及其類似物，或它們的組合。此外，所述組合物可包含少量 的助劑例如潤(rùn)濕劑、懸浮劑(纖維素衍生物，包括羥丙基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素、 各種環(huán)糊精，及其類似物)、或乳化劑(例如聚山梨酯，包括聚山梨酯80(TWEEN_0)、聚山梨酯 20 (TWEEN? 20 )、山梨糖醇酯(SpanS)、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、油酸、D-α-生育酚聚乙二 醇10 0 0琥珀酸酯（TPGS )、泊咯沙姆4 0 7、以及各種專用洗滌劑，例如L^BRASOL其、 GELUC削 C仙M紐微教、.3肋?.、SOLUTO'LS.?、LAB狀HLS:?> SOmGENS?、和它們的變體；pH 緩沖劑、及其類似物。
[0067] 針對(duì)組合物的口服給藥形式，可以添加各種增稠劑、調(diào)味品、稀釋液、乳化劑、分散 助劑、結(jié)合劑、與活性劑的緩釋有關(guān)的成分、及其類似物。本發(fā)明的組合物可以包含任何這 種額外的成分使得能夠提供適于給藥的組合物形式。該組合物可以配制為食品，例如配制 為可以口服的薄片或"糖果"、飲品（treats)等;和/或配制為通過(guò)將它們添加到食品中而給 藥，例如添加到調(diào)味飲料、飲用水、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑等中的粉末或結(jié)晶體。組合物可配制為用于 快速釋放或緩釋。配方中活性劑的最終含量可變化。然而，總體上，其在配方中的含量為大 約0.1-99%。可以發(fā)現(xiàn)其他適用于本發(fā)明的適當(dāng)配方，例如參見(jiàn)Remington的"藥物科學(xué)"， 費(fèi)城，第19版(1995)。
[0068] 本發(fā)明的目的是為了避免給藥的活性劑的系統(tǒng)前代謝和/或降解。因此，一般通過(guò) 口服給藥，例如通過(guò)吞咽和/或咀嚼或溶解(在口腔)組合物而給藥，所述組合物可以是液體 或固體。然而，可以使用任何將活性劑暴露于系統(tǒng)前代謝酶的給藥方式。
[0069] 此外，組合物可以和下述其他治療物質(zhì)共同給藥，例如提高免疫系統(tǒng)的物質(zhì)、各種 化療藥物、抗癌藥物、抗生素及其類似物。其他治療物質(zhì)可以組合物的形式給藥，所述組合 物和包含類鴉片和抑制劑的組合物是分離的，但是它們能夠以相互協(xié)調(diào)的方式給藥，或者 它們可包含在相同的組合物中。
[0070] 本發(fā)明的組合物給藥針對(duì)的個(gè)體一般是動(dòng)物、通常是哺乳動(dòng)物，以及可以是人類 (例如成人和中年男性和女性。然而，本發(fā)明也包含將該技術(shù)應(yīng)用到獸醫(yī)領(lǐng)域，例如用于寵 物(狗、貓、雪貂、倉(cāng)鼠等）、牲畜（牛、豬、山羊、綿羊等）、其他具有商業(yè)價(jià)值的非人類哺乳動(dòng) 物(馬等）、以及保護(hù)區(qū)域例如動(dòng)物園、保護(hù)地等的動(dòng)物。本發(fā)明的組合物對(duì)于上述這些應(yīng)用 的一部分是理想的，因?yàn)楸景l(fā)明的組合物設(shè)計(jì)為口服給藥，從而可被包括在例如動(dòng)物食品 中。非人類動(dòng)物可以是青少年或成年期動(dòng)物。
