修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定的范圍。
[0034]實(shí)施例1
[0035](I)將0.75g左旋聚乳酸(PLLA，分子量500kDa)溶解于1mL六氟異丙醇溶液中，配制成質(zhì)量體積比為7.5%的PLLA溶液，將該溶液用雙針頭紡絲系統(tǒng)制備PLLA納米纖維紗線，兩個(gè)針頭溶液流量皆為1.0mL/h，正壓紡絲系統(tǒng)電壓為+12kV，負(fù)壓紡絲系統(tǒng)電壓為_(kāi)12kV，兩針頭與金屬漏斗的距離為15cm，金屬漏斗轉(zhuǎn)速為500rpm，紗線卷繞器的卷繞速度為0.5m/min，得到PLLA納米纖維紗線；
[0036](2)將PLLA納米纖維紗線沿金屬棒軸向平行排列于金屬棒外側(cè)(圖4的a)，紗線有效長(zhǎng)度為6cm，金屬棒直徑為2.5mm，將附有納米纖維紗線的金屬棒加載在電動(dòng)馬達(dá)上，使其接地并旋轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)速為5rpm ；
[0037](3)將 1.2g 聚左旋乳酸己內(nèi)酯(P (LLA-CL)，分子量 300kDa，LA: CL = 50:50)溶解于1mL六氟異丙醇中，配制成質(zhì)量體積比為12%的P(LLA-CL)溶液，將該溶液用于靜電紡絲，溶液流量為lmL/h，紡絲電壓為12kV，接受距離為15cm，用附有納米纖維紗線的金屬棒旋轉(zhuǎn)接收，在納米纖維紗線外側(cè)形成一層P(LLA-CL)納米纖維膜(圖4的b);
[0038](4)靜電紡絲2h，結(jié)束后，移除金屬棒，裁剪，即得以PLLA納米纖維紗線為芯層，P (LLA-CL)納米纖維膜為殼層的神經(jīng)導(dǎo)管，導(dǎo)管長(zhǎng)度為6cm，內(nèi)徑2.5mm，壁厚?0.2mm。
[0039]將該神經(jīng)導(dǎo)管切斷為1.5mm的短管并與雪旺細(xì)胞共培養(yǎng)，在第3、5、7天觀察細(xì)胞在導(dǎo)管內(nèi)部的生長(zhǎng)情況(圖6)并測(cè)試雪旺細(xì)胞的增殖速度?？捎^察到，雪旺細(xì)胞在納米纖維紗線表面很好的粘附，且沿著紗線軸向伸展取向。隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，細(xì)胞數(shù)量顯著增加，表明該支架能夠有效促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的增殖與迀移。
[0040]實(shí)施例2
[0041](I)將0.6g聚己內(nèi)酯(PCL，分子量80kDa)與0.6g豬皮明膠溶解于1mL三氟乙醇溶液中，配制成質(zhì)量體積比為12%的PCL/明膠溶液，將該溶液用雙針頭紡絲系統(tǒng)制備PCL/明膠納米纖維紗線，兩個(gè)針頭溶液流量皆為1.2mL/h，正壓紡絲系統(tǒng)電壓為+10kV，負(fù)壓紡絲系統(tǒng)電壓為-10kV，兩針頭與金屬漏斗的距離為15cm，金屬漏斗轉(zhuǎn)速為300rpm，紗線卷繞器的卷繞速度為0.3m/min，得到PCL/明膠納米纖維紗線；
[0042](2)將PCL/明膠納米纖維紗線沿金屬棒軸向平行排列于金屬棒外側(cè)，紗線有效長(zhǎng)度為10cm，金屬棒直徑為2_，將附有納米纖維紗線的金屬棒加載在電動(dòng)馬達(dá)上，使其接地并旋轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)速為5rpm ；
[0043](3)將1.2g P (LLA-CL)溶解于1mL六氟異丙醇中，配制成質(zhì)量體積比為12%的P(LLA-CL)溶液，將該溶液用于靜電紡絲，溶液流量為lmL/h，紡絲電壓為15kV，接受距離為15cm，用附有納米纖維紗線的金屬棒旋轉(zhuǎn)接收，在納米纖維紗線外側(cè)形成一層P(LLA-CL)納米纖維膜；
