)腹腔注射麻醉，5%硫化鈉背部脫毛， 用75%酒精棉球消毒后，在大鼠背部近臀側(cè)脊柱兩側(cè)相同部位用打孔器制做直徑約2. 5cm 的創(chuàng)面2個(gè)，皮膚圓形全層切除，止血，形成機(jī)械損傷動(dòng)物模型。所有大鼠單籠喂養(yǎng)，自由充 分飲水。
[0019] 將模型大鼠75只隨機(jī)分為模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組和中藥提取物A、B、C組，每組 15只。中藥提取物A、B、C組分別施用各實(shí)施例制備的中藥提取物A、B、C，各中藥提取物干 膏粉分別加入注射用水中配制成2%的藥液，每次局部涂抹給藥0. 5mL (采用注射器滴加的 方式將藥物緩慢浸入傷口，給藥后對(duì)創(chuàng)面進(jìn)行反復(fù)輕揉，使藥物充分吸收），陽性對(duì)照組施 用重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子噴霧劑（bEGF，貝復(fù)濟(jì)，珠海億勝生物制藥有限公司，國 藥準(zhǔn)字S10980077)，按照產(chǎn)品說明書規(guī)定每次噴藥1下，模型對(duì)照組施用生理鹽水，方法同 提取物組。各組每天早晚各給藥1次，持續(xù)2周。觀察大鼠傷口愈合情況，愈合早期有無滲 出、出血，后期傷口愈合及瘢痕形成等，記錄創(chuàng)面愈合時(shí)間。采用透明硫酸膜描記法記錄傷 后不同時(shí)間的創(chuàng)面面積，即于制創(chuàng)后〇d，3d，6d，9d，14d，21d用半透明紙繪得創(chuàng)面的圖形， 再將圖形描至小方格紙，以小方格的格數(shù)表示創(chuàng)面面積，并與涂藥前（〇d)比較計(jì)算每只動(dòng) 物的每個(gè)創(chuàng)面不同時(shí)間的創(chuàng)面愈合百分率。創(chuàng)面愈合百分率=[(用藥前面積一用藥后面 積/用藥前面積）]Χ1〇〇%。
[0020] 另外，各組術(shù)后分別于第3,6,9，14,21天時(shí)間點(diǎn)上隨機(jī)各抽取3只，水合氯醛 (300mg/kg)麻醉后，切取距創(chuàng)面外側(cè)各0. 3cm，以創(chuàng)面為中心的全層皮膚及皮下組織，并處 死動(dòng)物，切取創(chuàng)面組織，10 %的甲醛溶液固定，石蠟包埋。取包埋的皮膚組織常規(guī)切片，HE染 色后，光鏡下觀察肉芽組織及膠原的形成情況，評(píng)價(jià)創(chuàng)面愈合質(zhì)量。
[0021] 試驗(yàn)結(jié)果如下：
[0022] (1)術(shù)后24h，模型對(duì)照組和中藥提取物B組大鼠傷口濕潤，受損組織呈紅色，有滲 出液，陽性組、中藥提取物A和C組創(chuàng)面開始出現(xiàn)少許紅暈，表明肉芽組織已在生長。術(shù)后 3d，模型對(duì)照組和中藥提取物B組創(chuàng)面紅腫減輕，有少許滲出液，陽性組、中藥提取物A和C 組肉芽組織生長明顯，局部已長出薄層或點(diǎn)狀上皮，創(chuàng)面周邊及基底部肉芽組織生長旺盛 見鮮紅的肉芽組織，呈顆粒狀，觸之易出血。中藥提取物C組與A組相比，創(chuàng)面干燥且創(chuàng)緣 皮膚收縮明顯。
[0023] (2)術(shù)后6d，模型對(duì)照組和中藥提取物B組傷口濕潤，有滲出物，收縮不明顯，僅見 薄層肉芽，未見明顯的新生上皮，陽性組、中藥提取物A和C組傷口干燥、無感染，創(chuàng)面已基 本被肉芽組織所填充。陽性組、中藥提取物A和C組創(chuàng)面結(jié)黑色硬血痂，中藥提取物A組中 創(chuàng)面結(jié)暗紅色血痂。術(shù)后9d，模型對(duì)照組和中藥提取物B組肉芽組織緩慢生長，創(chuàng)面皮膚開 始收縮，開始結(jié)痂，陽性組、中藥提取物A和C組創(chuàng)面已全部被新生肉芽組織填充，中藥提取 物C組部分痂皮自然或非自然脫落，新生表皮嫩而薄，呈紅色，中藥提取物A組創(chuàng)面結(jié)黑色 血痂。
[0024] (3)術(shù)后14d，模型對(duì)照組和中藥提取物B組創(chuàng)面已基本被肉芽組織所填充，結(jié)出 暗紅色血痂，陽性組、中藥提取物A和C組痂皮大部分脫落且瘢痕明顯，中藥提取物C組創(chuàng) 面上痂皮脫落多于中藥提取物A組且C組痂皮脫落后瘢痕呈淡紅色，A組中呈紅色。術(shù)后 21d各組創(chuàng)面基本愈合，模型對(duì)照組和中藥提取物B組瘢痕明顯且呈紅色，陽性組、中藥提 取物A和C組瘢痕區(qū)域減小且呈肉色。
