、 oxamflatin、 PXDIOI、 MG98及scriptaid。對于其他組蛋白脫乙?；?抑制劑的進(jìn)一步參考可見于以下文本；Miller，T.A.等，/JV/^/. 46(24):5097陽5116(2003)。"在有絲分裂進(jìn)程中所涉及的激酶的抑制劑，，包括但不限于極光 (aurora)激酶抑制劑、Polo樣激酶抑制劑(PLK;特別是PLK-1的抑制 劑)、bub-l抑制劑和bub-Rl抑制劑。 一個(gè)"極光激酶抑制劑"的例子 是VX-680。"抗增殖藥物"包括反義RNA和DNA寡核苷酸如G3139、ODN698、 RVASKRAS、 GEM231和INX3001 ，和抗代謝藥如依i若他濱、 卡莫氟、替加氟、噴司他丁、去氧氟尿苷、三甲曲沙、氟達(dá)拉賓、卡 培他濱、加洛他濱、阿糖胞苷ocfosfate、 fosteabine鈉水合物、雷替曲 塞、paltitrexid、乙嘧替氟、塞唑呋啉、地西他濱、諾拉曲塞、培美曲 塞、nelzarabine、 2'-脫氧-2'-甲叉基胞苷、2'-氟亞曱基-2，-脫氧胞苦、 N-[5-(2，3-二氫-苯并呋喃基)磺酰基]-N'-(3，4-二氯苯基)脲、N6-[4-脫氧-4-[N2-[2(E)，4(E)-十四碳二烯酰]甘氨酰氨基]-L-甘油基-B-L-甘露-庚吡 喃糖基]腺嘌呤、aplidine、海鞘素(ecteinascidin)、曲沙他濱、4-2-氨基 -4-氧代-4，6，7，8-四氫-311-嘧咬并[5，4-1)][1，4蓉"秦-6-基-(8)-乙基]-2，5-塞 吩曱酰-L-谷氨酸、氨基喋呤、5-氟尿嘧啶、阿拉諾新、11-乙?；?8-(氨 基曱酰氧基曱基)-4-曱酰基-6-曱氧基-14-氧雜-l，ll-二氮雜四環(huán) (7.4丄0.0)-十四碳-2，4，6-三烯-9-基乙酸酯、八氫吲溱三醇、洛美曲索、 右雷佐生、蛋氨酸酶、2'-氰基-2'-脫氧-N4-棕櫚?；?l-B-D-阿拉伯呋喃 糖基胞嘧啶和3-氨基吡啶-2-甲醛縮氨基硫脲。
單克隆抗體靶向治療劑的例子包括具有與癌細(xì)胞特異性或靶細(xì)胞 特異性單克隆抗體結(jié)合的細(xì)胞毒劑或放射性同位素的那些治療劑。例 子包括Bexxar。
"HMG-CoA還原酶抑制劑"是指3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原 酶抑制劑。可使用的HMG-CoA還原酶抑制劑的例子包括但不限于洛伐 他汀(MEVACOR ; 參見美國專利Nos. 4，231，938 、 4,294,926和 4,319,039)、辛伐他汀(ZOCOR⑧；參見美國專利Nos. 4,444,784、 4,820,850 和4，916，239)、普伐他汀(PRAVACHOL⑧；參見美國專利Nos. 4，346，227、 4,537,859、 4，410，629、 5，030，447和5，180，589)、氟伐他汀(LESCOL②， 參見美國專利Nos. 5,354,772 、 4,911,165 、 4,929,437 、 5，189，164 、 5,118,853、 5，290，946和5，356，896)和阿托伐他汀(LIPITOR⑧，參見美國 專利Nos. 5,273,995、 4,681,893、 5，489，691和5，342，952)?？稍诒景l(fā)明方 法中使用的這些和另外的HMG-CoA還原酶抑制劑的結(jié)構(gòu)式在M. Yalpani， "Cholesterol Lowering Drugs" ， C^￡m/W/j <fe /wrf"5t/j， 第 85-89頁(1996年2月5日)中的87頁和美國專利Nos. 4,782，084及4，885,314 中有述。本文使用的術(shù)語HMG-CoA還原酶抑制劑包括具有HMG-CoA還 原酶抑制活性的化合物的所有的藥學(xué)上可接受的內(nèi)酯和開環(huán)酸(open-acid) 形式 ( 即，其中內(nèi)酯環(huán)打開形成游離的酸)以及鹽和酯的形式，
因此，這些鹽、酯、開環(huán)酸和內(nèi)酯形式的使用包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。 "異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑"是指抑制在異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶包括法尼基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶(FPTase)、香葉基香葉基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn) 移酶I型(GGPTase-I)和香葉基香葉基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶II型(GGPTase-II，也叫做Rab GGPTase)中的任何一個(gè)或者任何組合的化合物。異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑的例子可在下列公開和專利中找 到WO 96/30343、 WO 97/18813、 WO 97/21701、 WO 97/23478、 WO 97/38665、 WO 98/28980、 WO 98/29119、 WO 95/32987、美國專利No. 5，420，245、美國專利No. 5,523,430、美國專利No. 5,532,359、美國專利 No. 5,510,510、美國專利No. 5,589,485、美國專利No. 5,602,098、歐洲 專利公開0 618 221、歐洲專利公開0 675 112、歐洲專利公開0 604 181、 歐洲專利公開0 696 593、 WO 94/19357、 WO 95/08542、 WO 95/11917、 WO 95/12612、 WO 95/12572、 WO 95/10514、美國專利No. 5，661，152、 WO 95/10515、 WO 95/10516、 WO 95/24612、 WO 95/34535、 WO 95/25086、 WO 96/05529、 WO 96/06138、 WO 96/06193、 WO 96/16443、 WO 96/21701、 WO 96/21456、 WO 96/22278、 WO 96/24611、 WO 96/24612、 WO 96/05168、 WO 96/05169、 WO 96/00736、美國專利No. 5,571,792、 WO 96/17861、 WO 96/33159、 WO 96/34850、 WO 96/34851、 WO 96/30017、 WO 96/30018、 WO 96/30362、 WO 96/30363、 WO 96/31111、 WO 96/31477、 WO 96/31478、 WO 96/31501、 WO 97/00252、 WO 97/03047、 WO 97/03050、 WO 97/04785、 WO 97/02920、 WO 97/17070、 WO 97/23478、 WO 97/26246、 WO 97/30053、 WO 97/44350、 WO 98/02436、和美國專利No. 5，532，359。異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶 抑制劑對血管生成的作用的例子參見五"n^^m / Omcw， Vol. 35， No. 9， pp. 1394-1401 (1999)。"血管生成抑制劑"是指抑制新血管形成的化合物，無論機(jī)制如 何。血管生成抑制劑的例子包括但不限于酪氨酸激酶抑制劑如酪氨酸 激酶受體Flt-1(VEGFR1)抑制劑和Flk-1/KDR(VEGFR2)抑制劑、表皮 衍生生長因子、成纖維細(xì)胞衍生生長因子或血小板衍生生長因子的抑 制劑、MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制劑、整聯(lián)蛋白阻斷劑、干擾素-a、 白細(xì)胞介素-12、戊聚糖多硫酸酯、環(huán)加氧酶抑制劑，包括非甾族抗炎 藥(NSAIDs)如阿斯匹林和布洛芬以及選擇性環(huán)加氧酶-2抑制劑如塞來
考昔和羅非考昔(尸A^s， Vol. 89， p. 7384(1992); JA^Y， Vol. 69， p. 475(1982); ^rc/i. 0^/m/附o/" Vol. 108， p. 573(1990); XwW. /^c" Vol. 238， p. 68(1994); /^5^ ， Vol. 372， p. 83(1995); C7/w， Or—. Vol. 313， p. 76(1995); / Mo/. ￡> /oct/wo/. ， Vol. 16， p. 107(1996); 丄尸/mr附aco/" Vol. 75， p. 105(1997); Cfl"cw及d , Vol. 57， p. 1625(1997); Ce〃， Vol. 93， p. 705(1998); /w"丄Mo/. MW.， Vol. 2, p. 715(1998);丄C臉附.，Vol. 274， p. 9116(1999))、甾族抗炎藥(如皮質(zhì)類固醇、鹽皮質(zhì)激素類藥、地 塞米松、潑尼松、潑尼松龍、曱潑尼龍、倍他米松)、羧基酰氨基三唑 (carboxyamidotriazole)、考布他汀A誦4、角鯊胺、6國0國氯乙酰基-羰基)畫 煙曲霉醇、酜咪哌咬酮(thalidomide)、血管生長抑素、肌釣蛋白-1、 血管緊張素II拮抗劑(參見Fernandez等，/ 丄M. C7/w. Afe/. 105:141-145(1985))，和VEGF抗體(參見，7Vfl似^所o&c/mo/ogv， Vol. 17， pp. 963-968(1999年10月)；Kim等，iVfl似^， 362， 841-844(1993); WO 00/44777;和WO 00/61186)。其它調(diào)節(jié)或者抑制血管生成并也可用于與本發(fā)明的化合物聯(lián)合使 用的治療劑包括調(diào)節(jié)或者抑制凝血和血纖維蛋白溶解體系的藥物(參見 C7/w. C7^附.la. 38:679-692(2000)中的綜述)。這些調(diào)節(jié)或者抑制凝 血和血纖維蛋白溶解路徑的藥物的例子包括但不限于肝素(參見 77i/w^.好flemoW. 80 : 10-23(1998))、低分子量肝素和羧基肽酶U抑制 劑(又名活性凝血酶可活化血纖維蛋白溶解抑制劑[TAFIa]的抑制 劑)(參見77^o附6ow:s101: 329-354(2001))。 TAFIa抑制劑已經(jīng)描述 于PCT公開WO 03/013,526和美國系列No. 60/349,925(提交于2002年 1月18曰)中有述。"干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的藥物"是指抑制轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞周期關(guān)卡信號的 蛋白激酶從而使癌細(xì)胞對DNA損害物質(zhì)增敏的化合物。這些藥物包括 ATR、 ATM、 Chkl和Chk2激酶以及cdk和cdc激酶的抑制劑中的抑制 劑，具體地通過7-羥基星孢素、flavopiridol 、 CYC202(Cyclacel)和 BMS-387032示例。"細(xì)胞增殖和生存信號通道抑制劑"是指抑制細(xì)胞表面受體和那 些表面受體的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)級聯(lián)下游的藥物。這些藥物包括EGFR抑制劑 (例如吉非替尼(gefitinib)和埃羅替尼(erlotinib))、 ERB-2抑制劑(例如 曲妥珠單抗)、IGFR抑制劑、細(xì)胞因子受體抑制劑、MET抑制劑、PI3K