[0044](4)靜電紡絲2h，結(jié)束后，移除金屬棒，裁剪，即得以PCL/明膠納米纖維紗線為芯層，P (LLA-CL)納米纖維膜為殼層的神經(jīng)導(dǎo)管，導(dǎo)管長(zhǎng)度為10cm，內(nèi)徑2.0mm，壁厚?0.2mm。
[0045]實(shí)施例3
[0046](I)將0.75g左旋聚乳酸(PLLA，分子量500kDa)溶解于1mL六氟異丙醇溶液中，配制成質(zhì)量體積比為7.5%的PLLA溶液，將該溶液用雙針頭紡絲系統(tǒng)制備PLLA納米纖維紗線，兩個(gè)針頭溶液流量皆為1.0mL/h，正壓紡絲系統(tǒng)電壓為+12kV，負(fù)壓紡絲系統(tǒng)電壓為_(kāi)12kV，兩針頭與金屬漏斗的距離為15cm，金屬漏斗轉(zhuǎn)速為500rpm，紗線卷繞器的卷繞速度為0.5m/min，得到PLLA納米纖維紗線，隨后，將0.2g膠原蛋白溶解于1mL去離子水中，得到質(zhì)量體積比為2%的膠原蛋白溶液，將制得的PLLA納米纖維紗線浸潤(rùn)于膠原蛋白溶液中2h，之后取出并室溫干燥，得到表面涂覆膠原蛋白的PLLA納米纖維紗線。
[0047](2)將膠原蛋白修飾的PLLA納米纖維紗線沿金屬棒軸向平行排列于金屬棒外側(cè)，紗線有效長(zhǎng)度為4cm，金屬棒直徑為1.0_，將附有納米纖維紗線的金屬棒加載在電動(dòng)馬達(dá)上，使其接地并旋轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)速為5rpm ；
[0048](3)將1.2g P(LLA-CL)，溶解于1mL六氟異丙醇中，配制成質(zhì)量體積比為12%的P(LLA-CL)溶液，將該溶液用于靜電紡絲，溶液流量為2mL/h，紡絲電壓為10kV，接受距離為10cm，用附有納米纖維紗線的金屬棒旋轉(zhuǎn)接收，在納米纖維紗線外側(cè)形成一層P(LLA-CL)納米纖維膜；
[0049](4)靜電紡絲lh，結(jié)束后，移除金屬棒，裁剪，即得以膠原蛋白修飾的PLLA納米纖維紗線為芯層，P(LLA-CL)納米纖維膜為殼層的神經(jīng)導(dǎo)管，導(dǎo)管長(zhǎng)度為4cm，內(nèi)徑1.0mm，壁厚?0.15mm。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種納米纖維紗線神經(jīng)導(dǎo)管，其特征在于:所述神經(jīng)導(dǎo)管由芯層和殼層組成，其中芯層為納米纖維紗線，殼層為管狀納米纖維膜；神經(jīng)導(dǎo)管長(zhǎng)度為lO-lOOmm，內(nèi)徑為0.5-10mm，壁厚為 0.02_2mm。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種納米纖維紗線神經(jīng)導(dǎo)管，其特征在于:所述納米纖維紗線密度為10-200根/mm2。
3.—種如權(quán)利要求1所述的納米纖維紗線神經(jīng)導(dǎo)管的制備方法，包括: (1)將材料A配制成靜電紡絲溶液A，然后用雙針頭紡絲系統(tǒng)進(jìn)行紡絲得到納米纖維紗線； (2)將納米纖維紗線沿金屬棒軸向平行排列于金屬棒外側(cè)，得到附有納米纖維紗線的金屬棒，然后加載在馬達(dá)上，接地并旋轉(zhuǎn)； (3)將材料B配制成靜電紡絲溶液B，靜電紡絲，用步驟(2)中附有納米纖維紗線的金屬棒旋轉(zhuǎn)接收，紡絲結(jié)束后，移除金屬棒，裁剪，即得納米纖維紗線神經(jīng)導(dǎo)管。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種納米纖維紗線神經(jīng)導(dǎo)管的制備方法，其特征在于:所述步驟(I)中靜電紡絲溶液A中添加生物活性因子和/或?qū)щ姴牧?；納米纖維紗線進(jìn)行表面修飾，其中表面修飾為浸漬纖連蛋白、浸漬膠原蛋白、等離子處理改性中的一種或幾種。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種納米纖維紗線神經(jīng)導(dǎo)管的制備方法，其特征在于:所述步驟(I)中雙針頭靜電紡絲系統(tǒng)包括一套正壓靜電紡絲系統(tǒng)、一套負(fù)壓靜電紡絲系統(tǒng)、旋轉(zhuǎn)金屬漏斗、紗線卷繞器。