[0025] (4)術(shù)后第3~9d，陽性組、中藥提取物A和C組的愈合率明顯高于模型對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 〇. 05或P < 0. 01);術(shù)后第14d，中藥提取物C組的愈合率明顯高 于模型對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0. 01)，其它組的愈合率與模型對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì) 學(xué)意義（P > 0.05)。
[0026] 表1各組大鼠皮膚愈合率比較（η = 6，％ )
[0028] 與模型對(duì)照組比較，*Ρ < 0· 05，**Ρ < 0· 01。
[0029] (5)創(chuàng)面組織的HE染色結(jié)果顯示：術(shù)后3d，各組血痂下都有新生的表皮舌和炎癥 細(xì)胞的浸潤，出現(xiàn)少量FB細(xì)胞。陽性組、中藥提取物A和C組炎癥細(xì)胞較少。術(shù)后6d，陽 性組、中藥提取物A和C組新生表皮明顯增厚，肉芽組織明顯增生，真皮內(nèi)見小血管長入并 發(fā)現(xiàn)大量的FB細(xì)胞；模型對(duì)照組和中藥提取物B組呈現(xiàn)出較強(qiáng)的炎癥反應(yīng)，表皮層稀薄， FB細(xì)胞明顯少于中藥提取物A和C組。術(shù)后9d，各組組織內(nèi)FB細(xì)胞大量增殖，新生毛細(xì)血 管較多，各組膠原排列紊亂。陽性組、中藥提取物A和C組表皮層已基本愈合且具有明顯的 分層結(jié)構(gòu)，模型對(duì)照組和中藥提取物B組表皮層尚未完全覆蓋創(chuàng)面且分層結(jié)構(gòu)不明顯。陽 性組、中藥提取物A和C組炎癥浸潤不明顯，模型對(duì)照組和中藥提取物B組仍有炎癥浸潤現(xiàn) 象。術(shù)后14d，各組FB細(xì)胞和毛細(xì)血管較少。陽性組、中藥提取物A和C組FB細(xì)胞明顯減 少且新生膠原排列整齊，細(xì)胞分化明顯，創(chuàng)面愈合。模型對(duì)照組和中藥提取物B組炎癥細(xì)胞 減少，F(xiàn)B細(xì)胞較多，形成表皮分層結(jié)構(gòu)，但新生膠原排列紊亂。術(shù)后21d，各組創(chuàng)面基本愈 合，炎性細(xì)胞都已基本消失，各組FB細(xì)胞和毛細(xì)血管較少。陽性組、中藥提取物A和C組表 皮層接近正常細(xì)胞，各層分化明顯，細(xì)胞間有大量的膠原，膠原纖維此時(shí)變得較粗大，排列 有序；模型對(duì)照組和中藥提取物B組創(chuàng)面已完全被新生表皮覆蓋，但表皮層的細(xì)胞還比較 稚嫩，真皮層的膠原纖維細(xì)小，排列紊亂。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用于術(shù)后傷口愈合的藥物組合物，該藥物組合物由中藥材原料經(jīng)水煎提取而 成，其特征在于，所述的中藥材原料由三方草和馬桂花組成。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于術(shù)后傷口愈合的藥物組合物，其特征在于，所述的三方 草選用莎草科植物亞大苔草Carex brownii Tuckerm.的干燥根；所述的馬桂花為紫金?？?植物多脈酸藤子Embelia oblongifolia Hemsl.的干燥果實(shí)。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于術(shù)后傷口愈合的藥物組合物，其特征在于，所述的三方 草和馬桂花的用量比為I :1. 6-5. 0。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于術(shù)后傷口愈合的藥物組合物，其特征在于，所述的三方 草和馬桂花的用量比為1 :2-3。5. 由三方草與馬桂花組成的原料組合物在制備促進(jìn)創(chuàng)面愈合的外用藥物中的應(yīng)用。6. 由三方草與馬桂花組成的原料組合物在制備用于術(shù)后傷口愈合的外用藥物中的應(yīng) 用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于術(shù)后傷口愈合的藥物組合物及其應(yīng)用，該藥物組合物由中藥材原料經(jīng)水煎提取而成，所述的中藥材原料由三方草和馬桂花組成。使用本發(fā)明藥物組合物，患者傷口愈合速度快、起效快，使用20分鐘內(nèi)即可感覺疼痛緩解，愈合皮膚與原有組織高度吻合，不會(huì)產(chǎn)生疤痕。
【IPC分類】A61K36/89, A61P17/02, A61K36/185
【公開號(hào)】CN105232856
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510784082
【發(fā)明人】張少峰, 崔宗權(quán)
【申請(qǐng)人】張少峰
【公開日】2016年1月13日
【申請(qǐng)日】2015年11月16日