一種具有抗衰老功效的組合物及其制劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)美容領(lǐng)域，尤其涉及一種具有抗衰老功效的組合物及其制劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 皮膚是覆蓋于人體表面的一個重要器官，由表皮、真皮、皮下組織和皮膚的附屬器 官構(gòu)成，是外界環(huán)境和機(jī)體之間的一道天然屏障。然而，皮膚的保護(hù)作用是有限的，人的皮 膚從20~25歲起就進(jìn)入自然老化狀態(tài)。一方面，隨著年齡的增大，皮脂分泌量減少，角質(zhì) 細(xì)胞間質(zhì)也減少，因而水份保持能力降低，皮膚的水份屏障功能逐步衰退，開始出現(xiàn)皮膚干 燥問題；另一方面，表皮細(xì)胞分化能力降低，表皮恢復(fù)速率減慢，角質(zhì)化功能衰退，角質(zhì)層變 薄，表皮萎縮產(chǎn)生細(xì)皺紋。
[0003] 干細(xì)胞生長因子是醫(yī)學(xué)美容領(lǐng)域新興的一種抗衰老產(chǎn)品，其能激活機(jī)體內(nèi)處于休 眠狀態(tài)下的各種干細(xì)胞群，以替代更新原有衰退和老化的組織細(xì)胞，達(dá)到組織器官功能的 恢復(fù)，增強(qiáng)組織器官的活性，改善因衰老等因素所造成的細(xì)胞與細(xì)胞間、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì) 間的信息傳遞，增強(qiáng)和加快各組織細(xì)胞的新老更替。
[0004] 因此，當(dāng)干細(xì)胞生長因子能夠源源不斷地滿足皮膚細(xì)胞需要時，皮膚的健康就會 得到保證，皮膚老化問題就可以被有效地預(yù)防，皮膚就可以重新回到更年輕的狀態(tài)。但是單 獨(dú)依靠干細(xì)胞生長因子能夠達(dá)到的抗衰老效果有限，具體表現(xiàn)為其對細(xì)胞融合和細(xì)胞的增 殖的促進(jìn)效果不明顯。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種具有抗衰老功效的組合物及其制劑，本發(fā) 明提供的組合物具有顯著的抗衰老效果。
[0006] 本發(fā)明提供了一種具有抗衰老功效的組合物，以重量份數(shù)計，包括：
[0007] 干細(xì)胞生長因子 0.03~4份; 金銀花提取物 1~30份; 蜂蜜 50~300份； 透明質(zhì)酸 0.1 X KT3~I X HT3份;
[0008] 所述干細(xì)胞生長因子包括表皮生長因子、纖維細(xì)胞生長因子、血小板源性生長因 子和血管內(nèi)皮生長因子中的至少兩種。
[0009] 優(yōu)選的，所述干細(xì)胞生長因子包括表皮生長因子、纖維細(xì)胞生長因子、血小板源性 生長因子和血管內(nèi)皮生長因子；
[0010] 所述表皮生長因子、纖維細(xì)胞生長因子、血小板源性生長因子和血管內(nèi)皮生長因 子的質(zhì)量比為10~30 :5~15 :2~10 :5~15。
[0011] 優(yōu)選的，所述干細(xì)胞生長因子包含于干細(xì)胞生長因子凍干粉中；所述干細(xì)胞生長 因子凍干粉中干細(xì)胞生長因子的含量為30~80wt%。
[0012] 優(yōu)選的，所述干細(xì)胞生長因子凍干粉按照以下方法制備：
[0013] a)、培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞，收集細(xì)胞培養(yǎng)液；
[0014] b)、所述細(xì)胞培養(yǎng)液依次經(jīng)過過濾和凍干，得到干細(xì)胞生長因子凍干粉。
[0015] 優(yōu)選的，所述金銀花提取物含有新綠原酸、綠原酸、咖啡酸和咖啡?？鼘幩嶂械囊?種或多種。
[0016] 優(yōu)選的，所述金銀花提取物含有新綠原酸、綠原酸、咖啡酸和咖啡?？鼘幩?；
[0017] 所述新綠原酸、綠原酸、咖啡酸和咖啡?？鼘幩岬馁|(zhì)量比為2~5 :5~15 :3~8 : 12 ~20〇
[0018] 優(yōu)選的，所述透明質(zhì)酸的數(shù)均分子量為5X IO5~15X10 5。
[0019] 本發(fā)明提供了一種具有抗衰老功效的生物制劑，包括水和上述技術(shù)方案所述的組 合物。