[0071] 發(fā)明人注意到，此處及所附權(quán)利要求書中使用的單數(shù)形式的"一"、"一種"和"該" 包括復(fù)數(shù)的指示物，除非上下文中另有指示。發(fā)明人進(jìn)一步注意到權(quán)利要求書可以撰寫成 排除任何可選的特征。因此，該聲明意在作為以下的先行基礎(chǔ):使用與權(quán)利要求特征的引用 相關(guān)的排除性術(shù)語(yǔ)如"單獨(dú)地"、"僅僅"及類似術(shù)語(yǔ)，或使用"否定"的限定。
[0072] 除非另有說(shuō)明，此處所用的所有的技術(shù)和科技術(shù)語(yǔ)具有本領(lǐng)域技術(shù)人員通常理解 的含義。雖然與此處所述的相似或等同的任何方法和材料也可以用于本發(fā)明的實(shí)踐或測(cè) 試，但是現(xiàn)在提供代表性方法和材料的例子
[0073] 應(yīng)該理解的是，除非上下文另有清楚的指示，否則在本發(fā)明提供的一定范圍的數(shù) 值時(shí)，本發(fā)明包括所述范圍的每個(gè)居中值至下限單位的十分之一、所述范圍的上限和下限 之間的值、所述范圍中其他特定的值或中間值。這些更小范圍的上限和下限可獨(dú)立地包含 在更小的范圍內(nèi)，其也包含在本發(fā)明中，符合所述范圍內(nèi)特定排除的限值。當(dāng)所述范圍包括 一個(gè)或兩個(gè)限值時(shí)，本發(fā)明也包括下述范圍，其排除了那些已經(jīng)包含的限值中的一個(gè)或兩 個(gè)。
[0074] 在對(duì)本發(fā)明所述的代表性情況進(jìn)行如下實(shí)施例中更細(xì)致的描述之前，應(yīng)該理解本 發(fā)明不限于所描述的特定實(shí)施方式，其當(dāng)然可以變型。同樣應(yīng)該理解，此處所用術(shù)語(yǔ)僅僅是 為了描述特定情況的目的，而不是意在進(jìn)行任何限制，因?yàn)楸景l(fā)明的范圍僅由所附權(quán)利要 求來(lái)限制。
[0075] 本發(fā)明中引用的所有出版物和專利均通過(guò)引用的方式包含在此處，相當(dāng)于每個(gè)出 版物或?qū)＠惶貏e地和單獨(dú)地指明通過(guò)引用而包含，以及通過(guò)引用包含在此處以公開和描 述所引用出版物相關(guān)的方法和/或材料。任何出版物的引用都是為了它在申請(qǐng)日之前公開 的內(nèi)容，不應(yīng)該被認(rèn)為是承認(rèn)本發(fā)明沒(méi)有先于這些出版物。進(jìn)一步地，此處提供的出版物日 期可能與實(shí)際出版不同。
[0076]在閱讀上述公開內(nèi)容后，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見(jiàn)的是所述的每個(gè)方面(情 況)和此處的舉例具有不連續(xù)的成分和特征，其可以容易地和其他方面的特征分開，或與其 他方面的特征相結(jié)合，而不背離本發(fā)明的范圍或精神。任何引用的方法可以所引用的順序 或邏輯上可行的順序操作。
[0077]實(shí)施方式
