一種防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方，將葉下珠、牛至、荔枝草按質量比3:2:1制成散劑，將散劑和飼糧按照質量比1:100混合，喂養(yǎng)患病豬，或者散劑加10倍散劑質量的蒸餾水，浸泡1h后加熱回流1h，趁熱用紗布過濾，藥渣再分別加8倍質量的水和6倍質量的水加熱回流1h，合并3次濾液，減壓濃縮成生藥濃度為1g/mL的藥液，對患病豬肌肉注射。能顯著上調TFF3含量，提升動物小腸粘膜防御功能，下調NO水平，改善小腸的蠕動性和腸液的電解質平衡，增強動物體質，降低機體的尿素水平；能顯著上調ALB水平，增加機體肝臟代謝功能，能顯著提高GLO水平，增強機體免疫功能。
【專利說明】
-種防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方
技術領域
[0001] 本發(fā)明屬于獸藥領域，尤其設及一種防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方。
【背景技術】
[0002] 豬流行性腹瀉，英文縮寫為陽D^orcine Epidemic Diarrhea)，由豬流行性腹瀉 病毒引起的一種接觸性腸道傳染病，其特征為嘔吐、腹瀉、脫水。臨床變化和癥狀與豬傳染 性胃腸炎極為相似。1971年首發(fā)于英國，20世紀80年代初我國陸續(xù)發(fā)生本病。我國多發(fā)生在 每年12月份至翌年1~2月，多發(fā)生于寒冷季節(jié)，夏季也有發(fā)病的報道。
[0003] 豬流行性腹瀉病毒(P邸V)，屬于冠狀病毒科冠狀病毒屬。本病只發(fā)生于豬，各種年 齡的豬都能感染發(fā)病。哺乳豬、架子豬或肥育豬的發(fā)病率很高，尤W哺乳豬受害最為嚴重， 母豬發(fā)病率變動很大，約為15-90%。病豬是主要傳染源。病毒存在于腸絨毛上皮細胞和腸 系膜淋己結，隨糞便排出后，污染環(huán)境、飼料、飲水、交通工具及用具等而傳染。主要感染途 徑是消化道。如果一個豬場陸續(xù)有不少窩仔豬出生或斷奶，病毒會不斷感染失去母源抗體 的斷奶仔豬，使本病呈地方流行性，在運種繁殖場內，豬流行性腹瀉可造成5-8周齡仔豬的 斷奶期頑固性腹瀉。
[0004] 病毒經口和鼻感染后，直接進入小腸。通過免疫巧光和電子顯微鏡檢查，病毒的復 制是在小腸和結腸絨毛上皮細胞漿中進行。其他臟器內未發(fā)現(xiàn)病毒增殖。由于病毒增殖首 先造成細胞器的損傷，繼而出現(xiàn)細胞功能障礙。腸絨毛萎縮，造成了吸收表面積的減少，小 腸黏膜堿性憐酸酶含量顯著降低進而引起營養(yǎng)物質吸收障礙，運是引起腹瀉的主要原因， 屬于滲透性腹瀉。嚴重腹瀉引起脫水，是導致病豬死亡的主要原因。
[0005] 預防措施包括種豬群緊急接種胃流二聯(lián)苗或胃流輪Ξ聯(lián)苗。發(fā)生嘔吐腹瀉后立即 封鎖發(fā)病區(qū)和產房，盡量做到全部封鎖。撲殺10日齡之內嘔吐且水樣腹瀉的仔豬，運是切斷 傳染源、保護易感豬群的做法，但成本較高。本病應用抗生素治療無效，疫苗效果日益下降。

【發(fā)明內容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于提供一種防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方，旨在解決現(xiàn) 有豬流行性腹瀉預防措施成本較高，疫苗效果日益下降的問題。
[0007] 本發(fā)明是運樣實現(xiàn)的，一種防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方，所述防治豬 流行性腹瀉病毒病的中草藥復方由葉下珠、牛至、慕枝草按質量比3:2:1組成。
[000引本發(fā)明的另一目的在于提供一種所述防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方的 制備方法，所述制備方法包括：
[0009] 將葉下珠、牛至、慕枝草按質量比3:2:1制成散劑后，將散劑和飼糧按照質量比1: 100混合，喂養(yǎng)患病豬。
