專(zhuān)利名稱(chēng)：一種穿心蓮內(nèi)酯的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種穿心蓮內(nèi)酯的制備方法，特別是涉及用大孔樹(shù)脂分離純化穿心蓮內(nèi)酯的方法。
背景技術(shù)：
穿心蓮內(nèi)酯，異名穿心蓮乙素結(jié)構(gòu)式如下 分子式C20H30O5分子量350.44穿心蓮內(nèi)酯系自爵床科植物芽心蓮中提取得到的二萜內(nèi)酯類(lèi)化合物，是中藥穿心蓮的主要有效成分之一，具有清熱解毒、涼血消腫等功能。對(duì)細(xì)菌性與病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊療效，被譽(yù)為天然抗生素藥物?，F(xiàn)代藥理研究表明，穿心蓮內(nèi)酯及其衍生物(如脫水穿心蓮內(nèi)酪琥珀酸半酪、穿琥寧注射液、蓮必治注射液、病毒凈滴眼液、復(fù)方穿琥寧涂膜劑等)具有消炎抗菌、抗病毒感染、抗腫瘤、抗心血管疾病、免疫刺激、保肝利膽及抗生育等功能。
傳統(tǒng)穿心蓮內(nèi)酯的制備采用乙醇提取，濃縮，水溶液加氯仿等有機(jī)溶劑萃取后，再用丙酮結(jié)晶處理。工業(yè)上萃取難度大，收率低，并引入較多的有機(jī)殘留物。本發(fā)明采用大孔樹(shù)脂吸附，用乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液用硅膠脫色后，丙酮結(jié)晶，得到純度高的穿心蓮內(nèi)酯，提高了收率。其制備過(guò)程中無(wú)劇毒溶劑使用，環(huán)保且保證安全性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種穿心蓮內(nèi)酯的制備方法，該方法包括以下步驟
步驟一、穿心蓮用乙醇提取步驟二、乙醇提取液上大孔樹(shù)脂，收集濾液，濃縮，乙醇洗滌沉淀，過(guò)濾。
步驟三、濾液上大孔樹(shù)脂乙醇洗脫，收集洗脫液。
步驟四、洗脫液中加入硅膠濃縮至干，丙酮洗滌，過(guò)濾，濃縮，干燥。
其中，步驟一中乙醇提取采用75-85％的乙醇；步驟二中的大孔樹(shù)脂為AB-8型大孔樹(shù)脂；步驟三中的大孔樹(shù)脂為AB-8型大孔樹(shù)脂；步驟四中加入的硅膠為200-300目的硅膠。
優(yōu)選的是以下步驟步驟一、乙醇提取取穿心蓮400g，粉碎成粗粉或切片(0.3mm/段)，加8倍量75-85％乙醇回流提取2次，每次1小時(shí)；過(guò)濾，合并濾液，放冷，備用。
步驟二、除雜上AB-8型大孔樹(shù)脂(樹(shù)脂體積400ml)，流速2-2.5BV/h。收集濾液，70℃以下減壓濃縮至醇濃度為20-28％，過(guò)濾，同濃度乙醇洗滌沉淀，與濾液混合至體積為400ml，備用。
步驟三、分離取濾液，上AB-8型大孔樹(shù)脂(樹(shù)脂體積400ml)流速1-1.5BV/h，用4倍柱體積30％乙醇沖洗，再用35-40％乙醇6倍量，洗脫，收集洗脫液。
步驟四、純化加入200-300目硅膠8g，70℃以下減壓濃縮至干，丙酮洗滌3次，每次100ml，超聲溶解，過(guò)濾，合并濾液，60℃以下減壓濃縮至干，丙酮洗滌沉淀3-4次，5-10ml/次，沉淀干燥，即得。
經(jīng)過(guò)本發(fā)明的提取方法得到的產(chǎn)物，經(jīng)過(guò)含量測(cè)定，證明純度極高。
純度檢測(cè)方法如下儀器及試藥 甲醇—美國(guó)fisher公司；蒸餾水色譜條件 甲醇—水(50∶50)；檢測(cè)波長(zhǎng)，225nm；理論塔板數(shù)以穿心蓮內(nèi)酯計(jì)不得低于4000。
對(duì)照品溶液制備 取經(jīng)105℃干燥至恒重的穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品6mg，精密稱(chēng)定，加甲醇溶解，并定量稀釋制成每1ml含穿心蓮內(nèi)酯約60μg的溶液。
樣品溶液制備 取穿心蓮內(nèi)酯樣品6-10mg，精密稱(chēng)定，置100ml量瓶，加甲醇溶解，并定量稀釋至刻度。
測(cè)定法 分別取供試品溶液及對(duì)照品溶液進(jìn)樣5ul，外標(biāo)法計(jì)算，即得。
3批測(cè)定結(jié)果

本方法最終產(chǎn)物含穿心蓮內(nèi)酯純度不低于98％。
本發(fā)明的提取工藝還可以采用滲漉、溫浸、超聲等提取方式；提取溶劑用50-95％乙醇、低濃度丙酮或甲醇均可，乙醇適宜濃度75-85％。提取液濃縮溫度不能高于70℃，優(yōu)選為65℃；樹(shù)脂量本發(fā)明的生藥∶樹(shù)脂的比例可以1∶1，優(yōu)選的是樹(shù)脂量大于生藥量；提取液直接上AB-8樹(shù)脂；洗脫溶劑濃度濃度低于35％，以30％為宜，體積控制在4倍量以下；柱層析硅膠200-300目，100-200目亦可；
具體實(shí)施例方式以下通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不作為對(duì)本發(fā)明的限制。
