一種具有pH和葡萄糖雙重響應(yīng)的納米球及其制備和應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明屬于納米材料制備和生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種具有pH和葡萄糖雙重響應(yīng)的納米球及其制備和應(yīng)用。所述的納米球是PAA?PBA?Glu?PAA（PPGP）聚合物，其制備過程為：由3?氨基苯硼酸修飾聚合物分子PAA獲得PAA?PBA，然后由葡萄糖胺修飾PAA制得PAA?Glu，再將PAA?PBA和PAA?Glu通過硼酸酯鍵進行交聯(lián)，在水/異丙醇混合液中進行自組裝，獲得PPGP納米球。所制得的PPGP納米球?qū)拱┧幬锇⒚顾丶昂舜懦上駝〨d3+具有很高的負(fù)載率，且針對pH及葡萄糖具有刺激響應(yīng)釋放特性，具有診斷、治療一體化功能等優(yōu)點。
【專利說明】
一種具有pH和葡萄糖雙重響應(yīng)的納米球及其制備和應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于納米材料制備和生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種具有pH和葡萄糖雙重響應(yīng)的納米球及其制備和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]釓核磁成像造影劑是一類Tl-加權(quán)MRI成像造影劑，且釓造影劑是醫(yī)療過程中常用的一類造影劑，具有水溶性好、毒性低或沒有毒性、體內(nèi)穩(wěn)定、能夠完全被排出體外、弛豫效能高、具有組織選擇性等優(yōu)點。但是其在體內(nèi)呈非特異性分布，且靜脈注射后迅速漏到血管外并被腎臟清除，因而檢查所需劑量高，特別是對于肝、脾等組織病變及腫瘤缺乏特異性，有時為了診斷的目的，不得不加大用藥劑量，從而增加了機體出現(xiàn)不良反應(yīng)的風(fēng)險。臨床上常用的Gd-DTPA造影劑rl值較小(一般3.7 mM—^s—1 )，而根據(jù)最近的研究結(jié)果表明，如果把釓離子做成納米顆粒時，其MRI性能會得到提高。所以，發(fā)展基于釓離子納米顆粒制備可降解型多功能藥物載體，同時能提高釓造影劑的造影性能，對推動其臨床應(yīng)用具有非常明顯的意義。
[0003]理想的納米藥物釋放系統(tǒng)應(yīng)具有生物相容性、生物可降解性、較長的血液循環(huán)時間、腫瘤靶向性、高載藥率、藥物刺激響應(yīng)釋放等特性。因此，利用納米材料作為抗腫瘤藥物的載體，構(gòu)建新型的智能響應(yīng)體系，實現(xiàn)定時、定量的將藥物導(dǎo)入病變部位，提高藥物的利用率，在臨床治療中具有潛在的應(yīng)用前景。聚合物膠束(Polymeric Micelles，PMs)是近20多年來被廣泛關(guān)注和快速發(fā)展的一種新型納米載體。響應(yīng)性聚合物膠束可對藥物進行靶向可控緩釋，在提高藥效的同時減少藥物的副作用，同時，能在體內(nèi)降解為小分子化合物，從而被機體代謝、吸收或排泄，對人體無毒副作用，因而已成為藥物傳遞系統(tǒng)研究的熱點。
[0004]另一方面，低分子量的聚丙烯酸鹽(PAA)能在水/異丙醇混合液中自組裝成球，這種PAA納米球因包含大量的羧基基團，所以對親水性帶正電的抗癌藥物具有很高的負(fù)載率。但是，由于PAA納米球良好的水溶性，易在水溶液中溶脹破裂，造成藥物預(yù)泄露很嚴(yán)重，不利于其作為藥物載體的后續(xù)應(yīng)用。因此，采用化學(xué)手段增強PAA納米球的交聯(lián)，達到穩(wěn)定其結(jié)構(gòu)的目的；同時，又能賦予PAA納米球新功能(如核磁成像、CT成像等)，發(fā)展多功能刺激響應(yīng)型藥物釋放體系，實現(xiàn)診治一體化目的，具有極高的研究意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]
