一種羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于藥物口服遞送的納米微粒固定化膠球的制備技術，即一種羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球的制備方法，通過內部離子交聯(lián)法將水溶液中均勻分散的羧甲基殼聚糖納米微粒固定于多層多孔海藻酸鈉膠球中。該多層球具有耐胃酸和腸道崩解的特性，在腸道中性及弱堿性環(huán)境中迅速釋放出羧甲基殼聚糖納米微粒。不僅能夠有效克服羧甲基殼聚糖納米微粒在胃酸條件下不穩(wěn)定的缺陷，更能夠延長負載藥物在腸道中的釋放時間，提高藥物的口服遞送效率?？捎糜卺t(yī)用生物材料和藥物載體，具有良好的研究和開發(fā)利用前景。
【專利說明】
一種羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球的制備方法
技術領域
[0001]本發(fā)明屬于生物材料領域的一種羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球的制備技術。
【背景技術】
[0002]殼聚糖是一種天然高分子聚糖，因其具有優(yōu)良的生物相容性、生物可降解性、血液及組織相容性，而廣泛應用于生物醫(yī)藥領域，是一種具有廣泛應用前景的新型藥物載體。羧甲基殼聚糖是一種水溶性殼聚糖衍生物，具有許多特性，如抗菌抗感染、抗病毒等，是一種兩性聚電解質，在醫(yī)藥方面有多種應用，也是近年來研究得較多的殼聚糖衍生物之一。海藻酸鈉是一種天然的陰離子多糖，強酸性條件下穩(wěn)定而在弱酸、生理中性及弱堿性條件下解體，可用作胃酸保護材料應用到口服藥物載體制備中。在現(xiàn)有的研究發(fā)明中，已經報道了一種羧甲基殼聚糖復合納米膠囊的制備方法，通過離子交聯(lián)、聚合物凝聚兩步法合成羧甲基殼聚糖復合納米膠囊。該方法制備的羧甲基殼聚糖復合納米膠囊，具有核殼結構，有利于藥物包載;表面電位為正，有利于細胞的吞噬;具有PH敏感性，有利于響應體內微環(huán)境變化。但是，在口服過程中，所制備的羧甲基殼聚糖復合納米膠囊在十二指腸中就會釋放出載藥納米微粒，這必然導致藥物的提前釋放，大大降低藥物的應用效果。如何提高羧甲基殼聚糖復合納米膠囊的結構穩(wěn)定性，延長復合納米膠囊釋放納米微粒的時間，是本發(fā)明所解決的關鍵問題。本發(fā)明不僅將羧甲基殼聚糖納米微粒通過層層包被技術固定于多孔多層海藻酸鈉膠球中來提高納米微粒的酸耐受性。同時，利用化學反應，使核心球中產生多孔結構，進而制備具有內部交聯(lián)結構的核心球。該羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球能在冷凍干燥后長期存放，在腸道中性及弱堿性條件下才能釋放出結構完整的納米微粒，因而能延長納米微粒的解體時間，能夠顯著增強羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球作為口服藥物輸送載體的臨床應用性。

【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球的制備方法，是在已有技術發(fā)明專利基礎上的延伸(申請?zhí)?201210101510.9)，以拓展已有技術的應用范圍。
[0004]本發(fā)明通過微孔滴注，離子交聯(lián)和層層包被技術合成目標產物即羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球。其具體步驟是:
1)羧甲基殼聚糖納米微粒的制備:參照專利(一種羧甲基殼聚糖復合納米膠囊的制備方法，申請?zhí)?201210101510.9)制備羧甲基殼聚糖納米微粒；
2)核心球的制備:將羧甲基殼聚糖納米微粒在水相中分散，超聲后，加入到含有碳酸鈣的海藻酸鈉水溶液(1.5 - 2.5 %(w/v))中混勻，制備成納米凝膠。將該混合溶液用注射器滴入緩慢攪拌的0.15 - 0.25 %(w/v)的鹽酸溶液中，待核心球全部浮起后濾去液體，用蒸餾水漂洗3次，得到多孔核心球；3)多層球的制備:將核心球浸沒于1.5-2.5 %(w/v)的海藻酸鈉水溶液中，靜置，濾除多余液體，將膠球放入含有表面活性劑吐溫-80和司班-80的液體石蠟中，其中表面活性劑與液體石錯的體積比為〇.5-1:100。500印111/111；[11攪拌15 111；[11，加入1-3%(￥八)的氯化|丐溶液，其中氯化鈣溶液與液體石蠟的體積比為1:1，500 rpm/min攪拌15 min，蒸餾水漂洗3次，得到單層包被多層球；4)重復步驟3)，得到所需層數的羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球，其中層數=重復步驟3)次數，可重復1 -5次，凍干后即得本發(fā)明產品。
[0005]本發(fā)明具有操作簡便、制備技術工藝簡單以及制造成本低廉等優(yōu)點，可以通過改變海藻酸鈉外殼的層數來控制本產品的抵抗胃酸能力，所形成的羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球為規(guī)則球形。本發(fā)明的重要意義在于形成的羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球不僅能夠耐受胃部的低pH環(huán)境，僅在到達小腸的中性或弱堿性環(huán)境下才釋放出納米微粒，而且能夠很大程度上延長納米微粒的解體時間，因此可以作為口服藥物的輸送載體，該項發(fā)明技術具有良好的開發(fā)應用潛力。以下結合附圖和實施例對本發(fā)明做出進一步說明?！靖綀D說明】