抑制劑(例如LY294002)、絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑(包括但并不限于 Akt抑制劑如在WO 02/083064、 WO 02/083139、 WO 02/083140和WO 02/083138中所述)、Raf激酶抑制劑(例如BAY-43-9006)、 MEK抑制劑(例 如CI-1040和PD-098059)和mTOR抑制劑(例如Wyeth CCI-779)中的抑 制劑。這些藥物包括小分子抑制劑化合物和抗體拮抗劑。"細(xì)胞程序死亡誘導(dǎo)劑"包括TNF受體家族成員(包括TRAIL受體)的活化劑。血管生成抑制劑的其它例子包括但不限于內(nèi)皮生長抑素 (endostatin)、 ukrain、豹蛙酶(ranpirnase)、 IM862、 5-甲氧基畫4畫[2畫曱 基-3-(3-甲基-2-丁烯基)氧雜環(huán)丙基-l-氧雜螺[2，5]辛-6-基(氯乙?；?氨 基曱酸酯、acetyldinanaline、 5-氨基-l-[[3，5-二氯-4-(4-氯苯曱?；?苯基
甲基-lH-l，2,3-三唑-4-曱酰胺、CMIOI、角鯊胺、考布他汀、RPI4610, NX31838、硫酸化甘露戊糖磷酸酯、7，7-(羰基-二[亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯并羰基亞氨基[N-甲基-4,2-吡咯-羰基亞氨基-二-(l，3-萘二磺酸酯) 和3-[(2,4-二曱基吡咯-5-基)亞甲基-2-吲哚滿酮(SU5416)。如上所述，"整聯(lián)蛋白阻斷劑"是指選擇性地拮抗、抑制或?qū)?生理配體與OCv(33整聯(lián)蛋白結(jié)合的化合物，是指選擇性地拮抗、抑制或 對抗生理配體與avPs整聯(lián)蛋白的結(jié)合的化合物，是指拮抗、抑制或?qū)股砼潴w與OtvP3和Otvp5整聯(lián)蛋白二者的結(jié)合的化合物，是指拮抗、抑制或?qū)乖诿?xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)的特定整聯(lián)蛋白的活性的化合物。i亥術(shù)i吾還才旨Otv(36、 avp8、 OCipi、 Ot2(3l、 OC5(3i、 OC6(3l和066(34整聯(lián)蛋白的拮抗劑。該術(shù)i吾還才旨av卩3、 otvp5、 avp6、 otvp8、 OClPl、 CX2p!、 a5(3i、Ot6(3i和OC6P4整聯(lián)蛋白的任意組合的拮抗劑。酪氨酸激酶抑制劑的 一些具體例子包括N-(三氟甲基苯基)-5-曱基 異嚅唑_4-曱酰胺、3-(2，4-二甲基吡咯-5-基)曱叉基(methylidenyl))吲哚 滿-2-酮、17-(烯丙基氨基)-17-脫曱氧基格爾德霉素、4-(3-氯-4-氟苯基 氨基)-7-曱氧基-6-[3-(4-嗎啉基)丙氧基喹唑啉、N-(3-乙炔基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)-4-全唑啉胺、BIBX1382、 2,3，9，10,11，12-六氫-10-(羥 基曱基)-10-羥基-9-甲基-9，12-環(huán)氧基-lH-二吲哚并[1，2，3-fg:3'，2'，l'-kl] 吡咯并[3，4-i[l，6苯并二氮芳辛-l-酮、SH268、金雀異黃素、STI571 、 CEP2563 、 4-(3-氯苯基氨基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶曱磺酸 酯、4-(3-溴-4-羥基苯基)氨基-6，7-二曱氧基喹唑啉、4-(4'-羥基苯基)氨
基-6，7-二甲氧基查唑啉、SU6668、 STI571A、 N-4-氯苯基-4-(4-吡咬基 曱基)-l-(2，3-二氮雜萘)胺、和EMD121974。與除了抗癌化合物之外的化合物的聯(lián)合也包括在本方法中。例 如，本發(fā)明所要求保護(hù)的化合物與PPAR-y(即PPAR-gamma)激動(dòng)劑和 PPAR- 5 (即PPAR-delta)激動(dòng)劑的聯(lián)合，可用在某些惡性腫瘤的治療 中。PPAR-y和PPAR-5是核過氧化物酶體增殖物激活受體y和5 。 PPAR-Y在內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá)及其與血管生成的關(guān)系已經(jīng)在文獻(xiàn)(參見丄 Cfl函麗c.漁r附,/. 1998 ^ 31:卯9-913，' / 所o/. Oi綴1999^ 274: 9116-9121 ; /wveW. 0/7/i"fl/mo/ 2000 ; 41: 2309-2317)中報(bào)導(dǎo)。新近，已顯示PPAR-Y激動(dòng)劑體外抑制對VEGF的生血管應(yīng)答；曲格列酮 和馬來酸羅格列酮抑制小鼠中視網(wǎng)膜新血管生成的發(fā)展(v4"/L 0/7/^/m附0/. 2001; 119: 709-717)。 PPAR-y激動(dòng)劑和PPAR畫Y/ot激動(dòng)劑的 例子包括但不限于噻唑烷二酮(如DRF2725、 CS-Oll、曲格列酮、羅格 列酮、和吡格列酮)、非諾貝特、吉非貝齊、氯貝丁酯、GW2570、 SB219994、 AR畫H039242、 JTT國501、 MCC-555、 GW2331、 GW409544、 麗2344、 KRP297、 NPOllO、 DRF4158、麗622、 GI262570、 P麗182716、 DRF552926、 2-[(5,7-二丙基-3-三氟曱基-l，2-苯并異嚅唑-6-基)氧基卜2-甲基丙酸(在USSN 09/782，856中公開)，和2(11)-7-(3-(2-氯-4-(4-氟苯氧基) 苯氧基)丙氧基)-2-乙基色滿-2-曱酸(在USSN 60/235,708和60/244，697中 公開)。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是本發(fā)明公開的化合物與基因治療的聯(lián) 合在癌癥治療中的應(yīng)用。關(guān)于治療癌癥的基因策略的綜述參見Hall等人 (X附61: 785-789, 1997)和Kufe等人(Omcw Aferf/c/we, 5th Ed， pp 876-889， BC Decker, Hamilton 2000)?；蛑委熆捎糜谶f送任何 胂瘤抑制基因。這些基因的例子包括但不限于p53，其可通過重組病毒 介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移進(jìn)行遞送(參見例如美國專利No. 6,069,134)， uPA/uPAR拮抗劑("Adenovirus國Mediated Delivery of a uPA/uPAR Antagonist Suppresses Angiogenesis國Dependent Tumor Growth and Dissemination in Mice，"Gewe 77^ra/ j;， 1998年8月；5(8): 1105-13)，和干 擾素丫(//附附"朋/2000 ; 164: 217-222)。本發(fā)明的化合物也可與固有多藥耐藥性(MDR)抑制劑聯(lián)合給藥， 特別是與轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白高水平表達(dá)有關(guān)的MDR的抑制劑聯(lián)合。這些MDR抑
制劑包括p-糖蛋白(P-gp)抑制劑，如LY335979、 XR9576、 OC144-093、 R101922、 VX853和PSC833(伐司樸達(dá))。本發(fā)明的化合物可與抗吐劑聯(lián)合使用，用于治療惡心或嘔吐，包 括急性的、遲發(fā)的、晚期的和前發(fā)的嘔吐，其可起因于本發(fā)明化合物 的使用，其中本發(fā)明的化合物單獨(dú)使用或與放射治療聯(lián)合使用。為了 預(yù)防或者治療嘔吐，本發(fā)明的化合物可與其它抗吐劑特別是神經(jīng)激肽-l受體拮抗劑、5HT3受體拮抗劑如昂丹司瓊、格拉司瓊、托烷司瓊和 扎替司瓊(zatisetron) 、 GABAB受體激動(dòng)劑如巴氯芬、皮質(zhì)類固醇如 Decadron沐塞米松)、康寧樂、Aristocort、鼻松、Preferid、 Benecorten 或者例如在以下文獻(xiàn)中公開的其它藥物美國專利No. 2,789,118、 2，990，401、 3,048,581、 3,126,375、 3，929，768、 3,996,359、 3,928,326和 3,749,712，抗多巴胺能藥如吩噻漆(例如丙氯拉溱、氟奮乃靜、硫利達(dá) 嗪和美索達(dá)嗪)、曱氧氯普胺或者屈大麻紛聯(lián)合使用。在一實(shí)施方案中， 給用選自神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑、5HT3受體拮抗劑和皮質(zhì)類固醇的抗 吐劑作為輔助藥用于治療或者預(yù)防給用本化合物時(shí)可發(fā)生的嘔吐。與本發(fā)明的化合物聯(lián)合使用的神經(jīng)激肽-l受體拮抗劑在例如以下 文獻(xiàn)中充分地描述美國專利Nos. 