降低尿蛋白的藥物及保健品的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中醫(yī)藥領(lǐng)域，具體而言，涉及一種降低尿蛋白的藥物及保健品。
【背景技術(shù)】
[0002] 糖尿?。╠iabetesmellitus，DM)是一種以胰島素的分泌相對或絕對缺乏及胰 島生物效應(yīng)損傷導(dǎo)致的全球性慢性代謝性疾病，其臨床的典型特征是高血糖及其引發(fā)的各 類慢性并發(fā)癥，包括心腦血管疾病、糖尿病腎?。╠iabeticnephropathy，DN)、糖尿病眼病 (白內(nèi)障、視網(wǎng)膜病變等）、糖尿病足等。其中，糖尿病腎病作為糖尿病最為嚴重和最為常見 的慢性微血管并發(fā)癥之一，是導(dǎo)致終末期腎功能衰竭（end-stagerenalfailure，ESRF)的 主要原因。近年來，由于人們生活方式和飲食習(xí)慣的改變，國內(nèi)DM與DN的發(fā)病率正在以驚 人的速度迅速飆升。根據(jù)國際糖尿病組織報告，中國現(xiàn)已成為世界第二糖尿病大國，預(yù)計至 2030年，全球的DM患者也將會超過5. 52億。
[0003] DN發(fā)病早期其癥狀并非十分明顯，臨床中以蛋白尿的產(chǎn)生作為診斷指標，伴隨漸 進性腎功能損害、高血壓、高血脂、水腫等癥狀，并認為蛋白尿的嚴重程度與腎臟損傷成正 比。事實上，早在DN發(fā)病前期，尿微量白蛋白（Urinarymicroalbumin，UALB)就已經(jīng)發(fā) 生，并伴隨糖尿病腎病的整個進程，而病程一旦進入到大量蛋白尿時期，此時腎臟的病理 損傷已經(jīng)很難逆轉(zhuǎn)，終將發(fā)展為終末期腎臟病。DN的臨床病理特征主要表現(xiàn)有：腎小球 細胞外基質(zhì)（Extracellularmatrix，ECM)堆積，腎小球基底膜（Glomerularbasement membrane，GBM)增厚，系膜細胞擴張，腎小管及小管間纖維化，足細胞消失等。
[0004] 目前DN的發(fā)病機制錯綜復(fù)雜且尚未完全闡明，通常認為是多種機制協(xié)同產(chǎn)生 作用，如：糖基化終末產(chǎn)物（Advancedglycationendproducts，AGEs)生成，氧化應(yīng)激 (Oxidativestress，OS)，炎性反應(yīng)等多種機制。最近越來越多的研宄者將研宄目標轉(zhuǎn)向 OS致病機制，認為活性氧自由基（Reactiveoxygenspecies，R0S)的產(chǎn)生對DN的發(fā)生起 到關(guān)鍵作用。在持續(xù)性的高血糖狀態(tài)下，ROS的積累導(dǎo)致脂代謝紊亂，而血脂異常又加速了 DN的進展，這就形成一個惡性循環(huán)。因此，開發(fā)一種能夠同時降低血糖和尿蛋白，且具有抵 抗ROS能力的藥物，對延緩DN的發(fā)生發(fā)展具深遠意義。
[0005] 既往針對DN的治療，早期多采取控制血糖、血壓和血脂，減少蛋白質(zhì)攝入等手段 延緩病情迅速惡化，此期間主要依靠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑（Angiotensionconverting enzymeinhibitors，ACEI)和血管緊張素受體詰抗劑（Angiotensionreceptorblockers， ARBs)類藥物進行控制。當病情進入腎臟衰竭時期，只能依靠血液透析或腹膜透析，而患者 5年內(nèi)的存活率僅為43 %。腎臟移植被公認為是最為有效的方法，但是由于器官來源及高 昂的手術(shù)費用等問題，此過程勢必會給患者的家庭和整個社會帶來沉重的負擔。