實(shí)施例1用乙醇提取取穿心蓮400g，粉碎成粗粉或切片(0.3mm/段)，加8倍量75％乙醇回流提取2次，每次1小時(shí)；過(guò)濾，合并濾液，放冷，備用。
分離、純化乙醇提取液上AB-8型大孔樹(shù)脂(樹(shù)脂體積400ml)，流速2-2.5BV/h。收集濾液，70℃以下減壓濃縮至醇濃度為20-28％，過(guò)濾，同濃度乙醇洗滌沉淀，與濾液混合至體積為400ml，備用。取濾液，上AB-8型大孔樹(shù)脂(樹(shù)脂體積400ml)流速1-1.5BV/h，用4倍柱體積30％乙醇沖洗，再用35-40％乙醇6倍量，洗脫，收集洗脫液，加入200-300目硅膠8g，70℃以下減壓濃縮至干，丙酮洗滌3次，每次100ml，超聲溶解，過(guò)濾，合并濾液，60℃以下減壓濃縮至干，丙酮洗滌沉淀3-4次，5-10ml/次，沉淀干燥，即得。
純度檢測(cè)儀器及試藥 甲醇—美國(guó)fisher公司；蒸餾水色譜條件 甲醇—水(50∶50)；檢測(cè)波長(zhǎng)，225nm；理論塔板數(shù)以穿心蓮內(nèi)酯計(jì)不得低于4000。
對(duì)照品溶液制備 取經(jīng)105℃干燥至恒重的穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品6mg，精密稱(chēng)定，加甲醇溶解，并定量稀釋制成每1ml含穿心蓮內(nèi)酯約60μg的溶液。
樣品溶液制備 取經(jīng)穿心蓮內(nèi)酯樣品6-10mg，精密稱(chēng)定，置100ml量瓶，加甲醇溶解，并定量稀釋至刻度。
測(cè)定法 分別取供試品溶液及對(duì)照品溶液進(jìn)樣5ul，外標(biāo)法計(jì)算，即得。
測(cè)定結(jié)果3批

實(shí)施例2用乙醇提取取穿心蓮400g，粉碎成粗粉或切片(0.3mm/段)，加8倍量85％乙醇回流提取2次，每次1小時(shí)；過(guò)濾，合并濾液，放冷，備用。
分離、純化乙醇提取液上AB-8型大孔樹(shù)脂(樹(shù)脂體積400ml)，流速2-2.5BV/h。收集濾液，70℃以下減壓濃縮至醇濃度為20-28％，過(guò)濾，同濃度乙醇洗滌沉淀，與濾液混合至體積為400ml，備用。取濾液，上AB-8型大孔樹(shù)脂(樹(shù)脂體積400ml)流速1-1.5BV/h，用4倍柱體積30％乙醇沖洗，再用35-40％乙醇6倍量，洗脫，收集洗脫液，加入200-300目硅膠8g，70℃以下減壓濃縮至干，丙酮洗滌3次，每次100ml，超聲溶解，過(guò)濾，合并濾液，60℃以下減壓濃縮至干，丙酮洗滌沉淀3-4次，5-10ml/次，沉淀干燥，即得。
權(quán)利要求
1.一種穿心蓮內(nèi)酯的制備方法，經(jīng)過(guò)穿心蓮用乙醇提取的步驟；其特征在于，還經(jīng)過(guò)乙醇提取液上大孔樹(shù)脂的步驟。
2.權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于，經(jīng)過(guò)以下步驟步驟一、穿心蓮用乙醇提取；步驟二、乙醇提取液上大孔樹(shù)脂，收集濾液，濃縮，乙醇洗滌沉淀，過(guò)濾；步驟三、濾液上大孔樹(shù)脂乙醇洗脫，收集洗脫液；步驟四、洗脫液中加入硅膠濃縮至干，丙酮洗滌，過(guò)濾，濃縮，干燥。
3.權(quán)利要求2的制備方法，其特征在于，步驟一中乙醇提取采用75-85％的乙醇；步驟二中的大孔樹(shù)脂為AB-8型大孔樹(shù)脂；步驟三中的大孔樹(shù)脂為AB-8型大孔樹(shù)脂；步驟四中加入的硅膠為200-300目的硅膠。
4.權(quán)利要求3的制備方法，其特征在于，步驟一是取穿心蓮400g，粉碎成粗粉或切片，加8倍量75-85％乙醇回流提取2次，每次1小時(shí)；過(guò)濾，合并濾液，放冷，備用；步驟二是提取液上AB-8型大孔樹(shù)脂，流速2-2.5BV/h，收集濾液，70℃以下減壓濃縮至醇濃度為20-28％，過(guò)濾，同濃度乙醇洗滌沉淀，洗滌液與濾液混合至體積為400ml，備用；步驟三是取濾液，上AB-8型大孔樹(shù)脂流速1-1.5BV/h，用4倍柱體積30％乙醇沖洗，再用35-40％乙醇6倍量，洗脫，收集洗脫液。步驟四、是洗脫液中加入200-300目硅膠8g，70℃以下減壓濃縮至干，丙酮洗滌3次，每次100ml，超聲溶解，過(guò)濾，合并濾液，60℃以下減壓濃縮至干，丙酮洗滌沉淀3-4次，5-10ml/次，沉淀干燥。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種穿心蓮內(nèi)酯的制備方法，特別是涉及用大孔樹(shù)脂分離純化穿心蓮內(nèi)酯的方法。
文檔編號(hào)C07D307/60GK1935798SQ20051010551
公開(kāi)日2007年3月28日 申請(qǐng)日期2005年9月23日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月23日
發(fā)明者張文生 申請(qǐng)人:天津天士力制藥股份有限公司