5,162,339， 5，232，929， 5,242,930， 5,373,003， 5,387,595， 5,459,270， 5,494,926， 5,496,833， 5,637,699， 5,719,147;歐洲專利^^開Nos. EP 0 360 3卯，0 394 989, 0 428 434， 0 429 366, 0 430 771, 0 436 334, 0 443 132, 0 482 539, 0 498 069, 0 499 313， 0 512 901, 0 512卯2, 0 514 273, 0 514 274, 0 514 275, 0 514 276, 0 515 681， 0 517 589, 0 520 555， 0 522 808， 0 528 495， 0 532 456, 0 533 280， 0 536 817, 0 545 478, 0 558 156, 0 577 394, 0 585 913，0 590 152, 0 599 538, 0 610 793， 0 634 402， 0 686 629， 0 693 489， 0 694 535， 0 699 655， 0 699 674， 0 707 006， 0 708 101， 0 709 375， 0 709 376， 0 714 891， 0 723 959， 0 733 632及0 776 893; PCT國際專利公開Nos. WO 90/05525， 90/05729，91/09844，91/18899，92/01688，92/06079，92/12151，92/15585，92/17449，92/20661，92/20676,92/21677，92/22569，93/00330，93/00331,93/01159，93/01165，93/01169，93/01170，93/06099，93/09116，93/10073，93/14084，93/14113，93/18023，93/1卯64，93/21155，93/21181，93/23380，93/24465，94/00440，94/01402,94/02461,94/02595，94/03429，94/03445,94/04494，94/04496,94/05625，94/07843，94/08997，94/10165,94/10167,94/10168,94/10170， 94/11368， 94/13639， 94/13663， 94/14767， 94/15卯3， 94/19320， 94/19323， 94/20500， 94/26735， 94/26740， 94/29309, 95/02595， 95/04040, 95/04042， 95/06645， 95/07886， 95/07908， 95/08549, 95/11880， 95/14017， 95/15311， 95/16679， 95/17382， 95/18124， 95/18129， 95/19344， 95/20575, 95/21819， 95/22525， 95/23798， 95/26338， 95/28418， 95/30674， 95/30687， 95/33744， 96/05181, 96/05193， 96/05203， 96/06094， 96/07649， 96/10562， 96/16939， 96/18643， 96/20197, 96/21661， 96/29304， 96/29317， 96/29326， 96/29328， 96/31214， 96/32385， 96/37489， 97/01553， 97/01554， 97/03066， 97/08144, 97/14671， 97/17362， 97/18206， 97/19084， 97/19942及 97/21702;以及英國專利公開Nos. 2 266 529， 2 268 931， 2 269 170， 2 269 590， 2 271 774, 2 292 144， 2 293 168, 2 293 169,及2 302 689。這些化合 物的制備在上述專利和公開中有充分描述，所述文獻(xiàn)作為參考并入本 文。在一實(shí)施方案中，用于與本發(fā)明的化合物聯(lián)合使用的神經(jīng)激肽-1 受體拮抗劑選自2-(11)-(1-(10-(3,5-二(三氟曱基)苯基)乙氧基)-3-(8)-(4-氟苯基)-4-(3-(5-氧代-lH，4H-l，2，4-三唑并)曱基)嗎啉或其藥學(xué)上可接受 的鹽，其在美國專利No.5，719，147中有述。本發(fā)明的化合物也可與用于治療貧血的藥物一起給用。這些貧血 治療劑為例如連續(xù)紅細(xì)胞生成(eythropoiesis )受體活化劑(如阿法依泊汀)。本發(fā)明的化合物也可與用于治療嗜中性白細(xì)胞減少癥的藥物一起 給用。這些嗜中性白細(xì)胞減少癥治療劑為例如調(diào)節(jié)嗜中性白細(xì)胞的產(chǎn) 生和功能的造血生長因子如人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)。 G-CSF的 例子包括非格司亭。本發(fā)明的化合物也可與免疫促進(jìn)藥如左旋咪唑、異丙肌苦和日達(dá) 仙給用。本發(fā)明化合物還可與雙膦酸鹽類(理解為包括雙膦酸鹽類、二膦酸 鹽類、雙膦酸類及二膦酸類)聯(lián)合用于治療或預(yù)防癌癥，包括骨癌。雙 膦酸鹽類的例子包括但不限于依替膦酸鹽(Didronel)、帕米膦酸鹽(阿 可達(dá))、阿侖膦酸鹽(福善美)、利塞膦酸鹽(Actonel)、唑來膦酸鹽 (Zometa)、伊班膦酸鹽(ibandronate)(Boniva)、伊卡膦酸鹽(incadronate) 或西馬膦酸鹽(cimadronate)、氯膦酸鹽、EB-1053 、米諾膦酸鹽
(minodronate)、 奈立膦酸鹽(neridronate)、 p比膦酸鹽(piridronate)及 替魯膦酸鹽(tiludronate)，包括其任何及所有藥學(xué)上可接受的鹽、衍生 物、水合物及它們的混合物。本發(fā)明的化合物還可與芳香酶(aromatase)抑制劑聯(lián)合用于治療或 預(yù)防乳腺癌。芳香酶抑制劑的例子包括但不限于阿那曲唑、來曲唑 及依西美坦。本發(fā)明化合物還可與siRNA治療劑聯(lián)合用于治療或預(yù)防癌癥。 因此，本發(fā)明的范圍包括本發(fā)明所要求保護(hù)的化合物與選自以下 的第二化合物的聯(lián)合使用雌激素受體調(diào)節(jié)劑，雄激素受體調(diào)節(jié)劑， 類視色素受體調(diào)節(jié)劑，細(xì)胞毒/細(xì)胞生長抑制劑，抗增殖藥，異戊二烯 基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑，HMG-CoA還原酶抑制劑，HIV蛋白酶抑制 劑，逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，血管生成抑制劑，PPAR-Y激動(dòng)劑，PPAR-5激 動(dòng)劑，固有多藥耐藥性抑制劑，抗吐劑，用于治療貧血的藥物，用于 治療嗜中性白細(xì)胞減少癥的藥物，免疫促進(jìn)藥，細(xì)胞增殖和生存信號 抑制劑，干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的藥物，雙膦酸鹽類，芳香酶抑制劑，siRNA 治療劑和細(xì)胞程序死亡i秀導(dǎo)劑。關(guān)于本發(fā)明化合物的術(shù)語"給用"及其變體(如"給用"化合物)是指將化合物或者該化合物的前藥引入到需要治療的動(dòng)物的系統(tǒng)內(nèi)。 當(dāng)本發(fā)明的化合物或其前藥與一種或多種其它活性劑(如細(xì)胞毒劑等等) 聯(lián)合提供時(shí)，"給用"及其變體各自可理解為包括所述化合物或其前 藥及其他藥物的同時(shí)的和順序的給予。如本文使用的，術(shù)語"組合物"是指包括含特定量的特定成分的 產(chǎn)品、以及直接地或者間接地得自特定量的特定成分的組合的任何產(chǎn)口口口 0本文使用的術(shù)語"治療有效量"是指在組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或者人 中引起生物學(xué)或者醫(yī)學(xué)應(yīng)答的活性化合物或者藥物的量，該量通過研 究人員、獸醫(yī)、醫(yī)生或者其它臨床醫(yī)師確定。術(shù)語"治療癌癥"或者"癌癥的治療"是指對遭受癌病況折磨的 哺乳動(dòng)物給藥以及是指通過殺死癌細(xì)胞減輕癌病況的活動(dòng)，還指導(dǎo)致 抑制癌癥生長和/或轉(zhuǎn)移的活動(dòng)。在一實(shí)施方案中，用作第二化合物的血管生成抑制劑選自酪氨酸 激酶抑制劑、表皮衍生生長因子抑制劑、成纖維細(xì)胞衍生生長因子的
抑制劑、血小板衍生生長因子的抑制劑、MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制 劑、整聯(lián)蛋白阻斷劑、干擾素-a、白細(xì)胞介素-12、戊聚糖多硫酸酯、 環(huán)加氧酶抑制劑、羧基酰氨基三唑、考布他汀A-4、角篁胺、6-0-(氯乙 ?；?羰基)-煙曲霉醇、酞咪哌啶酮、血管生長抑素、肌鈣蛋白-1、或者 VEGF抗體。在實(shí)施方案中，雌激素受體調(diào)節(jié)劑是他莫昔芬或者雷洛昔 芬。權(quán)利要求的保護(hù)范圍還包括治療癌癥的方法，包括與放射治療和/ 或與選自以下的化合物聯(lián)合給用治療有效量的式I的化合物雌激素受 體調(diào)節(jié)劑，雄激素受體調(diào)節(jié)劑，類視色素受體調(diào)節(jié)劑，細(xì)胞毒/細(xì)胞生 長抑制劑，抗增殖藥，異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑，HMG-CoA 還原酶抑制劑，HIV蛋白酶抑制劑，逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，血管生成抑制劑， PPAR-Y激動(dòng)劑，PPAR-5激動(dòng)劑，固有多藥耐藥性抑制劑，抗吐劑， 用于治療貧血的藥物，用于治療嗜中性白細(xì)胞減少癥的藥物，免疫促 進(jìn)藥，細(xì)胞增殖和生存信號抑制劑，干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的藥物，雙膦 酸鹽類，芳香酶抑制劑，siRNA治療劑和細(xì)胞程序死亡誘導(dǎo)劑。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是治療癌癥的方法，該方法包括與紫杉 醇或者曲妥珠單抗聯(lián)合給藥治療有效量的式I的化合物。本發(fā)明進(jìn)一步包括治療或者預(yù)防癌癥的方法，該方法包括與 COX-2抑制劑聯(lián)合給用治療有效量的式I化合物。本發(fā)明還包括可用于治療或者預(yù)防癌癥的藥物組合物，包括治療 有效量的式I化合物和選自以下的化合物雌激素受體調(diào)節(jié)劑，雄激素 受體調(diào)節(jié)劑，類視色素受體調(diào)節(jié)劑，細(xì)胞毒/細(xì)胞生長抑制劑，抗增殖 藥，異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑，HMG-CoA還原酶抑制劑，HIV 蛋白酶抑制劑，逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，血管生成抑制劑，PPAR-r激動(dòng)劑， PPAR-5激動(dòng)劑，細(xì)胞增殖和生存信號抑制劑，干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的 藥物，雙膦酸鹽類，芳香酶抑制劑，siRNA治療劑和細(xì)胞程序死亡誘導(dǎo) 劑。本發(fā)明的這些及其它方面從本文中的教導(dǎo)是顯而易見的。試驗(yàn)并發(fā)現(xiàn)具有激酶抑制活性。其它試驗(yàn)在文獻(xiàn)中已知并且本領(lǐng)域的技術(shù)
