一種治療乙型肝炎的藏藥組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物領(lǐng)域，涉及一種治療乙型肝炎的藏藥組合物。
【背景技術(shù)】
[0002] 九味牛黃丸收載于《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)?藏藥》第一冊(cè)，由以下藥材 組成：紅花150g，巴夏嘎100g，木香馬兜鈴120g，牛黃lg，渣馴膏50g，波棱瓜子40g，獐牙菜 150g，綠絨蒿150g，木香100g。其功能主治為清肝熱，對(duì)肝大，肝區(qū)疼痛，惡心，目赤效果較 好，用于各種肝炎，培根，木布病。
[0003] 盡管九味牛黃丸療效較好，但處方中的木香馬兜鈴含有馬兜鈴酸，馬兜鈴酸可引 起以寡細(xì)胞性纖維化為特點(diǎn)的馬兜鈴酸腎病，對(duì)人體腎臟有很大的傷害。因此考慮去除或 替換方中的木香馬兜鈴對(duì)人體用藥安全性有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種不含木香馬兜鈴和牛黃、可用于治療乙型肝炎（簡(jiǎn) 稱(chēng)：乙肝）的藏藥組合物，在九味牛黃丸的基礎(chǔ)上選擇性去掉了毒性藥材木香馬兜鈴及牛 黃，減少了腎臟毒性，同時(shí)增加了甘青青蘭的使用，調(diào)整了紅花和獐牙菜的用量，并發(fā)現(xiàn)獐 牙菜與綠絨蒿的比例關(guān)系為2:1時(shí)效果佳，以使藥方減毒但不降低療效。
[0005] 本發(fā)明技術(shù)方案如下：
[0006] 一種治療乙肝的藏藥組合物，由以下藥材組成：
[0007] 紅花150g，巴夏嘎100g，渣馴膏50g，波棱瓜子40g，獐牙菜150g，綠絨蒿150g，木 香l〇〇g。
[0008] 一種治療乙肝的藏藥組合物，由以下藥材組成：
[0009] 紅花150g，巴夏嘎100g，甘青青蘭100g，澄馴膏50g，波棱瓜子40g，猜牙菜150g， 綠絨蒿150g，木香100g。
[0010] 一種治療乙肝的藏藥組合物，由以下藥材組成：
[0011] 紅花200g，巴夏嘎100g，甘青青蘭100g，澄馴膏50g，波棱瓜子40g，猜牙菜150g， 綠絨蒿150g，木香100g。
[0012] 一種治療乙肝的藏藥組合物，由以下藥材組成：
[0013] 紅花200g，巴夏嘎100g，甘青青蘭100g，澄馴膏50g，波棱瓜子40g，猜牙菜300g， 綠絨蒿150g，木香100g。
[0014] -種治療乙肝的藏藥組合物：為減方，按照九味牛黃丸處方，去除木香馬兜鈴和牛 黃。
[0015] 紅花150g，巴夏嘎100g，渣馴膏50g，波棱瓜子40g，獐牙菜150g，綠絨蒿150g，木 香l〇〇g。以上藥材，除渣馴膏外，其余粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻，用渣馴膏加適量水泛丸，干燥 即得。將丸粉碎，水提取得提取液，濃縮成生藥含量5. 9g/mL。
[0016] -種治療乙肝的藏藥組合物：為改方1，即在九味牛黃丸配方基礎(chǔ)上去除木香馬 兜鈴和牛黃，增加甘青青蘭l〇〇g。
[0017] -種治療乙肝的藏藥組合物：為改方2,即在改方1基礎(chǔ)上增加了獐牙菜150g。
[0018] 本發(fā)明的藏藥組合物用于清肝熱，治療肝大，治療肝區(qū)疼痛。
[0019] 本發(fā)明的藏藥組合物，用于制備治療乙型肝炎、清肝熱，治療肝大，治療肝區(qū)疼痛、 并減少了腎臟毒性的藥物。
[0020] 優(yōu)選的，上述治療乙型肝炎的藏藥組合物，其體外抗HBsAg最佳濃度為 0. 097g?ml1，體外抗HBV-DNA最佳濃度為 0. 049g?ml1。
[0021] 有益效果：
[0022] 1、不含木香馬兜鈴，減少了腎臟毒性；
[0023] 2、通過(guò)配方的適當(dāng)調(diào)整，增加了甘青青蘭的使用，使得配方與九味牛黃丸相比，減 毒不減效；
[0024] 3、初步探索出最佳配方抗乙肝的最佳濃度為0.097g?mr1和0.049g?ml'
【具體實(shí)施方式】