[0010] 進一步，所述防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方的使用方法包括：
[00川將葉下珠、牛至、慕枝草按質量比3:2:1制成散劑后，加10倍散劑質量的蒸饋水，浸 泡化后加熱回流化，趁熱用紗布過濾，藥渣再分別加8倍質量的水和6倍質量的水加熱回流 化，合并3次濾液，減壓濃縮成生藥濃度為Ig/mL的藥液，對患病豬肌肉注射。
[0012] 本發(fā)明的防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方中藥方劑能顯著上調TFF3含量， 提升動物小腸粘膜防御功能，下調NO水平，改善小腸的蠕動性和腸液的電解質平衡，增強動 物體質，同時降低機體的尿素水平，運意味著蛋白質沉積增加，氨基酸平衡理想，加快了新 陳代謝的速度，促進生長發(fā)育;能顯著上調ALB水平，增加機體肝臟解毒功能。同時還能顯著 提高GL0水平，增強機體免疫功能;具有防治豬流行性腹瀉病毒病和提高機體免疫功能的作 用。
【具體實施方式】
[0013] 為能進一步了解本發(fā)明的
【發(fā)明內容】
、特點及功效，茲例舉W下實施例，詳細說明如 下：
[0014] -種防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方，將葉下珠、牛至、慕枝草按質量比3: 2:1制成散劑。
[0015] 進一步，所述防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方將葉下珠、牛至、慕枝草按質 量比3:2:1制成散劑后，將散劑和飼糧按照質量比1:100混合，喂養(yǎng)患病豬。
[0016] 進一步，所述防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方將葉下珠、牛至、慕枝草按質 量比3:2:1制成散劑后，加10倍散劑質量的蒸饋水，浸泡比后加熱回流比，趁熱用紗布過濾， 藥渣再分別加8倍質量的水和6倍質量的水加熱回流化，合并3次濾液，減壓濃縮成生藥濃度 為Ig/mL的藥液，對患病豬肌肉注射。
[0017]實施例1
[0018] 基礎飼糧由南京禾嘉吉升農牧發(fā)展有限公司提供，基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平見表 1。同仁堂藥店購得的中藥葉下珠、牛至、慕枝草按質量比3:2:1制成散劑后，再按質量比1: 100與基礎飼糧混合均勻，進行仔豬體內試驗。
[0019] 表1基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎）
[0020]
[0021]
[0022] 40頭健康普通級"杜X大X長"Ξ元雜交斷奶仔豬，35日齡，購自南京農業(yè)大學江 浦試驗豬場。適應環(huán)境后隨機分為4組，每組10頭，公母各半?？瞻捉M和陽DV組飼喂不添加中 藥復方的基礎日糧、預防組和藥物對照組添加中藥復方1%的基礎日糧，2周后飼喂不添加 中藥復方的基礎日糧。于試驗的第S周第ld，PEDV組和預防組Wl06TCID5〇/mL的 陽DVA肥012/12株攻毒，每頭灌服2. OmL 1次，然后隔離飼養(yǎng)。試驗總周期4周。
[0023] 分別于試驗的第Id和最后Id早上8:00空腹稱重，根據初重和末重計算平均日增 重。平均日增重=頭均凈增重/試驗天數。記錄仔豬的采食量，計算日均采食量，試驗結束后 計算料重比。料重比=日均采食量/平均日增重。結果發(fā)現(xiàn)，P抓V組的平均日增重為426. Ig， 預防組的平均日增重為526.8g，兩者差異極顯著，空白組的平均日增重為505.Og，藥物對照 組的平均日增重為533.7g。陽DV組的日均采食量為714.9g，預防組的日均采食量為807.8邑， 兩者差異極顯著，空白組的的日均采食量為835.5g，藥物對照組的日均采食量為829.6g。 陽DV組的料重比為1.68,預防組的料重比為1.53,空白組的料重比為1.65,藥物對照組的料 重比1.55。實驗表明，該中藥復方可W大幅提升仔豬的日增重，對飼料的適口性沒有任何影 響，采食量的增加與仔豬消化能力的提高有關。同時料重比下降，說明動物生長性能明顯改 善，營養(yǎng)狀態(tài)良好。