人員可容易地操作(參見，例如PCT公開WO 01/30768， 2001年5月3曰， 18-22頁)。I.驅(qū)動(dòng)蛋白腺苷三磷酸酶體外試驗(yàn)人多組氨酸標(biāo)記的KSP運(yùn)動(dòng)結(jié)構(gòu)域(KSP(367H))的克隆和表達(dá)用于表達(dá)人KSP運(yùn)動(dòng)結(jié)構(gòu)域構(gòu)建體的質(zhì)粒通過使用pBluescript全長人KSP構(gòu)建體(Blangy等，Cell, 83巻，pp 1159-1169， 1995)作為模板的PCR進(jìn)行克隆。使用!\末端引物5'-GCAACGATTAATATGGCGTCGCAGCCAAATTCGTCTGCGAAG (SEQ. ID. NO.: l)和C末端引物5國GCAACGCTCGAGTCAGTGATID. NO.: 2)來擴(kuò)增運(yùn)動(dòng)結(jié)構(gòu)域和頸連接區(qū)。PCR產(chǎn)物用AseI和XhoI消 化，連接到pRSETa(Invitrogen)的Ndel/XhoI消化產(chǎn)物中并轉(zhuǎn)化至大腸 桿菌BL21(DE3)中。細(xì)胞在37"C下生長到OD6(K)為0.5。培養(yǎng)物冷卻到室溫后，用100pM IPTG誘導(dǎo)KSP表達(dá)，并繼續(xù)培養(yǎng)過夜。細(xì)胞通過離心作用成為小球并 用冰冷卻的PBS洗滌一次。小球進(jìn)行快速冷凍并在-80。C下貯存。蛋白純化細(xì)胞小球在冰上解凍，并重懸在裂解緩沖液(50mM K-HEPES， pH 8.0， 250mM KC1， 0.1% Tween， 10mM咪哇，0.5mM Mg-ATP, lmM PMSF，2mMbenzimidine， lx完全蛋白酶抑制劑混合物(Roche))中。細(xì) 胞懸浮液在冰上用lmg/ml溶菌酶和5mM P-巰基乙醇培養(yǎng)10分鐘，然后 超聲處理(3x30秒)。隨后的所有過程在41C下進(jìn)行。裂解產(chǎn)物以40，000x g離心40分鐘。上清液稀釋并裝載在處于緩沖液A(50mMK-HEPES， pH 6.8， lmM MgCl2， lmM EGTA， 10|iM Mg畫ATP， lmMDTT)中的SP 瓊脂糖凝膠柱上(Pharmacia， 5ml柱體)，用0到750mM在緩沖液A中的 KC1梯度洗脫。收集含有KSP的級分并用Ni-NTA樹脂(Qiagen)培養(yǎng)l小 時(shí)。樹脂用緩沖液B(裂解緩沖液減去PMSF和蛋白酶抑制劑混合物)洗 滌三次，然后進(jìn)行3次的15分鐘培養(yǎng)，并用緩沖液B洗滌。最后，培養(yǎng) 樹脂并用緩沖液C(和緩沖液B—樣，除了pH為6.0)洗滌15分鐘三次，并 傾倒柱中。KSP用洗脫緩沖液(與緩沖液B相同，除了使用150mM KC1
和250mM咪唑)洗脫。收集含有KSP的級分，使在蔗糖中為10%，并在 -80匸]^存。從由牛腦中分離的微管蛋白制備微管。1 mg/ml的純化的微管蛋白 (> 97。/。不含MAP)在37X:、在BRB80緩沖液(80 mM K-PIPES， 1 mM EGTA， 1 mM MgCl2， pH6.8)中的10fiM紫杉醇、1 mM DTT、 1 mM GTP的存在下聚合。通過超速離心法和除去上清液從未聚合的微管蛋 白中分離得到的微管。含有微管的小球逐漸地再懸浮在在BRB80中的 lOpM紫杉醇、lmMDTT、 50 jig/ml氨芐青霉素、和5 ng/ml氯霉素中。驅(qū)動(dòng)蛋白運(yùn)動(dòng)結(jié)構(gòu)域用微管、1 mM ATP(l : 1 MgCl2 : Na-ATP)、 和化合物在231C下、在含有80 mM K-HEPES(pH7.0)、 lmM EGTA、 1 mMDTT、 1 mMMgCl2和50mMKCl的緩沖液中培養(yǎng)。反應(yīng)通過用最 終的緩沖液組合物通過2-10倍稀釋而終止，所述緩沖液組合物為80mM HEPES和50 mM EDTA。通過曱基氮萘紅/鉬酸銨試驗(yàn)測量得自ATP水 解反應(yīng)的游離磷酸鹽，所述試驗(yàn)加入150 nl猝滅劑C緩沖液，其含有2:1 比率的猝滅劑A :猝滅劑B。猝滅劑A含有O.l mg/ml的曱基氮萘紅和 0.14%的聚乙烯醇；猝滅劑B含有12.3 mM鉬酸銨四水合物在1.15 M硫 酸中。反應(yīng)在2310培養(yǎng)10分鐘，在540 nm測量磷鉬酸鹽絡(luò)合物的吸光 率。實(shí)施例中所述的化合物1-13到l-13D在以上試驗(yàn)中檢測并發(fā)現(xiàn)其 IC50<50 ^M。II.細(xì)胞增殖試驗(yàn)將細(xì)胞裝板在96孔組織培養(yǎng)皿中，裝板密度使得在24、 48和72小 時(shí)期間可進(jìn)行對數(shù)生長并過夜使之附著。隨后的一天，以10點(diǎn)，二分 之一對數(shù)滴定法將化合物加入到所有板中。各滴定系列進(jìn)行一式三 份，在整個(gè)試驗(yàn)過程中保持0.1。/。的恒定DMSO濃度。還包括單獨(dú)的 0.:r/。DMSO作為對照。各化合物稀釋系列在沒有血清的培養(yǎng)基中制 備。本試驗(yàn)中血清的最后濃度為在200^iL體積培養(yǎng)基中的5。/。。加入藥 物后，在24、 48或者72小時(shí)向滴定板上的各試樣和對照孔中加入二十 微升Alamar藍(lán)染色劑，并恢復(fù)在371C進(jìn)行培養(yǎng)。在CytoFluor II讀板器 上使用530-560亳微米波長激發(fā)、5卯毫微米波長發(fā)射，分析6-12小時(shí)后
的Alamar藍(lán)色熒光。
通過以X軸上的化合物濃度與Y軸上的各滴定點(diǎn)的細(xì)胞生長平均抑 制百分?jǐn)?shù)繪圖，得到細(xì)胞毒性ECso。在該試驗(yàn)中，將已經(jīng)用單獨(dú)介質(zhì) 處理的對照孔中的細(xì)胞生長定義為100%生長，用化合物處理的細(xì)胞的 生長與該值相對比。使用專有自用軟件使用對數(shù)4-參數(shù)曲線擬合來計(jì)算 細(xì)胞毒性百分?jǐn)?shù)的數(shù)值和拐點(diǎn)。細(xì)胞毒性百分?jǐn)?shù)定義為
細(xì)胞毒性％ :(熒光對照H熒光試樣)x 100 x (焚光對照)"
拐點(diǎn)為細(xì)胞毒性ECso。
III. 通過FACS評價(jià)有絲分裂停滯和細(xì)胞程序死亡 使用FACS分析來評價(jià)化合物抑制細(xì)胞的有絲分裂和誘導(dǎo)細(xì)胞程
序死亡的能力，其通過測量處理的細(xì)胞群中的DNA含量進(jìn)行。細(xì)胞以 每6 112組織培養(yǎng)皿1.4乂106個(gè)細(xì)胞的密度接種，并過夜使附著。然后細(xì) 胞用介質(zhì)(0.1% DMSO)或者用化合物滴定系列處理8-16小時(shí)。處理后， 細(xì)胞在給定時(shí)間通過胰蛋白酶消化收獲，通過離心作用形成小球。細(xì) 胞小球在PBS中漂清并用70%乙醇固定，在41C貯存過夜或更長時(shí)間。
對于FACS分析，使至少500，000個(gè)固定細(xì)胞形成小球并通過吸出除 去70%乙醇。然后細(xì)胞在4TC用核糖核酸酶A(50 Kunitz單位/ml)和碘化 丙錠(50 pg/ml)培養(yǎng)30分鐘，使用Becton Dickinson FACSCaliber分析。 使用Modfit細(xì)胞周期分析模型軟件(Verity Inc.)分析數(shù)據(jù)(得自IO，OOO個(gè) 細(xì)胞)。
以X軸上的化合物濃度與Y軸上的每個(gè)滴定點(diǎn)的細(xì)胞周期G2/M期 中的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)(通過碘化丙錠熒光測量)繪圖，得到有絲分裂停滯的 EC5()。使用SigmaPlot程序，使用對數(shù)4-參數(shù)曲線擬合進(jìn)行數(shù)據(jù)分析以 計(jì)算拐點(diǎn)。拐點(diǎn)作為有絲分裂停滯的ECs。。使用類似的方法來測定化 合物的細(xì)胞程序死亡的ECs。。這里，在各滴定點(diǎn)的細(xì)胞程序死亡細(xì)胞 的百分?jǐn)?shù)(通過碘化丙錠熒光測量)繪制在Y軸上，如上所述進(jìn)行類似的 分析。
IV. 檢測單極紡錘體的免疫熒光顯微術(shù) 在Kapoor等的(2000)J. Cell Biol. 150 : 975-988中基本上描述了
DNA、微管蛋白和中心粒周圍蛋白(pericentrin)的免疫熒光染色方法。
對于細(xì)胞培養(yǎng)研究，將細(xì)胞裝板在組織培養(yǎng)處理的玻璃小室載玻片
上，并過夜使其附著。然后將細(xì)胞用感興趣的化合物培養(yǎng)4到16小時(shí)。 培養(yǎng)完成后，吸出培養(yǎng)基和藥物，從玻璃載玻片上取出小室和墊圏。 然后將細(xì)胞進(jìn)行浸透、固定、洗滌、和封閉，用于根據(jù)所指方案進(jìn)行 非特異性抗體結(jié)合。用二曱苯將石蠟包埋的腫瘤切片進(jìn)行脫石蠟，然 后在封閉之前通過乙醇系列再水合。載玻片在41C下在初級抗體(小鼠單 克隆抗oc-微管蛋白抗體，得自Sigma的克隆DMlA， l:500稀釋；兔的多 克隆抗中心粒周圍蛋白抗體，得自Covance， 12000稀釋)中培養(yǎng)過夜。 洗滌后，載玻片用稀釋到15 ng/ml的偶聯(lián)二級抗體(FITC偶聯(lián)的針對微 管蛋白的驢抗小鼠IgG;德克薩斯紅偶聯(lián)的針對中心粒周圍蛋白的驢抗 兔IgG)在室溫下培養(yǎng)l小時(shí)。然后洗滌載玻片并用Hoechst 33342復(fù)染以 顯現(xiàn)DNA。在Mkon落射熒光顯微鏡上使用Metamorph反褶積和成像軟 件使免疫染色的試樣以100x油浸物鏡成像。
V. P-糖蛋白底物潛能(Subtrate Potential)的體外評價(jià)
