Penicillactones C在制備抑制肝臟成纖維細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明設(shè)及化合物化nicillactones C的新用途，尤其設(shè)及化nicillactones C在 制備抑制肝臟成纖維細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 肝纖維化是慢性肝損傷向肝硬化發(fā)展的動(dòng)態(tài)過(guò)程，過(guò)去的20年間，肝纖維化的研 究取得了長(zhǎng)足進(jìn)展，證實(shí)肝纖維化與一定程度的肝硬化都是可逆的。近年來(lái)陸續(xù)出現(xiàn)了一 些抗肝纖維化治療方法，包括化學(xué)藥、生物制劑、中藥與基因療法等，但是理想的臨床治療 手段仍然缺乏，目前防治肝纖維的關(guān)鍵是針對(duì)與肝星狀細(xì)胞激活相關(guān)的環(huán)節(jié)，主要是:減輕 肝損傷;抑制星狀細(xì)胞激活，減少細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生；調(diào)節(jié)細(xì)胞因子素亂，促進(jìn)活化肝星狀細(xì) 胞調(diào)亡。
[0003] 本發(fā)明設(shè)及的化合物Penicillactones C是一個(gè)2013年發(fā)表（Yunbao Liu，et al.,Structures and Absolute Configurations of Penicillactones A C from an Endophytic Microorganism,Penicilliumdangeardii Pitt.ORGANIC LETTERS,2013，15 (20)5206-5209.)的新化合物，該化合物擁有全新的骨架類(lèi)型（Yunbao Liu, et al.， Structures and Absolute Configurations of Penicillactones A C from an Endophytic Microorganism,Penicilliumdangeardii Pitt.ORGANIC LETTERS,2013，15 (20)5206-5209.)，本發(fā)明設(shè)及的化nicillactones C在制備抑制肝臟成纖維細(xì)胞增殖藥物 中的用途屬于首次公開(kāi)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于根據(jù)現(xiàn)有化nicillactones C研究中未發(fā)現(xiàn)其具有抑制肝臟成 纖維細(xì)胞增殖活性的報(bào)道的現(xiàn)狀，提供了化nicillactones C在制備抑制肝臟成纖維細(xì)胞 增殖藥物中的應(yīng)用。
[000引所述化合物化nicillactones C結(jié)構(gòu)如式（I)所示：
[0006]
[0007] 所述Pen i C i 11 ac tone S C在抑制肝臟成纖維細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用， Penicillactones巧Φ制成纖維細(xì)胞NIH/3T3增殖。
[0008] -種抑制肝臟成纖維細(xì)胞增殖藥物，由Penicillactones C為活性成分添加輔料 制備而成，制備方法為取5克化合物化nicillactones C，加入糊精195克，混勻，常規(guī)壓片制 成1000片。
[0009] -種抑制肝臟成纖維細(xì)胞增殖藥物，由Penicillactones C為活性成分添加輔料 制備而成，制備方法為取5克化合物化nicillactones C，加入淀粉195克，混勻，裝膠囊制成 1000粒。
[0010] 本發(fā)明對(duì)化nicillactones巧Φ制肝臟成纖維細(xì)胞增殖作用進(jìn)行了藥理試驗(yàn)?；?化的肝星狀細(xì)胞化SC)具有成纖維細(xì)胞特征，NIH/3T3細(xì)胞是研究藥物抗肝纖維化活性常用 的細(xì)胞模型。本研究WNIH/3T3成纖維細(xì)胞為祀細(xì)胞，觀察發(fā)明藥物對(duì)其增殖的影響。用MTT 法檢測(cè)的抑制細(xì)胞增殖的試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明藥物對(duì)NIH/3T3的細(xì)胞增殖有顯著的抑制 活性。結(jié)果證明化nici 1 lactones C具有抗肝纖維化作用。
【具體實(shí)施方式】
[0011] 本發(fā)明所設(shè)及化合物Penicillactones C的制備方法參見(jiàn)文獻(xiàn)（Yunbao Liu,et al.,Structures and Absolute Configurations of Penicillactones A C from an Endophytic Microorganism,Penicilliumdangeardii Pitt.ORGANIC LETTERS,2013，15 (20)5206-5209.)