[0024] 試驗最后Id仔豬清晨空腹前腔靜脈采血，酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中陽DV的抗體 水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性。結果發(fā)現(xiàn)，P邸V組的PEDV的抗體水平0D值為0.319，預防 組的PEDV的抗體水平0D值為0.402，兩者差異極顯著，空白組的PEDV的抗體水平0D值為 0.069，藥物對照組的陽DV的抗體水平0D值為0.075。陽DV組的血清SOD含量為7.77ng/mL，預 防組的SOD含量為10.26ng/mL，兩者差異顯著，空白組的SOD含量為9.14ng/mL，藥物對照組 的SOD含量為11.0化g/mL。實驗表明，該中藥復方可W大幅上調仔豬PEDV的抗體水平，特異 性的中和、消滅PEDV病原，從而增強機體免疫功能，預防該疫病的發(fā)生。SOD水平可反應出機 體細胞受自由基攻擊的嚴重程度和機體清除自由基的能力，該中藥復方可W減少過氧化作 用的發(fā)生，通過抑制肌肉的脂質氧化，參與調控禍體品質和肉質風味。
[0025] 試驗最后Id仔豬清晨空腹前腔靜脈采血，酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中TFF3和血清 NO含量，全自動生化分析儀檢測血液尿素（UREA)水平。結果發(fā)現(xiàn)，P抓V組的TFF3含量為 15.60ng/mL，預防組的TFF3含量為18.9化g/mL，兩者差異極顯著，空白組的TFF3含量為 18.09ng/mL，藥物對照組的TFF3含量為ig.Ung/血。陽DV組的血清NO含量為43.41皿〇1/1， 預防組的NO含量為38.22ymol/L，兩者差異顯著，空白組的NO含量為36.45皿ol/L，藥物對照 組的NO含量為36.90皿o1/LdP抓V組的血清尿素水平為3.66mmol/L，預防組的尿素水平為 2.71mmol/L，兩者差異極顯著，空白組的尿素水平為3.05mmol/L，藥物對照組的尿素水平為 2.98mmol/L"TFF3的主要生理功能是保護胃腸道粘膜上皮免受外源因子所致的損傷，W及 損傷后的上皮重建和再生。NO具有神經遞質的作用，高水平的NO也是臨床上斷奶仔豬腹瀉 脫水、形體消瘦、高病死率的主要原因。實驗表明，該中藥方劑能顯著上調TFF3含量，提升動 物小腸粘膜防御功能，下調NO水平，改善小腸的蠕動性和腸液的電解質平衡，增強動物體 質。同時降低機體的尿素水平，運意味著蛋白質沉積增加，氨基酸平衡理想，加快了新陳代 謝的速度，促進生長發(fā)育。
[00%] 實施例2
[0027]同仁堂藥店購得的中藥葉下珠、牛至、慕枝草按質量比3:2:1制成散劑后，加10倍 蒸饋水于圓底燒瓶中，浸泡Ih后加熱回流比，趁熱用紗布過濾。藥渣再分別加8倍水和6倍水 加熱回流化。合并3次濾液，減壓濃縮成生藥濃度為Ig/mL的藥液，進行仔豬體內試驗。
[00%] 40頭健康普通級"杜X大X長"Ξ元雜交斷奶仔豬，35日齡，購自南京農業(yè)大學江 浦試驗豬場。適應環(huán)境后隨機分為4組，每組10頭，公母各半。P抓V組和治療組W106TCI化〇/ mL的P邸VAH2012/12株攻毒，每頭灌服2.0mL 1次，然后隔離飼養(yǎng)2周。于試驗的第Ξ周第Id 治療組和藥物對照組，頸部肌肉注射該中藥復方液每天1次，每次2.OmL，持續(xù)2周?？瞻捉M和 PEDV組不頸部肌肉注射該中藥復方液。試驗總周期4周。
[0029] 每天定時觀察仔豬糞便情況，記錄腹瀉頭數，計算腹瀉率，腹瀉率（％) =總腹瀉次 數/(總頭數X試驗天數）X 100。腹瀉指數=糞便評分之和/供試豬總頭數(評分標準見表 2 )，該指數越高，表示腹瀉程度越嚴重。
[0030] 表2腹瀉評分標準
[0031]
[0032] 結果發(fā)現(xiàn)，P抓V組的腹瀉率為25.33,治療組的腹瀉率為11.31，兩者差異極顯著， 空白組的腹瀉率為8.92，藥物對照組的腹瀉率為9.07 dP抓V組的腹瀉指數為0.86，治療組的 腹瀉指數為0.51，兩者差異極顯著，空白組的腹瀉指數為0.23,藥物對照組的腹瀉指數為 0.37。實驗表明，該中藥方劑能顯著下調動物機體的腹瀉率和腹瀉指數，治療該病毒病的最 主要臨床癥狀，從而改善機體脫水狀態(tài)，增進健康。