[0025] 為了更詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明，給出下述具體實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例。但本發(fā)明的范圍并不 局限于此。本發(fā)明原料未作具體說(shuō)明的均為市售。
[0026] 實(shí)驗(yàn)例1、不同組方對(duì)腎毒性的影響
[0027] 1、材料：健康Wistar大鼠，體重180~200g，雌性，許可證號(hào)：SCXK(魯）20080002， 由山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司提供，正常、自由飲食。
[0028] 九味牛黃丸，市售，金訶藏藥公司生產(chǎn)；
[0029] 本發(fā)明的藏藥組合物（簡(jiǎn)稱(chēng)：改方），改方：一種治療乙型肝炎的藏藥組合物，由 以下藥材組成：紅花200g，巴夏嘎100g，甘青青蘭100g，澄馴膏50g，波棱瓜子40g，猜牙菜 300g，綠絨蒿150g，木香100g。水提取得提取液，濃縮成生藥含量5. 9g/mL。
[0030] 減方：按照九味牛黃丸處方，去除木香馬兜鈴和牛黃后制備的藥物組合物，自制方 法如下：藥材組成紅花150g，巴夏嘎100g，澄馴膏50g，波棱瓜子40g，猜牙菜150g，綠絨蒿 150g，木香100g。以上藥材，除渣馴膏外，其余粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻，用渣馴膏加適量水泛 丸，干燥即得。將丸粉碎，水提取得提取液，濃縮成生藥含量5. 9g/mL。
[0031] 2、給藥方法：將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為空白組、九味牛黃丸組、減方組和改方組，每組 10只，將九味牛黃丸、減方和改方研成粉末，加水配成2. 5ml/100g(相當(dāng)于0. 675g/kg/d)， 灌胃給藥，每日2次（上午9 :00,下午16 :00)，對(duì)照組給予相同劑量的自來(lái)水灌胃2次。實(shí) 驗(yàn)共進(jìn)行7d，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后測(cè)定尿蛋白、尿糖、尿潛血等。
[0032]3、觀測(cè)指標(biāo)：①肉眼觀察動(dòng)物一般情況，稱(chēng)體重；②檢測(cè)大鼠尿蛋白（UPR)、尿素 氮（BUN)、血肌酐（Scr)、尿糖（GLU)、血尿0 2-MG、尿NAG酶，生化指標(biāo)采取半自動(dòng)生化分析 儀及酶標(biāo)儀檢測(cè)。
[0033] 4、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件處理，所有結(jié)果以i士S表示，各組 均數(shù)間行t檢驗(yàn)。
[0034]5、結(jié)果
[0035] 1)大鼠行為與體重的變化：見(jiàn)表1。
[0036] 表1大鼠與體重的變化
[0037]
[0038] 2)各組大鼠尿常規(guī)比較：見(jiàn)表2。
[0039] 表2各組大鼠尿常規(guī)比較
[0040]
[0041] 注：九味牛黃丸組個(gè)別大鼠的尿常規(guī)見(jiàn)尿蛋白和尿糖。
[0042] 3)各組大鼠腎功能比較：見(jiàn)表3。
[0043] 表3各組大鼠腎功能比較（[土S，n= 10)
[0044]
[0045] 注：與空白組比較，*p〈0. 05
[0046] 4)各組大鼠尿NAG及02_MG比較：見(jiàn)表4。
[0047] 表4各組大鼠尿NAG及02_MG比較（E士S，n= 10)
[0048]
[0049] 注：與對(duì)照組比較，*p〈0. 05
[0050] 6、小結(jié)