P-gp轉(zhuǎn)染的LLC-細(xì)胞(L-mdrla ， 一種小鼠mdrla轉(zhuǎn)染的豬腎上皮 細(xì)胞林；及L-MDR1， 一種人MDR1轉(zhuǎn)染的豬腎上皮細(xì)胞林)以及對照 細(xì)胞(LLC-PKl)按先前公開的獲得(A. H. Schinkel等，/ /m^成， (1995) 96:1698-1705; A. H. Schinkel等，C匿"紐，(1991) 51:2628-2635;及A. H. Schinkel等，/ B/o/. C紐附.，(1993) 268:7474-7481)。細(xì)胞 在補(bǔ)充有2mM左旋谷氨酰胺、青霉素(50單位/mL)、鏈霉素(50 jig/mL) 及10。/o(v/v)FCS(Invitrogen)(l)的介質(zhì)199(Invitrogen， Grand Island, NY)中培養(yǎng)。每三到四天通過用胰蛋白酶-EDTA處理將匯合的單層細(xì)胞 傳代培養(yǎng)。
按以下進(jìn)行L-MDR1、 L-mdrla、及LLC-PK1細(xì)胞單層的跨上皮 轉(zhuǎn)運(yùn)研究將L-MDR1、 L-mdrla、及LLC-PK1細(xì)胞以2.0 x 105細(xì)胞 /0.5 mL/孔的密度裝板在多孔隙的24孑L(l.O fim)聚對苯二甲酸乙二酯薄
Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ)或者96孔聚碳酸酯薄膜(0.4 pm) 濾板(MultiScreenTM Caco-2, Millipore Corporation, Bedford, MA)上； 在具有30 mL培養(yǎng)基的進(jìn)料器盤中。在裝板后的第二天用新鮮培養(yǎng)基 補(bǔ)充細(xì)胞以及在裝板后的第四天用于轉(zhuǎn)運(yùn)研究。在轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn)開始前大
約一小時(shí)，吸出培養(yǎng)基以及將細(xì)胞培養(yǎng)插入物分別轉(zhuǎn)入24孔 Multiwell 培養(yǎng)板(Becton Dickinson)或96孑L轉(zhuǎn)運(yùn)分析培養(yǎng)板 (Millipore)，以及將細(xì)胞借助把0.5 mL轉(zhuǎn)運(yùn)緩沖液(含有10 mM Hepes 的不含血清的Hank平衡鹽溶液(HBSS; Invitrogen)(pH 7.4))加至細(xì)胞 培養(yǎng)插入物(頂部；A)側(cè)及貯存器(底部；B)側(cè)進(jìn)行洗滌。然后通過用含 或不含試驗(yàn)化合物(5 pM)的0.5 mL轉(zhuǎn)運(yùn)緩沖液替換每個(gè)室的培養(yǎng)基開 始轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn)。平行操作維拉帕米(以1 fiM)的跨細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)作為陽性對 照。在C02培養(yǎng)器中培養(yǎng)三小時(shí)后，從兩側(cè)取出100pL等分試樣以及 轉(zhuǎn)入96孔培養(yǎng)板用于LC/MS/MS定量分析。將在50/50乙腈/水中的內(nèi) 標(biāo)物(PCT公開No.WO03/105855中所描述的化合物35-2)加至每個(gè)孔并 通過LC/MS/MS立即定量。簡言之，將試樣在Inertsil ODS-3柱(2.1 x 50 mm， 5 um， Varian， Torrance， PA)上用在乙腈中的0.1%甲酸(FA)及在水 中的0.1。/oFA的線性梯度進(jìn)行色譜處理，以及通過經(jīng)由Sciex加熱霧化 器源接合的Sciex API 3000質(zhì)i普儀(Applied Biosystems， Toronto, Canada)進(jìn)行檢測。檢測到前體/產(chǎn)物離子躍遷為m/z 455.0 — 165.0(對 于維拉帕米)，m/z 345.0 — 256.9(對于內(nèi)標(biāo)物)以及試驗(yàn)化合物是相關(guān) 的。用以下方程式計(jì)算表觀滲透系數(shù)(Papp;以[cm/s頭E-061為單位)
Papp=轉(zhuǎn)運(yùn)量(pmo1/3小時(shí)/孔)/在3小時(shí)培養(yǎng)后在給體和受體室 中濃度的和(nM) /表面積(0.3 cmV孑L) /培養(yǎng)時(shí)間(10800 s)
結(jié)果被稱作Papp(平均值±S.D.，n = 3)。底部到頂部(B-A)相對于 頂部到底部(A-B)的比(B-A/A-B)是用每個(gè)Papp值的平均值計(jì)算。顯著 大于l.O(尤其大于3.0)的B-A/A-B比表明試驗(yàn)化合物是P-糖蛋白底物。
實(shí)施例
提供的實(shí)施例意在幫助進(jìn)一步理解本發(fā)明。使用的特定原料、物 質(zhì)和條件意在說明本發(fā)明，并且不限制本發(fā)明的合理范圍。
流程

圖1
<formula>formula see original document page 60</formula>
流程圖l(續(xù))
Me
步驟l:2-(3-曱基丁?；?氨基l噻吩-3-曱酸(1-2)
在OIC下向2-氨基塞吩-3-曱酸曱酯Id (5.0 g， 31.8 mmol)在DMF (30 mL)中的溶液中加入異戊酰氯(4.21 g， 34.9 mmol)。將該反應(yīng)在OTC 下攪拌2.5h，接著用乙醚萃取并用水洗滌。將所述有機(jī)溶液用硫酸鈉 干燥，過濾并濃縮從而得到油狀的酰胺。向2-[(3-曱基丁?；?氨基噻 喻-3-曱酸甲酯(7.60 g, 31.49 mmol)在THF/MeOH中的溶液中加入1N KOH (2.65 g， 47.24 mmol)并將該反應(yīng)攪拌過夜。將所述反應(yīng)用IN HC1 中和至于pH為6.0。在真空下除去甲醇并將殘余物溶于DCM且用水 洗滌。將所述有機(jī)溶液用硫酸鈉干燥。過濾并濃縮得到灰色固體狀的 標(biāo)題化合物。NMR (500 MHz, CDC13) S 1.05 (d， J = 6.5 Hz， 6H), 2.24-2.29 (m, 1H)， 2.41 (d, /= 10 Hz， 2H)， 6.78 (d， / = 5 Hz， 1H)， 7.27 (d， /= 5 Hz， 1H)， 10.97 (br s， 1H). MS [M+H] C10H13NO3S = 228.1。
步驟2: N-芐基-2-(3-曱基丁酰基)氨基l噻吩-3-曱酰胺(1-3)
向2-[(3-曱基丁?；?氨基噻吩-3-曱酸1r2(3.50g， 15.4mmol)中加 入節(jié)胺(3.38 g， 31.56 mmol)、 EDC (3.01 g, 15.7 mmol)、 HOAt (2.13 g， 15.7mmo1)、三乙胺(1.55 g， 15.4 mmol)，接著加入DMF。將該反應(yīng)在 55。C下攪拌過夜。在用乙醚稀釋后，將所述溶液用冰-水和鹽水洗滌， 硫酸鈉干燥并過濾。濃縮之后，將殘余物使用正相色譜條件純化(0%-> 30% EtOAc:Hx)從而得到黃色半固體狀的標(biāo)題化合物U。 ifi[ NMR (500 MHz, CDC13) S 1.03 (d， / = 7 Hz， 6H)， 2.25-2.28 (m， 1H)， 2.39 (d, / =5 Hz, 2H)， 4.64 (d， /= 5.5 Hz， 2H)， 6.21 (br s， 1H)， 6.77 (d， /= 5.5 Hz， 1H)， 6.93 (d， / = 6 Hz， 1H)， 7.33-7.40 (m， 5H)， 11.91 (br s， 1H). MS [M+H] C17H20N2O2S = 317.1。
歩驟3: 3-芐基-2-異丁基噻吩并2,3-dl嘧啶-4(3H)-酮(1-4)
向N-芐基-2-[(3-曱基丁?；?氨基]噻吩-3-甲酰胺(2.50 g， 7.90 mmol)在乙二醇(15 mL)中的溶液中加入NaOH (0.032 g， 0.790 mmol) 并將反應(yīng)加熱至130TC持續(xù)5h。在冷卻至室溫之后，將該反應(yīng)用EtOAc 稀釋并用鹽水洗滌兩次。將所述有機(jī)溶液用硫酸鈉干燥并使用正相條 件(0% -> 20% EtOAc:Hx)純化從而得到淺黃色粘稠油狀的標(biāo)題化合物 L4。 NMR (500 MHz, CDC13) 5 0.96 (d， / = 7 Hz， 6H), 2.26-2.32 (m， 1H)， 2.63 (d， / = 7 Hz， 2H)， 5.43 (br s， 2H)， 7.16 (br (!， /= 7.5 Hz， 2H)， 7.20 (d， / = 6 Hz， 1H)， 7.28-7.30 (m， 1H)， 7.32-7.35 (m， 2H)， 7.50 (d， / = 6.5 Hz， 1H). MS [M+H] C17H18N2OS = 299.1 。
步驟4: 3-芐基-5，6-二溴-2-(l-(R,S)-溴-2-曱基丙基)蓉吩并2,3-dl嘧咬-4(3H)畫酮(l誦5)
向3-節(jié)基-2-異丁基噻吩并[2,3-d嘧啶-4(3H)-酮(1.40 g， 4.69 mmol)在乙酸(2.0 mL)中的溶液中加入乙酸鉀(2.76 g， 28.1 mmol)和溴 (4.49 g, 28.14 mmol)。將該反應(yīng)加熱至100TC持續(xù)3h。在冷卻至室溫后， 在真空下除去溶劑。將殘余物溶于DCM，并過濾除去所述鹽。使用正 相條件(0%->25% EtOAc:Hx)純化所述殘余物從而得到棕色油狀的標(biāo) 題化合物W。 NMR (500 MHz, CDC13) S 0.53 (d， /= 6.5 Hz， 3H)， 1.10 (d， /= 6.5 Hz， 3H)， 2.65-2.70 (m， 1H)， 4.43 (d， J= 10.5 Hz， 1H)， 4.78-4.83
(m， 1H)， 6.22 (br d， J= 16 Hz， 1H)， 7.15-7.19 (m， 2H)， 7.30-7.37 (m， 3H). MS [M+H] C17H15Br3N2OS = 536.8。
歩驟5: 2-(l-(R，S)-疊氮基-2-曱基丙基)-3-辛基-5,6-二溴漆吩并〖2,3-dl嘧 咬畫4(3H)-酮(l畫6)
向3-節(jié)基-5，6-二溴-2-(1-溴-2-曱基丙基)噻吩并[2，3-(1]嘧啶-4(311)-酮(0.350 g， 0.654 mmol)在DMF (0.3 mL)中的溶液中加入疊氮化鈉 (0.047 g， 0.719 mmol)并將該反應(yīng)在室溫下攪拌lh。將所述反應(yīng)內(nèi)容物