[0033] 試驗最后Id仔豬清晨空腹前腔靜脈采血，實時巧光定量PT-PCR法檢測血清中PEDV 的抗原含量，酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中IFN-丫的含量。結果發(fā)現(xiàn)，PEDV組的抗原含量為 5.86(lg)AiL，治療組的抗原含量為4.21(lg)AiL，兩者差異極顯著，空白組和藥物對照組的 PEDV抗原均未檢測到。PEDV組的IFN- 丫含量為15 2.7Pg/mL，治療組的IFN- 丫含量為 203.4pg/mL，兩者差異極顯著，空白組的IFN- 丫含量為111.6pg/mL，藥物對照組的IFN- 丫含 量為134.化g/mL。實驗表明，該中藥方劑能顯著降低機體內的病毒含量，抑制病毒血癥的產 生，具有明顯的抗PEDV病毒作用。該中藥方劑還能明顯提高動物血清中IFN- γ的含量，該細 胞因子具有全面廣譜的抗病毒作用，從而提高免疫功能。
[0034] 試驗最后Id仔豬清晨空腹前腔靜脈采血，全自動生化分析儀檢測機體中IgG、IgM、 白蛋白（ALB)和球蛋白（GLO)的水平。結果發(fā)現(xiàn)PEDV組的IgG水平為1.35mg/mL，治療組的IgG 水平為1.65mg/血，兩者差異極顯著，空白組的IgG水平為1.27mg/mL，藥物對照組的IgG水平 為1.44mg/mL。陽DV組的IgM水平為0.63mg/mL，治療組的IgM水平為1.21mg/mL，兩者差異極 顯著，空白組的IgM水平為0.70mg/mL，藥物對照組的IgM水平為0.86mg/mUPEDV組的血清 ALB含量為28.17g/L，治療組的ALB含量為35.52g/L，兩者差異極顯著，空白組的ALB含量為 32.60g/L，藥物對照組的ALB含量為34.34g/L。陽DV組的血清化0含量為30.15g/L，治療組的 GL0含量為37.07g/L，兩者差異極顯著，空白組的化0含量為35.51g/L，藥物對照組的化0含 量為36.98g/L。實驗表明，該中藥方劑能大幅上調仔豬血清中IgG的水平，從而提高防病抗 病能力。同時還能顯著提高IgM水平，影響體液免疫反應，加快初次應答。白蛋白作為一種膽 存蛋白質，可隨時修補組織和提供能量。該中藥方劑能顯著上調ALB水平，增加機體肝臟代 謝功能。同時還能顯著提高GL0水平，增強機體免疫功能。
[0035] W上所述僅是對本發(fā)明的較佳實施例而已，并非對本發(fā)明作任何形式上的限制， 凡是依據本發(fā)明的技術實質對W上實施例所做的任何簡單修改，等同變化與修飾，均屬于 本發(fā)明技術方案的范圍內。
【主權項】
1. 一種防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方，其特征在于，所述防治豬流行性腹瀉 病毒病的中草藥復方由葉下珠、牛至、荔枝草按質量比3:2:1組成。2. -種如權利要求1所述防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方的制備方法，其特征 在于，所述制備方法包括： 將葉下珠、牛至、荔枝草按質量比3:2:1制成散劑后，將散劑和飼糧按照質量比1:100混 合，喂養(yǎng)患病豬。3. 如權利要求2所述制備方法制備的防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方，其特征 在于，所述防治豬流行性腹瀉病毒病的中草藥復方的使用方法包括： 將葉下珠、牛至、荔枝草按質量比3:2:1制成散劑后，加10倍散劑質量的蒸餾水，浸泡Ih 后加熱回流Ih，趁熱用紗布過濾，藥渣再分別加8倍質量的水和6倍質量的水加熱回流Ih，合 并3次濾液，減壓濃縮成生藥濃度為I g/mL的藥液，對患病豬肌肉注射。
【文檔編號】A61P31/14GK105878369SQ201610460029
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2016年6月22日
【發(fā)明人】胡屹屹, 茅愛華, 何孔旺, 溫立斌, 倪艷秀, 郭容利, 范寶超
【申請人】江蘇省農業(yè)科學院