[0006]圖1為3層包被的羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球橫切面掃描電鏡照片。
[0007]圖2為羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球的核心球掃描電鏡照片。
[0008]圖3為包載阿霉素的3層包被羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球的釋藥圖片。【具體實施方式】
[0009]1 )參照專利(一種羧甲基殼聚糖復合納米膠囊的制備方法，申請?zhí)? 201210101510.9)制備羧甲基殼聚糖納米微粒；2)將羧甲基殼聚糖納米微粒超聲(功率:150 W，時間:5-10 min)分散后，加入到含有碳酸鈣的海藻酸鈉水溶液(1.5-2.5 %(w/v))中混勻制備成納米凝膠，將該混合溶液用注射器滴加至緩慢攪拌〇.15-0.25 %(w/v)的鹽酸溶液中，待核心球全部浮起后濾去液體，蒸餾水漂洗3次，得到多孔核心球；3)將核心球浸沒于1.5-2.5 %(w/v)的海藻酸鈉水溶液中，靜置，濾除多余液體，將膠球放入含有表面活性劑的液體石蠟中，其中表面活性劑與液體石蠟的體積比為0.5-1:100， 攪拌懸浮，加入濃度為1-3 %(w/v)的氯化鈣溶液，攪拌固化，濾去液體，蒸餾水漂洗3次，得到單層包被核心球；4)重復步驟3)得到所需層數的羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球，凍干后即得本發(fā)明產品。
[0010]實施例1將5 mL，0.2 %(w/v)的羧甲基殼聚糖納米微粒150 W超聲5 min分散，加入到5 mL含有0.2 g碳酸鈣的海藻酸鈉溶液(1.5 %(w/v))中混勻，將混合液用注射器滴入緩慢攪拌的
0.15 %(w/v)的鹽酸溶液中。待核心球全部浮起，用蒸餾水漂洗3次，得到多孔核心球。將核心球浸沒于1.5 %(w/v)的海藻酸鈉溶液中，靜置5 min，濾去多余液體，將膠球放入0.5 mL吐溫-80，0.5 mL司班-80與100 mL液體石錯的混合液中，500 rpm/min攪拌15 min，加入100mL濃度為I %(w/v)的氯化鈣溶液，500 rpm/min繼續(xù)攪拌15 min，蒸餾水漂洗3次，得到包被核心球，凍干，即可得到單層包被本產品。
[0011]實施例2
將5 mL，0.3 %(w/v)的羧甲基殼聚糖納米微粒150 W超聲8 min分散，加入到5 mL含有
0.2 g碳酸鈣的海藻酸鈉溶液(2 %(w/v))中混勻，將混合液用注射器滴入緩慢攪拌的0.2 %(w/v)的鹽酸溶液中。待核心球全部浮起，用蒸餾水漂洗3次，得到多孔核心球。將核心球浸沒于2 %(w/v)的海藻酸鈉溶液中，靜置5 min，濾去多余液體，將膠球放入0.8 mL吐溫-80，
0.8 mL司班-80與100 mL液體石錯的混合液中，500 rpm/min攬摔15 min，加入100 mL濃度為2 %(w/v)的氯化鈣溶液，500 rpm/min繼續(xù)攪拌15 min，蒸餾水漂洗3次，得到包被核心球，凍干，重復包被3次，即可得到3層包被本產品。
[0012]實施例3
將5 mL，0.4 %(w/v)的羧甲基殼聚糖納米微粒150 W超聲10 min分散，加入到15 mL含有0.2 g碳酸鈣的海藻酸鈉溶液(2.5 %(w/v))中混勻，將混合液用注射器滴入緩慢攪拌的
0.25 %(w/v)的鹽酸溶液中。待核心球全部浮起，用蒸餾水漂洗3次，得到多孔核心球。將核心球浸沒于2.5 %(w/v)的海藻酸鈉溶液中，靜置5 min，濾去多余液體，將膠球放入1.0 mL吐溫-80，1.0 mL司班-80與100 mL液體石錯的混合液中，500 rpm/min攪拌15 min，加入100mL濃度為3 %(w/v)的氯化鈣溶液，500 rpm/min繼續(xù)攪拌15 min，蒸餾水漂洗3次，得到包被核心球，凍干，重復包被5次，即可得到5層包被本產品。
【主權項】
1.一種羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球的制備方法，其特征在于 通過內部離子交聯(lián)法將羧甲基殼聚糖納米微粒固定于多孔多層海藻酸鈉膠球中，凍干后獲 得羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球，具體為:(1)核心球的制備:將羧甲基殼聚糖納米微粒在水相中分散，加入到含有碳酸鈣的 1.5-2.5 %(w/v)海藻酸鈉水溶液中攪拌混勻后，將該混合溶液加入到至0.15-0.25 %(w/v) 的鹽酸溶液中，高速攪拌，待核心球全部浮起后濾去液體，用蒸餾水漂洗，得到多孔核心球；(2)多層結構的制備:將核心球浸沒于1.5-2.5 %(w/v)的海藻酸鈉水溶液中，靜置，濾 除多余液體，將膠球放入含有表面活性劑的液體石蠟中，攪拌，加入1-3 %(w/v)的氯化鈣溶 液，攪拌固化，濾去液體，蒸餾水漂洗，得到包被多孔膠球；(3)重復步驟(2)，得到所需包被層數的羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸 鈉膠球，其中層數=重復步驟(2)次數，可重復1-5次，凍干后即得羧甲基殼聚糖納米微粒固 定化多孔多層海藻酸鈉膠球。2.根據權利要求1所述的羧甲基殼聚糖納米微粒固定化多孔多層海藻酸鈉膠球制備方 法，其特征是核心球制備過程中所述的碳酸鈣與羧甲基殼聚糖納米微粒的質量比為1: 0.05-0.1，碳酸鈣與海藻酸鈉的質量比為1:0.375-0.625。
【文檔編號】A61K47/36GK105997936SQ201610455538
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年6月22日
【發(fā)明人】馮超, 李靜, 陳西廣, 孔明
【申請人】中國海洋大學