硫酸鈉干燥。過濾并濃縮得到淺黃色油狀的標(biāo)題化合物1^。 NMR (500 MHz, CDC13) 5 0.54 (d， / = 7 Hz， 3H)， 1.05 (d, / = 6.5 Hz， 3H)， 2.53-2.56 (m， 1H)， 3.71 (m， 1H), 5.07 (m， 1H)， 5.80 (m， 1H)， 7.12-7.16 (m, 2H)， 7.30 7.35 (m， 3H). MS C17H15Br2N5OS = 496.1 。
步驟6: 2-(1-(11，8)-氨基-2-曱基丙基)-3-辛基漆吩并2,3-(11嘧咬-4(311)-酮(1-7)
向2-(1-疊氮基-2-甲基丙基)-3-芐基-5，6-二溴噻吩并[2，3-d]嘧啶-4(3H)-酮(0.325 g， 0.654 mmol)在乙醇中的溶液中加入10%碳載釔 (0.250 g)并將該反應(yīng)在經(jīng)由氣球的氫氣氛下攪拌2.5 h。將該反應(yīng)內(nèi)容 物經(jīng)由硅藻土墊過濾并濃縮從而得到灰白色泡沫狀的標(biāo)題化合物。 匪R (500 MHz， CDC13) 8 0.89 (d， / = 7 Hz， 3H)， 0.98 (d， /= 6.5 Hz， 3H)， 1.95 (m， 1H)， 4.64 (br s， 1H)， 5.35 (br (!, /= 16.5 Hz， 1H)， 5.62 (br d, / = 16.5 Hz, 1H)， 7.17 (m， 1H)， 7.29 (m， 1H)， 7.30-7.37 (m, 4H)， 7.49 (m, 1H). MSM+H] C17H19N3OS = 314.1。
歩驟7: 3-{叔丁基(二苯基)曱硅烷基1氧基卜2-氟代丙烷-1-醇
向裝有THF (20 mL)的燒瓶中加入氫化鈉(0.255 mg， 10.62 mmol)， 接著加入在THF中的2-氟代丙二醇(1.0 g， 10.62 mmol)。將該反應(yīng)攪拌 45分鐘，接著加入叔丁基二苯基甲硅烷基氯(2.92 g， 10.628 mmol)并強(qiáng) 烈攪拌另外45min，同時(shí)所述反應(yīng)逐漸接近室溫。將所述反應(yīng)混合物 傾入裝有1/3乙醚的分液漏斗中并用15% K2C03萃取，用鹽水洗滌， 硫酸鈉干燥。將所得到的透明油狀物用柱色鐠純化(Si02; 0%->30%
EtOAc:Hx)從而得到透明油狀的標(biāo)題化合物。NMR (500 MHz， CDC13) 5 1.56 (s， 9H)， 3.83-3.93 (m， 4H), 4.58-4.69 (d， J = 52 Hz， 1H)， 7.39-7.47 (m， 6H)， 7.72-7.73 (m， 4H) ppm. HRMS [M+H] C19H25F02Si 計(jì)算值333.1681 ，測量值333.1667。
步驟8: 3-{叔丁基(二苯基)甲硅烷基1氧基}-2-氟代丙醛
向在二氯曱烷(13.5 mL)中的3-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-2國氟代丙烷畫l-醇 (0.900 g, 2.707 mmol)加入Dess畫Martin高珙烷(1.72 g， 4.06mmo1)。將所述反應(yīng)攪拌40分鐘，然后用Na2S203 (2.0 M水溶液) 和飽和碳酸氫鈉幹滅。將該反應(yīng)分配入二氯甲烷和水并用硫酸鈉干燥 有機(jī)溶液。過濾所述有才幾溶液并濃縮從而得到透明油狀的標(biāo)題4匕合 物。NMR (500 MHz, CDC13) 8 1.05 (s， 9H)， 4.02-4.12 (m， 2H)， 4.75-5.07 (m， 1H)， 7.35-7.44 (m， 6H)， 7.64-7.69 (m， 4H)， 9.85-9.86 (m， 1H) ppm。
歩驟9: 3-芐基-2-U-(R,S)-(3-f叔丁基(二苯基)甲硅烷基l氣基V2 (R，S)-氟丙基)氨基卜2-曱基丙基l噻吩并『2,3-dl嘧啶-4(3H)-酮(1-8)
向2-(1 -氨基-2-甲基丙基)-3-卡基噻吩并[2，3-d嘧啶國4(3H)畫酮 (0.420 g， 1.34 mmol)及3-U叔丁基(二苯基)甲硅烷基氧基)-2-氟代丙醛 (0.443 g， 1.34 mmol)在DCE(6.5 mL)中的溶液中加入乙酸(0.25 mL， 3.35 mmol)、 4A分子篩(一滿刮勺)以及三乙酰氧基氫硼化鈉(0.426 g， 2.01 mmol)。 一'J、時(shí)后，將所述反應(yīng)用EtOAc稀釋并用水洗滌。將所述有 機(jī)溶液用MgS04干燥，過濾，并濃縮。使用正相條件(5%->8% EtOAc:Hx)對所述殘余物進(jìn)行色譜處理從而得到透明粘稠油狀的標(biāo)題 化合物。MS [M+HC36H42FN302SSi = 628.5。
歩驟10: ^1-(3-芐基-4-氧代-3，4-二氫塞吩并2，3-(11嘧咬-2-基)-2-(11,8)-曱基丙基卜N-(3-〖『叔丁基(二苯基)曱硅烷基l氣基卜2-(R，S)-氟丙基)-4-曱 基苯曱酰胺(1-9)
向3-芐基-2-{1-[(3-{[叔丁基(二苯基)甲硅烷基1氧基}-2-氟丙基)氨 基卜2-曱基丙基)塞吩并[2，3-d]嘧啶-4(3H)-酮(0.328 g， 0.522 mmol)在 DCM (3.0 mL)中的溶液中加入二異丙基乙胺(0.149 g， 1.14 mmol)、 4-
曱基苯曱酰氯(0.283 g， 1.82 mmol)以及催化量的二曱基氨基吡咬。將 所述反應(yīng)在55TC下攪拌1.5 h。將該反應(yīng)冷卻至室溫并用NaHC03處 理，用DCM萃取并使用正相條件(0%->20% EtOAc:Hx)純化從而得到 透明油狀的標(biāo)題化合物。HRMS [M+H] C44H48FN303SSi計(jì)算值 746.3243，測量值746.3248。
紐11: N-l-(3-芐基-4-氧代-3，4- 二氫噻吩并『2，3-dl嘧啶-2-基)-2陽 (R，S)-曱基丙基l-N-(2-(R，S)-氟-3-羥丙基)-4-曱基苯曱酰胺(1-10)
向N-[l-(3-節(jié)基-4-氧代-3，4-二氫噻吩并[2，3-d]嘧啶-2-基)-2-曱基丙 基]-N-(3-([叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}-2-氟丙基)-4-甲基苯甲酰胺 (0.250 g， 0.335 mmol)在THF (3.0 mL)中的溶液中加入氟化四丁基銨 (0.105 g， 0.402 mmol，在THF中的1M溶液)并將反應(yīng)攪拌0.5 h。在真 空下除去所述溶劑并使用正相條件(0%->50% EtOAc:Hx)純化從而得 到白色泡沫狀的標(biāo)題化合物。HRMSM+H] C28H30FN3O3S計(jì)算值 508.2065，測量值508.2069。
步驟12: 3-『〖1-(3-芐基-4-氣代-3，4-二氫噻吩并2，3-(11嘧啶-2-基)-2-(R，S)-曱基丙基K4-甲基笨甲?；?氨基卜2-(R，S)-氟丙基甲磺酸酯(l-11)
在OlC下向1\-[1-(3-千基-4-氧代-3，4-二氫噻吩并[2，3-(1嘧啶-2-基)-2-曱基丙基]-N-(2-氟-3-羥丙基)-4-曱基苯曱酰胺(0.1S0 g， (U95 mmol) 在DCM (1.5 mL)中的溶液中加入三乙胺(0.045 g， 0.443 mmol)，接著加 入甲磺酰氯(0.041 g， 0.355 mmol)并將反應(yīng)攪拌0.5h。將所述反應(yīng)用 NH4C1處理，用EtOAc稀釋，并用水洗滌。將所述有機(jī)溶液用辟u酸鈉 干燥，過濾，并濃縮從而得到透明油狀的標(biāo)題化合物。HRMS [M+H
C29H32FN305S2計(jì)算值586.1840，測量值586.1840。
歩驟13: N-(3-疊氮基-2-(R,S)-氟丙基)-N-l-(3-芐基-4-氧代-3，4-二氫噻 吩并『2，3-(11嘧啶-2-基)-2-(11，8)-曱基丙基卜4-曱基苯曱酰胺(1-12)
向3-[[l-(3-節(jié)基-4-氧代-3，4-二氫噻吩并[2，3-d]嘧啶-2-基)-2-曱基丙 基(4-曱基苯曱酰基)氨基]-2-氟丙基甲磺酸酯(0.170 g， 0.290 mmol)在 DMF (1.0 mL)中的溶液中加入疊氮化鈉(0.057 g， 0.871 mmol)并將反應(yīng) 加熱至601C過夜。將該反應(yīng)冷卻至室溫并傾入裝有乙醚和冰水的分液
漏斗中。將所述反應(yīng)用乙醚萃取兩次。用鹽水洗滌所述有機(jī)溶液，硫
酸鈉干燥，并過濾。濃縮該溶液得到綠色泡沫狀的標(biāo)題化合物。HRMS [M+H] C28H29FN602S計(jì)算值533.2130，測量值533.2141。
歩驟14: N-(3-氨基-2-(R,S)-氟丙基)-N-l-(3-芐基-4-氣代-3,4-二氫噻吩 并2,3-dl嘧啶-2-基)-2-(R，S)-曱基丙基卜4-甲基苯甲酰胺(1-13)
向經(jīng)冷卻(01C)的^(3-疊氮基-2-氟丙基)-1^-[1-(3-節(jié)基-4-氧代-3，4-二氫噻吩并[2，3-d]嘧啶-2-基)-2-甲基丙基]-4-甲基苯甲酰胺(0.155 g， 0.291 mmol)在THF中的溶液中加入三苯基膦(0.092 g, 0.349 mmol)
并攪拌該反應(yīng)直到起始的疊氮化物消耗掉。然后加入水(幾滴)并將反應(yīng) 加熱至601C持續(xù)2h。濃縮該溶液并將殘余物使用正相條件(0%->50% EtOAc:Hx，接著0%->10% MeOH(10% NH4OH):DCM )純化從而得到 淺綠色泡沫狀的以異構(gòu)體混合物形式的標(biāo)題化合物。NMR (500 MHz， CDC13) S 0.33-0.41 (br dd， / = 6 Hz， 5.5 Hz， 3H)， 0.96-1.02 (br dd， / = 7 Hz， 6.5 Hz， 3H)， 2.38 (s， 3H), 2.66-2.73 (m， 1H)， 3.38-3.60 (m， 3H)， 3.88-4.04 (m， 2H)， 5.13-5.17 (m， 1H)， 5.82-5.85 (m, 1H), 6.18-6.24 (m, 1H)， 7.22-7.23 (m， 2H)， 7.26-7.34 (m， 6H), 7.45-7.49 (m， 2H)， 7.54-7.60 (m, 1H). HRMS [M+HC28H31FN402S計(jì)算值507.2225 ， 測量值 507.2221。
N-(3-氨基-2-(R)-氟丙基)-N-[l-(3-芐基-4-氧代-3，4-二氫噻吩并[2，3-d嘧啶-2-基)-2-(R》曱基丙基-4-曱基苯甲酰胺，
N-(3-氨基-2-(R)-氟丙基)-N-[l-(3-芐基-4-氧代-3，4-二氫噻吩并[2，3-d]嘧啶-2-基)-2-(S)-曱基丙基]-4-曱基苯甲酰胺，
N-(3-氨基-2-(S)-氟丙基)-N-l-(3-芐基-4-氧代-3，4-二氫噻吩并[2，3-d
嘧啶-2-基)-2-(R)-甲基丙基]-4-曱基苯甲酰胺，以及
N-(3-氨基-2-(S)-氟丙基)-N-[l-(3-芐基-4-氧代-3，4-二氫噻吩并[2，3-d] 嘧咬-2-基)-2-(S)-曱基丙基-4-曱基苯曱酰胺