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種納米纖維紗線神經(jīng)導(dǎo)管的制備方法，其特征在于:所述步驟(I)中雙針頭紡絲系統(tǒng)進(jìn)行紡絲的工藝參數(shù)為:流量為0.3?5mL/h，正壓紡絲系統(tǒng)電壓為+8?+25kV，負(fù)壓紡絲系統(tǒng)電壓為-8?-25kV，兩針頭與金屬漏斗的距離為10?30cm，金屬漏斗轉(zhuǎn)速為200?4000rpm，紗線卷繞器的卷繞速度為0.1?10m/min。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種納米纖維紗線神經(jīng)導(dǎo)管的制備方法，其特征在于:所述步驟(2)中納米纖維紗線長(zhǎng)度為5?50cm，金屬棒直徑為0.5?20mm ;旋轉(zhuǎn)速率為5rpm?50rpmo
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種納米纖維紗線神經(jīng)導(dǎo)管的制備方法，其特征在于:所述步驟(3)中靜電紡絲工藝參數(shù)為:流量為0.5?2mL/h，紡絲電壓為10?20kV，接收距離為5?20cm，紡絲時(shí)長(zhǎng)為I?5h。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種納米纖維紗線神經(jīng)導(dǎo)管的制備方法，其特征在于:所述步驟(I)中材料A、步驟(3)中材料B為同種或不同種生物材料；其中生物材料為合成聚合物材料或/天然生物材料。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種納米纖維紗線神經(jīng)導(dǎo)管的制備方法，其特征在于:所述合成聚合物材料為聚己內(nèi)酯、聚乳酸、聚氨酯中的一種或幾種；天然生物材料為膠原、明膠、絲素中的一種或幾種。
11.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種納米纖維紗線神經(jīng)導(dǎo)管的制備方法，其特征在于:所述步驟(I)中靜電紡絲溶液A的質(zhì)量體積百分濃度為5-15%，溶劑為三氟乙醇、六氟異丙醇中的一種；步驟(3)中靜電紡絲溶液B的質(zhì)量體積百分濃度為10-15%，溶劑為六氟異丙醇、三氟乙醇中的一種。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種納米纖維紗線神經(jīng)導(dǎo)管及其制備方法，神經(jīng)導(dǎo)管由芯層和殼層組成，其中芯層為納米纖維紗線，殼層為管狀納米纖維膜；制備方法包括：利用靜電紡絲技術(shù)制備納米纖維紗線，紗線中的納米纖維沿紗線軸向平行排列；將納米纖維紗線平行排列包覆一層納米纖維膜，形成神經(jīng)導(dǎo)管。本發(fā)明操作簡(jiǎn)單，穩(wěn)定性高，綠色安全，制備的神經(jīng)導(dǎo)管生物相容性好，能夠促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的粘附、鋪展和增殖，其中納米纖維紗線表面的平行納米纖維有利于神經(jīng)細(xì)胞的取向生長(zhǎng)，可根據(jù)實(shí)際情況定制不同尺寸的導(dǎo)管滿足周邊神經(jīng)修復(fù)的需要。
【IPC分類(lèi)】A61L27-18, A61L27-22, A61L27-24, D04H1-728, A61F2-04, A61B17-11
【公開(kāi)號(hào)】CN104739473
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510109325
【發(fā)明人】莫秀梅, 李大偉, 潘信, 孫彬彬, 黃晨, 柯勤飛
【申請(qǐng)人】東華大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年7月1日
【申請(qǐng)日】2015年3月12日