[0051] 實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與空白組相比，九味牛黃丸組個(gè)別大鼠尿中發(fā)現(xiàn)尿蛋白和尿糖，該組大 鼠的Scr和0 2-MG指標(biāo)均有明顯升高，而B(niǎo)UN、NAG也有升高趨勢(shì)，表明九味牛黃丸對(duì)腎功 能有不良影響；而減方組、改方組與空白組相比，無(wú)論大鼠日常行為、尿常規(guī)還是腎功能制 備均無(wú)顯著性差異（p>〇. 05)，說(shuō)明減方、改方組對(duì)腎臟無(wú)明顯毒性。
[0052] 實(shí)驗(yàn)例2、不同組方抗乙型肝炎病毒作用考察
[0053] 1.實(shí)驗(yàn)材料
[0054] 1)藥物和試劑準(zhǔn)備
[0055]A、九味牛黃丸，市售，金訶藏藥公司生產(chǎn)；
[0056]B、本發(fā)明的藏藥組合物（簡(jiǎn)稱(chēng)：改方），
[0057] 改方：一種治療乙型肝炎的藏藥組合物，由以下藥材組成：紅花200g，巴夏嘎 l〇〇g，甘青青蘭l〇〇g，澄馴膏50g，波棱瓜子40g，猜牙菜300g，綠絨蒿150g，木香100g。水 提取得提取液，濃縮成生藥含量5. 9g/mL。
[0058]C、減方：按照九味牛黃丸處方，去除木香馬兜鈴和牛黃后制備的藥物組合物，自制 方法如下：藥味組成：紅花150g，巴夏嘎100g，澄馴膏50g，波棱瓜子40g，猜牙菜150g，綠絨 蒿150g，木香100g。以上藥材，除澄馴膏外，其余粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻，用澄馴膏加適量 水泛丸，干燥即得。將丸粉碎，水提取得提取液，濃縮成生藥含量5. 9g/mL。
[0059]D、改方1:藥味組成：紅花150g，巴夏嘎100g，甘青青蘭100g，澄馴膏50g，波棱瓜 子40g，獐牙菜150g，綠絨蒿150g，木香100g，即在九味牛黃丸配方基礎(chǔ)上去除木香馬兜鈴 和牛黃，增加甘青青蘭l〇〇g。以上藥材，除澄馴膏外，其余粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勾，用澄馴膏 加適量水泛丸，干燥即得。將丸粉碎，水提取得提取液，生藥含量5. 7g/mL。
[0060] E、改方2 :藥味組成：紅花200g，巴夏嘎100g，甘青青蘭100g，渣馴膏50g，波棱瓜 子40g，獐牙菜300g，綠絨蒿150g，木香100g，即在改方1基礎(chǔ)上僅增加了獐牙菜150g而未 增加紅花的用量。以上藥材，除渣馴膏外，其余粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻，用渣馴膏加適量水 泛丸，干燥即得。將丸粉碎，水提取得提取液，生藥含量6. 0g/mL。
[0061] F、試劑：拉米夫定（賀普丁C8H11N303S)，葛蘭素史克制藥（蘇州）有限公 司；PBS，Sigma公司，干粉劑，以雙蒸水配制后高壓蒸汽滅菌，于-20°C貯存待用；胎牛血 清（美國(guó)hyclone公司），過(guò)濾除菌后-20°C貯存待用；G-418,DMEM和胰蛋白酶（美國(guó) Gibico公司）；青霉素鈉，硫酸鏈霉素（華北制藥廠）；二甲亞砜（Dimethylsulfoxide， DMS0,Gibico公司），常溫保存；HBsAg定量檢測(cè)酶聯(lián)反應(yīng)試劑盒（48T，美國(guó)R&D公司，批 號(hào)：08/2010) ;HBeAg定量檢測(cè)酶聯(lián)反應(yīng)試劑盒（48T，HBeAg酶聯(lián)反應(yīng)試劑盒，美國(guó)R&D 公司，批號(hào)：08/2010) ;HBV-DNA核酸定量檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ瑒P杰生物，批 號(hào)：08/2010)。
[0062] 2)細(xì)胞：HePG2. 2. 1. 5細(xì)胞，購(gòu)自山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院。
[0063] 3)儀器與場(chǎng)所：雙人單面凈化工作臺(tái)（SW-CJ-1C，蘇州凈化）；立式壓力蒸汽滅菌 鍋（LDZX-50FBS，上海申安）；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（101，上