[0078] 除非另有說(shuō)明，下述章節(jié)中所述的體外實(shí)驗(yàn)均使用高加索人結(jié)腸癌LS180細(xì)胞進(jìn) 行。這些細(xì)胞在現(xiàn)有技術(shù)中被視為人腸細(xì)胞培養(yǎng)模型。它們可以表達(dá)很寬范圍內(nèi)的藥物代 謝酶，這與小腸中發(fā)現(xiàn)的那些類似。它們很容易生長(zhǎng)并提供可復(fù)制的結(jié)果。LS180細(xì)胞也表 達(dá)ATP-結(jié)合盒(ABC)轉(zhuǎn)運(yùn)體(P-糖蛋白、多藥耐藥性相關(guān)蛋白（MRPs)等）。
[0079] 實(shí)施例1.抑制劑對(duì)丁丙諾啡-葡萄糖苷酸形成在LS180細(xì)胞中的影響
[0080] 酚醛類鴉片的口服生物利用度一般較低(例如〈50%)。此外，在不同的病人中，生 物利用度變化很大。雖然也可以觀察到氧化和一些硫酸鹽化作用，但該變異性主要取決于 廣泛的系統(tǒng)前代謝例如葡萄糖苷酸化。
[0081] 人腸細(xì)胞(LS180)在微孔板中用添加了10%胎牛血清和1 %非必須氨基酸的杜爾 貝科改良伊格爾培養(yǎng)基(DMEM)中進(jìn)行培養(yǎng)。在抑制劑(如之前所述（100μΜ))存在或不存在 下，在杜爾貝科磷酸緩沖鹽溶液(DPBS)中制備丁丙諾啡（10μΜ)溶液。細(xì)胞用DPBS沖洗、送 氣，將溶液(37°C)添加到細(xì)胞中并培養(yǎng)2小時(shí)。通過(guò)添加20%的乙腈停止反應(yīng)并使得蛋白質(zhì) 沉淀。在冰凍(-80°C)和融化之后，樣品離心并通過(guò)HPLC采用梯度洗脫(流動(dòng)相A:乙腈;流動(dòng) 相B:10% 乙腈、90%水25mM乙酸銨；0-78%A)Alltima HP C18柱（4.6x100 mm，3ym)進(jìn)行分 析，隨后通過(guò)焚光（283nm激發(fā)、346nm發(fā)射)檢測(cè)，以及使用Waters Empower2軟件進(jìn)行定量。 結(jié)果使用Dunnett的事后檢驗(yàn)(對(duì)照樣對(duì)抑制劑)通過(guò)單因素方差分析；星號(hào)表示p〈0.05; n.d.表不未檢出。
[0082]圖3表明丁丙諾啡-葡萄糖苷酸形成在體外（LS180細(xì)胞中）的時(shí)間過(guò)程，類鴉片丁 丙諾啡的無(wú)活性代謝產(chǎn)物通過(guò)UGT因丁丙諾啡葡萄糖苷酸化而形成。
[0083]圖4A表明了對(duì)羥基苯甲酸丙酯、乙基香蘭素、丁子香酚、和香蘭素均顯著降低了丁 丙諾啡葡萄糖苷酸的形成，針對(duì)槲皮素、白藜蘆醇、或異丁子香酚，不能對(duì)丁丙諾啡葡萄糖 苷酸的形成進(jìn)行定量，因?yàn)槠湮幢粰z出。圖4B表明姜油酮、胡椒堿、和乙基香蘭素丙二醇縮 醛(EVPGA)均顯著降低了丁丙諾啡葡萄糖苷酸的形成，針對(duì)姜黃素、紫檀芪、或沒(méi)食子酸丙 酯，不能對(duì)丁丙諾啡葡萄糖苷酸的形成進(jìn)行定量，因?yàn)槠湮幢粰z出?？梢缘玫綄?duì)羥基苯甲酸 甲酯的測(cè)定，其表明了丁丙諾啡葡萄糖苷酸有降低的趨勢(shì)?？偠灾?，對(duì)羥基苯甲酸丙酯、 乙基香蘭素、丁子香酚、香蘭素、槲皮素、白藜蘆醇、異丁子香酚、姜油酮、胡椒堿、乙基香蘭 素丙二醇縮醛(EVPGA)、姜黃素、紫檀芪、沒(méi)食子酸丙酯、和對(duì)羥基苯甲酸甲酯均能降低丁丙 諾啡葡萄糖苷酸的形成。
[0084] 實(shí)施例2.其他抑制劑對(duì)丁丙諾啡-葡萄糖苷酸形成在LS180細(xì)胞中的影響