本發(fā)明的目的在于提供一種具有PH和葡萄糖雙重響應(yīng)的納米球及其制備和應(yīng)用。本發(fā)明所制得PAA-PBA-Glu-PAA(PPGP)聚合物納米球具有在腫瘤部位受pH及葡萄糖雙重響應(yīng)藥物釋放特性，同時，PPGP納米球?qū)拱┧幬锇⒚顾丶昂舜懦上駝〨d3+具有很高的負(fù)載率，可實現(xiàn)診斷、治療一體化的目的。
[0006]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
一種具有PH和葡萄糖雙重刺激響應(yīng)性的納米球:其是由3-氨基苯硼酸(PBA)修飾聚丙烯酸鈉(PAA)分子制得PAA-PBA;再由葡萄糖胺(Glu)改性聚丙烯酸鈉(PAA)獲得PAA-Glu，然后將PAA-PBA和PAA-Glu通過硼酸酯鍵進行交聯(lián)與自組裝，而制得的PAA-PBA-Glu-PAA納米球。
[0007]一種制備如上所述的具有pH和葡萄糖雙重刺激響應(yīng)性的納米球的方法，包括如下步驟:
a)PAA-PBA聚合物材料的合成:
將一定量的H)C和NHS加入至3-氨基苯硼酸溶液中，然后加入聚丙烯酸鈉，在室溫條件下反應(yīng)并對所得產(chǎn)物進行透析、冷凍干燥后，獲得PAA-PBA聚合物材料；
b)PAA-Glu聚合物材料的合成:
將一定量的H)C和NHS加入至葡萄糖胺溶液中，加入聚丙烯酸鈉，在室溫條件下反應(yīng)并對所得產(chǎn)物進行透析、冷凍干燥后，獲得PAA-Glu聚合物材料；
c)PAA-PBA-Glu-PAA納米球的組裝:
將步驟a)制得的PAA-PBA聚合物材料分散于pH=8.0的PBS緩沖液中，加入步驟b)制得的PAA-Glu聚合物材料，室溫攪拌12 h，通過硼酸酯鍵的構(gòu)建獲得PAA-PBA-Glu-PAA聚合物溶液;再往聚合物溶液中逐滴加入一定體積的異丙醇使聚合物分子自組裝，然后經(jīng)甲醇離心、洗滌處理，獲得PAA-PBA-Glu-PAA納米球。
[0008]步驟a)中聚丙烯酸鈉與3-氨基苯硼酸的反應(yīng)摩爾比是7:1?2:1;步驟b)中聚丙烯酸鈉與葡萄糖胺的反應(yīng)摩爾比是7:1?2:1。
[0009]步驟c)中PAA-Glu聚合物材料與PAA-PBA聚合物材料的質(zhì)量比是1:1;步驟c)中在PAA-Glu-PBA-PAA的自組裝反應(yīng)體系中水和異丙醇體積比是1:20。
[0010]步驟c)制備的PAA-PBA-Glu-PAA納米球的平均直徑為100±10 nm;表面帶負(fù)電。
[0011]一種如上所述的方法制得的具有pH和葡萄糖雙重刺激響應(yīng)性的納米球的應(yīng)用:作為核磁成像劑Gd3+和抗癌藥物的載體。
[0012]在上述應(yīng)用中，所述的抗癌藥物為阿霉素;阿霉素與納米球復(fù)合后，在pH彡6、葡萄糖濃度為I?10 mM的雙重刺激條件下釋放阿霉素。
[0013]在上述應(yīng)用中，PAA-PBA-Glu-PAA納米球和核磁成像劑Gd3+復(fù)合時的摩爾比為1:
0.25-1:2，所制得的PAA-PBA-Glu-PAA-Gd3+納米聚合物球的平均直徑為100土 10 nm、表面帶正電；更優(yōu)的，PAA-PBA-Glu-PAA納米球和核磁成像劑Gd3+復(fù)合時的摩爾比為1: 1.5，此時，Gd3+的實際固定量達到74.76% ο
[0014]與其他藥物釋放體系相比，本發(fā)明的顯著優(yōu)點在于:
(1)本發(fā)明的聚合物納米球PPGP制備方法簡單，合成顆粒尺寸較為均一，條件溫和可控，易于規(guī)?；?可負(fù)載核磁成像劑Gd3+和抗癌藥物，具有pH和葡萄糖雙重刺激響應(yīng)性；
(2)本發(fā)明的聚合物納米球?qū)舜懦上駝〨d3+和抗癌藥物的負(fù)載率高，對抗癌藥物的負(fù)載率可達到74.21%，因此可有效降低治療過程中藥物載體的使用量，達到減少副作用的目的；
(3)本發(fā)明所述的聚合物納米球PPGP生物相容性優(yōu)良，易于在細(xì)胞內(nèi)降解，是可降解型藥物載體；