[0020] 優(yōu)選的，所述組合物在生物制劑中的含量為50~350mg/mL。
[0021] 優(yōu)選的，所述生物制包括：
[0022] 干細(xì)胞生長因子 0.03~4 mg/mL; 金銀花提取物 1~30mg/mL; 蜂蜜 50~300 mg/mL;
[0023] 透明質(zhì)酸 100~1000 ng/mL。
[0024] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供了一種具有抗衰老功效的組合物及其制劑。本發(fā)明 提供的組合物，以重量份數(shù)計，包括：干細(xì)胞生長因子〇. 03~4份；金銀花提取物1~30 份；蜂蜜50~300份；透明質(zhì)酸0.1 X KT3~IX KT3份；所述干細(xì)胞生長因子包括表皮生長 因子、纖維細(xì)胞生長因子、血小板源性生長因子和血管內(nèi)皮生長因子中的至少兩種。本發(fā)明 通過在組合物中添加多種干細(xì)胞生長因子，顯著提高了表皮細(xì)胞的增殖能力，同時通過優(yōu) 化組合物配方，高效發(fā)揮組合物中每種組分的功效，從而使該組合物具有豐富的營養(yǎng)成分、 良好的保濕效果和抗氧化效果，進(jìn)而使該組合物表現(xiàn)出優(yōu)異的抗衰老功效。實驗結(jié)果表明， 在添加有本發(fā)明提供的組合物的培養(yǎng)基中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時，細(xì)胞融合度達(dá)到80%的耗時低 于29h，培養(yǎng)8天后細(xì)胞總量增加200倍，說明本發(fā)明提供的組合物具有良好的抗衰老效果。
【附圖說明】
[0025] 為了更清楚地說明本發(fā)明實施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實施例或現(xiàn) 有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本 發(fā)明的實施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù) 提供的附圖獲得其他的附圖。
[0026] 圖1是本發(fā)明實施例提供的1號皿在低倍鏡下觀察到的細(xì)胞形態(tài)圖；
[0027] 圖2是本發(fā)明實施例提供的4號皿在低倍鏡下觀察到的細(xì)胞形態(tài)圖。
【具體實施方式】
[0028] 下面對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例 僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通 技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范 圍。
[0029] 本發(fā)明提供了一種具有抗衰老功效的組合物，以重量份數(shù)計，包括：
[0030] 干細(xì)胞生長因子 0.03~4份; 金銀花提取物 丨~30份;
[0031] 蜂蜜 50~300份； 透明質(zhì)酸 0.1 X UT3~I X HT3份；
[0032] 所述干細(xì)胞生長因子包括表皮生長因子、纖維細(xì)胞生長因子、血小板源性生長因 子和血管內(nèi)皮生長因子中的至少兩種。
[0033] 本發(fā)明提供的具有抗衰老功效的組合物包括干細(xì)胞生長因子、金銀花提取物、蜂 蜜和透明質(zhì)酸。其中，所述干細(xì)胞生長因子由具有刺激內(nèi)源性干細(xì)胞生長的高效蛋白質(zhì)和 酶組成。在本發(fā)明中，所述干細(xì)胞生長因子包括表皮生長因子（EGF)、纖維細(xì)胞生長因子 (FGF)、血小板源性生長因子（PDGF)和血管內(nèi)皮生長因子（VEGF)中的至少兩種，優(yōu)選包括 表皮生長因子、纖維細(xì)胞生長因子、血小板源性生長因子和血管內(nèi)皮生長因子。在本發(fā)明提 供的一個干細(xì)胞生長因子包括表皮生長因子、纖維細(xì)胞生長因子、血小板源性生長因子和 血管內(nèi)皮生長因子的實施例中，所述表皮生長因子、纖維細(xì)胞生長因子、血小板源性生長因 子和血管內(nèi)皮生長因子的質(zhì)量比為10~30 :5~15 :2~10 :5~15 ;在本發(fā)明提供的另一 個干細(xì)胞生長因子包括表皮生長因子、纖維細(xì)胞生長因子、血小板源性生長因子和血管內(nèi) 皮生長因子的實施例中，所述表皮生長因子、纖維細(xì)胞生長因子、血小板源性生長因子和血 管內(nèi)皮生長因子的質(zhì)量比為10~18 :8~15 :2~5 :5~10。
