一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物修復(fù)材料領(lǐng)域，特別涉及一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]SIS作為一種天然細(xì)胞外基質(zhì)生物材料，作為組織工程支架材料已經(jīng)進(jìn)行了廣泛研究，在生物體內(nèi)能引導(dǎo)、支持宿主細(xì)胞的生長最終逐漸完全降解，再生的組織機(jī)構(gòu)得到重塑成形，可以用于神經(jīng)、膀胱、肌腱、腹壁等組織缺損的修復(fù)。
[0003]目前在生物材料領(lǐng)域內(nèi)也有很多利用SIS作為組織修復(fù)材料的制備和相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的報(bào)道，但工藝過程簡單，大多都局限在單獨(dú)脫細(xì)胞和去垢上，總體來說都會(huì)存在脫脂脫蛋白或者消毒不充分的問題，從而導(dǎo)致存在一定的免疫原性，在使用中受到一定程度的限制，同時(shí)，SIS組織修復(fù)材料作為緩釋藥物載體的相應(yīng)研究比較少見，如何將緩釋藥物進(jìn)入SIS組織并使其藥物緩慢釋放發(fā)揮藥用價(jià)值是有必要進(jìn)行深入研究的課題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為了克服上述缺陷，發(fā)明的目的在于提供一種降低免疫原性、預(yù)防和治療免疫排斥的帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法。
[0005]為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為:一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法，其特征在于，包括如下步驟:
(1)取哺乳動(dòng)物的粘膜下層，清洗并消毒;粘膜下層為小腸粘膜下層；
(2)將粘膜下層在醋酸水溶液中浸泡5-15小時(shí)，取出粘膜下層并清洗得到醋酸處理后的材料；
(3)取步驟(2)的材料投入高滲透壓鹽溶液中振蕩浸泡，取出所述處理后的材料并加純化水浸泡并振蕩浸泡，隨后排出加入的溶液，以所述高滲透壓鹽溶液和純化水對(duì)所述材料進(jìn)行交替振蕩浸泡處理，各重復(fù)循環(huán)操作2-3次；所有的振蕩浸泡過程采用電磁振蕩，振蕩頻率為15-25kHz;
(4)對(duì)步驟(3)得到的材料進(jìn)行去垢并清洗，去垢并清洗完成后將材料置于溶質(zhì)為環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤的混合物的水溶液，在5-15攝氏度條件下靜置過夜，清洗后制得帶有緩釋藥物的修復(fù)材料。
[0006]前述的一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法，在步驟(I)中，清洗采用蒸餾水沖洗，消毒步驟為:將清洗后粘膜下層浸泡于0.5%過氧乙酸和10%乙醇混合溶液中l(wèi)-2h。以上百分比為體積百分比。
[0007]前述的一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法，在步驟(2)中，冰醋酸占醋酸水溶液的質(zhì)量體積濃度為40-50g/L，粘膜下層與醋酸水溶液的質(zhì)量比為1:5-1:15。
[0008]前述的一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法，在步驟(3)中，高滲透壓鹽溶液為氯化鈉水溶液，氯化鈉與氯化鈉水溶液的質(zhì)量比為1:4.5。
[0009]前述的一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法，在步驟(4)中，去垢處理采用2%的SDS溶液。以上百分比為溶質(zhì)SDS占SDS水溶液的質(zhì)量百分比。
[0010]前述的一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法，在步驟(4)中，環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤的質(zhì)量比為2:1:1，且環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤分別占環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤的混合物的水溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%、I %和I %。