(4)以本發(fā)明聚合物納米球為載體的核磁成像劑PPGP-Gd3+在腫瘤細(xì)胞內(nèi)易受酸性及葡萄糖雙重刺激響應(yīng)，硼酸酯鍵解離，釋放出所負(fù)載釓離子，可實現(xiàn)對腫瘤或炎癥組織的 MRI成像功能。
【附圖說明】
[0015]
圖1為PPGP納米球的低倍透射電鏡圖(TEM)(A)5PPGP-Gd3+納米球的低倍透射電鏡圖(TEMXB)；
圖2為PPGP納米球的紅外圖譜;橫坐標(biāo)為波數(shù)，縱坐標(biāo)為吸收強度；
圖3為PAA納米球與PPGP納米球的粒徑變化圖；橫坐標(biāo)為不同時間組樣品(1、甲醇;2、pH=7.4,PBS-O h;3、pH=7.4，PBS-24 h;4、pH=7.4，PBS_72 h)；
圖4為PAA-DOX納米球與PPGP-DOX納米球的預(yù)泄漏實驗;橫坐標(biāo)為釋放時間，縱坐標(biāo)為釋放百分率；
圖5為考察PPGP-Gd3+納米球的生物相容性測試;橫坐標(biāo)為納米球濃度，縱坐標(biāo)為細(xì)胞存活率；
圖6為考察PPGP-Gd3+納米球的細(xì)胞毒性實驗;橫坐標(biāo)為不同樣品組，縱坐標(biāo)為細(xì)胞存活率；UControl 2、PPGP-Gd3+3、PPGP-Gd3+-DOX 4、Free DOX；
圖7為PPGP-Gd3+納米球在不同條件下的體外核磁共振成像對比圖；橫坐標(biāo)為Gd3+濃度，縱坐標(biāo)為每秒分之一。
【具體實施方式】
[0016]下面以具體實施示例對本發(fā)明的技術(shù)方案做進一步說明，但是不能以此限制本發(fā)明的范圍。
[0017]實施例1
一種制備具有PH和葡萄糖雙重刺激響應(yīng)的聚合物納米球的方法，具體步驟為:
a)PAA-PBA聚合物材料的合成:
取4 mg PAA溶解于2 mL去離子水中，按摩爾比4:1加入2.46 mg 3-氨基苯硼酸，2.73mg EDC與1.634 mg NHS，在室溫條件下反應(yīng)24 h，透析處理24 h，冷凍干燥12 h，獲得PAA-PBA聚合物材料；
b)PAA-Glu聚合物材料的合成:
取4 mg PAA溶解于2 mL去離子水中，按摩爾比4:1加入3.06 mg葡萄糖胺，2.73 mg EDC與1.634 mg NHS，在室溫條件下反應(yīng)24 h，透析處理24 h，冷凍干燥12 h，獲得PAA-Glu聚合物材料；
c)PPGP聚合物納米球的組裝:
將步驟a)制得的PAA-PBA材料分散于pH=8.0的PBS緩沖液中，按質(zhì)量比為1:1加入步驟
b)制得的PAA-Glu材料，室溫攪拌12 h，通過硼酸酯鍵的構(gòu)建獲得PPGP聚合物材料;之后再加入16 mL異丙醇使其自聚合，進一步形成PPGP聚合物納米球；
d)PPGP-Gd3+-D0X聚合物納米球的組裝:
將步驟c)制得的PPGP聚合物納米球分散于甲醇中，按摩爾比為1: 1.5加入六水硝酸釓，室溫攪拌6 h，離心甲醇清洗處理;再按質(zhì)量比1:2加入D0X，室溫攪拌12 h，進一步離心處理得PPGP-Gd3+-DOX聚合物納米球。通過ICP-MS檢測確認(rèn)Gd3+的實際固定量達到74.76%;熒光數(shù)據(jù)表明DOX的吸附率是74.21%。
[0018]步驟C)制備的PPGP納米球相比PAA納米球具有更好的熱穩(wěn)定性，有利于藥物的緩釋性能;Zeta粒度分析儀數(shù)據(jù)表明:在pH=7.4緩沖液中，在0-72h內(nèi)，PPGP納米球的粒徑從150 nm增大到367 nm，而PAA納米球則從367 nm增大到1365 nm。在ρΗ=7.4緩沖液中，PPGP-DOX在48 h內(nèi)的預(yù)泄露率為24.18%，而PAA-DOX的預(yù)泄露率為98.7%。上述數(shù)據(jù)說明PPGP納米球在水中的穩(wěn)定性更高，更有利于藥物的緩慢釋放。
[0019]應(yīng)用實施例1
將實施例1步驟C)制得的PPGP納米球，取0.5 mg重新分散到0.875 mL甲醇溶液中，加入12.5 uL，0.1 M的六水硝酸釓甲醇溶液，室溫反應(yīng)6 h之后，離心處理得固體，繼續(xù)用甲醇洗2次，最后獲得PPGP-Gd3+納米聚合物膠束。