最初，使用以下條件經(jīng)由反相色鐠法分離兩個(gè)非對映異構(gòu)體的組 (外消旋)
反相條件
DeltaPak C18， 47mm x 300mm， 15微米
在H20(0.1% TFA)中的25%國>75% ACN (0.1%TFA)，經(jīng)歷45 min 梯度，以80 mL/min。
檢測器設(shè)置在260 nm。
然后經(jīng)由正相手性色譜法分離每一外消旋物 來自反相的第 一峰(非對映異構(gòu)體A及B): ChiralPak AD， 5cm X 50cm， 20微米
伴有DEA (lmL/min)的在EtOH中的60%->40% Hx，以80 mL/min ， 經(jīng)歷60 min的時(shí)間。
來自反相的第二峰(非對映異構(gòu)體C及D): ChiralPak AD， 5cm X 50cm， 20微米
伴有DEA (lmL/min)的在iPrOH中的70%->30% Hx，以80 mL/min ， 經(jīng)歷60 min的時(shí)間。
對于所有四個(gè)非對映異構(gòu)體的分析數(shù)據(jù) ChiralPak AD， 4.6mm X 250mm, 10微米
伴有DEA (ImL/min)的在iPrOH中的80%->20% Hx ， 以 lmIVmin。
檢測器設(shè)置在260nm。
保留時(shí)間(min)
非對映異構(gòu)體A(1-13A)--------- 17.307
非對映異構(gòu)體B(1-13B)--------- 11.497
非對映異構(gòu)體C(1-13C)--------- 16.460
非對映異構(gòu)體D(1-13D)--------- 15.43權(quán)利要求
1.式I的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體，其中a為0或1；b為0或1；n為0到2；p為0到2；r為0或l；s為0或1；X和Y中的一個(gè)是S以及X和Y中的另一個(gè)是CH；R1選自氫和氟；R2選自1)H，2)C1-C10烷基，3)芳基，4)C2-C10烯基，5)C3-C8環(huán)烷基，6)C2-C10炔基，和7)雜環(huán)基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、環(huán)烷基和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R5的取代基取代；R3獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)(C＝O)aObC2-C10烯基，4)(C＝O)aObC2-C10炔基，5)CO2H，6)鹵素，7)OH，8)ObC1-C6全氟烷基，9)(C＝O)aNR6R7，10)CN，11)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，12)(C＝O)aOb雜環(huán)基，13)SO2NR6R7，和14)SO2C1-C10烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、環(huán)烷基和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R5的取代基取代；R4獨(dú)立地選自1)H2)(C＝O)aObC1-C10烷基，3)(C＝O)aOb芳基，4)C2-C10烯基，5)C2-C10炔基，6)(C＝O)aOb雜環(huán)基，7)CO2H，8)鹵素，9)CN，10)OH，11)ObC1-C6全氟烷基，12)Oa(C＝O)bNR6R7，13)氧代，14)CHO，15)(N＝O)R6R7，16)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，17)SO2C1-C10烷基，和18)SO2NR6R7，所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R5的取代基取代；R5選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)(C0-C6)亞烷基-S(O)mRa，4)氧代，5)OH，6)鹵素，7)CN，8)(C＝O)rOs(C2-C10)烯基，9)(C＝O)rOs(C2-C10)炔基，10)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，13)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，14)C(O)Ra，15)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra，16)C(O)H，17)(C0-C6)亞烷基-CO2H，和18)C(O)N(Rb)2，所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基任選被最多三個(gè)取代基取代，所述取代基選自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代和N(Rb)2；R6和R7獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基和炔基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R5的取代基取代，或R6和R7可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為4-7元環(huán)并且除了所述氮之外還任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)選自R5的取代基取代；Ra為(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基；和Rb為H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NRa2、(C1-C6)烷基-NH2、(C1-C6)烷基-NHRa、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。
2.式II的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體，其中a為0或1; b為0或1; p為0到2; r為0或1; s為0或1;X和Y中的一個(gè)是S以及X和Y中的另一個(gè)是CH;R2選自1) H，2) C廣do烷基，所述烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自W的取代基取代； W獨(dú)立地選自1) (C-O)aObC廣C!O烷基，2) (C-0)aOb芳基，3) 鹵素，4) OH，5) Obd-C6全氟烷基，6) (C=0)aNR6R7，7) CN,8) (C=0)aOhC3-C8環(huán)烷基，9) (C-0)aOb雜環(huán)基，10) SO2NR6R7，和11) S02d-Cn)烷基，所述烷基、芳基、環(huán)烷基和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)選自RS的取代基取代；W獨(dú)立地選自1) H,2) (C-0)aObd-do烷基，3) (C-0)aOb芳基，4) 鹵素，5) OH，6) Obd-C6全氟烷基，7) Oa(C…)bNRbR，8) (C-0)aObOC8環(huán)烷基，9) S02d-Cm烷基，和10) SO2NR6R7，所述烷基、芳基和環(huán)烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R5的取代基取代；R5選自1) (C-0)rOs(d-d。)烷基，2) Or(d-C3)全氟烷基，3) (Co-C6)亞烷基-S(0)加Ra，4) 氧代，5) OH，6) 鹵素，7) CN，8) (C-0)rOs(C2國d。)烯基，9) (00)rOs(CVdo)炔基，10) (C-0)rOs(C3國C6)環(huán)烷基，11) (00)rOs(QrC6)亞烷基-芳基，12) (00)rOs(Q-C6)亞烷基-雜環(huán)基，13) (00)rOs(QrC6)亞烷基-N(Rb)2，14) C(0)Ra，15) (Co-C6)亞烷基-C02Ra，16) C(0)H，17) (CVC6)亞烷基-C02H，和18) C(0)翠b)2，所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基任選被最多三個(gè)取代基取代，所述取代基選自Rb、 OH、 (d-C6)烷氧基、鹵素、C02H、 CN、 0(C-0)d-C6烷基、氧代和翠、； R6和R7獨(dú)立i也選自1) H，2) (C-0)ObC廣do烷基，3) (C=0)ObC3-C8環(huán)烷基，4) (C=0)Ob芳基，5) (C二0)Ob雜環(huán)基，6) Ci-Ci0坑基，7) 芳基，8) C2-Cm烯基，9) C2-C1G炔基，10) 雜環(huán)基，11) CVC8環(huán)烷基，12) S02Ra，和13) (C=0)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基和炔基任選被一個(gè)或多 個(gè)選自RS的取代基取代，或R6和R7可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為4-7元環(huán)并且除了 所述氮之外還任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、 O和S的雜原子的 單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)選自RS的取 代基取代；Ra為(d-C6)烷基、(CVC6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基；和Rb為H、 (d-C6)烷基、(C廣C6)烷基-NRa2、 (C廣C6)烷基-NH2、 (d-C6)烷基-NHRa、芳基、雜環(huán)基、(CVC6)環(huán)烷基、(C=0)Od-C6烷基、(C-0)d-C6烷基或S(0)2Ra。