[0011 ]相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果:采用醋酸既能去脂也能脫除粘膜下層材料的多余細(xì)胞，同時(shí)降低了免疫原性，減少了步驟(2)的處理次數(shù);將材料浸泡于環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤的混合物的水溶液中，并在一定溫度和濃度下靜置過夜，提高環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤進(jìn)入粘膜下層材料內(nèi)的濃度，能夠緩慢釋放藥物以預(yù)防兼治療免疫排斥。
【具體實(shí)施方式】
[0012]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作更進(jìn)一步的說明。
[0013]實(shí)施例1
一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法，其特征在于，包括如下步驟:
(1)取哺乳動(dòng)物的粘膜下層，清洗并消毒;粘膜下層為羊小腸粘膜下層；
(2)將粘膜下層在醋酸水溶液中浸泡5-15小時(shí)，取出粘膜下層并清洗得到醋酸處理后的材料；
(3)取步驟(2)的材料投入高滲透壓鹽溶液中振蕩浸泡，取出所述處理后的材料并加純化水浸泡并振蕩浸泡15分鐘，隨后排出加入的溶液，以所述高滲透壓鹽溶液和純化水對(duì)所述材料進(jìn)行交替振蕩浸泡處理15分鐘，各重復(fù)循環(huán)操作2次；所有的振蕩浸泡過程采用電磁振蕩，振蕩頻率為15kHz;
(4)對(duì)步驟(3)得到的材料進(jìn)行去垢并清洗，去垢并清洗完成后將材料置于溶質(zhì)為環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤的混合物的水溶液，在5攝氏度條件下靜置過夜，清洗后制得帶有緩釋藥物的修復(fù)材料。
[0014]在步驟(I)中，清洗采用蒸餾水沖洗，消毒步驟為:將清洗后粘膜下層浸泡于0.5%過氧乙酸和10%乙醇混合溶液中l(wèi)_2h。以上百分比為體積百分比。在步驟(2)中，冰醋酸占醋酸水溶液的質(zhì)量體積濃度為40-50g/L，粘膜下層材料與醋酸水溶液的質(zhì)量比為1: 5-1:15。在步驟(3)中，高滲透壓鹽溶液為氯化鈉水溶液，氯化鈉與氯化鈉水溶液的質(zhì)量比為1:4.5。在步驟(4)中，去垢處理采用2%的SDS溶液，以上百分比為溶質(zhì)SDS占SDS水溶液的質(zhì)量百分比。在步驟(4)中，環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤的質(zhì)量比為2:1:1，且環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤分別占環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤的混合物的水溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%、1%和1%。
[0015]實(shí)施例2
一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法，其特征在于，包括如下步驟:
(1)取哺乳動(dòng)物的粘膜下層，清洗并消毒;粘膜下層為羊小腸粘膜下層；
(2)將粘膜下層在醋酸水溶液中浸泡15小時(shí)，取出粘膜下層并清洗得到醋酸處理后的材料；
(3)取步驟(2)的材料投入高滲透壓鹽溶液中振蕩浸泡，取出所述處理后的材料并加純化水浸泡并振蕩浸泡18分鐘，隨后排出加入的溶液，以所述高滲透壓鹽溶液和純化水對(duì)所述材料進(jìn)行交替振蕩浸泡處理18分鐘，各重復(fù)循環(huán)操作2次；所有的振蕩浸泡過程采用電磁振蕩，振蕩頻率為15kHz;
(4)對(duì)步驟(3)得到的材料進(jìn)行去垢并清洗，去垢并清洗完成后將材料置于溶質(zhì)為環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤的混合物的水溶液，在14攝氏度條件下靜置過夜，清洗后制得帶有緩釋藥物的修復(fù)材料。
[0016]在步驟(I)中，清洗采用蒸餾水沖洗，消毒步驟為:將清洗后粘膜下層浸泡于0.5%過氧乙酸和10%乙醇混合溶液中2h，以上百分比為體積百分比。在步驟(2)中，冰醋酸占醋酸水溶液的質(zhì)量體積濃度為50g/L，粘膜下層材料與醋酸水溶液的質(zhì)量比為1: 5。在步驟(3)中，高滲透壓鹽溶液為氯化鈉水溶液，氯化鈉與氯化鈉水溶液的質(zhì)量比為I: 4.5。在步驟(4)中，去垢處理采用2%的SDS溶液，以上百分比為溶質(zhì)SDS占SDS水溶液的質(zhì)量百分比。在步驟