[0020]體外核磁成像實驗結(jié)果表明，在pH=5.0緩沖液中PPGP-Gd3+納米球造影劑的rl值為14.93 mM—1.S—S在葡萄糖=10 mM，pH=5.0的緩沖液中，PPGP-Gd3+納米球造影劑的rl值最高可達到34.34 mM—1.S—1，說明PPGP-Gd3+聚合物納米球可實現(xiàn)針對pH及葡萄糖雙重刺激響應(yīng)觸發(fā)的Tl加權(quán)MRI成像。
[0021]性能檢測:
1、將實施例1制得PPGP納米球甲醇溶液滴在銅網(wǎng)上，晾干后進行TEM掃描(見圖1)，結(jié)果見圖1所示，從圖1-A中可以看出PPGP膠束為球形顆粒，尺寸較為均一，分散性較好，平均粒徑約為100 ± 1 nm；將應(yīng)用實施例1制得PPGP-Gd3+納米球甲醇溶液滴在銅網(wǎng)上，從圖1 -B中可以看出PPGP-Gd3+納米聚合物膠束仍為球形結(jié)構(gòu)，尺寸均一，平均粒徑約為100± 10 nm；
2、將實施例1制得不同產(chǎn)物在60°C干燥成固體，取3mg與溴化鉀均勻混合，之后利用壓片機將其壓制成透明均勻的小薄片;紅外測試結(jié)果如圖2所示，其中圖2為四種聚合物的疊加圖，可知聚合物b和d在波數(shù)為3000-3700 cm—1左右有較大寬峰，主要由于此二者聚合物含有較多-0H，并且聚合物b、c、d均有氨基吸收峰，說明PAA-Glu、PAA-PBA、以及PPGP均已通過酰胺鍵成功交聯(lián);在聚合物c、d中波數(shù)在1350-1310 cm—1處具有硼氧鍵吸收峰，進一步證明了PAA- PBA與PPGP成功合成;并且由于PPGP上硼氧鍵受聚合物影響，導(dǎo)致其發(fā)生輕微的紅移;
3、分別取PAA納米球和PPGP(納米球加入至PBS(pH=7.4)緩沖溶液中，配制濃度為Img/mL，混勻。樣品置于25°C恒溫箱中，分別于O h~72 h取樣測粒徑大小變化。結(jié)果如圖3所示，PPGP納米球的粒徑從90 nm增大到367 nm，而PAA納米球則從132 nm增大到1365nm，可知PAA納米球在水中溶脹明顯，而PPGP納米球相對穩(wěn)定，說明通過硼酸酯鍵的交聯(lián)，能夠提高這類納米球的穩(wěn)定性；
4、取2 ml I mg/ml實施例1制得的PPGP納米球加入至4 ml I mg/ml的DOX(阿霉素)充分混合，室溫避光攪拌12 h，離心，水洗兩次收集上清液。用熒光分光光度計(Ex=488 nm)，記錄波長在500 nm至800 nm間的發(fā)射光譜最大吸收值，并根據(jù)阿霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出每克PPGP納米球可負(fù)載742.1 mg的鹽酸阿霉素?？疾熵?fù)載了阿霉素的PPGP納米球和PAA納米球在pH=7.4 PBS緩沖溶液中的預(yù)泄漏效果，具體的實驗步驟如下:將I mg吸附藥物后的PPGP納米球和PAA納米球分別分散于3 ml PBS (pH=7.4，10 mM)溶液中，放入透析袋后將透析袋加入47 ml PBS溶液中透析48 h，每隔O h，3 h，6 h，12 h，24 h，48 h取3ml溶液測熒光，原溶液再補入3 ml PBS，測試的結(jié)果如圖4所示。兩條曲線分別代表PAA-DOX納米球和PPGP-DOX納米球;從圖4中可以看出在pH=7.4條件下PAA-DOX所釋放出的DOX熒光強度最高，PPGP-DOX在48 h內(nèi)的預(yù)泄露率為24.18%，而PAA-DOX的預(yù)泄露率為98.7%。說明PPGP納米球在水中的穩(wěn)定性更高，有利于藥物的緩慢釋放；
