青稞麩皮提取物在制備α-葡萄糖苷酶活性抑制劑中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及農(nóng)副產(chǎn)品深加工及綜合利用領(lǐng)域；更具體地涉及青稞麩皮提取物在制 備α-葡萄糖苷酶活性抑制劑中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 糖尿病（DiabetesMellitus，DM)及其并發(fā)癥嚴(yán)重威脅著人類的健康，第17屆國(guó) 際糖尿病大會(huì)報(bào)道，全球已確診1. 5億人，預(yù)測(cè)2025年將增至3億。在發(fā)達(dá)國(guó)家DM患病率 已達(dá)3 %~7 %，成為僅次于癌癥、艾滋病、心血管病之后第4位需要優(yōu)先考慮的疾病，已成 為世界第5位死亡主因。我國(guó)的情況也不容樂(lè)觀，2015年國(guó)家衛(wèi)計(jì)委發(fā)布的《中國(guó)居民營(yíng)養(yǎng) 與慢性病狀況報(bào)告》中指出，當(dāng)前我國(guó)18歲及以上成人糖尿病患病率為9. 7%，約已經(jīng)達(dá)到 了 1.06億，還有上億糖尿病高危人群。因而研究開(kāi)發(fā)預(yù)防糖尿病發(fā)生的功能食品和高效、 無(wú)毒副作用的降糖藥物，是刻不容緩的事情。
[0003] α-葡萄糖苷酶（a-Glucosidase)位于小腸刷狀細(xì)胞表面。多糖只有水解 成單糖后才能被人體吸收，而α-葡萄糖苷酶是多糖水解中的關(guān)鍵酶類[KimSD，Nho HJ.Isolationandcharacterizationofa-glucosidaseinhibitorfromthe fungusganodermalucidm.J.Microbiology, 2004, 42, 223-227]，是人體糖代謝中最重 要的酶之一。研究表明，α-葡萄糖苷酶抑制劑類藥物能夠通過(guò)降低α-葡萄糖苷酶 的活性、調(diào)節(jié)餐后胃腸激素的方式而有效控制餐后血糖的升高，產(chǎn)生較為理想的降糖效 果[RequejoF,UttenthalL0,BloomSR.Effectsofa-glucosidaseinhibitionand viscousfibreondiabeticcontrolandpostprandialguthormoneresponse. DiabetMed, 1990,7,515-520][MoritohY,TakeuchiK,HazamaM.Voglibose,and alpha-glucosidaseinhibitor,toincreaseactiveglucagon-likepeptide-llevels. MolCellPharmacol, 2009, 1，188-192]。a-葡萄糖苷酶抑制劑，依其來(lái)源可劃分為微生物 代謝物、天然動(dòng)植物或微生物提取物和化學(xué)合成物三大類。目前已被批準(zhǔn)用于臨床糖尿病 治療的α-葡萄糖苷酶抑制劑主要為化學(xué)合成藥物，包括：阿卡波糖（Acarbose)、伏格列波 糖（Voglibose)和米格列醇（Miglitol)。因長(zhǎng)期服用化學(xué)合成藥物會(huì)產(chǎn)生副作用，因此從 天然植物中獲得更安全、高效的抑制劑的尋求仍然是II型糖尿病治療藥物和功能性食品開(kāi) 發(fā)的研究熱點(diǎn)。
[0004] 目前，應(yīng)用到臨床的α-葡萄糖苷酶抑制劑多為糖及其衍生物類的競(jìng)爭(zhēng)性抑制 劑，而α-葡萄糖苷酶非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑通過(guò)與酶的非活性部位結(jié)合導(dǎo)致其酶活性降低， 基本上屬于非糖基化合物。通常，非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑大都是通過(guò)篩選隨機(jī)得到的。已報(bào)道 的從天然產(chǎn)物中得到的α-葡萄糖苷酶非糖基化合物抑制劑并沒(méi)有統(tǒng)一的結(jié)構(gòu)模型，種 類繁多，包括：姜黃素類、黃酮類、咕噸酮類、喹唑啉類、Schulzeine、芪類和萜類等[Melo EB,GomesASandCarvalhoI.a-andβ-glucosidaseinhibitors:chemicalstructure andbiologicalactivity.Tetrahedron, 2006,62:10277-10302]。因此，從天然產(chǎn)物 中篩選α-葡萄糖苷酶非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑是尋找高效治療II型糖尿病藥物的有效途徑。CN101849973.Α公開(kāi)了具有降血糖作用的樺褐孔菌總?cè)频闹苽浞椒?，方法中依次采用?醇水溶液提取、石油醚萃取、正丁醇萃取、干燥等工藝，獲得三萜含量70-300mg/g的樺褐孔 菌總?cè)铺崛∥?。