[0006] 而且，目前，降尿蛋白的藥物多為西藥或中藥復(fù)方藥物。西藥作用強而迅速，但病 人常因為藥物毒副作用而被迫停藥，停藥又致癥狀反跳。而中藥復(fù)方藥基本上都是由天然 中草藥經(jīng)簡單的炮制和提取制成的，不僅成分相當復(fù)雜、制備不便；而且藥效不清，難以深 入研宄藥物的有效成分，不利于藥物質(zhì)量控制和中藥現(xiàn)代化。因此，急需開發(fā)一種能有效降 低尿蛋白且有效成分相對明確的單方中藥制劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的主要目的在于提供一種能有效降低尿蛋白且有效成分相對明確的單方 中藥制劑，以提供一種有效成分相對明確，利于質(zhì)量控制的降尿蛋白的藥物及保健品。
[0008] 為了實現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了一種降低尿蛋白的藥物，該藥 物由有效量的芡實醇提物和輔料組成。
[0009] 進一步地，芡實醇提物中含有酚類和三萜類物質(zhì)，且酚類和三萜類物質(zhì)的質(zhì)量之 和占芡實醇提物總質(zhì)量的比例大于50 %，優(yōu)選大于60 %。
[0010] 進一步地，酚類物質(zhì)包含沒食子酸、沒食子酸乙酯、表兒茶素沒食子酸酯、 5, 7, 3'，4'，5' -五羥基二氫黃酮以及5, 7, 4' -三羥基二氫黃酮；三萜類物質(zhì)包括異落葉 松樹酯醇-9-0-0 -D-吡喃葡萄糖苷；優(yōu)選地，芡實醇提物中的酚類和三萜類物質(zhì)的質(zhì)量比 為 1 :1 ~2 :1〇
[0011] 進一步地，輔料為載體、賦形劑或佐劑。
[0012] 進一步地，藥物的給藥途徑為口服給藥；優(yōu)選地，藥物的劑型為片劑、膠囊劑、丸 劑、粉末劑、栓劑、溶液劑或懸浮劑。
[0013] 進一步地，芡實醇提物的制備方法包括：用乙醇對芡實果仁粉進行醇提，得到醇粗 提物；用大孔樹脂對醇粗提物進行純化，并用體積含量為20 %~80 %的乙醇進行洗脫，得 到芡實醇提物；其中，大孔樹脂選自AB-8、D101、DM-301或HPD-100中的任意一種。
[0014] 進一步地，以SD大鼠體重計，芡實醇提物的有效劑量為75~600mg/kg。
[0015] 根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了一種保健品，該保健品包含有效量的芡實醇提物。
[0016] 進一步地，保健品的劑型為片劑、膠囊劑、丸劑、粉末劑、栓劑、溶液劑或懸浮劑。
[0017] 進一步地，芡實醇提物中含有酚類和三萜類物質(zhì)，且酚類和三萜類物質(zhì)的質(zhì)量之 和占芡實醇提物的總質(zhì)量的比例大于50 %，優(yōu)選大于60 %。
[0018] 進一步地，酚類物質(zhì)包含沒食子酸、沒食子酸乙酯、表兒茶素沒食子酸酯、 5, 7, 3'，4'，5' -五羥基二氫黃酮以及5, 7, 4' -三羥基二氫黃酮；三萜類物質(zhì)包括異落葉 松樹酯醇-9-0-0 -D-吡喃葡萄糖苷；優(yōu)選地，芡實醇提物中，酚類和三萜類物質(zhì)的質(zhì)量比 為 1 :1 ~2 :1〇
[0019] 應(yīng)用本發(fā)明的技術(shù)方案，提供了一種降低尿蛋白的藥物及保健品。該藥物由有效 量的芡實醇提物及輔料組成，能夠顯著降低尿蛋白和尿微量白蛋白，可用于治療各種具有 尿蛋白和尿微量白蛋白升高癥狀的包含糖尿病腎病在內(nèi)的腎病。
【附圖說明】
[0020] 構(gòu)成本申請的一部分的說明書附圖用來提供對本發(fā)明的進一步理解，本發(fā)明的示 意性實施例及其說明用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對本發(fā)明的不當限定。在附圖中：
[0021] 圖1示出了芡實各提取物的總還原能力的測定結(jié)果；
[0022] 圖2示出了芡實各提取物對DPPH清除能力的結(jié)果；
[0023] 圖3示出了芡實各提取物對超氧陰離子清除能力的測定結(jié)果；