5、用HeLa細(xì)胞作為目標(biāo)細(xì)胞評價PPGP納米球的生物相親性:取已消化成單分散的HeLa細(xì)胞懸濁液用培養(yǎng)液稀釋，以lOOyL/孔的密度接種到96孔板，每孔的細(xì)胞個數(shù)控制約為15個。將96孔板置于37 °C，5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后，移去培養(yǎng)液，加入含有不同濃度的PPGP納米球培養(yǎng)液，每組設(shè)置4個重復(fù)孔。繼續(xù)培養(yǎng)4h后，移去培養(yǎng)液，用PBS緩沖液(pH=7.4)清洗兩次，加入10yL培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)20 h后，每孔分別加入1yL濃度為5 mg/mL的MTT，繼續(xù)培育4 h，小心移去培養(yǎng)液，加入150yL DMS0，37°C培養(yǎng)25 min，震蕩均勻后，在酶標(biāo)儀上測490 nm處的吸收值，計算細(xì)胞存活率，評價PPGP納米球生物相親性。圖5顯示PPGP納米球濃度在5?100yg/ml區(qū)間，細(xì)胞存活率均在90%以上，說明PPGP納米球生物具有優(yōu)異的生物相親性，適于當(dāng)藥物載體；
6、取已消化成單分散的HeLa細(xì)胞懸濁液用培養(yǎng)液稀釋，以lOOyL/孔的密度接種到96孔板，每孔的細(xì)胞個數(shù)控制約為15個，每組設(shè)置4個復(fù)孔作為重復(fù)組。將96孔板置于37 V，5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后，移去孔中培養(yǎng)液，分別加入含有I ,Control 2，PPGP_Gd3+(6.7 μg/ml) 3，卩？6卩-6(13+-00父(6.748/1111，00父濃度為548/1111) 4，F(xiàn)ree D0X(5yg/ml)，其中3組中DOX的濃度為5yg/ml，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)4 h，移去培養(yǎng)液，用PBS緩沖液清洗兩次，加入10yL培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)20 h后，每孔分別加入1yL濃度為5 mg/mL的MTT，繼續(xù)培育4 h，小心移去培養(yǎng)液，加入150yL DMS0，37 °C培養(yǎng)20 min，振蕩均勻后，在酶標(biāo)儀上測490 nm處的吸收值，計算細(xì)胞存活率，評價各組治療效果。從圖6可以看出PPGP-Gd3+-DOX對癌細(xì)胞在
24h內(nèi)抑制率達到63.68 %，說明該載藥體系能有效地用于腫瘤的治療；
7、PPGP-Gd3+納米聚合物膠束溶液的體外核磁共振成像:
(1)先取Iml 0.5mg/mL PPGP-Gd3+納米聚合物膠束加入透析袋中，放入49 ml 2wt%硝酸進行解離24 h，使其完全解離，再取一定量按需要稀釋測ICP-MS，根據(jù)ICP-MS測試結(jié)果計算出I mL PPGP-Gd3+納米聚合物膠束溶液中含有Gd3+為0.942 mM；
(2)取0.212mL PPGP-Gd3+制備液，分別加入到Iml ρΗ=7.4、ρΗ=5.0、ρΗ=5.0+10 mM葡萄糖的PBS溶液中(相當(dāng)于所含Gd3+濃度為0.2 mM),浸泡24h，離心后，取一定量上清液配成5個不同濃度，取出I mL去測MRI。從圖7可以看出:在pH=5.0和pH=5.0+10 mM葡萄糖條件下，隨著解離出來釓離子的濃度增加，成像的亮度也逐漸變亮;而在pH=7.4條件下，成像的亮度基本沒有變化，說明在PH=7.4緩沖液中PPGP-Gd3+納米球比較穩(wěn)定，釓離子解離的量較少。由圖7可知:在pH=5.0和pH=5.0+10 mM葡萄糖條件下的r 1=14.93 mM—1.S—1 和r 1=34.34 mM—1.S—1均大于pH=7.4條件下的rl=2.54 mM—1.S—1，這說明在酸性以及葡萄糖存在條件下，PPGP-Gd3+納米球發(fā)生解構(gòu)，釋放出較多的Gd3+，即造影劑增多，進而MRI成像效果增強。
[0022]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例，凡依本發(fā)明申請專利范圍所做的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。