CN101953867.A公開(kāi)了具有α-葡萄糖苷酶抑制作用的天山雪蓮石油醚 提取物的制備方法。CN101810625A公開(kāi)一種含量為5%~100%的蒲公英甾醇對(duì)α-葡萄 糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用。CN103705593A公開(kāi)了從矮生二裂葉委陵菜中提取α-葡 萄糖苷酶抑制劑的方法，具體步驟：原料經(jīng)粉碎后用6倍體積的70%乙醇回流提取，提取液 濃縮后依次進(jìn)行石油醚、乙酸乙酯萃取，萃取液真空干燥得α-葡萄糖苷酶抑制劑。已報(bào)道 的技術(shù)通常含有多步提取、萃取過(guò)程，步驟均較為繁瑣。
[0005] 青稞（HordeumvulgareL.var.nudumhook.f.)是我國(guó)青藏高原地區(qū)特有的一種 尚蛋白、尚纖維、尚維生素、低脂肪、低糖的多棱裸粒大麥。由于青棵生長(zhǎng)在尚海拔地區(qū)，尚 寒、缺氧、強(qiáng)光照的極端環(huán)境，青稞相比其他谷物含有更豐富的次生代謝產(chǎn)物和更明顯的保 健特性。人群調(diào)查試驗(yàn)已對(duì)青稞降血脂、降體重、改善胰島素敏感性等保健作用進(jìn)行了驗(yàn) 證，同時(shí)，青稞中的β-葡聚糖降血脂、降膽固醇、改善胰島素敏感性等藥理活性也已被證 實(shí)。此外，朱穎秋等研究結(jié)果顯示超臨界C02萃取的青稞麩皮油對(duì)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠的血 脂有很明顯的調(diào)節(jié)作用，可預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生[朱穎秋，蔣思萍，包善飛，等.超臨界 C02萃取青稞麩皮油對(duì)高脂血癥大鼠降脂作用研究[J].四川動(dòng)物，2013, 32 (2) :272-275]。 報(bào)道并未涉及超臨界〇)2萃取的工藝參數(shù)，且該研究認(rèn)為青稞麩皮油中的亞油酸、十八碳烯 酸是降低血清TC、LDL-C的有效成分。
[0006] 總體而言，對(duì)青稞麩皮提取物的制備工藝及其功效作用的研究報(bào)道仍較少，且以 對(duì)β-葡聚糖、花色苷、黃酮等為主。中國(guó)專利文獻(xiàn)CN101555294A公開(kāi)了利用二次纖維素 酶酶解青稞麩皮，后續(xù)經(jīng)過(guò)堿提離心、酸提離心除蛋白、高溫α-淀粉酶酶解、離心醇沉、硫 酸銨沉淀等系列工藝后分別制得β-葡聚糖和青稞膳食纖維；CN104725526A公開(kāi)了利用堿 提酸沉、過(guò)濾脫色、濃縮等步驟制備β-葡聚糖的方法；CN201410350638. 8公開(kāi)了一次性連 續(xù)分離青稞蛋白、淀粉、纖維素和β-葡聚糖的方法，具體包括以下步驟：將青稞粉碎，粉碎 產(chǎn)物中加水并調(diào)節(jié)pH提取，過(guò)篩，篩上物烘干研磨后得青稞纖維粉；篩下物離心得第一沉 淀物為青稞淀粉；第一上清液調(diào)節(jié)pH離心后得第二沉淀物為青稞蛋白；第二上清液超濾得 透過(guò)液濃縮離心得第三沉淀物為青稞β-葡聚糖；CN200710039964. 7公開(kāi)了以β-葡聚糖 為主成分的青稞提取物在治療神經(jīng)干細(xì)胞缺血藥物中的應(yīng)用；CN200910168946. 8公開(kāi)了 含青稞β-葡聚糖的降血脂藥物的配方及其制劑；CN201310196869. 3公開(kāi)從紫色青稞中 分離花色苷的方法；CN201310400124. 4公開(kāi)了黑青稞籽皮類黃酮及其制備方法與應(yīng)用，該 黑青稞籽皮類黃酮具有預(yù)防和治療缺氧損傷的作用；CN101696381A公開(kāi)了用常規(guī)含水醇 溶媒回流提取青稞幼苗中黃酮類化合物的制備新工藝，方法中采用管式離心機(jī)除去雜質(zhì)、 陶瓷膜過(guò)濾澄清、超濾膜截留分離和納濾膜脫鹽濃縮等工序，最后經(jīng)噴霧干燥或微波干燥 制得含總黃酮80. 1%~14. 9%的青稞黃酮提取物；CN201410604115. 1公開(kāi)了青稞膳食纖 維-多酚復(fù)合物的制備方法；CN201410603523. 5公開(kāi)了青稞膳食纖維中多酚化合物的分離 方法；CN201410151798.X公開(kāi)了青稞胚芽油閃式提取的制備方法，獲得的胚芽油富含維生 素Ε、維生素D和谷維素；CN201410851568. 4公開(kāi)了一種對(duì)糖尿病患者有保健功能的蠶豆 青稞餅干及其生產(chǎn)方法；CN201310506264.X公開(kāi)了一種具有抗疲勞功能的含青稞苗提取 物的青稞全粉餅干，該餅干能顯著提高小鼠的爬桿和負(fù)重游泳時(shí)間；另有多項(xiàng)專利涉及了 降低血脂、提高人體免疫力、提高記憶力、預(yù)防心血管疾病等功能的含有青稞或青稞提取物 的保健食品、飲