[0012] W下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加 W限定。
[0013] 實(shí)施例1:本發(fā)明所設(shè)及化合物化nicillactones C片劑的制備：
[0014] 取5克化合物化nicillactones C，加入糊精195克，混勻，常規(guī)壓片制成1000片。 [001引實(shí)施例2:本發(fā)明所設(shè)及化合物化nicillactones C膠囊劑的制備：
[0016] 取5克化合物化nicillactones C，加入淀粉195克，混勻，裝膠囊制成1000粒。
[0017] 下面通過(guò)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明其藥物活性。
[0018] 實(shí)驗(yàn)例一:采用MTT法評(píng)價(jià)化合物化nicillactones C對(duì)肝纖維化的抑制作用
[0019] 1、方法：NIH/3T3細(xì)胞株購(gòu)自引自ATCC(American Type CulUire Collection)的 中科院上海細(xì)胞所細(xì)胞庫(kù)。將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的亞融合的NIH/3T3細(xì)胞用0.25%膜酶消化，洗 涂，離屯、后，用DMEM培養(yǎng)液(含10%FCS)制成lXl〇4cell/ml的細(xì)胞懸液，臺(tái)吩藍(lán)染色鑒定存 活率大于95%，按每孔lOOul加入96孔板中，在37°C、5%C〇2培養(yǎng)2地同步處理后，棄上清，加 入含有不同稀釋濃度藥物的培養(yǎng)液(含10%FCS)200ul，培養(yǎng)4她，每孔加入MTT溶液解 育4h。棄去培養(yǎng)液，加入150U1DMS0，振蕩10分鐘，使結(jié)晶溶解，酶標(biāo)儀490nm處讀取0D值，結(jié) 果W 0〇49日表不。
[0020] 2.結(jié)果：
[0021] 2.1形態(tài)學(xué)觀察
[0022] NIH/3T3在用藥前伸展良好，折光性較弱，有方向性，呈放射狀，細(xì)胞增殖的速度 快;而加藥物24h后，成纖維細(xì)胞數(shù)目減少，形狀變得不規(guī)則，突起變短，細(xì)胞排列混亂，細(xì)胞 內(nèi)代謝產(chǎn)物增多。
[0023] 表1 :MTT法檢測(cè)本發(fā)明藥物對(duì)NIH/3T3增殖的抑制作用
[0024]
[002引注：與細(xì)胞陰性對(duì)照比較沖<0.05 ;*沖<0.01
[0026] 結(jié)果:本發(fā)明藥物在10ug/ml-40ug/ml的濃度范圍內(nèi)對(duì)成纖維細(xì)胞NIH/3T3在10% 小牛血清的刺激下的細(xì)胞增殖有顯著的抑制作用。表明本發(fā)明藥物體外對(duì)纖維細(xì)胞的增殖 有顯著抑制作用。
[0027] 實(shí)驗(yàn)例2:本發(fā)明藥物對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-&(TGF-i3i)誘導(dǎo)的成纖維細(xì)胞增殖的抑制 作用
[002引 TGF-βι是促進(jìn)細(xì)胞增殖和膠原生成的強(qiáng)活性因子，在細(xì)胞中加入TGF-MOng/ml刺 激細(xì)胞增殖，在檢測(cè)藥物對(duì)TGF-m誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖的抑制作用，W分析判斷本發(fā)明藥物的 作用機(jī)理。
[0029] 表2 :MTT法檢測(cè)本發(fā)明藥物對(duì)TGF誘導(dǎo)NIH/3T3增殖的抑制作用
[0030]
[0031 ] 注:*，與細(xì)胞+TGF對(duì)照P<0.05; **，與細(xì)胞+TGF對(duì)照P<0.01
[0032] 結(jié)果:本發(fā)明藥物在10-40ug/ml兩個(gè)濃度區(qū)間內(nèi)對(duì)成纖維細(xì)胞NIH/3T3在TGF-m 的誘導(dǎo)下的細(xì)胞增殖有顯著的抑制作用。表明本發(fā)明藥物體外對(duì)纖維細(xì)胞增殖的抑制作用 可能是通過(guò)干預(yù)TGF信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)的。
[0033] 由上述實(shí)施例表明，本發(fā)明對(duì)成纖維細(xì)胞NIH/3T3在10%小牛血清的刺激下的細(xì) 胞增殖有顯著的抑制作用;Penicillactones C對(duì)成纖維細(xì)胞NIH/3T3在TGF-βΙ的誘導(dǎo)下的 細(xì)胞增殖有顯著的抑制作用。由此證明，Penicillactones C可W明顯抑制肝纖維化的發(fā)生 和發(fā)展，可用于制備抗肝纖維化、防治肝硬化的藥物。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. Penicil lactones C在抑制肝臟成纖維細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用，所述化合物 Penicillactones C結(jié)構(gòu)如式（I)所示：2. 如權(quán)利要求1所述Penicillactones C在抑制肝臟成纖維細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用，其 特征在于Penicillactones C抑制成纖維細(xì)胞NIH/3T3增殖。3. -種抑制肝臟成纖維細(xì)胞增殖藥物，其特征在于由權(quán)利要求1所述Penicillactones C為活性成分添加輔料制備而成，制備方法為取5克化合物Penicillactones C,加入糊精 195克，混勻，常規(guī)壓片制成1000片。4. 一種抑制肝臟成纖維細(xì)胞增殖藥物，其特征在于由權(quán)利要求1所述Penicillactones C為活性成分添加輔料制備而成，制備方法為取5克化合物Penicillactones C，加入淀粉 195克，混勻，裝膠囊制成1000粒。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了Penicillactones？C在制備治療肝纖維化藥物的用途。藥理試驗(yàn)證明，Penicillactones？C可以明顯抑制肝纖維化的發(fā)生和發(fā)展，可用于制備抗肝纖維化、防治肝硬化的藥物，Penicillactones？C屬于全新的骨架類(lèi)型，而且其對(duì)于肝臟成纖維細(xì)胞增殖抑制活性強(qiáng)，具備突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)，同時(shí)用于抗肝臟成纖維細(xì)胞增殖顯然具有顯著的進(jìn)步。
【IPC分類(lèi)】A61P1/16, A61K31/365
【公開(kāi)號(hào)】CN105456254
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510962308
【發(fā)明人】田麗華
【申請(qǐng)人】淄博齊鼎立專(zhuān)利信息咨詢有限公司
【公開(kāi)日】2016年4月6日
【申請(qǐng)日】2015年12月18日