【主權(quán)項】
1.一種具有pH和葡萄糖雙重刺激響應(yīng)性的納米球，其特征在于:其是由3-氨基苯硼酸修飾聚丙烯酸鈉分子制得PAA-PBA;再由葡萄糖胺改性聚丙烯酸鈉獲得PAA-Glu，然后將PAA-PBA和PAA-Glu通過硼酸酯鍵進行交聯(lián)與自組裝，而制得的PAA-PBA-GIu-PAA納米球。2.—種制備如權(quán)利要求1所述的具有P H和葡萄糖雙重刺激響應(yīng)性的納米球的方法，其特征在于:包括如下步驟: a)PAA-PBA聚合物材料的合成: 將一定量的EDC和NHS加入至3-氨基苯硼酸溶液中，然后加入聚丙烯酸鈉，在室溫條件下反應(yīng)并對所得產(chǎn)物進行透析、冷凍干燥后，獲得PAA-PBA聚合物材料； b)PAA-Glu聚合物材料的合成: 將一定量的EDC和NHS加入至葡萄糖胺溶液中，加入聚丙烯酸鈉，在室溫條件下反應(yīng)并對所得產(chǎn)物進行透析、冷凍干燥后，獲得PAA-Glu聚合物材料； c)PAA-PBA-Glu-PAA納米球的組裝: 將步驟a)制得的PAA-PBA聚合物材料分散于pH=8.0的PBS緩沖液中，加入步驟b)制得的PAA-Glu聚合物材料，室溫攪拌12 h，通過硼酸酯鍵的構(gòu)建獲得PAA-PBA-Glu-PAA聚合物溶液;再往聚合物溶液中逐滴加入一定體積的異丙醇使聚合物分子自組裝，然后經(jīng)甲醇離心、洗滌處理，獲得PAA-PBA-Glu-PAA納米球。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備具有pH和葡萄糖雙重刺激響應(yīng)性的納米球的方法，其特征在于:步驟a)中聚丙烯酸鈉與3-氨基苯硼酸的反應(yīng)摩爾比是7:1?2:1;步驟b)中聚丙烯酸鈉與葡萄糖胺的反應(yīng)摩爾比是7:1?2:1。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備具有pH和葡萄糖雙重刺激響應(yīng)性的納米球的方法，其特征在于:步驟c)中PAA-Glu聚合物材料與PAA-PBA聚合物材料的質(zhì)量比是1:1;步驟c)中在PAA-Glu-PBA-PAA的自組裝反應(yīng)體系中水和異丙醇體積比是1:20。5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備具有pH和葡萄糖雙重刺激響應(yīng)性的納米球的方法，其特征在于:步驟c)制備的PAA-PBA-GIu-PAA納米球的平均直徑為100±10 nm;表面帶負(fù)電。6.—種如權(quán)利要求2-5任一項所述的方法制得的具有pH和葡萄糖雙重刺激響應(yīng)性的納米球的應(yīng)用，其特征在于:作為核磁成像劑Gd3+和抗癌藥物的載體。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于:所述的抗癌藥物為阿霉素；阿霉素與納米球復(fù)合后，在PH彡6、葡萄糖濃度為I?10 mM的條件下釋放阿霉素。8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于:PAA-PBA-Glu-PAA納米球和核磁成像劑Gd3+復(fù)合時的摩爾比為1:0.25?1:2，所制得的PAA-PBA-Glu-PAA-Gd3+納米聚合物球的平均直徑為100±10 nm、表面帶正電。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于:PAA-PBA-Glu-PAA納米球和核磁成像劑Gd3+復(fù)合時的摩爾比為1:1.5。
【文檔編號】A61K49/18GK105963277SQ201610512393
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年7月4日
【發(fā)明人】朱春玲, 曾胚羨, 謝增鴻, 林旭聰
【申請人】福州大學(xué)