[0085] 在存在或不存在如圖5A和B所示的抑制劑（100μΜ)的條件下，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)、處 理，樣品通過(guò)丁丙諾啡（1〇μΜ)如實(shí)施例1中所述進(jìn)行分析。圖5Α表明覆盆子酮、厚樸酚、愈創(chuàng) 木酚、α-倒捻子素、和水飛薊賓均顯著降低了丁丙諾啡葡萄糖苷酸的形成，針對(duì)松脂醇，不 能對(duì)丁丙諾啡葡萄糖苷酸的形成進(jìn)行定量，因?yàn)槠湮幢粰z出。相比之下，矢車菊素-3-葡萄 糖苷沒(méi)有顯著影響。這些結(jié)果表明覆盆子酮、厚樸酚、愈創(chuàng)木酚、α-倒捻子素、水飛薊賓和松 脂醇降低了丁丙諾啡葡萄糖苷酸的形成。
[0086 ]實(shí)施例3.抑制劑組合的協(xié)同作用
[0087] 在存在或不存在如下試劑的條件下，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)、處理，樣品通過(guò)丁丙諾啡 (IOyM)如上所述(實(shí)施例1)進(jìn)行分析:香蘭素(24μΜ)、異丁子香酚(24μΜ)、沒(méi)食子酸丙酯（24 μΜ)、香蘭素和異丁子香酚(每種12μΜ、或總共12μΜ)、香蘭素和沒(méi)食子酸丙酯(每種12μΜ、或 總共12μΜ)、異丁子香酚和沒(méi)食子酸丙酯（每種12μΜ、或總共12μΜ)，以及香蘭素、異丁子香 酚、和沒(méi)食子酸丙酯的組合(每種8μΜ、或總共8μΜ)。結(jié)果（圖5Β)表明這些試劑中的每種均能 顯著抑制丁丙諾啡葡萄糖苷酸的形成(Ρ〈〇.05)。雖然香蘭素和沒(méi)食子酸丙酯的組合僅僅是 加和的（產(chǎn)生與兩種抑制劑的平均值相等的效果），但其他組合(異丁子香酚和沒(méi)食子酸丙 酯；香蘭素和異丁子香酚;香蘭素和異丁子香酚以及沒(méi)食子酸丙酯）則是協(xié)同的（產(chǎn)生比全 部抑制劑的平均值更高的效應(yīng)）。這些結(jié)果表明抑制劑的特定組合在抑制丁丙諾啡葡萄糖 苷酸的形成方面產(chǎn)生了令人出乎意料的協(xié)同效應(yīng)。
[0088] 分配系數(shù)是兩種溶液之間的非離子化合物的濃度比例。為了測(cè)量可電離溶質(zhì)的分 配系數(shù)，調(diào)整水相的PH值使得化合物的主要形式是非離子形式。溶劑中非離子溶質(zhì)的濃度 比例的對(duì)數(shù)值稱為log P:log P值也稱為親油性測(cè)量值。
[0089] 圖7表明下述抑制劑的IC5q值:異丁子香酚、紫檀芪、槲皮素、白藜蘆醇、香蘭素、和 a-倒捻子素，相對(duì)于計(jì)算的Log P值(cLogP;美國(guó)化學(xué)學(xué)會(huì)(ACS)SciFinder)的圖表。該圖表 表明cLogP僅與抑制劑的IC50值低相關(guān)，因此，簡(jiǎn)單的親油性不足以預(yù)測(cè)這些化合物抑制丁 丙諾啡的葡萄糖苷酸化的程度。
[0090] 實(shí)施例4.酚醛類鴉片:體內(nèi)進(jìn)行的檢驗(yàn)
[0091]健康的頸靜脈插管的雄性大鼠（280_350g)通過(guò)口腔喂食的給藥丁丙諾啡的劑量 是10mg/kg、納洛酮2.5mg/kg，該給藥在存在或不存在抑制劑的組合的條件下進(jìn)行。液體配 方是含有如下物質(zhì)的水自發(fā)微乳液/納米乳液配方（aqueous spontaneous micro/ nano