(4)中，環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤的質(zhì)量比為2:1:1，且環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤分別占環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤的混合物的水溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%、1%和1%。
[0017]對(duì)實(shí)施例1和2進(jìn)行HE染色實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)實(shí)施例1和2的材料未見細(xì)胞結(jié)構(gòu)。
[0018]對(duì)實(shí)施例1和2的材料抑制到小鼠的破損皮膚表面，觀察Id_7d后未見皮膚表面的感染。
[0019]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出:對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)取哺乳動(dòng)物的粘膜下層，清洗并消毒； (2)將粘膜下層在醋酸水溶液中浸泡5-15小時(shí)，取出粘膜下層并清洗得到醋酸處理后的材料； (3)取步驟(2)的材料投入高滲透壓鹽溶液中振蕩浸泡，取出所述處理后的材料并加純化水浸泡并振蕩浸泡，隨后排出加入的溶液，以所述高滲透壓鹽溶液和純化水對(duì)所述材料進(jìn)行交替振蕩浸泡處理，各重復(fù)循環(huán)操作2-3次； (4)對(duì)步驟(3)得到的材料進(jìn)行去垢并清洗，去垢并清洗完成后將材料置于溶質(zhì)為環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤的混合物的水溶液，在5-15攝氏度條件下靜置過夜，清洗后制得帶有緩釋藥物的修復(fù)材料。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法，其特征在于，在步驟(I)中，清洗采用蒸餾水沖洗，消毒步驟為:將清洗后粘膜下層浸泡于0.5%過氧乙酸和10%乙醇混合溶液中I _2h。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法，其特征在于，在步驟(2)中，冰醋酸占醋酸水溶液的質(zhì)量體積濃度為40-50g/L，粘膜下層與醋酸水溶液的質(zhì)量比為 1:5-1:15。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法，其特征在于，在步驟(3)中，高滲透壓鹽溶液為氯化鈉水溶液，氯化鈉與氯化鈉水溶液的質(zhì)量比為1:4.5。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法，其特征在于，在步驟(4 )中，去垢處理采用2%的SDS溶液。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法，其特征在于，在步驟(4)中，環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤的質(zhì)量比為2:1:1，且環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤分別占環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤的混合物的水溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%、1%和1%。
【專利摘要】本發(fā)明屬于生物修復(fù)材料領(lǐng)域，特別涉及一種帶有緩釋藥物的修復(fù)材料的制備方法，包括如下步驟：取哺乳動(dòng)物的粘膜下層，清洗并消毒；將粘膜下層在醋酸水溶液中浸泡5-15小時(shí)，取出粘膜下層并清洗得到醋酸處理后的材料；取上述材料投入高滲透壓鹽溶液中振蕩浸泡，取出所述處理后的材料并加純化水浸泡并振蕩浸泡，隨后排出加入的溶液，以所述高滲透壓鹽溶液和純化水對(duì)所述材料進(jìn)行交替振蕩浸泡處理；去垢并清洗，去垢并清洗完成后將材料置于溶質(zhì)為環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤的混合物的水溶液。本發(fā)明降低了免疫原性，提高環(huán)孢素、霉酚酸酯和硫唑嘌呤進(jìn)入粘膜下層材料內(nèi)的濃度，能夠緩慢釋放藥物以預(yù)防兼治療免疫排斥。
【IPC分類】A61L27/54, A61L27/36
【公開號(hào)】CN105664256
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610096594
【發(fā)明人】韓立軍
【申請(qǐng)人】江蘇期佰醫(yī)療技術(shù)有限公司
【公開日】2016年6月15日
【申請(qǐng)日】2016年2月23日