[0034] 在本發(fā)明提供的一個實施例中，所述干細(xì)胞生長因子包含于干細(xì)胞生長因子凍干 粉中。所述干細(xì)胞生長因子凍干粉中干細(xì)胞生長因子的含量優(yōu)選為30~SOwt %，更優(yōu)選為 33~50wt%。本發(fā)明對所述干細(xì)胞生長因子凍干粉的來源沒有特別限定，可以采用市售的 干細(xì)胞生長因子凍干粉，也可以按照以下方法進(jìn)行制備：
[0035] a)、培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞，收集細(xì)胞培養(yǎng)液；
[0036] b)、所述細(xì)胞培養(yǎng)液依次經(jīng)過濃縮和凍干，得到干細(xì)胞生長因子凍干粉。
[0037] 在本發(fā)明提供的干細(xì)胞生長因子凍干粉的制備方法中，首先進(jìn)行間充質(zhì)干細(xì)胞的 培養(yǎng)。其中，所述間充質(zhì)干細(xì)胞優(yōu)選由人體細(xì)胞組織經(jīng)過組織貼壁法或酶消化法分離獲得， 所述人體細(xì)胞組織優(yōu)選為臍帶、胎盤或人體脂肪組織。在本發(fā)明中，培養(yǎng)所述間充質(zhì)干細(xì)胞 采用的培養(yǎng)基優(yōu)選為無血清培養(yǎng)基，所述無血清培養(yǎng)基的型號優(yōu)選為LONZA X-VIVO 15培 養(yǎng)基、PC-I 培養(yǎng)基、UltraMEM Reduced Serum 培養(yǎng)基、UltraMDCKTM 培養(yǎng)基或 HL-ITM 完全 無血清培養(yǎng)基；培養(yǎng)所述間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞接種密度優(yōu)選為IO5~10 6cell/mL。本發(fā)明 優(yōu)選向培養(yǎng)所述間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)基中添加一定量的生長因子，所述生長因子優(yōu)選為表 皮生長因子（EGF)，所述生長因子在培養(yǎng)基中的含量優(yōu)選為1~10ng/mL。
[0038] 間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)一段時間后，收集細(xì)胞培養(yǎng)液。在本發(fā)明中，優(yōu)選收集第3代至 第5代的細(xì)胞培養(yǎng)液。收集到的細(xì)胞培養(yǎng)液后，所述細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行過濾，得到濾液。在本 發(fā)明中，優(yōu)選先采用〇. 4~0. 45 μ m的濾膜對所述細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行粗濾，之后再采用0. 2~ 0. 22 μ m的濾膜對所述細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行精濾。本發(fā)明對所述過濾采用的設(shè)備沒有特別限定， 優(yōu)選為本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的切向流過濾器。得到濾液后，對所述濾液進(jìn)行凍干，得到干細(xì) 胞生長因子凍干粉。本發(fā)明對所述凍干采用的設(shè)備沒有特別限定，優(yōu)選為本領(lǐng)域技術(shù)人員 熟知的凍干機(jī)。
[0039] 在本發(fā)明中，所述干細(xì)胞生長因子在所述具有抗衰老功效的組合物中的含量為 0. 03~4重量份；在本發(fā)明提供的一個實施例中，所述干細(xì)胞生長因子在所述具有抗衰老 功效的組合物中的含量為〇. 03~1. 6重量份；在本發(fā)明提供的另一個實施例中，所述干 細(xì)胞生長因子在所述具有抗