[0024] 圖4示出了芡實各提取物對羥基自由基清除能力的測定結(jié)果；
[0025] 圖5A示出了雌性KM小鼠灌胃芡實醇提物后14天內(nèi)的體重變化情況；其中，圖5A 表示雌性KM小鼠；
[0026] 圖5B示出了雄性KM小鼠灌胃芡實醇提物后14天內(nèi)的體重變化情況；
[0027] 圖5C示出了雌性KM小鼠灌胃芡實醇提物后14天內(nèi)的進食量變化情況；
[0028] 圖示出了雄性KM小鼠灌胃芡實醇提物后14天內(nèi)的進食量變化情況；
[0029] 圖6示出了灌胃12周后各組SD大鼠的腎系數(shù)；
[0030] 圖7示出了灌胃12周后各組SD大鼠的尿蛋白水平變化；
[0031] 圖8示出了灌胃12周后各組SD大鼠的微量白蛋白水平變化；
[0032] 圖9A示出了灌胃12周后各組SD大鼠的血糖水平變化；
[0033] 圖9B示出了灌胃12周后各組SD大鼠的血清肌酐水平變化；
[0034] 圖9C示出了灌胃12周后各組SD大鼠的血清尿素氮水平變化；
[0035] 圖9D示出了灌胃12周后各組SD大鼠的甘油三酯水平變化；
[0036] 圖9E示出了灌胃12周后各組SD大鼠的總膽固醇水平變化；
[0037] 圖10示出了灌胃12周后各組SD大鼠的腎臟病理切片圖；
[0038] 圖11示出了本發(fā)明的一種優(yōu)選的實施例中芡實醇提物經(jīng)UPLC-MS分析得到的總 離子流圖；
[0039] 圖12A至圖12D示出了本發(fā)明的芡實提取物與現(xiàn)有技術(shù)的芡實合劑在抗氧化能力 方面的差異；其中，
[0040] 圖12A示出了本發(fā)明的芡實各提取物與現(xiàn)有技術(shù)的芡實合劑的總還原能力的測 定結(jié)果；
[0041] 圖12B示出了本發(fā)明的芡實各提取物與現(xiàn)有技術(shù)的芡實合劑對DPPH清除能力的 結(jié)果；
[0042] 圖12C示出了本發(fā)明的芡實各提取物與現(xiàn)有技術(shù)的芡實合劑對超氧陰離子清除 能力的測定結(jié)果；以及
[0043] 圖12D示出了本發(fā)明的芡實各提取物與現(xiàn)有技術(shù)的芡實合劑對羥基自由基清除 能力的測定結(jié)果。
【具體實施方式】
[0044] 需要說明的是，在不沖突的情況下，本申請中的實施例及實施例中的特征可以相 互組合。下面將結(jié)合實驗數(shù)據(jù)來詳細說明本發(fā)明。
[0045] 名稱簡稱說明：
[0046] Scr(Serumcreatinine)血清肌酐；BUN(Bloodureanitrogen)血清尿素氮； TC(Totalcholesterol)總膽固醇；TG(Triglyceride)，甘油三醋；BG(Bloodglucose)，血 糖。
[0047] 如【背景技術(shù)】部分所提到的，現(xiàn)有技術(shù)中治療糖尿病腎病的藥物類型為西藥或中 藥復(fù)方藥，西藥往往伴隨著毒副作用，而中藥復(fù)方藥由于成分復(fù)雜，藥效不清，難以實現(xiàn)有 效成分的控制。為改善上述狀況，本發(fā)明首先通過分光光度計法體外篩選突實（Euryale ferox)各部位對DPPH、02'OIT的清除能力及其總還原能力，實驗證明突實醇提物濃度在 0. 6、0. 8、1.0mg/ml時能顯示出一定的還原能力，且對各種有害自由基的均顯示出相當?shù)那?除能力，其中對DPPH自由基的清除功能最為顯著，由此說明，芡實醇提物具有較強的抗氧 化能力。芡實水提物上清只在較高濃度時展現(xiàn)出較為微弱的還原能力和清除自由基功能， 而水提物沉淀并不具有抗氧化的能力。
[0048] 在上述篩選結(jié)果的基礎(chǔ)上，利用鏈脲佐菌素（STZ)誘導(dǎo)的糖尿病腎病大鼠模型檢 測芡實醇提物的降尿蛋白作用。模型大鼠均出現(xiàn)預(yù)期病理癥狀，給予厄貝沙坦陽性對照藥 和不同劑量的芡實醇提物后，發(fā)現(xiàn)中、高劑量芡實醇