3.式III的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物<formula>formula see original document page 8</formula>或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體，其中a為O或1; b為O或1; p為0到2; r為O或l; s為0或1;X和Y中的一個(gè)是S以及X和Y中的另一個(gè)是CH;R2選自1) H，2) Crd。烷基，所述烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自W的取代基取代； RS獨(dú)立地選自1) (C-0)aObd-d。烷基，2) (C二0)aOb芳基，3) 鹵素，4) OH，5) ObCVC6全氟烷基，6) (C=0)aNR6R7，7) CN，8) (C=0)aObC3-C8環(huán)烷基，9) (C二0)aOb雜環(huán)基，10) SO2NR6R7,和11) S02d-d。烷基，所述烷基、芳基、環(huán)烷基和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)選自115的取代基取代；R4獨(dú)立i也選自1) (C-O)aObd醫(yī)do烷基，2) (C:0)aOb芳基，3) 鹵素，4) OH，5) ObC廣C6全氟烷基，6) Oa(C=0)bNR6R7， 7) (C=0)aObC3-Cs環(huán)烷基，8) S02d-Cu)烷基，和9) S02NR6R7，所述烷基、芳基和環(huán)烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R5的取代基取代；R5選自1) (C-0)rOs(Crd。)烷基，2) Or(d-C3)全氟烷基，3) (Co畫C6)亞烷基隱S(0)mRa，4) 氧代，5) OH，6) 鹵素，7) CN，8) (C-0)rOs(C2-dn)烯基，9) (C-0)rOs(C2-d。)炔基，10) (C-0)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，1 l)(C=0)rOs(CG-C6)i烷基-芳基，12) (C-0)rOs(QrC6)亞烷基-雜環(huán)基，13) (00)rOs(Co-C6)亞烷基-N(Rb)2，14) C(0)R 15) (Co-C6)亞烷基-C02Ra，16) C(0)H，17) (CVC6)亞烷基-C02H，和18) C(0)翠b)2，所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基任選被最多三個(gè) 取代基取代，所述取代基選自Rb、 OH、 (d-C6)烷氧基、卣素、C02H、 CN、 0(C-0)d-C6烷基、氧代和N(Rb)2;116和R7獨(dú)立地選自1) H，2) (C-0)ObC廣do烷基，3) (C:0)ObC3-C8環(huán)烷基，4) (C=0)Ob芳基， 5) (C-0)0b雜環(huán)基，6) Ci-C10烷基，7) 芳基，8) C2-C10烯基，9) C2-C1G炔基，10) 雜環(huán)基，11) C3-Q環(huán)烷基，12) S02Ra，和13) (C=0)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基和炔基任選被一個(gè)或多 個(gè)選自RS的取代基取代，或R6和R7可與它們所連接的氮一起形成每個(gè)環(huán)為4-7元環(huán)并且除了 所述氮之外還任選含有一個(gè)或兩個(gè)另外的選自N、 O和S的雜原子的 單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選被一個(gè)或多個(gè)選自RS的取代基取代；Ra為(d-C6)烷基、(CVC6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基；和Rb為H、 (C廣C6)烷基、(d-C6)烷基-NR、、 (d-C6)烷基-NH2、 (d-C6)烷基-NHRa、芳基、雜環(huán)基、(CVC6)環(huán)烷基、(C=0)Od-C6烷基、(C=0)d-C6烷基或S(0)2Ra。
4. 一種化合物，其是N-(3-氨基-2-(R，S)-氟代丙基)-N-l-(3-爺基-4-氧代-3，4-二氫噻吩并 [2，3-d嘧啶-2-基)-2-(R,S)-曱基丙基-4-甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基J-(R)-氟代丙基)-N- [1 -(3-芐基-4-氧代-3，4- 二氫噻吩并 [2，3-d嘧啶-2-基)-2-(R卜甲基丙基卜4-甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基-2-(R)-氟代丙基)-N-[l-(3-芐基-4-氧代-3，4-二氫噻吩并 [2，3-d嘧啶-2-基)-2-(S)-甲基丙基-4-甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基-2-(S)-氟代丙基)-N-[l-(3-節(jié)基-4-氧代-3，4-二氫噻吩并 [2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(R)-曱基丙基-4-甲基苯曱酰胺；以及N-p-氨基-:2-(S)-氟代丙基)-N-[l-p-芐基-4-氧代J，4-二氬噻吩并 [2，3-d]嘧啶-2-基)-2-(S)-甲基丙基-4-曱基苯甲酰胺；或其藥學(xué)上可接受的鹽。
5. —種包含根據(jù)權(quán)利要求l的化合物和藥學(xué)上可接受的載體的藥 物組合物。
6. —種包含根據(jù)權(quán)利要求3的化合物和藥學(xué)上可接受的載體的藥 物組合物。
7. —種使用根據(jù)權(quán)利要求1的化合物制備可用于在需要所述治療 的哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防癌癥的藥物的方法。
8. —種使用根據(jù)權(quán)利要求l的化合物制備可用于在需要所述治療 的哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防癌癥的藥物的方法，其中所述癌癥選自組織 細(xì)胞性淋巴瘤、肺腺癌、小細(xì)胞肺癌、胰腺癌、惡性膠質(zhì)瘤和乳腺癌。
9. 一種使用根據(jù)權(quán)利要求l的化合物制備可用于在需要所述治療 的哺乳動(dòng)物中調(diào)節(jié)有絲分裂紡錘體形成的藥物的方法。
10. —種在需要所述治療的哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防癌癥的方法，其 包括對所述哺乳動(dòng)物給用治療有效量的權(quán)利要求l的化合物。
11. 根據(jù)權(quán)利要求10的治療癌癥或預(yù)防癌癥的方法，其中所述癌 癥選自腦癌、泌尿生殖道癌、淋巴系統(tǒng)癌、胃癌、喉癌和肺癌。
12. 根據(jù)權(quán)利要求10的治療或預(yù)防癌癥的方法，其中所述癌癥選 自組織細(xì)胞性淋巴瘤、肺腺癌、小細(xì)胞肺癌、胰腺癌、惡性膠質(zhì)瘤和 乳腺癌。
13. —種治療癌癥的方法，其包括給用治療有效量的權(quán)利要求l的 化合物并結(jié)合放射治療。
14. 一種治療或者預(yù)防癌癥的方法，其包括聯(lián)合給用治療有效量的 權(quán)利要求1的化合物和選自以下的化合物雌激素受體調(diào)節(jié)劑，雄激 素受體調(diào)節(jié)劑，類視色素受體調(diào)節(jié)劑，細(xì)胞毒/細(xì)胞生長抑制劑，抗增 殖藥，異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑，HMG-CoA還原酶抑制劑， HIV蛋白酶抑制劑，逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，血管生成抑制劑，PPAR-Y激動(dòng) 劑，PPAR-5激動(dòng)劑，固有多藥耐藥性抑制劑，抗吐劑，用于治療貧 血的藥物，用于治療嗜中性白細(xì)胞減少癥的藥物，免疫促進(jìn)藥，細(xì)胞 增殖和生存信號抑制劑，干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的藥物，和細(xì)胞程序死亡 誘導(dǎo)劑。
15. —種治療癌癥的方法，其包括聯(lián)合給用治療有效量的權(quán)利要求 l的化合物、放射治療和選自以下的化合物雌激素受體調(diào)節(jié)劑，雄激 素受體調(diào)節(jié)劑，類視色素受體調(diào)節(jié)劑，細(xì)胞毒/細(xì)胞生長抑制劑，抗增 殖藥，異戊二烯基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑，HMG-CoA還原酶抑制劑， HIV蛋白酶抑制劑，逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，血管生成抑制劑，PPAR-Y激動(dòng) 劑，PPAR-5激動(dòng)劑，固有多藥耐藥性抑制劑，抗吐劑，用于治療貧 血的藥物，用于治療嗜中性白細(xì)胞減少癥的藥物，免疫促進(jìn)藥，細(xì)胞 增殖和生存信號抑制劑，干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的藥物，和細(xì)胞程序死亡 誘導(dǎo)劑。
16. —種治療或預(yù)防癌癥的方法，其包括給用治療有效量的權(quán)利要 求1的化合物和紫杉醇或曲妥珠單抗。
17. —種治療或預(yù)防癌癥的方法，其包括聯(lián)合給用治療有效量的權(quán) 利要求1的化合物和極光激酶抑制劑。
18. —種治療或者預(yù)防癌癥的方法，其包括聯(lián)合給用治療有效量的 權(quán)利要求1的化合物和絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑。
19. 一種調(diào)節(jié)有絲分裂紡錘體形成的方法，其包括給用治療有效量的權(quán)利要求l的化合物。
20. —種抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白KSP的方法，其包括給用治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及氟化2-氨基甲基噻吩并嘧啶酮化合物，其可用于治療細(xì)胞增殖疾病、用于治療與KSP驅(qū)動(dòng)蛋白活性有關(guān)的病癥、以及用于抑制KSP驅(qū)動(dòng)蛋白。本發(fā)明還涉及包含這些化合物的組合物、以及使用它們治療哺乳動(dòng)物的癌癥的方法。
文檔編號C07D333/38GK101107253SQ200680002540
公開日2008年1月16日 申請日期2006年1月13日 優(yōu)先權(quán)日2005年1月19日
發(fā)明者G·D·哈特曼, P·J·科爾曼 申請人:默克公司